DB37T 3322-2018 蔬菜中甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法.doc

ICS67.050X04DB37山東省地方標準DB 37/T 33222018蔬菜中甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法2018 - 06 - 12發(fā)布2018 - 07 - 12實施山東省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布DB37/T 33222018前言本標準按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由山東省農(nóng)業(yè)廳提出。本標準由山東省農(nóng)業(yè)標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：山東省農(nóng)業(yè)環(huán)境保護和農(nóng)村能源總站。本標準主要起草人：吳成、王蕾、趙志強、任海雷。11蔬菜中甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1 范圍本標準規(guī)定了菠菜、豇豆、番茄、甘藍、黃瓜和韭菜中甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物(參見附錄A)殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本標準適用于菠菜、豇豆、番茄、甘藍、黃瓜和韭菜中甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定，其它蔬菜可參照執(zhí)行。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 2763 食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 原理試樣用乙腈勻漿提取，鹽析離心后，取上清液，過濾后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測，外標法定量。4 試劑和材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為色譜純，水為符合GB/T 6682中規(guī)定的一級水。4.1 試劑a) 乙腈(CH3CN，75-05-8)。b) 甲醇(CH3OH，67-56-1)。c) 甲酸(CH2O2，64-18-6)。d) 醋酸銨(C2H7NO2，631-61-8)。e) 氯化鈉(NaCl，7647-14-5)，分析純，140 烘烤4 h。4.2 溶液配制0.1 %甲酸+5 mmol/L醋酸銨水溶液：準確移取1 mL甲酸和稱取0.385 g醋酸銨于1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，現(xiàn)配現(xiàn)用。4.3 標準品7種農(nóng)藥及代謝物標準品：純度95%，標準品信息參照附錄A。4.4 標準溶液配制4.4.1 標準儲備溶液分別準確稱取適量（精確至0.1 mg）農(nóng)藥及代謝物標準品于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成100 mg/L的標準儲備溶液(或購買有證標準儲備溶液)，0 4 保存，保存期為6個月。4.4.2 中間標準溶液準確吸取適量的標準儲備溶液，用甲醇稀釋配制成10 mg/L的7種農(nóng)藥及代謝物中間標準溶液，0 4 保存，保存期為1個月。4.4.3 混合標準工作溶液準確吸取適量的中間標準溶液，用甲醇稀釋配制成所需濃度的混合標準工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。4.5 材料微孔過濾膜：有機系，0.22 m。5 儀器和設備a) 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)；b) 分析天平：感量0.0001 g和0.01 g；c) 組織搗碎機；d) 旋渦混合器；e) 均質(zhì)器：轉(zhuǎn)速不低于15000 r/min； f) 離心機：轉(zhuǎn)速不低于5000 r/min；6 試樣制備蔬菜樣品取樣部位按照GB 2763附錄A執(zhí)行，將樣品切碎、混勻、均一化，制成勻漿，制備好的試樣均分成兩份，裝入潔凈的盛樣容器內(nèi)，密封并標明標記。應將試樣于-18 冷凍保存。7 分析步驟7.1 提取稱取15 g試樣（精確至0.01 g）于100 mL離心管中，加入30 mL乙腈，用均質(zhì)器在12000 r/min勻漿提取2 min，加入 6 g氯化鈉，再勻漿提取1 min，3500 r/min離心5 min，取上清液約2 mL，用0.22 m濾膜過濾，待測。7.2 測定7.2.1 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜參考條件a) 色譜柱：Shim-pack XR-ODS色譜柱，50 mm 2.0 mm（i.d.），1.6 m，或相當者；b) 流動相：A為0.1 %甲酸+5 mmol/L醋酸銨水溶液按4.2配制的溶液，B為甲醇，梯度洗脫程序參照表1，流速：0.35 mL/min；c) 柱溫：40 ；d) 進樣體積：10.0 L；e) 掃描方式：正/負離子模式；f) 檢測方式：多反應監(jiān)測(MRM)，多反應監(jiān)測條件參照附錄B；g) 加熱塊溫度：400 ；h) 脫溶劑管(DL)溫度：250 ；i) 干燥氣（N2）流速：15.0 L/min，純度99.999 %；j) 霧化氣（N2）流速：3.0 L/min，純度99.999 %；k) 電噴霧正離子源(ESI+)接口電壓：4.5 kV，電噴霧負離子源(ESI-)接口電壓：-3.5 kV；l) 檢測器電壓：1.74 kV。表1 梯度洗脫程序時間/minA/%B/%0.590102.050505.050509.059511.559513.09010注1： 非商業(yè)性說明：以上質(zhì)譜條件是在SHIMADZULCMS-8040質(zhì)譜儀上完成的，列出試驗用儀器型號僅是為了提供參考，并不涉及商業(yè)目的，鼓勵標準使用者嘗試采用不同廠家或型號的儀器。7.2.2 定性測定 進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子豐度比與標準樣品的離子豐度比進行比較，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在該農(nóng)藥及代謝物。如果不能確證，應重新進樣，以掃描方式（有足夠靈敏度）或采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來確證。表2 定性時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度50%20%至50%10%至20%10%允許相對偏差20%25%30%50%7.2.3 定量測定 本方法采用外標法單定量離子對定量測定。為減少基質(zhì)的影響，定量用標準溶液應采用基質(zhì)混合標準工作溶液。標準溶液濃度應與待測物濃度相近。在儀器最佳工作條件下，對基質(zhì)混合標準工作溶液進樣，繪制標準工作曲線，用標準工作曲線對樣品進行定量，樣品溶液中待測物響應值均應在儀器測定的線性范圍。本方法的甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物標準物質(zhì)多反應監(jiān)測色譜圖參照附錄A中圖A.1，質(zhì)譜圖參照附錄C。7.3 空白試驗 除不稱取試樣外，均按上述步驟進行。7.4 平行試驗 按以上步驟對同一試樣進行平行測定。8 結(jié)果計算和表述 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定結(jié)果可由計算機按外標法自動計算，也可按式(1)計算：(1)式中：質(zhì)量分數(shù)，指試樣中各農(nóng)藥及代謝物殘留量，單位為毫克每千克（mg/kg）；r標準溶液中農(nóng)藥及代謝物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；A樣品溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；AS農(nóng)藥及代謝物標準溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；V1提取溶劑總體積，單位為毫升（mL）；m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；V2樣品溶液進樣體積，單位為微升（L）；V3標準溶液進樣體積，單位為微升（L）；注1： 計算結(jié)果應扣除空白值，計算結(jié)果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術平均值表示，保留兩位有效數(shù)字，含量超過1mg/kg時表示到三位有效數(shù)字。9 精密度a) 在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），按照附錄E。b) 在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），按照附錄F。10 定量限和回收率10.1 定量限 本方法的定量限(LOQ)參照附錄A。10.2 回收率 當添加水平為LOQ、 2LOQ、 20LOQ時，添加回收率參照附錄D。AA附錄A （資料性附錄）甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間、定量限和標準物質(zhì)色譜圖甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間和定量限，參照表A.1。標準物質(zhì)色譜圖參照圖A.1。表A.1 甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號、保留時間和定量限序號中文名稱英文名稱分子式CAS號保留時間（min）定量限（mg/kg）1甲拌磷亞砜Phorate-sulfoxideC7H17O4PS22588-05-85.680.0052甲拌磷砜Phorate-sulfoneC7H17O4PS32588-04-76.080.0053氟甲腈Fipronil-desulfinylC12H4Cl2F6N4205650-65-38.330.0054氟蟲腈FipronilC12H4Cl2F6N4OS120068-37-38.450.0055氟蟲腈硫醚Fipronil-sulfideC12H4Cl2F6N4S120067-83-68.550.0056氟蟲腈砜Fipronil-sulfoneC12H4Cl2F6N4O2S120068-36-28.690.0057甲拌磷PhorateC7H17O2PS3298-02-28.910.0051-甲拌磷亞砜 2-甲拌磷砜 3-氟甲腈 4-氟蟲腈 5-氟蟲腈硫醚 6-氟蟲腈砜 7-甲拌磷圖A.1 甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物標準物質(zhì)色譜圖BB附錄B （資料性附錄）甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和碎裂電壓甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和碎裂電壓，參照表B.1。表B.1 甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測離子對、碰撞氣能量和碎裂電壓序號化合物名稱電離模式母離子子離子Q1/VCE/VQ3/V相對離子強度/%1甲拌磷亞砜+27797*-13-34-1986.8143-30-20-152甲拌磷砜+31097*-16-30-1988.8143-30-22-273氟甲腈-387351*10152314.42821131294氟蟲腈-435330*20152338.12502030255氟蟲腈硫醚-419383*10111284.92621035106氟蟲腈砜-451282*10271723.82441345107甲拌磷+26175*-18-11-2911.797-13-29-18注1： “+”和“-”分別指正、負離子模式，“*”指定量離子，“Q1”和“Q3”分別指質(zhì)譜儀碰撞池前端和后端四極桿預桿偏置電壓，“CE”指碰撞池電壓，“相對離子強度”指定性參考離子與定量離子強度比。CC附錄C （資料性附錄）甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物標準物質(zhì)多反應監(jiān)測（MRM）質(zhì)譜圖7種農(nóng)藥及代謝物標準物質(zhì)多反應監(jiān)測（MRM）質(zhì)譜圖，參照圖C.1圖C.7。圖C.1 甲拌磷質(zhì)譜圖圖C.2 甲拌磷砜質(zhì)譜圖圖C.3 甲拌磷亞砜質(zhì)譜圖圖C.4 氟蟲腈質(zhì)譜圖圖C.5 氟甲腈質(zhì)譜圖圖C.6 氟蟲腈硫醚質(zhì)譜圖圖C.7 氟蟲腈砜質(zhì)譜圖DD附錄D （資料性附錄）甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率，參照表D.1。表D.1 甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率化合物名稱添加水平（mg/kg）菠菜（%）豇豆（%）番茄（%）甘藍（%）黃瓜（%）韭菜（%）甲拌磷亞砜0.0057411274114721047810270106761100.017010377106701007510279107721140.1711098210283109801088410478110甲拌磷砜0.005781127698761107611074102781060.01831127596731047910679106681070.1811087110979107791098410480108甲拌磷0.0057010468102689672886092601120.017710169987310470947490791070.1851117910884105781018210380108氟甲腈0.00578108749068102729470106701100.0182110719275102739879104711080.18310885998910882988210882109氟蟲腈0.005761087290721087411066110701100.01821017395761037710378109681120.181107789782108791028210579109氟蟲腈硫醚0.005741067694721047210466112701060.01771077193751047010579106711070.1771087910286108791