外周血細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn).ppt

外周血細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn),浙中大 微免教研室,以紅細(xì)胞系統(tǒng)的成熟過程為例,單個(gè)細(xì)胞觀察順序,細(xì)胞大小、形狀 胞漿量多少、顏色、顆粒 細(xì)胞核形狀、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)（粗細(xì)、凝聚）、核仁數(shù)目、大小。 核、漿比例。, 外周血細(xì)胞檢驗(yàn)程序 涂片、染色與鏡檢；外周血細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn)報(bào)告方式 外周血紅細(xì)胞異常形態(tài)檢驗(yàn) 大小、形態(tài)、染色與結(jié)構(gòu)異常；點(diǎn)彩紅細(xì)胞 外周血白細(xì)胞異常形態(tài)檢驗(yàn) 中性粒細(xì)胞異常變化；異常淋巴細(xì)胞 血小板形態(tài)與寄生蟲檢驗(yàn) 血小板大小、形態(tài)、數(shù)量變化；寄生蟲,外周血細(xì)胞檢驗(yàn)程序,血涂片的制備, 器材 清潔、干燥、無塵、無油脂的載玻片。 操作 在玻片近一端1/3處，加一滴血液，握住另一張邊緣光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散開，快速、平穩(wěn)地推動(dòng)推片至載玻片的另一端。, 注意事項(xiàng) 血膜呈舌狀，頭、體、尾分明 空氣中晃動(dòng)，盡快干燥；37恒溫箱中促干 涂片的厚薄、長度與血滴大?。?020l）與血片質(zhì)量 1h內(nèi)染色或在1h內(nèi)甲醇固定 正確清潔玻片 抗凝血或毛細(xì)血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h內(nèi)涂片,血涂片染色, 原理 瑞氏（Wright）染色法（經(jīng)典染色法） 瑞氏染色法使細(xì)胞著色既有化學(xué)親和反應(yīng)，又有物理吸附作用。 瑞氏染液含美藍(lán)和伊紅兩種成分：美藍(lán)偏堿性，與細(xì)胞內(nèi)酸性物質(zhì)有親和力（胞 漿），染成蘭色； 伊紅偏酸性，與細(xì)胞內(nèi)堿性物質(zhì)有親和力（胞核），染成紫紅色。 試劑 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇 （AR） 60ml,pH6.8磷酸鹽緩沖液（pH6.46.8） 磷酸二氫鉀（KH2PO4） 0.3g 磷酸氫二鈉（Na2HPO4） 0.2g 加少量蒸餾水溶解，再加至1000ml。, 操作 加瑞氏染液數(shù)滴，固定血膜約1min。 滴加約等量的緩沖液與染液混合， 室溫下染色510min。 用流水沖去染液,待干燥后鏡檢。, 注意事項(xiàng) pH對(duì)細(xì)胞染色有影響。 未干透的血膜不能染色。 染色時(shí)間與染液濃度、染色時(shí)溫度成反比。 不能先倒掉染液，用流水沖去。 血膜上有染料顆粒沉積，可加少許甲醇。,涂抹標(biāo)本的觀察方法: 肉眼觀察 低倍鏡下觀察 油鏡下觀察,血 涂 片 鏡 檢,先在低倍鏡下瀏覽全片，了解染色好壞和 細(xì)胞分布情況，觀察有無異常細(xì)胞。 選擇涂片體尾交界處染色良好的區(qū)域，在 油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞，按其形態(tài)特征 進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。求出各類細(xì)胞所占百分?jǐn)?shù)。,血 涂 片 鏡 檢,A：染色偏酸，細(xì)胞核、顆粒結(jié)構(gòu)不清楚，紅細(xì)胞染色偏紅。 B：染色較好，細(xì)胞結(jié)構(gòu)、顆粒、胞漿清晰，紅細(xì)胞染粉紅色。 C：染色偏堿，細(xì)胞核、胞漿染色太深，細(xì)胞不易辨認(rèn)，紅細(xì)胞 染成藍(lán)色。, 注意事項(xiàng) 分類時(shí)應(yīng)從血膜體尾交界處邊緣向中央依次上下呈城垛狀迂回移動(dòng)，計(jì)數(shù)使不能重復(fù)和遺漏。 白細(xì)胞數(shù)明顯減少的血片，應(yīng)檢查多張血片。 分類見有核紅細(xì)胞，不計(jì)入100個(gè)白細(xì)胞內(nèi)，以分類100個(gè)白細(xì)胞過程中見到多少有核紅細(xì)胞報(bào)告，并注明所屬階段。,除慢淋外，破碎細(xì)胞或不能識(shí)別細(xì)胞不超過白細(xì)胞總數(shù)的2%。若破碎細(xì)胞仍能明確鑒別，如破碎的嗜酸性粒細(xì)胞，應(yīng)包括在分類計(jì)數(shù)中。在結(jié)果報(bào)告中應(yīng)對(duì)破碎細(xì)胞或不能識(shí)別細(xì)胞作適當(dāng)描述。 分類中應(yīng)注意觀察成熟紅細(xì)胞、血小板的形態(tài)、染色及分布情況，注意有無寄生蟲和其他異常所見。 白細(xì)胞形態(tài)變化較大，遇有疑問應(yīng)請(qǐng)示上級(jí)主管或主任進(jìn)行核實(shí)，以減少錯(cuò)誤。,異常紅細(xì)胞形態(tài)檢查,大小異常,正常紅細(xì)胞大小較為一致，直徑69um 在各種貧血時(shí)，紅細(xì)胞可出現(xiàn)大、小不 一。直徑10um為大紅細(xì)胞，15um為 巨紅細(xì)胞，常見于巨幼貧、肝臟疾病等， 直徑6um為小紅細(xì)胞，多見于缺鐵性貧 血等。 直徑相差1倍以上為大小不均 右圖：大紅細(xì)胞（上） 小紅細(xì)胞（下） (中央蒼白區(qū)擴(kuò)大）,形 態(tài) 異 常,RBC直徑通常2.6 um，呈小圓形，細(xì)胞中心區(qū)蛋白含量較正常多。見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥（25%以上）、自身免疫性溶貧和異常Hb?。℉BS、HBC病等）。,球形紅細(xì)胞,紅細(xì)胞呈橢圓形，橫短，長大，有時(shí)呈畸形。正常人可見到， 15%。 見于以下疾病: 1、遺傳性橢圓性RBC增多癥，高 于 2550%才有診斷價(jià)值。 2、大細(xì)胞性貧血時(shí)可達(dá)25%。 3、其他各類貧血有不同程度的 增多。,橢圓形紅細(xì)胞,比正常紅細(xì)胞扁薄，中心有少許血紅蛋白，部分可與周圍的血紅蛋白連接，邊緣部染色較中央深，故呈靶狀。主要見于以下疾病: 1、珠蛋白生成障礙性貧血 2、嚴(yán)重缺鐵性貧血 3、一些血紅蛋白病（血紅蛋白C、D、E、S?。?4、肝病、脾切除后及阻塞性黃疸等。,靶形紅細(xì)胞,細(xì)胞狹長似鐮刀，也可呈麥粒狀或冬青葉樣，主要見于遺傳性鐮形紅細(xì)胞增多癥,鐮形紅細(xì)胞,紅細(xì)胞淡染區(qū)呈裂口狀狹孔，正常4%。增多見于以下疾病 : 1、口形紅細(xì)胞增多癥 2、急性乙醇中毒,口形紅細(xì)胞,棘形紅細(xì)胞是一種帶刺狀的紅細(xì)胞，刺呈針刺狀或尖刺狀，見于以下疾?。?1、棘細(xì)胞增多癥：遺傳性血漿脂蛋白缺乏癥時(shí)，棘形紅細(xì)胞可高達(dá)70%80% 2、 嚴(yán)重肝病或制片不當(dāng),棘形紅細(xì)胞,鋸齒細(xì)胞也稱短棘形細(xì)胞。細(xì)胞突出較棘細(xì)胞短，但分布均勻。主要見于尿毒癥、微血管病性溶血性貧血、丙銅酸激酶缺乏癥、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥等。,鋸齒細(xì)胞,裂紅細(xì)胞指紅細(xì)胞碎片，包括盔形紅細(xì)胞等，多見于DIC和心源性溶血性貧血等。其他也多見于化學(xué)中毒、腎功能不全、血栓性血小板減少性紫癜等。,裂紅細(xì)胞,紅細(xì)胞中心淡染區(qū)擴(kuò)大，多見于缺鐵性貧血、地中海貧血及其他血紅蛋白病,著色過淺,染 色 異 常,中心淡染區(qū)不見，著色較深，多見于溶血性貧血及大細(xì)胞性貧血,著色過深,紅細(xì)胞經(jīng)瑞氏染色染成灰藍(lán)色、灰紅色、淡灰色，包體較正常紅細(xì)胞稍大，這是一種尚未完全成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞，多染性物質(zhì)是核糖體，隨著細(xì)胞的成熟而逐漸消失，主要見于各種增生性貧血,嗜多色性紅細(xì)胞,結(jié) 構(gòu) 異 常,用亞甲藍(lán)染色，成熟紅細(xì)胞內(nèi)有散在的深藍(lán)色嗜堿性顆粒，外周血中點(diǎn)彩紅細(xì)胞增多，表示貧血時(shí)骨髓再生旺盛或有紊亂現(xiàn)象，某些重金屬中毒時(shí)可大量出現(xiàn),嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞,成熟紅細(xì)胞內(nèi)有染成紫紅色的細(xì)線狀環(huán)，呈圓形或 8 字形，可能是殘留核膜 所致，見于惡性貧血、溶血性貧血、鉛中毒等。,卡波環(huán),成熟紅細(xì)胞中含有紫紅色圓形小體，大小不等（12m），數(shù)量不一，可能是殘留的核染色質(zhì)微粒。見于增生性貧血、脾切除后、巨幼紅細(xì)胞性貧血、惡性貧血等。（注意與血小板區(qū)別）,豪喬氏小體（染色質(zhì)小體）,有核紅細(xì)胞,正常成人血片中不會(huì)出現(xiàn)，新生兒出生1周內(nèi)可能有少量有核紅細(xì)胞出現(xiàn)。溶貧、急、慢性白血病、紅白血病、髓外造血及嚴(yán)重缺氧等常見有核紅細(xì)胞（主要是晚幼紅）。 右圖：中幼紅（上） 晚幼紅（下）,紅細(xì)胞形態(tài)異常：球形紅細(xì)胞（左上），橢圓形紅細(xì)胞（上），口形紅細(xì)胞（左下），棘形紅細(xì)胞（右下）。,紅細(xì)胞形態(tài)異常：可見紅細(xì)胞碎片，淚滴形紅細(xì)胞，鋸齒形紅 細(xì)胞，盔形紅細(xì)胞，鐮刀狀紅細(xì)胞。,紅細(xì)胞形態(tài)異常：可見靶形紅細(xì)胞，半島形紅細(xì)胞，半月形紅細(xì)胞，拖鞋形紅細(xì)胞，環(huán)形紅細(xì)胞，淚滴形紅細(xì)胞。,異常白細(xì)胞形態(tài)檢驗(yàn),白細(xì)胞 粒細(xì)胞 中性粒細(xì)胞：中性粒細(xì)胞核分葉情況 1葉3%的現(xiàn)象。,中性粒細(xì)胞的異常變化,核象變化 包括核左移和核右移，反映中性粒細(xì)胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀核細(xì)胞出現(xiàn)，它與分葉核細(xì)胞之間的比值約為1:13。,核左移,外周血液中出現(xiàn)不分葉粒細(xì)胞（指桿狀核粒細(xì)胞，正常：15%、幼稚粒細(xì)胞，正常：不出現(xiàn)） 5%。常見于感染（特別是急性化膿性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等細(xì)胞增多為極度左移，多見于類白血病反應(yīng)或白血病。,具體表現(xiàn)為： 伴白細(xì)胞總數(shù)增高的核左移稱再生性移，常見于急 性化膿性感染，如大葉性肺炎等。 白細(xì)胞總數(shù)不增加或減低的核左移稱退行性左移， 常見于嚴(yán)重感染、機(jī)體抵抗力低下時(shí)，如傷寒、感 染中毒性休克的敗血癥等。,中性粒細(xì)胞核出現(xiàn)4、5葉（正常時(shí)多為3葉，占5070%）或更多，其百分?jǐn)?shù) 3%。這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)。常見于巨幼細(xì)胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外，在疾病進(jìn)行期突然出現(xiàn)核象右移，提示預(yù)后不良。,核右移,毒性變化,嚴(yán)重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積燒傷等，中性粒細(xì)胞可出現(xiàn)形態(tài)變化。具體表現(xiàn)為： 細(xì)胞大小不均：為骨髓內(nèi)幼稚粒細(xì)胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。 中毒顆粒：細(xì)胞質(zhì)中部分或全部顆粒變粗，著色深，顆粒的分布及大小等，可能為中性顆粒成熟過程中發(fā)生變性所致,可在細(xì)胞質(zhì)或核中出現(xiàn)，常為多個(gè)，被認(rèn)為是細(xì)胞脂肪變性后未能著色所致。,空 泡,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性多呈斑塊、梨形或云霧狀，可能為核漿發(fā)育不平衡所致，為細(xì)胞嚴(yán)重毒性變的表現(xiàn),杜勒小體,胞核有各種形態(tài)的芽狀突出，臨床意義尚不明確，可能與中毒、癌轉(zhuǎn)移、嚴(yán)重的放射損傷等有關(guān)。,核棘突,退行性變,表現(xiàn)為胞體腫大，結(jié)構(gòu)模糊，邊緣不清。胞核可呈固縮、腫脹、破碎、溶解等變化，退行性變是細(xì)胞衰老死亡的表現(xiàn)。,粒細(xì)胞異常：粒細(xì)胞中毒性顆粒，中性桿狀細(xì)胞胞漿內(nèi)充滿粗大著色深染顆粒。,粒細(xì)胞異常：粒細(xì)胞中毒性顆粒，中性桿狀核細(xì)胞內(nèi)充滿粗大染色深的顆粒。,粒細(xì)胞異常：中性粒細(xì)胞胞漿空泡變性（左上），胞漿出現(xiàn)Dohle小體，核棘突和退行性變(右上、左下)，核分葉過多，核右移（右下）。,粒細(xì)胞異常：中性粒細(xì)胞核棘突和核碎裂，核固縮。,粒細(xì)胞異常：中性粒細(xì)胞巨幼變，細(xì)胞分葉過多，見8葉。,粒細(xì)胞異常：中性粒細(xì)胞巨幼變，細(xì)胞分葉過多，呈7葉狀。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-Huet)異常，細(xì)胞分葉到2葉為止，圓形或卵圓形，染色質(zhì)明顯濃縮。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細(xì)胞分兩葉，核染色質(zhì)明顯濃縮，如眼鏡狀。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細(xì)胞分葉到2葉為止，核染色質(zhì)固縮。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Peger-huet）異常，細(xì)胞分葉障礙，核染色質(zhì)固縮。,粒細(xì)胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細(xì)胞分葉困難，核染色質(zhì)固縮。,粒細(xì)胞異常：假性佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細(xì)胞分兩葉，核染色質(zhì)較疏松。,粒細(xì)胞異常：異常白細(xì)胞包涵體Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細(xì)胞胞漿中含有明顯紫紅色的巨大顆粒。,粒細(xì)胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。,粒細(xì)胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。 。,粒細(xì)胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。 。,粒細(xì)胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)含有兩個(gè)紫紅色巨大顆粒。 。,粒細(xì)胞異常：Chediak-Higashi綜合癥的淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞內(nèi)也可見紫紅色巨大顆粒。,粒細(xì)胞異常：梅-黑格林May-Hegglin異常，中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)有淡藍(lán)色的Dohle小體，伴有巨大血小板。,Alder-Reiily異常: 中性粒細(xì)胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。,Alder-Reiily異常: 淋巴細(xì)胞胞漿中有暗紫紅色顆粒。,Alder-Reiily異常: 單核細(xì)胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。,Alder-Reiily異常: 中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。,Alder-Reiily異常: 中性粒細(xì)胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。,Alder-Reiily異常: 中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。,棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body),棒狀小體（Auer Body)：原始細(xì)胞中可見數(shù)個(gè)棒狀小體， 排列紊亂。,淋巴細(xì)胞的異常變化,異形淋巴細(xì)胞：細(xì)胞大小為1025l，形態(tài)各異，呈圓形，