百合的組織培養(yǎng).ppt

1、百合組織培養(yǎng)、種子生產(chǎn)和經(jīng)營11001組制片人：閃重陽、百合花介紹、種類：百合科屬多年生草本鱗莖植物原產(chǎn)地：豪州萩名球根花卉主要分布于北半球溫帶和寒帶地區(qū)，少數(shù)種類分布于熱帶高地。 形態(tài)特征，多年生球根草本花卉，株高4060cm，高度1m以上。 莖直立，不分枝，草綠色的莖的基部帶有紅色或紫褐色的斑點。 地下有鱗莖，鱗莖寬卵形或針狀，白色或淡黃色，直徑68cm肉質(zhì)鱗片，球形，外有膜質(zhì)層。 很多須根生在球基部。 單葉，互生，狹線狀，無葉柄，直接包在莖中，葉脈平行。 某品種在葉腋間發(fā)出紫色或綠色顆粒狀珠芽，該珠芽可繁殖成小株。 花生于莖尖，呈整體花序，群生或單生，花冠大，花筒長，呈漏斗狀喇叭狀，六裂

2、無葉片，莖細，花大，開放常下垂或平展的花色因品種不同顏色多樣花瓣有扁平的，也有朝外卷的，所以有“卷丹”的美名。 有一朵花香氣濃郁，被稱為“麝香百合”。 花結(jié)長橢圓形的蒴果。 生長習(xí)性、性喜濕潤、光照、肥沃、腐殖質(zhì)豐富、土層深、排水性極好的砂質(zhì)土壤，許多品種宜從微酸性生長為中性土壤。 百合喜歡涼爽潮濕的環(huán)境，陽光充足的地方，稍微陰涼的環(huán)境適合百合。 不喜歡干旱，不喜歡炎熱，耐寒性稍差。 百合的生長、開花溫度為1624，低于5或高于30的生長幾乎停止，10以上的植株正常生長，超過25則生長停滯，冬季夜間溫度低于5則持續(xù)57天，花芽分化、蕾發(fā)育受到嚴重影響，開花延期花或花開裂。 百合是肥沃、腐殖質(zhì)多

3、深的土壤，最討厭硬粘土的排水良好的微酸性土壤好，土壤pH為5.56.5。 在百合的組織培養(yǎng)方面，最初由Dobreaux等(1950 )首次成功用純白百合(Liliumcandidum )的花蕾誘導(dǎo)小鱗莖。 黃濟明(19791984 )對25種或品種進行組培試驗，證明百合的珠芽、鱗片、鱗莖盤、根、莖、葉、莖尖、花梗、花柱和未成熟胚等外植體均促進形態(tài)發(fā)生。 新美芳二(1980 )對百合鱗片、花被片、花絲、花柄等也成功組培，一般認為開花時各花器官和莖形成的小鱗莖能力最高。 程治英等人(19912001 )對30種以上或品種的百合進行了組培證實，(1)以百合根、葉為外植體，與鱗片一樣，按部位分化叢芽的

4、能力近軸端大于遠軸端。 (2)鱗莖鱗片分化能力(分化苗的頻度和速度)均為外部大于內(nèi)部。 雜種的分化能力大于野生種，低海拔種大于高海拔種。 鱗片組培得到的小鱗莖的試管鱗片的分化能力比原始培養(yǎng)鱗片的分化能力大。 有效的組培方法1、培養(yǎng)基配方誘導(dǎo)培養(yǎng)基： MS BA1.0mg/L NAA0.1mg/L增殖培養(yǎng)基： MS BA0.5mg/L NAA0.5mg/L定影培養(yǎng)基：1/2MS NAA0.1mg/L采訪前，將準備好的接種鱗莖在45的低溫下處理68周，用洗滌劑常規(guī)洗滌剝?nèi)[莖外皮和外部的23層鱗片，稍微切去頂部和基部，首先用75%的酒精浸漬3060S，然后用0.1%水銀溶液處理1520分鐘，用漂白

5、水處理1015分鐘。 溫度： 20-25光照： 800-1200lx每天9-14h照明培養(yǎng)基： pH5.6-5.8，培養(yǎng)條件，培養(yǎng)條件，根培養(yǎng)，以毛百合為材料，msnaa0.5-0毛百合試管苗56個月可形成直徑17mm左右的鱗莖，移植后生存狀況良好。 在雜交育種中，如果雜種胚和母體胚乳之間沒有親和性，可能導(dǎo)致胚培養(yǎng)失敗，胚培養(yǎng)可以克服缺乏親和性的現(xiàn)象，有利于育種的順利進行。 培養(yǎng)時以MS培養(yǎng)基為宜，糖濃度因種類不同，異常在20-40之間的ph值為5.0，NAA的用量僅在0.1-0.001之間。 加入適量的BA有利于幼胚存活，高BA抑制胚根的發(fā)生，促進胚組織的愈傷組織化，通常MS BA1.0mg

6、/L NAA0.1mg/L培養(yǎng)促進愈傷組織的生長，然后將生長的愈傷組織轉(zhuǎn)移到1/2MS不加激素的培養(yǎng)基中，約2個月后， 影響百合小鱗莖形成大量不定的因素有：季節(jié)(春、夏、秋、冬)鱗片不同部位的影響(上、中、下)小鱗莖大小分布小鱗莖形成的重量與培養(yǎng)及使用量的關(guān)系(反比)、試管鱗莖休眠現(xiàn)象、百合30下無小鱗莖的低鹽低糖和高氮培養(yǎng)基上的小鱗莖不休眠、高糖不同品種在36個溫度下可在39120D打破休眠。 休眠現(xiàn)象也與培養(yǎng)小鱗莖時所使用的糖濃度有關(guān)(Takayama等1982 )在3 %糖濃度下培養(yǎng)得到的小鱗莖在5以下約2個月內(nèi)可破壞休眠，在9%糖濃度下培養(yǎng)得到的小鱗莖冷藏約4個月。 發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)過程中蔗糖

7、濃度高(40g/L )有利于小鱗莖的形成和生長。 糖濃度下降至20g/L時，小鱗莖立即生長成幼苗。 因此，能夠以糖濃度控制小鱗莖的生長，使幼苗的生長變得結(jié)實，提高成活率。 在組培前將鱗片120D在4的低溫下處理，組培得到的小鱗莖也有不發(fā)生休眠現(xiàn)象的人。 快速繁殖的實例是將最初培養(yǎng)得到的小鱗莖，在每2個月20 x90mm的培養(yǎng)皿中，加入MS NAA0.1蔗糖9%活性炭0.5%的瓊脂培養(yǎng)基，繼續(xù)下一代。 2個月后將獲獎的小鱗片切斷，轉(zhuǎn)移到MS KT10的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，給予25和2.5w/的連續(xù)光。 經(jīng)過2個月，原小鱗片表面再生了無數(shù)堆積的新的小鱗片。 將這些堆積的小鱗片轉(zhuǎn)移到加入了100mLMS的液體培養(yǎng)基