藥物制劑分析概論-杭太俊藥物分析第七版課件江西大學.ppt

1、藥物分析,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicines,主講: 曾金祥,第十八章 藥物制劑分析,藥物分析教研室,Analysis of drugs in pharmaceutical preparations,Company Logo, 第一節(jié) 藥物制劑分析的特點 Special feature 第二節(jié) 片劑和注射劑的分析 General detection in Tablets & Injection 第三節(jié) 片劑和注射劑中藥物的含量測定 Assay Interferences & their elimination 第四節(jié) 復方制劑

2、分析 Assay of compound preparations,Company Logo,第一節(jié) 藥物制劑分析的特點, 防治和診斷疾病的需要 保證藥物用法和用量的準確 增強藥物的穩(wěn)定性 藥物使用、貯存和運輸的方便 延長藥物的生物利用度 降低藥物的毒性和副作用,Special features,Company Logo,(一)檢查內容不同,一般原料藥項下的檢查項目不需重復檢查，只檢查在制備和儲運過程中產生的雜質及制劑相應的檢查項目。 例：鹽酸普魯卡因注射劑中“對氨基苯甲酸” 阿司匹林片“水楊酸”,Company Logo,(二)質量控制要求不同,1.含量要求范圍不同,Company Logo

3、,2.雜質限度要求不同,Company Logo,3.含量測定方法不同,鹽酸氯丙嗪（含量測定） 原料：非水滴定法 片劑：UV法(測 254nm) 注射劑：UV法(測 306nm),制劑含量測定：強調選擇性、要求靈敏度高 原料含量測定：強調準確度、精密度,Company Logo,(三)含量測定的計算方法不同,原料藥,制劑,Company Logo,1.原料藥含量測定的計算,1.1容量分析法,Company Logo,應用示例,精密稱取青霉素鉀供試品0.4021g，按藥典規(guī)定用剩余堿量法測定含量。先加入NaOH(0.1mol/L)25.00ml，回滴時消耗0.1015mol/L的HCl為14.2

4、0ml，空白試驗消耗0.1015mol/L的鹽酸液24.68ml。每1ml氫氧化鈉液(0.1mol/L)相當于37.25mg的青霉素鉀，求供試品的含量。,Company Logo,1.2 UV法,1.2.a 直接測定,Company Logo,應用示例,對乙酰氨基酚的含量測定方法為：取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，照分光光度法，在257nm的波長處測定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數( )為715計算，即得。若樣品稱樣量為m(g)，測得

5、的吸收度為A，則含量百分率的計算式為,Company Logo,1.2.b 對照法,Company Logo,應用示例,利血平的含量測定方法為： 對照品溶液的制備 精密稱取利血平對照品20mg，置100ml量瓶中，加氯仿4ml使溶解，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取5m1，置50ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備 精密稱取本品0.0205g，照對照品溶液同法制備。精密量取對照品溶液與供試品溶液各5ml，各加硫酸滴定液（0.25mol/L）1.0ml與新制的0.3%亞硝酸鈉溶液1.0ml，搖勻，置55水浴中加熱30分鐘，冷卻后，各加新制的5%氨基磺酸銨溶液0.5

6、ml，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻；另取對照品溶液與供試品溶液各5ml，除不加0.3%亞硝酸鈉溶液外，分別用同一方法處理后作為各自相應的空白，照分光光度法，在3902nm的波長處分別測定吸收度，供試品溶液的吸收度為0.604，對照品溶液的吸收度為0.594，計算利血平的百分含量。,Company Logo,2.片劑含量測定的計算,Company Logo,2.1 容量分析方法,Company Logo,應用示例,取司可巴比妥鈉膠囊（標示量為0.1g）20粒，除去膠囊后測得內容物總重為3.0780g，稱取0.1536g，按藥典規(guī)定用溴量法測定。加入溴液（0.1 mol/L） 25ml，剩余的溴液用

7、硫代硫酸鈉液（0.1025mol/L）滴定到終點時，用去17.94ml。空白試驗用去硫代硫酸鈉液25.00ml。按每1ml 溴液（0.1mol/L）相當13.01mg的司可巴比妥鈉，計算該膠囊中按標示量表示的百分含量。,Company Logo,2.2 UV法,Company Logo,3.注射劑含量測定的計算,Company Logo,3.1 容量分析方法,Company Logo,應用示例,維生素C注射液（規(guī)格2ml：0.1g）的含量測定：精密量取本品2ml，加水15ml與丙酮2ml，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4ml與淀粉指示液1ml，用碘滴定液（0.1003mol/L）滴定，至溶液顯蘭色

8、并持續(xù)30秒鐘不褪，消耗10.56ml。每1ml碘滴定液（0.1mol/L）相當于8.806mg的C6H8O6。計算維生素C注射液的標示量%。,Company Logo,3.2 UV法,Company Logo,應用示例,中國藥典（1990年版）規(guī)定維生素B12注射液規(guī)格為0.1mgm1，含量測定如下：精密量取本品7.5m1，置25ml量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，混勻，置lcm石英池中，以蒸餾水為空白，在3611nm波長處吸收度為0.593，按 為207計算維生素B12按標示量計算的百分含量,Company Logo,應用示例,用異煙肼比色法測定復方己酸孕酮注射液的含量。當己酸孕酮對照品的濃度

9、為50g/ml，按中國藥典規(guī)定顯色后在380nm波長處測得吸收度為0.160。取標示量為250mg/ml(己酸孕酮)的供試品2ml配成100ml溶液，再稀釋100倍后，按對照品顯色法同樣顯色，測得吸收度為0.154。求供試品中己酸孕酮的含量為標示量的多少？,Company Logo,制劑含量測定中，應考慮 取樣問題 輔料對含量測定的干擾與排除 復方制劑中各成分互相干擾其含量測定及其措施 要有合適的分析方法與一定的準確度，以保證制劑的質量。,Company Logo,第二節(jié) 片劑和注射劑的分析,片劑的檢查項目, 【重量差異】 (weight variation) 【崩解時限】 (disinteg

10、ration) 【含量均勻度】 (content uniformity) 【溶出度】 (dissolution) 【釋放度】,General detection in Tablets & Injection,Company Logo,一、片劑的檢查項目,（一）重量差異 (weight variation),按規(guī)定稱量方法測得片劑每片的重量和平均片重之間的差異程度。,檢查方法,取供試品20片，精密稱定總重量，求得平均片重，再分別準確稱定每片的重量，計算每片片重與平均片重差異的百分率，即重量差異。,Company Logo,結果判斷,超出重量差異限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度的1倍。,C

11、ompany Logo,（二）崩解時限 (disintegration),固體制劑在規(guī)定的介質中，以規(guī)定的方法進行檢查，崩解溶散并通過篩網所需時間的限度（不溶性的包衣材料或破碎的膠囊殼除外）。,Company Logo,結果判斷,取藥片6片檢查，如有1片不合格，應另取6片復試，均應符合規(guī)定。,Company Logo,（三）含量均勻度 (content uniformity),小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑等每片(個)含量符合標示量的程度。,適用范圍, 每片/個標示量10 mg或主要含量5片重的片劑、膠囊或注射用無菌粉末 其余制劑中每片/個標示量2 mg或主要含量2片重者

12、 透皮貼劑 藥物的有效濃度與毒副反應濃度比較接近的品種或混勻工藝較困難的品種，每片(個)標示量25 mg者,Company Logo,檢查方法,除另有規(guī)定外，取供試品10片(個)，按照各藥品項下規(guī)定的方法，分別測定每片(個)以標示量為100的相對含量X，求其平均值X 和標準差S以及標示量與均值之差的絕對值A( ), A1.80S15.0 AS15.0 A1.80S15.0，且AS15.0 另取20片(個)復試 根據初、復試結果，計算30片(個) 的均值、標準差S和標示量與均值之差的絕對值A； A+1.45S15.0 A1.45S15.0 ,結果判斷,Company Logo,應用示例,地西泮片

13、 (Diazepam Tablets) 規(guī)格(1)2.5 mg (2)5 mg 含量均勻度 取本品1片，置100 ml量瓶中，加水5 ml，振搖，使藥片崩解后，加0.5 %硫酸的甲醇溶液約60 ml，充分振搖使地西泮溶解，用加0.5 %硫酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 ml，置25 ml量瓶中，用0.5 % 硫酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法(附錄A)，在284 nm的波長處測定吸光度，按C16H13ClN2O的吸收系數( )為454計算含量，應符合規(guī)定（附錄 E）。,Company Logo,試驗結果,結果判斷,X 102.26 A = 100-X

14、 =2.26 S2.06 A+1.8s5.97 合格,Company Logo,（四）溶出度 (dissolution),藥物從片劑等固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速率和程度。 它是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中崩解和溶出的體外簡易試驗方法，是評價藥物口服固體制劑質量的一個指標，對難溶性藥物一般都做溶出度的檢查。, 第一法 轉籃法 第二法 槳法 第三法 小杯法（小杯攪拌槳法）,檢查方法,Company Logo,第一法 轉籃法,除另有規(guī)定外，分別量取經脫氣處理的溶出介質900 ml，置各溶出杯內，加溫，待溶出介質溫度恒定在37oC0.5oC后，取供試品6片(粒、袋)，分別投入6個干燥的轉籃內，按規(guī)

15、定速度旋轉。除另有規(guī)定外，至規(guī)定時間時取樣，立即用0.8m的微孔濾膜濾過。自取樣至濾過應在30s內完成。取澄清濾液，照該品種項下規(guī)定的方法測定，計算每片的溶處量。,Company Logo,籃體,溶出杯,籃軸,Company Logo,Company Logo,Company Logo,第二法 槳法,如片劑或膠囊劑浮于液面，應先裝入沉降籃。 計時自供試品接觸溶出介質開始。,Company Logo,第三法 小杯法,Company Logo,結果判斷,6片(個)中每片(個)的溶出量，按標示量計算，均不低于規(guī)定限度(Q) 6片(個)中僅有12片(個)低于Q，但不低于Q-10%，且其平均溶出度不低于

16、Q 6片(個)中有12片(個)低于Q，其中僅有1片(個)低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q時，應另取6片(個)復試 初、復試的12片(個)中僅有13片(個)低于Q，其中僅有1片(個)低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q,Company Logo,應用示例 阿司匹林片溶出度的測定,測定方法 取本品，照溶出度測定法(第一法)，以稀鹽酸(鹽酸24ml加水至1000ml)，轉速為100轉/分，依法操作，經30 min，取溶液10 ml濾過；精密量取續(xù)濾液3 ml置50 ml容量瓶中，加0.4%NaOH 5ml，置水浴中煮沸5min，放冷，加稀硫酸2.5 m

17、l，并加水稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法(藥典附錄A)，以溶劑為空白，在303 nm的波長處測定吸光度，按C7H6O3的吸收系數( 為454）計算，再乘以1.304，計算每片的溶出量，限度為標示量的80%，應符合規(guī)定。,Company Logo,計 算,結果判斷,Company Logo,（五）釋放度,系指藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等在規(guī)定條件下釋放的速率和程度。 它是模擬體內消化道條件，用規(guī)定的儀器，在規(guī)定的溫度、介質、攪拌速率等條件下，對制劑進行藥物釋放速率的試驗，用以檢測產品的生產工藝是否達到控制產品質量的目的。,檢查方法, 第一法 緩試制劑或控釋制劑 第二法 腸溶制劑

18、 第三法 透皮貼劑,Company Logo,第一法,第一點 0.52h 考察藥物是否有突釋,第二點 中間取樣時間點 確定釋藥特性,第三點 最后取樣時間點 確定釋藥完全,第二法,酸中釋放量 10標示量,緩沖液中釋放量 70標示量(Q),Company Logo,二、注射液的檢查項目,注射液系指藥物與適宜的溶劑或分散介質制成的供注入體內的溶液、乳狀液或混懸液，以及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑。,溶劑 最常用的水性溶劑為注射用水，亦可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液。 非水溶劑有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。 常用的油溶劑為注射用大豆油。其質量應符合大豆油(供注

19、射用)的標準。 其他溶劑必須安全無害，用量應不影響療效。,Company Logo,附加劑 附加劑一般有滲透壓調節(jié)劑、pH值調節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑等。 抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等。常用的抑菌劑及其濃度(g/ml)為苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。 抑菌劑用量應能抑制注射液內微生物的生長。加有抑菌劑的注射液，仍應用適宜的方法滅菌。注射量超過5ml的注射液，添加的抑菌劑必須特別審慎選擇。 供靜脈(除另有規(guī)定外)或椎管注射用的注射液，均不得添加抑菌劑。,Company Logo, 【裝量】 【裝量差異】 【可見異物】 【無菌】 【熱原】/【細菌內毒素】 【不

20、溶性微粒】,Company Logo,（一）裝量,為保證注射用量不少于標示量，灌裝標示裝量為50ml與50ml以下的注射液時，應按下表適當增加裝量。 除另有規(guī)定外，供多次用量的注射液，每一容器的裝量不得超過10次注射量，增加裝量應能保證每次注射用量。,Company Logo,注射液的標示裝量為2ml或2ml以下者取供試品5支，2ml以上至10ml者取供試品3支，10ml以上者取供試品2支 開啟時注意避免損失，將內容物分別用相應體積的干燥注射器及注射針頭抽盡，然后注入標化的量具內，在室溫下檢視； 測定油溶液或混懸液的裝量時，應先加溫搖勻，再用干燥注射器及注射針頭抽盡后，同前法操作，放冷至室溫檢

21、視， 每支注射液的裝量均不得少于其標示量。 注射液的標示裝量為50ml以上至500ml的按最低裝量檢查法(附錄 F)檢查，應符合規(guī)定。,檢查方法,Company Logo,（二）裝量差異,供試品5瓶(支)的中每瓶(支)的裝量與平均裝量相比，應該符合規(guī)定。如有一瓶(支)不符合規(guī)定，應該另取10瓶(支)復試，均應符合規(guī)定。,凡檢查含量均勻度的注射用無菌粉末，一般不再檢查裝量差異。,Company Logo,（三）可見異物,存在于注射液、滴眼液中，在規(guī)定條件下目視可以觀察到的不溶性物質，其粒度或長度通常大于50m。, 燈檢法 光散射法,結果判斷,溶液型靜脈用注射液、注射用濃溶液和滴眼劑20支(瓶)供

22、試品中，均不得檢出可見異物，如檢出可見異物的供試品不超過1支(瓶)，應另取20支(瓶)同法檢查，均不得檢出。 混懸型注射液和混懸型滴眼液20支(瓶)供試品中，均不得檢出色塊/纖毛等可見異物。,Company Logo,（四）無菌,檢查注射劑以及其他要求無菌的藥品是否無菌的一種方法。, 對檢查無影響的供試品 直接接種法 供試品對檢查有干擾 薄膜過濾法,Company Logo,（五）熱原/細菌內毒素,內毒素為外源性致熱原，可激活中性粒細胞，使之釋放出內源性熱原質，作用于體溫調節(jié)中樞引起機體發(fā)熱。, 熱原家兔法 細菌內毒素鱟試劑法,原理,鱟的血變形細胞中含有高分子量凝固酶原和凝固蛋白原。前者經內毒

23、素激活轉化為具有活性的凝固酶，通過凝固酶的酶解作用將凝固蛋白原轉變?yōu)槟痰鞍?，凝固蛋白通過交聯酶作用相互聚合而形成牢固的凝膠。,Company Logo,第三節(jié) 片劑和注射劑中藥物的含量測定,一、常見干擾及排除, 糖類 硬脂酸鎂 抗氧劑 加入掩蔽劑 加酸分解 加入弱氧化劑氧化 利用主藥和抗氧劑紫外吸收光譜的差異進行測定 溶劑油 有機溶劑稀釋法 萃取法 柱色譜法,Company Logo,（一）糖類,淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是固體制劑的稀釋劑，具有還原性，干擾氧化還原滴定：高錳酸鉀法、溴酸鉀法等。,Company Logo,FeSO4原料藥采用KMnO4法 FeSO4片劑 采用鈰量法,應用示例,

24、Company Logo,【含量測定】取本品約0.5g，精密稱定，加稀硫酸與新沸過的冷水各15ml溶解后，立即用高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)滴定至溶液顯持續(xù)的粉紅色。每1ml高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)相當于27.80mg的FeSO47H2O。,【含量測定】取本品10片，置200ml量瓶中，加稀硫酸60ml與新沸過的冷水適量，振搖使硫酸亞鐵溶解，用新沸過的冷水稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙迅速濾過，精密量取續(xù)濾液30ml，加鄰二氮菲指示液數滴，立即用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當于27.80mg的FeSO47H2O。,Compa

25、ny Logo,固體制劑常用的潤滑劑，以硬脂酸鎂(C36H70O4Mg)和棕櫚酸鎂(C32H62O4Mg)為主的混合物。,配位常數：被測離子-EDTA Mg2+-EDTA，不干擾 調節(jié)pH或選擇合適的指示劑 pH6.07.5，酒石酸(草酸)可掩蔽。,（二）硬脂酸鎂,Mg2+干擾EDTA配位滴定； 硬脂酸根干擾高氯酸非水滴定。,干擾作用,干擾消除方法,Company Logo,硬脂酸根、苯甲酸鹽、羧甲基纖維素鈉干擾高氯酸滴定,干擾消除方法,被測藥物含量硬脂酸含量，干擾可以忽略； 脂溶性有機堿性藥物，堿化萃取分離后，滴定。,無水草酸的醋酐溶液，與硬脂酸鎂的鎂離子形成沉淀，且游離的硬脂酸在醋酐溶液中

26、不顯酸性，以孔雀綠為指示劑，高氯酸為滴定液，適用于叔胺類藥物或含氮雜環(huán)類藥物的片劑測定。,Company Logo,硫酸奎寧片Quinine Sulfate Tablets 【含量測定】取本品10片，除去糖衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于硫酸奎寧0.3g），置分液漏斗中，加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，精密加氯仿50ml，振搖10分鐘，靜置，分取氯仿液，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，加醋酐5ml與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)

27、相當于19.57mg的(C20H24N2O2)2H2SO42H2O。,應用示例,【含量測定】取本品約2g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml與結晶紫指示液12滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍綠色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于24.90mg的 (C20H24N2O2)2H2SO4。,Company Logo,（三）抗氧劑,常用抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉及維生素C等,碘量法 溴量法 鈰量法 亞硝酸鈉法,Company Logo,3.1 加入掩蔽劑（丙酮或甲醛）,Company Logo,維生素

28、C注射液 Vitamin C Injection 【含量測定】精密量取本品適量（約相當于維生素C 0.2g），加水15ml與丙酮2ml，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4ml與淀粉指示液1ml，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍色并持續(xù)30秒鐘不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當于8.806mg的C6H8O6。 安乃近注射液 Metamizole Sodium Injection 【含量測定】 精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，立即精密量取10ml，置錐形瓶中，加乙醇2ml、水6.5ml與甲醛溶液0.5ml，放置1分鐘，加鹽酸溶液

29、(91000)1.0ml，搖勻，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定（控制滴定速度為每分鐘35ml），至溶液所顯的淡黃色在30秒鐘內不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當于17.57mg的C13H16N3NaO4SH2O。,應用示例,Company Logo,3.2 加酸分解,Na2S2O3 + 2HCl 2NaCl + H2S2O3(加熱) SO2 + H2O NaHSO3+HCl NaCl + H2SO3 (加熱) SO2 + H2O,應用示例,磺胺嘧啶鈉注射液 Sulfadiazine Sodium Injection 本品為磺胺嘧啶鈉的滅菌水溶液。 【規(guī)格】 (1)2ml0.4g

30、 (2)5ml1g 【含量測定】 精密量取本品適量(約相當于磺胺嘧啶鈉0.6g)，照永停滴定法(附錄A)，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當于27.23mg的C10H9N4NaO2S。,Company Logo,永停滴定法,用作重氮化法的終點指示時，調解R1使加于電極上的電壓約為50mv。取供試品適量，精密稱定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液(1 2)15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑-鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L或0.05mol/L)迅速滴

31、定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計指針突然偏轉，并不再回復，即為滴定終點。,Company Logo,鹽酸普魯卡因胺注射液 Procainamide Hydrochloride Injection,本品為鹽酸普魯卡因胺的滅菌水溶液。 【規(guī)格】(1)1ml0.1g (2)2ml0.2g (3)5ml0.5g (4)10ml1g 【含量測定】精密量取本品5ml，加水40ml與鹽酸溶液(12)10ml，迅速煮沸，立即冷卻至室溫，照永停滴定法(附錄 A)，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.1m

32、ol/L)相當于27.18mg的C13H21N3OHCl。,Company Logo,3.3 加入弱氧化劑氧化(H202和HNO3),要求加入的弱氧化劑能將抗氧劑(亞硫酸鹽等)氧化，而不氧化被測藥物，不消耗滴定液。,Company Logo,306nm,243nm,3.4 UV吸收譜差消除干擾,Company Logo,鹽酸異丙嗪片 【含量測定】 取本品10片，除去包衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于鹽酸異丙嗪12.5mg)，置200ml量瓶中，加鹽酸溶液(9 1000)適量，振搖15分鐘使鹽酸異丙嗪溶解，再加鹽酸溶液(9 1000)稀釋至刻度，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液10 m

33、l，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照 紫外-可見分光光度法（附錄 A），在249nm的波長處測定吸收度，按C17H20N2SHCl的吸收系數( )為910計算，即得。 鹽酸異丙嗪注射液 【含量測定】精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液(91000)稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置另一100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄 A），在299nm的波長處測定吸收度，按C17H20N2SHCl的吸收系數( )為108計算，即得。,Company Logo,甲萘氫醌二磷酸酯鈉注射液(USP) Menadiol Sodium Injection 本品為滅

34、菌水溶液。含苯甲酸或苯酚抑菌劑及焦亞硫酸鈉。 【含量測定】精密移取本品適量，用0.1mol/L鹽酸稀釋配制為每1ml含甲萘氫醌二磷酸酯鈉50g的溶液，取上述溶液10ml置于60ml分液漏斗中，用15ml三氯甲烷提取三次，棄去有機層，取水層離心分離后作為供試液，于290nm處測定其吸收值A290nm。另取甲萘氫醌二磷酸酯鈉對照品同法測定，按計算含量，即得。,萃取分離后UV測定,3.5 其它方法,Company Logo,（四）溶劑油,脂溶性藥物(如甾體激素類)常配制成油溶液。溶劑油對以水為溶劑的分析方法可產生影響：溶液渾濁，影響UV測定、容量滴定、HPLC測定。,4.1 有機溶劑稀釋法,適用范圍

35、 藥物標示量高，稀釋倍數大或測定溶劑對油溶解性好，溶劑油對測定無干擾。,Company Logo,應用示例,癸氟奮乃靜注射液 Fluphenazine Decanoate Injection 本品為癸氟奮乃靜的滅菌油溶液。 【規(guī)格】1ml25mg 【含量測定】精密量取本品5ml（約相當于癸氟奮乃靜0.125g），加冰醋酸20ml，振搖，加結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至顯藍綠色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于29.59mg的C32H44F3N3O2S。,Company Logo,復方己酸羥孕酮注射液 Compound Hy

36、droxyprogesterone Caproate Injection 本品為己酸羥孕酮和戊酸雌二醇的滅菌油溶液。 【規(guī)格】1ml己酸羥孕酮250mg與戊酸雌二醇5mg 【含量測定】照高效液相色譜法（附錄 D）測定。 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(8515)為流動相；流速每分鐘0.7ml；檢測波長為225nm。己酸羥孕酮與戊酸雌二醇的分離度應符合要求。 測定法用內容量移液管精密量取本品1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為戊酸雌二醇供試品溶液；精密量取1.0ml，置

37、50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為己酸羥孕酮供試品溶液；取此兩種供試品溶液各10l，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積。另分別取戊酸雌二醇與己酸羥孕酮對照品適量，精密稱定，加甲醇使溶解并定量稀釋制成每1ml約含己酸羥孕酮與戊酸雌二醇各0.02mg的溶液，作為對照品溶液，取對照品溶液10l ，依法測定，按外標法以峰面積計算，即得。,Company Logo,4.2 萃取法,本品為丙酸睪酮的滅菌油溶液。 【規(guī)格】 (1)1ml10mg (2)1ml25mg (3)1ml50mg 【含量測定】HPLC測定 ODS柱；甲醇-水(7030) 流動相；檢測波長254nm。柱效和分離度

38、應符合要求。 內標溶液的制備 取苯丙酸諾龍約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。 測定法 用內容量移液管精密量取本品適量(約相當于丙酸睪酮50mg)，置50ml 量瓶中，用乙醚分數次洗滌移液管內壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml 置具塞離心管中，在溫水浴內使乙醚揮散；用甲醇振搖提取4次(第13次各5ml，第4次3ml)，每次振搖10分鐘后離心15分鐘，并用滴管將甲醇液移置25ml 量瓶中，合并提取液，精密加入內標溶液5ml,用甲醇稀釋至刻度，搖勻，取510l 注入液相色譜儀，測定，即得。,丙酸睪酮注射液 Testosterone Pr

39、opionate Injection,Company Logo,4.3 柱色譜法,USP測定丙酸睪酮注射液,油溶液,反相,正相,丙酸睪酮，甾醇，三萜類,丙酸睪酮,乙醇稀釋,紫外測定,Company Logo,二、含量測定應用示例,（一）鹽酸苯海拉明制劑的含量測定,鹽酸苯海拉明 Diphenhydramine Hydrochloride,本品為N,N-二甲基-2-(二苯基甲氧基)乙胺鹽酸鹽。,Company Logo,含量測定方法,Company Logo,1.原料藥測定,【含量測定】取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸20ml與醋酐4ml溶解后，再加醋酸汞試液4ml與結晶紫指示液1滴，用高氯酸

40、滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍綠色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于29.18 mg的C17H21NOHCl。,按干燥品計算，含C17H21NOHCl不得少于99.0%。,Company Logo,2.片劑含量測定,2.1 酸性染料比色法 (2000版Ch.P),原理 堿性藥物在酸性條件下與酸性染料溴甲酚綠結合生成有色的離子對，經氯仿提取后，在415nm波長處有最大吸收，利用比色法測定含量。,【性狀】本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯白色 【規(guī)格】25 mg 含量要求：本品含鹽酸苯海拉明(C17H21NOHCl)應為標示量的93.0%1

41、07.0%。,Company Logo,【含量測定】 對照品溶液的制備精密稱取鹽酸苯海拉明對照品50mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣后精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于鹽酸苯海拉明50mg)置100ml量瓶中，加水適量使鹽酸苯海拉明溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置另一100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。 溴甲酚綠溶液的制備 取溴甲酚綠50mg，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液0.7ml溶解后，加0.1mol/L鄰苯二甲酸氫鉀溶液5

42、0ml，0.1mol/L鹽酸溶液3.5ml，加水稀釋成100ml，搖勻，濾過，pH值為3.8。,Company Logo,測定法精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置分液漏斗中，各加水5ml與溴甲酚綠溶液3.0ml，搖勻，分別精密加氯仿10ml，振搖提取3分鐘，靜置分層后，分取氯仿液至具塞離心管中，離心(2500轉/分)10分鐘，取澄清的氯仿液，照分光光度法(附錄 B)，在415nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。,Company Logo,2.2 高效液相色譜法 (2005版Ch.P),【含量測定】照高效液相色譜法(附錄D)測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用氰基鍵合相硅膠為填充劑

43、；以乙腈-水-三乙胺(50:50:0.5)（用冰醋酸調節(jié)pH值至6.5）為流動相；檢測波長為258 nm。理論塔板按鹽酸苯海拉明峰計算不低于5000。鹽酸苯海拉明峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。 測定法 取本品20片，除去包衣后精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于鹽酸苯海拉明50 mg)，置100 ml量瓶中，加水適量使鹽酸苯海拉明溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸苯海拉明對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每1 ml中約含有0.5 mg的溶液，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。,Company Logo,3.注射劑含量測定,【

44、性狀】本品為無色的澄明液體 【規(guī)格】1ml:20 mg 含量要求：本品含鹽酸苯海拉明(C17H21NOHCl)應為標示量的95.0%105.0%。, 陰離子表面活性劑滴定法（兩相滴定法） (2000版Ch.P) 反相高效液相色譜法 (2005版Ch.P),Company Logo,3.1 陰離子表面活性劑（烷基磺酸鹽）滴定法,原理 使用陰離子表面活性劑(Anion Surfactant)溶液作為滴定劑的方法。常用于呈陽離子態(tài)的有機堿性藥物的含量測定。,終點前,終點時,Company Logo,【含量測定】精密量取本品適量(約相當于鹽酸苯海拉明20mg)，置具塞錐形瓶中，加水20ml，加氯仿50

45、ml與稀硫酸5ml，再加二甲基黃-溶劑藍19混合指示液1ml，用磺基丁二酸鈉二辛酯試液滴定，至近終點時強力振搖，繼續(xù)滴定至氯仿層由綠色轉變?yōu)榧t灰色；另精密稱取鹽酸苯海拉明對照品約20mg，照上述方法自“置具塞錐形瓶中”起，依法測定，根據二者消耗磺基丁二酸鈉二辛酯試液的量(ml)的比值計算，即得。,Company Logo,陰離子表面活性劑滴定法 測定的其它藥物, 克霉唑軟膏、栓、溶液 鹽酸胺碘酮片 硝酸益康唑軟膏 鹽酸氯丙那林片(含量及均勻度) 鹽酸苯海索片(含量及均勻度),Company Logo,鹽酸苯海索片 (Benzhexol Hydrochloride Tablets),【含量測定】

46、取本品25片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于鹽酸苯海索20mg)，置具塞錐形瓶中，加水8ml、稀硫酸3ml和氯仿25ml，再加二甲基黃-亞甲藍混合指示液0.5ml，用0.25磺基丁二酸鈉二辛酯溶液滴定，至近終點時強力振搖，繼續(xù)滴定至氯仿層由綠色轉變?yōu)榧t灰色；另精密稱取鹽酸苯海索對照品20mg，照上述方法自“置具塞錐形瓶中”起，依法測定，根據二者消耗0.25磺基丁二酸鈉二辛酯溶液的量(ml)的比值計算，即得。,Company Logo,（二）鹽酸嗎啡制劑的含量測定,鹽酸嗎啡 Morphine Hydrochloride,本品為17-甲基-3-羥基-4,5-環(huán)氧-7,8-二脫氫嗎啡喃-6-醇鹽酸鹽三水合物。,Company Logo,Company Logo,（三）阿片中嗎啡的含量測定,阿 片 Opium,本品為罌粟科植物罌粟的未