生物安全柜性能測(cè)試項(xiàng)目與方法

1、生物安全柜性能測(cè)試項(xiàng)目與方法（依據(jù)生物安全柜應(yīng)用指南原理、使用和驗(yàn)證李勁松主編，化學(xué)工業(yè)出版社）A.1 柜體泄漏檢測(cè)試驗(yàn)壓力衰減及皂泡/示蹤氣體檢測(cè)試驗(yàn)A.1.1 壓力衰減及皂泡試驗(yàn)A.1.1.1 目的該測(cè)試應(yīng)在所有壓力排風(fēng)系統(tǒng)的外表面進(jìn)行，目的是檢測(cè)焊縫、密封墊、壓力排風(fēng)系統(tǒng)檢漏口以及級(jí)柜手套接口是否存在泄漏。A.1.1.2 儀器壓力計(jì)、壓.力表或壓力傳感系統(tǒng)，測(cè)量范圍為0500Pa、精確度為5 Pa。滲漏檢測(cè)試劑（25g/L肥皂液，或其他稀釋10倍的中性洗滌劑)。塑料布(0.5mm耐沖擊性聚苯乙烯膜)。管道密封膠帶。A.1.1.3 （壓力衰減測(cè)試）方法將安全柜密封（對(duì)于I級(jí)、級(jí)安全柜即密閉

2、正面的觀察窗和排風(fēng)口）。為方便測(cè)試，必要時(shí)應(yīng)除去裝飾嵌板及其他通道障礙部件以暴露壓力排風(fēng)系統(tǒng)。將壓力計(jì)、壓力表或壓力傳感系統(tǒng)連接到測(cè)試區(qū)域以指示內(nèi)部壓力見圖A-1(a)將安全柜充氣加壓至500Pa，停止充氣，并在30min后測(cè)量壓力。允許的泄漏量為原壓力的10%。如果安全柜的壓力達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)，則使用皂泡法來確定泄漏位置。A.1.1.4 （皂泡測(cè)試）方法將安全柜密封（對(duì)于1級(jí)、級(jí)安全柜即密閉正面的觀察窗和排風(fēng)口）。為方便測(cè)試，必要時(shí)應(yīng)除去裝飾嵌板及其他通道障礙部件以暴露壓力排風(fēng)系統(tǒng)。將壓力計(jì)、壓力表或壓力傳感系統(tǒng)連接到測(cè)試區(qū)域以指示內(nèi)部壓力見圖A-1(a)。圖A-1 生物安全柜柜體泄漏試驗(yàn)安全柜充

3、氣加壓至。沿著安全柜壓力排風(fēng)系統(tǒng)外表面上所有的焊縫、密封墊、檢漏口和級(jí)柜手套接口噴灑或擦拭液態(tài)滲透檢測(cè)試劑（25g/L肥皂液，或其他稀釋10倍的中性洗滌劑）。小的泄漏點(diǎn)將會(huì)形成氣泡顯示出來。而較大的泄漏點(diǎn)則在洞口處還沒有形成氣泡時(shí)，就把探測(cè)液體吹走，而且可以感覺到氣體輕微的流動(dòng)或聽到聲音。A.1.1.5 合格標(biāo)準(zhǔn)安全柜應(yīng)能保持在500Pa50Pa的氣壓下30min，或者當(dāng)壓力維持在500Pa50Pa時(shí)，安全柜壓力排風(fēng)系統(tǒng)外表面上所有的焊縫、密封墊、檢漏口和密封處沒有皂泡產(chǎn)生。A.1.2 氦氣泄漏測(cè)試A.1.2.1 目的該測(cè)試在可能受生物污染的壓力排風(fēng)系統(tǒng)中進(jìn)行，目的是檢測(cè)焊接、密封墊或密封劑密

4、封的連接處是否存在泄漏，這些泄漏可能使具有潛在危害的物質(zhì)釋放進(jìn)入大氣。A.1.2.2 儀器氦氣泄漏檢測(cè)器：用前應(yīng)按照使用說明進(jìn)行標(biāo)定。A.1.2.3 方法進(jìn)行測(cè)試的房間內(nèi)事先應(yīng)徹底排空測(cè)試氣體，并且盡可能減少空氣流動(dòng)。測(cè)試區(qū)應(yīng)禁煙。將安全柜密封(對(duì)于級(jí)、級(jí)安全柜即密閉正面的觀察窗和排風(fēng)口)。安全柜充氣加壓至500Pa。如果30min后，安全柜壓力變化不超過10%，則減壓至正常。如果安全柜不能保持這一壓力，則使用滲漏檢測(cè)試劑檢查泄漏處（見A.1.1），修復(fù)后再次進(jìn)行測(cè)試。氦氣泄漏檢測(cè)：向安全柜內(nèi)充入純氦氣，直至排風(fēng)口氦氣濃度達(dá)15%，然后將安全柜加壓至500Pa?；蛘呤褂门蛎洑饽以诎踩駜?nèi)部排出

5、15%的空氣，在氣囊向安全柜外排氣的同時(shí)將氦氣注入安全柜，然后加壓至500Pa。打開安全柜的送風(fēng)機(jī)使氣體循環(huán)30s。按照使用說明調(diào)整氦氣泄漏檢測(cè)器的靈敏度至110-5ml/s。沿縫隙、級(jí)柜手套接口、檢漏口、面板密封墊以及其他可能的泄漏處移動(dòng)探頭。注意不使儀器震動(dòng)。在探測(cè)表面以約2.5cm/s的速度移動(dòng)探頭，探頭與表面的距離保持在6.3 13mm之間見圖A-1(b)。A.1.2.4 合格標(biāo)準(zhǔn)(氦氣泄漏測(cè)試)當(dāng)以15%以土的氦氣濃度加壓至500Pa時(shí)，安全柜任意位置的泄漏率不得超過1x10-5ml/s。注意：檢測(cè)的靈敏度，保持正壓在整個(gè)柜體為103ml/s，肥皂水法每一處為10-2ml/s，鹵素漏

6、泄試驗(yàn)整個(gè)柜體為10-5ml/s。保持正壓操作的關(guān)鍵是前面開口的密閉。只要密閉完全，操作很簡(jiǎn)單。但出現(xiàn)漏時(shí)，確定漏泄點(diǎn)比較困難。肥皂水法在密閉操作不完美時(shí)也可進(jìn)行，但需要柜內(nèi)能持續(xù)保持一定壓力。大的泄漏點(diǎn)因不易形成肥皂泡反而會(huì)被疏忽，要充分注意這一點(diǎn)。A.1.3 六氟化硫（SF6）泄漏測(cè)試A.1.3.1 目的該測(cè)試在可能受生物污染的壓力排風(fēng)系統(tǒng)中進(jìn)行，目的是檢測(cè)焊接、密封墊或密封劑密封的連接處是否存在泄漏，這些泄漏可能使具有潛在危害的物質(zhì)釋放進(jìn)入大氣。A.1.3.2 儀器工業(yè)型SF6泄漏檢測(cè)器(或靈敏度110-7ml/s的鹵化物檢測(cè)儀)，使用前需按照使用說明校準(zhǔn)。A.1.3.3 方法進(jìn)行測(cè)試的

7、房間內(nèi)事先應(yīng)徹底排空測(cè)試氣體，并.且盡可能減少空氣流動(dòng)。測(cè)試區(qū)應(yīng)禁煙。將安全柜密封（即密閉正面的觀察窗和排風(fēng)口）。安全柜充氣加壓至500Pa。如果30min后，安全柜壓力變化不超過10%，則減壓至正常。如果安全柜不能保持這一壓力，則使用滲漏檢測(cè)試劑檢查泄漏處(見A.1.1，修復(fù)后再次進(jìn)行測(cè)試。向安全柜內(nèi)充入SF6氣體，加壓至500Pa。打開安全柜的送風(fēng)機(jī)使氣體循環(huán)30s。按照使用說明調(diào)整SF6泄漏檢測(cè)器的靈敏度至510-7ml/s。沿縫隙、連接處、檢漏口、面板密封墊以及其他可能的泄漏處移動(dòng)探頭。注意不使儀器震動(dòng)。在探測(cè)表面以約2.5cm/s的速度移動(dòng)探頭，探頭與表面的距離保持在6.313mm之

8、間見圖A-1(b)。A.1.3.4 合格標(biāo)準(zhǔn)（SF6泄漏檢測(cè)）安全柜任意位點(diǎn)的泄漏速率不得超過510-7ml/s。A.2 高效空氣粒子（HEPA）過濾器泄漏檢測(cè)A.2.1 目的檢測(cè)下排送風(fēng)HEPA過濾器和排風(fēng)HEPA過濾器本身、過濾器外殼以及過濾器固定框架的完整性。檢測(cè)時(shí)安全柜以額定風(fēng)速0.025m/s運(yùn)行。A.2.2 儀器A.2.2.1 線性或?qū)?shù)刻度顯示的氣溶膠光度計(jì)。對(duì)于濾器上游平均粒徑0.3 m，濃度為10g/L的多分散性鄰苯二甲酸二辛酚（DOP）氣溶膠顆粒，能夠100%顯示。靈敏度為110-3g/L，采樣流量510-4m3/s10%以上，噴霧口面積在11cm2以下。光度計(jì)使用前應(yīng)按照

9、說明進(jìn)行標(biāo)定。A.2.2.2 氣溶膠發(fā)生器。氣噴式，產(chǎn)生粒子的平均粒徑0.3m。A.2.2.3 壓力表。量程0550kPa，分辨率7kPa，使用前按照說明進(jìn)行校準(zhǔn)。A.2.3 檢剛方法及合格標(biāo)準(zhǔn)A.2.3.1 適于掃描操作的過濾器如果安全柜裝有過濾擴(kuò)散器和保護(hù)外罩，監(jiān)測(cè)前應(yīng)移除。打開安全柜的風(fēng)機(jī)和照明，按照使用說明安放氣溶膠發(fā)生器，井將氣溶膠通過有螺紋插塞的貫穿物向被測(cè)生物安全柜的遠(yuǎn)離過濾器的靜壓箱內(nèi)引入。氣溶膠的引入點(diǎn)應(yīng)按照適于與柜內(nèi)氣流均勻混合的原則確定?？稍跉馊苣z發(fā)生器的出口安裝一個(gè)T形接頭，以使檢測(cè)氣溶膠分布到單一風(fēng)機(jī)的多個(gè)入口之內(nèi)或多個(gè)風(fēng)機(jī)的入口之內(nèi)。按照使用說明啟動(dòng)并調(diào)整氣溶膠光度

10、計(jì)。在上游臨近過濾器處測(cè)量氣溶膠濃度，測(cè)點(diǎn)最少為3點(diǎn)，分別為中心1點(diǎn)，距兩邊50mm處各一點(diǎn)，樣品濃度應(yīng)大于10g/L。線性刻度光度計(jì)（刻度0100）需調(diào)整滿讀數(shù)至100。對(duì)于對(duì)數(shù)刻度光度計(jì)，將過濾器上游側(cè)濃度調(diào)整至一個(gè)分刻度所代表濃度的10000倍（采用儀器校準(zhǔn)曲線）。在HEPA過濾器的整個(gè)下游面以及每個(gè)過濾器接縫的四周用光度計(jì)作掃描檢漏。過濾器的四周邊緣必須單獨(dú)掃過，過濾器濾材與邊框之間要沿著接縫掃描，過濾器與安全柜之間要圍繞密封部位掃描。探頭與檢測(cè)面距離保持在2.5cmn以內(nèi)，掃描速度小于5cm/s，線路應(yīng)重疊。任何點(diǎn)上氣溶膠的持續(xù)滲透不得超過上游濃度的0.01%。A.2.3.2 不適于

11、掃描操作的過濾器如果安全柜的管道連接不適于對(duì)排風(fēng)過濾器進(jìn)行掃描操作，就在過濾器下游的通風(fēng)管的某一位置鉆一個(gè)直徑大約為1cm（0.3in）的孔，開孔的位置要宜于氣溶膠與柜內(nèi)空氣均勻混合，然后用剛性伸縮管將光度計(jì)的采樣探頭插入小孔中來進(jìn)行泄漏試驗(yàn)。氣溶膠的持續(xù)滲透不得超過上游濃度的0.005%。注意：排風(fēng)高效空氣粒子過濾器也可用下述方法檢漏。只開排風(fēng)機(jī)，不開送風(fēng)機(jī)，使生物安全柜吸入普通環(huán)境空氣，含塵濃度不低于100000粒/L（0.5m）。用粒子計(jì)數(shù)器的采樣口在排風(fēng)高效過濾器出風(fēng)面和邊框縫隙處之上20處，做掃描檢漏，掃描移動(dòng)速度520mm/s，路線應(yīng)重疊。合格標(biāo)準(zhǔn)為級(jí)、級(jí)和級(jí)柜第一級(jí)排風(fēng)濾器3粒/

12、L，級(jí)柜第二級(jí)排風(fēng)濾器1粒/L。除級(jí)柜外其他型號(hào)的安全柜送風(fēng)濾器均應(yīng)達(dá)到3粒/L。檢測(cè)管的直徑和流量對(duì)檢測(cè)靈敏度影響很大。掃描試驗(yàn)的最佳條件是等速吸風(fēng)。流量一般設(shè)定為510-4m3/s，檢測(cè)口的直徑最好是25mm。DOP具有微弱致癌性。它的替代品，例如聚一烯烴（polyalpha olefin, PAO），二（2乙基己基）癸二酸酯di(2-ethylhexyl)sebacate、聚乙二醇以及藥用級(jí)輕質(zhì)礦物油，雖然氣溶膠數(shù)據(jù)齊全，但尚不能保證安全可靠，因此目前仍采用DOP。A.3 噪聲水平測(cè)試A.3.1 目的測(cè)量安全柜的機(jī)械噪聲水平，有助于設(shè)法減少操作人員的疲勞。檢測(cè)可在普通房間里進(jìn)行。A.3.

13、2 儀器聲測(cè)儀，精度為1dB，分辨率為1dB，最小范圍為50100dB，應(yīng)按使用說明將加權(quán)值設(shè)為“A”。A.3.3 方法A.3.3.1 打開安全柜的照明燈，使安全柜在額定風(fēng)速0.025m/s（5ft/min）運(yùn)行。A.3.3.2 將儀器加權(quán)值設(shè)定為“A”。A.3.3.3 在安全柜前窗中心水平向外30cm，工作臺(tái)面向上38cm位置測(cè)量噪聲水平（參見圖A-2）。A.3.3.4 測(cè)量環(huán)境的噪聲水平時(shí)，關(guān)閉安全柜的送風(fēng)機(jī)和照明燈，遠(yuǎn)程排風(fēng)機(jī)應(yīng)繼續(xù)運(yùn)行，并按A.3.3.3項(xiàng)進(jìn)行測(cè)量。A.3.4 合格標(biāo)準(zhǔn)在環(huán)境噪聲不超過57dB(A)級(jí)的情況下，安全柜前方的總噪聲水平不應(yīng)超過7OdB(A)。當(dāng)周圍環(huán)境噪聲

14、超過57dB(A)時(shí)，按附錄A中A.3.3.3R測(cè)得的讀數(shù)應(yīng)當(dāng)根據(jù)聲測(cè)儀操作手冊(cè)中所提供的曲線或表格進(jìn)行修正。如果操作手冊(cè)沒有提供修正資料，則使用標(biāo)準(zhǔn)的校正曲線或校正表（見表A-1）表A-1 噪聲讀數(shù)修正表噪聲測(cè)量值與背景噪聲間的差值/dB(A)從測(cè)量值中減去的數(shù)值噪聲測(cè)量值與背景噪聲間的差值/dB(A)從測(cè)量值中減去的數(shù)值02扣除背景噪聲值610133100452A.4 照明強(qiáng)度測(cè)試A.4.1 目的測(cè)定安全柜工作臺(tái)面的照明強(qiáng)度，單位為h，幫助減少安全柜操作人員的疲勞。A.4.2儀器精確度為10%的便攜式光度計(jì)。使用前應(yīng)按照說明進(jìn)行標(biāo)定。A.4.3 方法A.4.3.1 關(guān)閉安全柜的照明燈，沿著

15、工作臺(tái)中央縱軸測(cè)量背景光強(qiáng)度，起始測(cè)量點(diǎn)離一側(cè)15cm，然后以大約30cm的相等間距逐點(diǎn)測(cè)定(見圖A-3)。A.4.3.2 打開照明燈和送風(fēng)機(jī)，再在相同點(diǎn)讀取數(shù)據(jù)。圖A-3 光強(qiáng)度測(cè)試A.4.4 合格標(biāo)準(zhǔn)背景光平均強(qiáng)度不大于160lx情況下，平均照明強(qiáng)度應(yīng)不低于480lx。A.5 振動(dòng)測(cè)試A.5.1 目的測(cè)定安全柜運(yùn)行時(shí)的機(jī)械振動(dòng)量，有助于設(shè)法減少操作人員的疲勞，防止損壞組織培養(yǎng)物等脆弱的試驗(yàn)材料。A.5.2 儀器振幅達(dá)到微米量級(jí)的振動(dòng)分析儀。A.5.3 方法A.5.3.1 打開安全柜的照明燈，并使安全柜在額定風(fēng)速0.025m/s內(nèi)運(yùn)行。A.5.3.2 測(cè)定垂直軸的震動(dòng)位移時(shí)，可使用適當(dāng)工具將

16、震動(dòng)測(cè)試儀的傳感器元件固定在工作臺(tái)面的幾何中心點(diǎn)。測(cè)試位置見圖A-4。圖A-4振動(dòng)測(cè)試A.5.3.3 測(cè)定安全柜運(yùn)行時(shí)的總振幅。A.5.3.4 關(guān)閉安全柜的送風(fēng)機(jī)，僅運(yùn)行排風(fēng)機(jī)，測(cè)定背景振幅。A.5.3.5 安全柜總振幅減去背景振幅即得到安全柜凈振幅。A.5.4合格標(biāo)準(zhǔn)安全柜正常運(yùn)行條件下，工作臺(tái)面中央振動(dòng)頻率在1010000Hz時(shí)，凈振幅應(yīng)50m均方根振幅。A.6 溫升測(cè)試A.6.1 目的測(cè)定安全柜運(yùn)行一段時(shí)間后柜內(nèi)溫度上升幅度。應(yīng)在環(huán)境溫度1928的房間內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。A.6.2儀器2個(gè)溫度汁：精密度為0.1。A.6.3 方法將一個(gè)溫度計(jì)安裝在操作臺(tái)面中心上方30cm的位置上，測(cè)量安全柜內(nèi)的溫

17、度。同時(shí)用另一個(gè)溫度計(jì)測(cè)量房間內(nèi)的溫度。啟動(dòng)送風(fēng)機(jī)、點(diǎn)亮照明燈，使安全柜在額定風(fēng)速0.025m/s內(nèi)運(yùn)行。記錄4h以后的兩個(gè)溫差。A.6.4 合格標(biāo)準(zhǔn)生物安全柜正常運(yùn)行4h后，柜內(nèi)與環(huán)境的溫度差應(yīng)小于8。A.7人員、樣品和交叉污染保護(hù)測(cè)試驗(yàn)證(微生物學(xué))A.7.1 目的以生物學(xué)方法測(cè)試生物安全柜對(duì)人員、產(chǎn)品、交叉污染保護(hù)性能，接受下述檢測(cè)的生物安全柜送風(fēng)機(jī)、排風(fēng)機(jī)均應(yīng)以額定轉(zhuǎn)速運(yùn)行，并在整個(gè)測(cè)試期間持續(xù)穩(wěn)定運(yùn)行。級(jí)生物安全柜不提供產(chǎn)品保護(hù)，工作面氣流為亂流，只進(jìn)行人員保護(hù)試驗(yàn)一項(xiàng)檢測(cè)；級(jí)生物安全柜需進(jìn)行人員、樣品、交叉污染保護(hù)三項(xiàng)檢測(cè)；級(jí)安全柜前部封閉，工作面氣流為亂流，不需要進(jìn)行人員、樣品保

18、護(hù)和交叉污染保護(hù)試驗(yàn)。A.7.2材料和儀器、設(shè)備A.7.2.1 黏質(zhì)沙雷菌（Serratia marcescens ATCC.8039)菌懸液的配置第1步 高濃度的磷酸鹽緩沖液（PDB）34g磷酸二氫鉀（KH2P04）溶于500ml蒸餾水中；在25（77F）下用1mo/L NaOH調(diào)溶液pH值至7.20.5；用蒸餾水稀釋至1L。第2步 最終的PBS稀釋液蒸餾水1L（1L蒸餾水在25調(diào)pH值至7.00.1，在120高壓滅菌15min）；第1步的高濃度PBS溶液1.25ml；最終pH至7.20.5；120（250F）高壓滅菌15min。第3步黏質(zhì)沙雷菌（Serratia marcescens）菌懸

19、液的制備在無菌條件下將黏質(zhì)沙雷菌菌種劃線接種到普通瓊脂培養(yǎng)基平皿（100mm15mm）上。（350.5）培養(yǎng)（242）h。在無菌條件下從特征性菌落表面上挑取一接種環(huán)細(xì)菌轉(zhuǎn)移到裝有5ml肉湯液體培養(yǎng)基的試管中。(370.5)搖床(160r/min)培養(yǎng)(482)h。4保存。使用前用平皿稀釋計(jì)數(shù)法確定菌液濃度。用第2步配置的PBS稀釋液稀釋黏質(zhì)沙雷菌菌液，使其平均濃度為1.010-8/mI。用PBS稀釋液稀釋后黏質(zhì)沙雷菌菌懸液即可應(yīng)用。注：黏質(zhì)沙雷菌菌落為玫瑰紅色，微凸，光滑濕潤(rùn)，邊緣整齊。A.7.2.2 指示微生物也可以選用恥垢分枝桿菌(M.Smegmatis ATCC.19420)噬菌體懸液的

20、制備和使用方法。第1步 宿主菌菌液的制備將在改良L-J培養(yǎng)基上生長(zhǎng)1周的恥垢分枝桿菌接種于7H9（另加10OADC+1mmol/L CaCl2）液體培養(yǎng)基，37 150r/min振蕩培養(yǎng)48h，菌液麥?zhǔn)媳葷岱☉?yīng)為5mg/mL，4保存?zhèn)溆谩５?步分枝桿菌噬菌體的增殖采用半固體雙層瓊脂平皿法。下層用含1.5瓊脂的7H9（50時(shí)加10小牛血清+1mmol/L CaCl2）7ml鋪皿；上層培養(yǎng)基4mL（瓊脂含量0.7%），在50時(shí)加入恥垢分枝桿菌和噬菌體混合懸液0.4ml（1：1混合），鋪皿，37培養(yǎng)48h，加入9ml SM液37孵1l小時(shí)，吸取液體，用0.2m濾膜過濾，所得擴(kuò)增液效價(jià)檢查應(yīng)為1.01

21、081.0109pfu/ml，4保存（如效價(jià)不足，可重復(fù)增殖數(shù)次）。第3步指示平板的制備和使用雙層平皿法。下層鋪皿方式同第2步，放入采樣器中進(jìn)行噬菌體采樣后取出，在無菌條件下倒入48混有1ml宿主菌的上層瓊脂4ml。放在臺(tái)面上搖勻。使上層培養(yǎng)基鋪滿乎板。待凝固后，37培養(yǎng)24h，計(jì)數(shù)噬菌斑。A.7.2.3 氣溶膠發(fā)生和采樣儀器、設(shè)備空氣壓縮機(jī)、氣體過濾裝置、壓力表、流量計(jì)、連接軟管、支架等。氣溶膠發(fā)生器1個(gè)，性能見附錄B。含營(yíng)養(yǎng)瓊脂或其他適用的生長(zhǎng)介質(zhì)，無抑制劑或其他添加劑的平皿（100mm15mm或150mm22mm）。6個(gè)分別裝有20ml無菌PBS稀釋液的AGI-30型沖擊式空氣采樣器（流

22、量校準(zhǔn)到12.312.6L/min)。2個(gè)額定流量為(28.30.2)Lmin的安德森2級(jí)空氣微生物采樣器。一個(gè)外徑63mm、末端密閉的不銹鋼、鋁質(zhì)或有機(jī)玻璃圓筒模擬操作者手臂干擾氣流。長(zhǎng)度由安全柜內(nèi)部的空間大小決定。管子的一端頂在工作區(qū)域的后壁，另一端經(jīng)由安全柜操作口凸入實(shí)驗(yàn)室至少15cm。計(jì)時(shí)器1個(gè)。操作人員個(gè)人防護(hù)用具，防護(hù)服、口罩、防護(hù)鏡等。A.7.3 人員保護(hù)測(cè)試用1.01088.0108的黏質(zhì)沙雷菌攻擊5min。(級(jí)生物安全柜不需作此項(xiàng)測(cè)試)A.7.3.1 方法開啟安全柜待其風(fēng)機(jī)達(dá)到額定風(fēng)速。用軟管連接空氣壓縮機(jī)、氣體過濾裝置、壓力計(jì)、流量計(jì)、氣溶膠發(fā)生器。將裝備的黏質(zhì)沙雷菌懸液放

23、入冰浴槽中，連接到氣溶膠發(fā)生器上。氣溶膠發(fā)生器放置于安全柜左右內(nèi)壁中央，噴口位于工作臺(tái)面上方35cm處，噴射軸平行于工作面。噴口距觀察窗100mm，朝向觀察窗(見圖A-5)。圖A-5人員安全性試驗(yàn)正面視圖將一個(gè)模擬手臂的金屬圓筒置于安全柜中央，圓筒的中心軸位于工作臺(tái)面上方70mm。圓筒的一端緊靠安全柜的后壁，另端應(yīng)伸出安全柜外150mm以上。圍繞圓筒放置4個(gè)撞擊采樣器，采樣口均位于安全柜觀察窗向外63cm處。其中兩個(gè)采樣器的采樣口軸線相隔15cm，位于圓筒頂緣水平切面。另外兩個(gè)采樣器的采樣口軸線相隔5.0cm，位于圓筒底部下方3cm的水平面。一個(gè)有支撐架的瓊脂培養(yǎng)皿放在圓筒中心軸下方，前進(jìn)風(fēng)格

24、柵上方或下方10mm處，使其對(duì)進(jìn)入氣流干擾最小，作為陽性對(duì)照。(見圖A-6圖A-8。)圖A-6人員安全性試驗(yàn)側(cè)面視圖放置2個(gè)裂隙式空氣采樣器，采樣口水平面與工作臺(tái)面持平，垂直軸在安全柜前15cm、同側(cè)壁20cm處。另放置兩個(gè)撞擊式采樣器，采樣口位于工作臺(tái)面上方36cm，安全柜觀察窗外側(cè)5.0cm、安全柜中線兩邊各15cm處（見圖A-8）。測(cè)試時(shí)間為30min，測(cè)試順序?yàn)椋褐貜?fù)進(jìn)行3次測(cè)試。時(shí)間/min操作時(shí)間/min操作0啟動(dòng)安德森2級(jí)空氣微生物采樣器11關(guān)閉AGI-30型沖擊式空氣采樣器5啟動(dòng)噴霧器11.5關(guān)閉噴霧器6啟動(dòng)AGI-30型沖擊式空氣采樣器30關(guān)閉安德森2級(jí)空氣微生物采樣器用直徑

25、47.0mm、孔徑0.22m微孔濾膜過濾撞擊式采樣器中的所有采樣液，無菌條件下將濾膜轉(zhuǎn)移有普通瓊脂平皿中。含有濾膜的平皿和取自裂隙式空氣采樣器的平皿在37.0培養(yǎng)，2428h觀察結(jié)果。生物安全柜進(jìn)行型式檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)在下述條件下重復(fù)上面檢測(cè)步驟。吸入口風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速（-0.050.015）m/s，下送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(+0.050.015)m/s；吸入口風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-0.050.01)m/s，下送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-0.050.01)m/s。試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)安全柜內(nèi)表面進(jìn)行擦拭消毒。A.7.4 樣品保護(hù)測(cè)試方法（級(jí)和級(jí)生物安全柜不需作此項(xiàng)測(cè)試。）開啟安全柜待其風(fēng)機(jī)達(dá)到額定風(fēng)速，安全柜前開口

26、開啟至生產(chǎn)商設(shè)定的最大高度。在工作臺(tái)面上滿布100mm15mm瓊脂平皿，然后依次打開培養(yǎng)皿蓋子。用軟管連接空氣壓縮機(jī)、濾油裝置、壓力計(jì)、流量計(jì)、氣溶膠發(fā)生器。將黏質(zhì)沙雷菌懸液用PBS稀釋液稀釋100倍后，冰浴放置，連接到氣溶膠發(fā)生器上。氣溶膠發(fā)生器放置于安全柜的水平中心，其水平噴射軸應(yīng)與前操作開口的上邊緣平齊，且平行于工作面。氣溶膠發(fā)生器的噴嘴應(yīng)置于觀察窗外側(cè)100mm處，并朝向觀察窗。將一個(gè)兩端密封、外徑為6.3cm的模擬手臂金屬圓筒置于安全柜中央。中心軸位于工作臺(tái)面向上70mm處。圓筒的一端緊靠安全柜的后壁，另一端應(yīng)伸出安全柜外至少150mm(見圖A-9圖A-11)。圖A-9受試樣品保護(hù)試

27、驗(yàn)培養(yǎng)皿擺放位置平面圖作為陽性對(duì)照，將一個(gè)有支撐架的瓊脂培養(yǎng)皿放在安全柜內(nèi)圓筒中心軸下方，且位于前進(jìn)風(fēng)格柵上方或下方10mm，使其對(duì)進(jìn)入隔柵的氣流干擾最小。啟動(dòng)氣溶膠發(fā)生器min后停止噴霧。氣溶膠發(fā)生器停止后再等待5min，然后迅速蓋好瓊脂平皿。試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)安全柜內(nèi)各表面進(jìn)行擦拭消毒。在37.0培養(yǎng)，2428h觀察結(jié)果。對(duì)于新產(chǎn)品或經(jīng)過重大改型設(shè)計(jì)的生物安全柜在下述條件下按7.9和7.10的程序分別重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn)：吸入口風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-0.050.015)m/s，送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(+0.050.015)m/s；吸入口風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-0.050.015)m/s，送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-

28、0.050.015)m/s。A.7.4.2 合格標(biāo)準(zhǔn)每次試驗(yàn)中，瓊脂平皿上黏質(zhì)沙雷菌的菌落數(shù)不得超過5個(gè)。對(duì)照平皿必須是陽性結(jié)果。當(dāng)對(duì)照培養(yǎng)皿內(nèi)含有300個(gè)黏質(zhì)沙雷菌的菌落，稱其為陽性。試驗(yàn)重復(fù)3次。A.7.5 交叉污染測(cè)試用11048104的黏質(zhì)沙雷菌攻擊5min（級(jí)和級(jí)生物安全柜不需作此項(xiàng)測(cè)試)。A.7.5.1 方法開啟安全柜待其風(fēng)機(jī)達(dá)到額定風(fēng)速。裝有55ml黏質(zhì)沙雷菌懸液(11048104/mL)的噴霧器，其水平噴射位于工作臺(tái)面上方76130mm處，且平行于工作面。噴霧器的背面緊靠左（右）內(nèi)壁的氣流分界面，噴嘴正對(duì)右（左）內(nèi)壁。將瓊脂平皿按下述方法排布于工作臺(tái)面（見圖A-12、圖A13）

29、，然后依次打開培養(yǎng)皿蓋子：在噴霧器噴嘴下方布置2列對(duì)照平皿；距噴嘴一側(cè)內(nèi)壁36cm處布置一列平皿；距噴嘴一側(cè)內(nèi)壁36cm以外位置一至兩列平皿。啟動(dòng)噴霧器，5min之后關(guān)閉噴霧器。試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)環(huán)境內(nèi)各個(gè)表面進(jìn)行擦拭消毒。把噴霧器放在安全柜內(nèi)對(duì)面一側(cè)內(nèi)壁的中線，重復(fù)步驟。停止噴霧15min之后，迅速蓋好瓊脂平皿。在37.0培養(yǎng)，2428h觀察結(jié)果。如果結(jié)果為陰性，則放回恒溫箱繼續(xù)培養(yǎng)至4448h后再計(jì)數(shù)。對(duì)于新產(chǎn)品或經(jīng)過重大改型設(shè)計(jì)的生物安全柜在下述條件下按上述程序分別重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn)：吸入口風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速（-0.050.015）m/s，送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(+0.050.015)m/s；吸入口風(fēng)速

30、偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速（-0.050.01）m/s，送風(fēng)風(fēng)速偏離標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速(-0.050.01)m/s。A.7.5.2合格標(biāo)準(zhǔn)距離攻擊側(cè)壁36cm之內(nèi)的一些瓊脂平皿可以得到枯草芽孢桿菌菌落，它們用作陽性對(duì)照。每次測(cè)試時(shí)，在大于38cm中心處的瓊脂平皿所得到的菌落總數(shù)不得超過2個(gè)。在安全柜的左側(cè)和右側(cè)各做3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)。A.8穩(wěn)定性測(cè)試A.8.1 目的通過施加靜態(tài)力并測(cè)定安全柜的變形和偏移，來測(cè)試生物安全柜以下幾方面的結(jié)構(gòu)完整性和穩(wěn)定性：抵抗外力作用造成的翻倒；抵抗外力作用造成的變形；抵抗負(fù)載造成的工作臺(tái)面偏移；傾斜時(shí)的穩(wěn)定性；工作臺(tái)面水平性。A.8.2 儀器測(cè)力計(jì)或彈簧秤，精確度為0.1kg千分尺；水平儀。

31、A.8.3抗翻倒試驗(yàn)將安全柜的前后支架調(diào)至最高，然后固定使其不能晃動(dòng)。沿任一方向，自水平位置傾斜10。合格的安全柜應(yīng)不翻倒。A.8.4抗柜體變形試驗(yàn)用螺栓將安全柜固定在基座或地板上，使其不能移動(dòng)。在安全柜頂端的背面和一個(gè)側(cè)面水平加載1078N (110kg)的外力(加載區(qū)域不小于250mm250mm，且均勻受力)。用千分尺測(cè)量安全柜頂部正面和另一側(cè)面邊緣的偏移(見圖A-14和圖A-15)。安全柜頂部正面和側(cè)面邊緣向前移動(dòng)的距離應(yīng)小于0.2cm。A.8.5 工作臺(tái)面抗變形試驗(yàn)測(cè)量工作臺(tái)面正面邊緣中心點(diǎn)到地板的距離。然后將一個(gè)面積為25cmX25cm、質(zhì)量為225.4N(23kg)的測(cè)試負(fù)載均勻地

32、施加于被測(cè)生物安全柜臺(tái)面中央，在載重條件下測(cè)量安全柜臺(tái)面前部邊緣中心至地面的距離(見圖A-16)。負(fù)載及空載條件下安全柜臺(tái)面前部邊緣中心至地板的變化距離應(yīng)小于5mm。A.8.6抗傾斜試驗(yàn)(級(jí)安全柜試驗(yàn)之前應(yīng)將前面板卸下)在安全柜前前窗操作口前沿的中心加載1078N(110kg)的壓力，測(cè)量安全柜后底部與地面的距離(見圖A-17)。安全柜背面的底部離開地板的距離應(yīng)小于0.20cm。圖A-17前窗負(fù)載抗前傾試驗(yàn)A. 8.7 工作臺(tái)面水平性測(cè)試 (級(jí)安全柜試驗(yàn)之前應(yīng)將前面板卸下)將安全柜的前后支架調(diào)齊并固定。以10cm間隔等分安全柜工作臺(tái)面，用水平儀在等分格點(diǎn)測(cè)量，任意位點(diǎn)均應(yīng)為水平。A.9 下送氣

33、流速度A.9.1 目的測(cè)量安全柜內(nèi)操作區(qū)下送氣流氣流速度。級(jí)、級(jí)生物安全柜操作區(qū)為亂流，不進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。測(cè)試時(shí)風(fēng)機(jī)和安全柜前開口高度均應(yīng)處于生產(chǎn)商設(shè)定的狀態(tài)。A.9.2 裝置熱風(fēng)速儀，精確度為指示值土0.015ms或土3。使用前按照說明進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。支架(如環(huán)形支架和夾具)，可準(zhǔn)確定位氣流測(cè)量頭，并且不影響氣流模式。A.9.3 方法A.9.3.1 下送氣流均衡的安全柜測(cè)量通過安全柜操作口上邊沿上方10cm處水平面上的氣流速度，位置設(shè)定方法：將安全柜內(nèi)非運(yùn)行所必需的可卸設(shè)備(可選組件)拆除后，在距離內(nèi)側(cè)壁板及觀察窗15cm圍成的平面矩形區(qū)域內(nèi)，測(cè)量點(diǎn)按行、列均為15cm的網(wǎng)格布置。若去除測(cè)量邊界

34、后凈尺寸不等于15的整數(shù)倍，允許修正測(cè)量點(diǎn)距離，但每列至少測(cè)量3點(diǎn)，每行至少測(cè)量了點(diǎn)(見圖A-18)。將熱風(fēng)速儀測(cè)量頭固定在獨(dú)立式支架上，要求定位準(zhǔn)確，并且不擾亂氣流模式。報(bào)告每一個(gè)格點(diǎn)的測(cè)定值以及所有測(cè)定值的平均數(shù)。以平均數(shù)為依據(jù)確定額定風(fēng)速。測(cè)定的額定風(fēng)速應(yīng)符合制造商指定的結(jié)果0.025m/s，單個(gè)讀數(shù)的變化不得超出平均速度的20或上0.08m/s(取較大一種)。圖A-18下降氣流流速測(cè)量試驗(yàn)A.9.3.2下送氣流有區(qū)域差異的安全柜在距離安全柜操作口上邊沿上方10cm處水平面(測(cè)試高度)上，分區(qū)測(cè)量工作空間多個(gè)位點(diǎn)的氣流速度。使用說明書中應(yīng)標(biāo)明測(cè)量區(qū)域的位置、每個(gè)區(qū)域內(nèi)測(cè)定點(diǎn)的數(shù)目以及位置

35、。在測(cè)定額定風(fēng)速以前，應(yīng)將非運(yùn)行所必需的可卸設(shè)備(可選組件)拆除。報(bào)告每個(gè)區(qū)域中的每個(gè)測(cè)定值以及該區(qū)域的平均值。按照安全柜使用說明，依據(jù)上述資料確定額定風(fēng)速。測(cè)定的額定風(fēng)速應(yīng)符合制造商指定的結(jié)果0.025m/s，單個(gè)讀數(shù)的變化不得超出相應(yīng)區(qū)域平均速度的20或0.08m/s(取較大一種)。A.10 操作口向內(nèi)氣流速度測(cè)試A.10.1 目的測(cè)量操作口向內(nèi)氣流的速度，以及排風(fēng)速度。A.10.2 儀器直讀式向內(nèi)氣流測(cè)量?jī)x(DIM)，精確度為測(cè)定值3或0.002m。s。熱風(fēng)速儀，精確度為測(cè)定速度0.015ms或3(取較大的一個(gè))。風(fēng)速計(jì)探針夾具，可將風(fēng)速計(jì)探針精確定位在測(cè)量點(diǎn)并且不影響氣流模式，如環(huán)狀?yuàn)A

36、和鉗夾都可以使用。A.10.3 測(cè)試方法A.10.3.1 風(fēng)量計(jì)前窗流量測(cè)量法用密封條帶將風(fēng)量計(jì)的捕獲罩密封在微生物安全柜的前窗操作口中心。捕獲罩兩邊留有開口區(qū)域時(shí)也要密封。運(yùn)行安全柜，讀取風(fēng)量計(jì)至少5次，得到相應(yīng)的氣體流量測(cè)量值，計(jì)算平均值，得到流入氣流的平均流量。應(yīng)注意，不要影響氣流通過風(fēng)量計(jì)入口。流入氣流的平均流量(m3/s)除以前窗操作口面積(m2)，為計(jì)算的流入氣流平均流速(m/s)。流入氣流的平均流量(m3/s)除以工作臺(tái)面寬度(m)得出工作臺(tái)面每單位寬度的流入量(m2/s)。測(cè)試報(bào)告應(yīng)包括各次的實(shí)測(cè)流量、計(jì)算的平均流量、前窗操作口尺寸和面積、平均流速、工作臺(tái)面寬度、每米寬工作臺(tái)面

37、的流入量和所使用的測(cè)量方法。A.10.3.2 風(fēng)速計(jì)測(cè)量法這類方法由廠商提供并驗(yàn)證，需經(jīng)測(cè)試機(jī)構(gòu)審核。廠商的驗(yàn)證程序包括不少于10個(gè)重復(fù)測(cè)試的結(jié)果。測(cè)試機(jī)構(gòu)的認(rèn)可在對(duì)這些數(shù)據(jù)審查以及成功再現(xiàn)測(cè)試結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)行。（1）排氣流速測(cè)量法用熱式風(fēng)速計(jì)多點(diǎn)測(cè)量穿過排氣過濾器面的氣流流速，測(cè)量點(diǎn)為不大于100mm100mm的格柵點(diǎn)，邊界點(diǎn)距過濾器邊緣約100mm，測(cè)量面與過濾器面的距離約100mm（見圖A-19）。圖A-19排氣流速測(cè)量試驗(yàn)排氣過濾器或排氣口的有效開口面積應(yīng)由廠商確定和提供，并經(jīng)測(cè)試機(jī)構(gòu)確認(rèn)。對(duì)于安全柜的排氣過濾器不易拆卸、排氣口不均勻，則應(yīng)按測(cè)試機(jī)構(gòu)核準(zhǔn)的方法進(jìn)行檢測(cè)。計(jì)算各測(cè)點(diǎn)排氣流

38、速平均值即平均排氣度率(m/s)，平均排氣度率乘以排氣面積(m2)，得到排氣流量(m3/s)。排氣流量(m3/s)除以前窗操作口面積(m2)，得到平均流入氣流流速(m/s)。測(cè)試報(bào)告應(yīng)包括各測(cè)量點(diǎn)實(shí)測(cè)排氣流速、平均排氣流速、排氣口尺寸和面積、排氣流量、前窗操作口尺寸和面積、流入氣流流速和所用的測(cè)定方法。（2）前窗操作口流入氣流流速用風(fēng)速計(jì)在前窗操作口平面的兩排點(diǎn)測(cè)量氣流流速，第一排在前窗操作口上沿下約25開口高度位置；第二排在前窗操作口上沿下約75開口高度位置(見圖A-20)。圖A-20流入氣流流速測(cè)量試驗(yàn)測(cè)量點(diǎn)間隔100mm，距前窗操作口的側(cè)邊不少于100mm，用所有測(cè)量值的平均值表示流入氣

39、流流速。測(cè)試報(bào)告包括各測(cè)點(diǎn)流入氣流流速實(shí)測(cè)值、平均流入流速以及測(cè)定所用的方法。（3）B2型安全柜流入氣流流速的測(cè)定打開安全柜垂直下送氣流吹風(fēng)機(jī)和排氣系統(tǒng)吹風(fēng)機(jī)。將窗框（觀察窗）按廠商建議的操作高度設(shè)定。測(cè)定和計(jì)算排氣體積?？砂凑諟y(cè)試機(jī)構(gòu)驗(yàn)證的方法，或氣流流速測(cè)定的國(guó)標(biāo)。在下降氣流擴(kuò)散器下方150mm水平面，起始點(diǎn)距各側(cè)壁50mm，對(duì)大約100mm100mm柵格點(diǎn)測(cè)定供給氣流流速，氣流測(cè)定探針應(yīng)牢固地夾持在一獨(dú)立夾具（環(huán)夾或夾鉗）上，此夾具可精確的定位，且不影響氣流模式（見圖A-21）。將氣流流速測(cè)量值平均，并且乘以測(cè)定速率的平面面積(m2)，得出過濾空氣供給的總數(shù)(m3/s)。圖A-21 B2

40、型安全柜經(jīng)過濾的供氣量測(cè)量試驗(yàn)將供給空氣的體積速率(m3/s)從總排氣體積速率中減去，此差值表示所計(jì)算的流入體積速率(m3/s)。用開口的面積(m2)除計(jì)算所得的流入空氣的體積速率，得平均流入速率(m/s)。報(bào)告資料應(yīng)包括各個(gè)排氣流速實(shí)測(cè)值、計(jì)算出的平均排氣流速、排氣輸送管面積、計(jì)算出的排氣體積、各個(gè)供氣流速實(shí)測(cè)值、平均供氣流速、有效供氣面積、計(jì)算出的供氣體積、工作開口面積算出的流入空氣體積、計(jì)算出的開口平均流入速率，以及測(cè)定所用的方法。A.10.3.3 級(jí)安全柜手套連接口氣流流速測(cè)量開放安全柜的一個(gè)手套連接口，用熱式風(fēng)速計(jì)在連接口中心測(cè)量氣流流速，至少測(cè)量1min。在另一連接口進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。

41、A.10.4 合格標(biāo)準(zhǔn)A.10.4.1 級(jí)和A1型生物安全柜操作口向內(nèi)氣流速度應(yīng)大于0.4m/s。A.10.4.2 B1、B2和A2型生物安全柜操作口向內(nèi)氣流速度應(yīng)大于0.5m/s。A.10.4.3 級(jí)生物安全柜當(dāng)一只手套脫落時(shí)，開口處的向內(nèi)氣流速度應(yīng)大于0.7m/s。A.11煙霧流型測(cè)試A.11.1 目的通過目視觀察煙霧的流動(dòng)狀態(tài)，檢驗(yàn)安全柜內(nèi)氣流模式。A.11.2 儀器煙霧發(fā)生裝置及煙霧劑，提供可視煙霧。A.11.3 實(shí)驗(yàn)方法測(cè)試前使生物安全柜以正常狀態(tài)運(yùn)行，前窗開啟高度為生產(chǎn)商規(guī)定的最大值。A.11.3.1 下降氣流模式測(cè)試煙霧沿著工作表面的中心線，在前窗操作口頂端以上100mm的高度，

42、從安全柜的一端到另一端。A.11.3.2 觀察屏保留測(cè)試煙在觀察屏后25mm、前窗操作口頂端以上150mm高度從安全柜的一端到另一端。A.11.3.3 前窗操作口邊緣測(cè)試煙在安全柜外大約38mm處沿著整個(gè)前窗操作口的周界經(jīng)過，特別應(yīng)注意角落和垂直邊緣。A.11.3.4上下滑動(dòng)窗密閉性測(cè)試煙在滑動(dòng)窗內(nèi)從距安全柜側(cè)壁50mm處沿工作區(qū)上沿經(jīng)過。A.12排水槽滲漏測(cè)試A.12.1 目的確定工作臺(tái)面下方排水槽的防滲漏性能。A.12.2 方法向排水槽注入4L的水并保持1h，1h后目視檢查是否有明顯的漏水現(xiàn)象。A.12.3 合格標(biāo)準(zhǔn)排水槽應(yīng)能容納4L水，并在盛放1h后沒有明顯的漏水現(xiàn)象。A.13電機(jī)風(fēng)機(jī)性

43、能A.13.1 目的該試驗(yàn)用于證實(shí)電機(jī)風(fēng)機(jī)可以在符合7.14的靜態(tài)壓力要求下正常運(yùn)行。A.13.2 裝置熱風(fēng)速儀，精確度為測(cè)定速度0.015m/s或3(取較大的個(gè))。使用前按照說明進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。套管。壓力計(jì)，精確度為檢測(cè)值2。A.13.3 方法及合格標(biāo)準(zhǔn)將安全柜設(shè)定在額定風(fēng)速0.015m/s狀態(tài)下運(yùn)行。測(cè)量總的送風(fēng)流量(m3/s)，安全柜的送風(fēng)體積按A.10的方法確定。生產(chǎn)廠家應(yīng)在柜上安裝正壓測(cè)量接頭和負(fù)壓測(cè)量接頭。正壓測(cè)量接頭安裝在下送風(fēng)HEPA濾器上方，但不可正對(duì)送風(fēng)機(jī)出口。負(fù)壓測(cè)量接頭安裝在送風(fēng)機(jī)吸風(fēng)口前，距離吸風(fēng)口至少1.5倍其直徑的位置。將壓力計(jì)與壓力測(cè)量接頭相連，并記錄測(cè)得的初始正

44、壓和負(fù)壓值。通過減小安全柜下送氣流（即堵住部分工級(jí)和A1、B1、A2型安全柜的前格柵或B2和級(jí)安全柜的送風(fēng)入口)，使安全柜負(fù)壓增幅達(dá)到初始正壓值的50左右。測(cè)量安全柜風(fēng)機(jī)在限制運(yùn)行時(shí)的送風(fēng)總流量(m3/s)（見A.10）。合格的安全柜在不控制風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)情況下，總氣流流量(m3/s)的減小不應(yīng)超過10。A.14 壓差A(yù).14.1概述檢測(cè)各種類型的生物安全柜柜體內(nèi)外壓力差是否符合性能要求。A.14.2 裝置壓力計(jì)2個(gè)，精確度為檢測(cè)值2。A.14.3 方法及合格條件將一個(gè)壓力計(jì)置于安全柜操作臺(tái)面中央，另一個(gè)置于室內(nèi)。將安全柜設(shè)定在額定風(fēng)速0.015m/s下運(yùn)行。待安全柜運(yùn)行狀態(tài)穩(wěn)定，測(cè)量柜內(nèi)壓力值。同

45、時(shí)記錄室內(nèi)壓力，計(jì)算兩者之差。級(jí)、級(jí)和級(jí)生物安全柜柜體的操作區(qū)相對(duì)于實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)為負(fù)壓。級(jí)生物安全柜柜體內(nèi)與環(huán)境的壓差應(yīng)大于-127Pa。A.15電氣安全測(cè)試A.15.1概述電氣安全應(yīng)符合GB4793.1-1995的標(biāo)準(zhǔn)。A.15.2裝置萬用表。A.15.3方法及合格標(biāo)準(zhǔn)接觸電流。按GB4793.1-1995接觸電流和保護(hù)導(dǎo)體電流的測(cè)量方法進(jìn)行試驗(yàn)，可觸及表面的泄漏電流應(yīng)小于50mA。接地電阻。被測(cè)生物安全柜所有的功能開關(guān)均置于“斷”位，用萬用表測(cè)量電源插頭“地”插銷與可觸及件之間的電阻，可觸及金屬表面與電源插頭“地”插銷間的電阻值應(yīng)小于0.15。耐電壓。被測(cè)生物安全柜電源輸入端各極插銷與箱體接

46、地端之間應(yīng)能承受50Hz正弦電壓1500V，有效值工頻電壓持續(xù)1min，應(yīng)無擊穿和閃絡(luò)現(xiàn)象。生物安全柜 現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試D.1現(xiàn)場(chǎng)認(rèn)證目的和頻率為確保安全柜符合規(guī)定的運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)，每臺(tái)安全柜初次安裝時(shí)都應(yīng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試，并且此后每年應(yīng)進(jìn)行至少一次。此外，更換HEPA過濾器、內(nèi)部組件保養(yǎng)維修以及重新安放后，都應(yīng)進(jìn)行重新認(rèn)證。進(jìn)行特殊危害性工作時(shí)，應(yīng)加大安全柜再認(rèn)證的頻度。符合現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)的安全柜應(yīng)粘貼性能良好的標(biāo)志。D.2物理防護(hù)(即個(gè)人或環(huán)境保護(hù))和樣品保護(hù)的相關(guān)測(cè)試現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)進(jìn)行下列物理測(cè)試：下送氣流速度測(cè)試；操作口向內(nèi)氣流速度測(cè)試；煙霧流型測(cè)試；HEPA過濾器滲漏測(cè)試；安全柜完整性測(cè)試(僅針對(duì)工級(jí)和Al型安

47、全柜)；現(xiàn)場(chǎng)安裝評(píng)價(jià)測(cè)試(包括報(bào)警功能、風(fēng)機(jī)互鎖功能、排風(fēng)系統(tǒng)性能測(cè)試)D.3人員舒適性和安全性的相關(guān)測(cè)試進(jìn)行過微生物操作的生物安全柜，在修理或更換位于污染區(qū)的部件之前，或在安全柜重新安放之前，以及重新進(jìn)行認(rèn)證以前，均應(yīng)先凈化除污。進(jìn)行過毒性化學(xué)物質(zhì)或放射性物質(zhì)操作的生物安全柜，在清除化學(xué)污染時(shí)應(yīng)穿著防護(hù)服并采用安全操作程序。下列測(cè)試關(guān)系操作人員的舒適和安全性，這些測(cè)試在用戶要求時(shí)進(jìn)行，或由認(rèn)證提供機(jī)構(gòu)決定：照度測(cè)試；振動(dòng)測(cè)試；噪聲水平測(cè)試；漏電、接地電阻和極性測(cè)試。D.4生物學(xué)檢測(cè)驗(yàn)證新安裝或更換高效空氣粒子過濾器后，必須進(jìn)行生物學(xué)檢測(cè)驗(yàn)證。如果實(shí)驗(yàn)室工作有分工，那么從事細(xì)菌、真菌和寄生蟲工

48、作的，用黏質(zhì)沙雷菌進(jìn)行生物學(xué)檢測(cè)驗(yàn)證；從事病毒工作的，應(yīng)用恥垢分枝桿菌噬菌體進(jìn)行生物學(xué)檢測(cè)驗(yàn)證。生物學(xué)檢測(cè)驗(yàn)證包括以下三方面：人員保護(hù)試驗(yàn)；受試樣品保護(hù)試驗(yàn)；受試樣品交叉污染保護(hù)試驗(yàn)。D.5現(xiàn)場(chǎng)安裝評(píng)估測(cè)試D.5.1目的驗(yàn)證生物安全柜在實(shí)驗(yàn)室中的安裝是否正確，能否達(dá)到正常工：作時(shí)的性能要求。按生物安全柜操作手冊(cè)進(jìn)行。D.5.2測(cè)試內(nèi)容D.5.2.1報(bào)警功能（1）氣流報(bào)警器(建筑物自動(dòng)化系統(tǒng)除外)使用報(bào)警器 監(jiān)測(cè)氣流狀況時(shí)，每一次安全柜認(rèn)證時(shí)，都要對(duì)報(bào)警器性能進(jìn)行驗(yàn)證。按照操作手冊(cè)的步驟進(jìn)行。安全柜設(shè)定于合適的氣流范圍內(nèi)，則當(dāng)排風(fēng)量減少20%時(shí)，要求聲光警報(bào)器應(yīng)能在15s內(nèi)報(bào)警指示。（2）觀察窗

49、報(bào)警器 將觀察窗提升到生產(chǎn)商推薦高度上方2.5cm處。檢測(cè)是否有聲音報(bào)警信號(hào)。D.5.2.2風(fēng)機(jī)互鎖功能B2型安全柜使用風(fēng)機(jī)互鎖： 在驗(yàn)證報(bào)警器時(shí)進(jìn)行互鎖測(cè)試； 一旦安全柜設(shè)定于合適的氣流范圍內(nèi)，減少20排風(fēng)量，驗(yàn)證聲光警報(bào)器能否在15s內(nèi)報(bào)警。在報(bào)警器被激活的同時(shí)，安全柜內(nèi)置風(fēng)機(jī)應(yīng)互鎖關(guān)閉。D.5.2.3排風(fēng)罩性能使用可視煙源檢驗(yàn)排風(fēng)罩連接間隙的負(fù)壓性。煙霧一旦進(jìn)入排風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)不能逸出進(jìn)入房間。對(duì)于硬管連接式的排風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)測(cè)量位于柜體和排風(fēng)管風(fēng)閥之間位置的靜壓力。D.6現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試記錄附錄F列出了現(xiàn)場(chǎng)安裝后的檢測(cè)項(xiàng)目，測(cè)試指標(biāo)均合格的生物安全柜的性能要求，除非使用者另有指定，應(yīng)在生物安全柜正面易

50、于看到的部位張貼下列信息：認(rèn)證測(cè)試日期；重新認(rèn)證期限（）之前；測(cè)試項(xiàng)目及結(jié)果；認(rèn)證測(cè)試機(jī)構(gòu)的名稱、地址、電話號(hào)碼；檢測(cè)者簽名。附錄F 生物安全柜 檢測(cè)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目表格序號(hào)檢驗(yàn)項(xiàng)目試驗(yàn)方法型式檢驗(yàn)出廠檢驗(yàn)安裝測(cè)試l外觀檢驗(yàn)5.1.12箱體檢漏附錄A.13排風(fēng)高效過濾器檢漏附錄A.24送風(fēng)高效過濾器檢漏附錄A.25噪聲附錄A.36照度附錄A.47振動(dòng)幅值附錄A.58溫升附錄A.69人員安全性附錄A.710受試樣本安全性附錄A.711交叉污染附錄A.712抗翻倒附錄A.813抗變形附錄A.814工作臺(tái)面抗偏移附錄A.815工作臺(tái)面水平性附錄A.816下送氣流速度附錄A.917操作口向內(nèi)氣流速度附錄A

51、.1018煙霧流型附錄A.1119排水槽滲漏性附錄A.1220電機(jī)風(fēng)機(jī)性能附錄A.1321壓差附錄A.1422接觸電流附錄A.1523接地電阻附錄A.1524耐電壓附錄A.15注：表中有“”者表示在該檢驗(yàn)中應(yīng)檢驗(yàn)的項(xiàng)目E.14 氨濃度的檢測(cè)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了公共場(chǎng)所空氣中氨濃度的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于公共場(chǎng)所空氣中氨濃度的測(cè)定，也適用于居住區(qū)大氣和室內(nèi)空氣中氨濃度的測(cè)定。第一法 靛酚藍(lán)分光光度法2原理空氣中氨吸收在稀硫酸中，在亞硝基鐵氰化鈉及次氯酸鈉存在下，與水楊酸生成藍(lán)綠色的靛酚藍(lán)染料，根據(jù)著色深淺，比色定量。3試劑和材料本法所用的試劑均為分析純，水為無氨蒸餾水制備方法見附錄A。3.1吸收液c(H2SO4)=0.005： 量取2.8mL濃硫酸加入水中，并稀釋至1L。臨用時(shí)再稀釋10倍。3.2水楊酸溶液(50g/L)：稱取10.0 g水楊酸C6H4(OH)COOH和10g檸檬酸鈉(Na3C6O72H2O加水約50mL，再加55 mL氫氧化鈉溶液c(NaOH)=2m