免疫學(xué)SOP寫(xiě)作參考手冊(cè).doc

目 錄標(biāo)本采集與管理11 血液標(biāo)本12 尿液標(biāo)本2特種蛋白測(cè)定51 ARRAY分析系統(tǒng)52 BNP蛋白分析系統(tǒng)83 免疫分析的質(zhì)量控制104 特種蛋白檢測(cè)的注意事項(xiàng)134 特種蛋白的臨床意義145 特種蛋白檢測(cè)后事務(wù)處理23自動(dòng)化電泳技術(shù)241 血清蛋白電泳242 血清免疫固定電泳283 尿蛋白電泳技術(shù)334 自動(dòng)化電泳技術(shù)的質(zhì)量控制375 蛋白電泳檢測(cè)后事務(wù)處理40T淋巴細(xì)胞Ag-NORs檢測(cè)421 Ag-NORs測(cè)定的基本原理422 測(cè)定方法423 T淋巴細(xì)胞Ag-NORs檢測(cè)的臨床意義434 注意事項(xiàng)與影響因素445 Ag-NORs檢測(cè)結(jié)果及報(bào)告時(shí)間45淋巴細(xì)胞亞群分析461 檢測(cè)原理(流式細(xì)胞術(shù))462 淋巴細(xì)胞亞群分析試劑463 淋巴細(xì)胞亞群分析操作步驟464 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)注意事項(xiàng)484 淋巴細(xì)胞亞群分析臨床意義495 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)時(shí)間及報(bào)告5050標(biāo)本采集與管理1 血液標(biāo)本1.1 采血標(biāo)本的選擇1.1.1 生物鐘周期的影響人體內(nèi)有許多系列化指標(biāo)在一日內(nèi)會(huì)出現(xiàn)周期性變化，因此采用適當(dāng)時(shí)段的血標(biāo)本對(duì)特種蛋白的檢測(cè)是至關(guān)重要的。1.1.2 飲食、饑餓飲食對(duì)生化指標(biāo)的影響取決于飲食中的成分及進(jìn)食與采血時(shí)間的間隔，如果禁食時(shí)間太長(zhǎng)又可引起部分特種蛋白指標(biāo)偏低如補(bǔ)體C3、前白蛋白及轉(zhuǎn)鐵蛋白等。1.1.3 運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)后由于出汗和呼吸加快，體液的量及分布發(fā)生改變，使部分生化指標(biāo)偏高。1.1.4 某些診斷手段的影響有些診斷和治療手段也可對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，主要包括：外科手術(shù)，輸液或輸血，穿刺或活檢等?；颊咴谕饪剖中g(shù)后可使C反應(yīng)蛋白升高及白蛋白下降。1.2.5 體位人的體位改變可引起血液中許多指標(biāo)發(fā)生變化。例如，從仰臥到直立時(shí)，由于血漿容積的重新分布，大多數(shù)生化物質(zhì)從仰臥到直立增高515%如免疫球蛋白。1.2 標(biāo)本處理1.2.1 血清和血漿由于一些技術(shù)性和生理方面的原因，血清和血漿中某些生化指標(biāo)會(huì)有所不同。一般來(lái)說(shuō)，作特種蛋白分析的血液標(biāo)本多數(shù)都采用血清標(biāo)本如作蛋白電泳分析時(shí)血漿中常因纖維蛋白原出現(xiàn)在-球蛋白區(qū)帶而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.2.2 標(biāo)本的保存標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，不能送檢的標(biāo)本應(yīng)在合適的環(huán)境下保存。一般血液標(biāo)本應(yīng)首先分離血清，分離的血清常存放在4環(huán)境中。血液標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，C-反應(yīng)蛋白測(cè)定結(jié)果偏低。一般情況下，血液標(biāo)本從采集到送檢不能超過(guò)1小時(shí)，實(shí)驗(yàn)室則應(yīng)對(duì)送檢的標(biāo)本及時(shí)檢驗(yàn)，免疫學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)在冰箱保存2天。1.3 實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收血液標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)1 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)應(yīng)清楚填寫(xiě)下列內(nèi)容：病人姓名、性別、年齡、科別、床號(hào)、病案號(hào)、住院號(hào)、申請(qǐng)序號(hào)、標(biāo)本類(lèi)型、臨床診斷或主要癥狀、采集標(biāo)本時(shí)間、實(shí)驗(yàn)室接收時(shí)間及申請(qǐng)檢查的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。2 血液標(biāo)本容器標(biāo)簽填寫(xiě)內(nèi)容應(yīng)與實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單的內(nèi)容完全一致。3 不同檢測(cè)技術(shù)需要不同的血液標(biāo)本種類(lèi)，血液標(biāo)本量不能少于最低檢測(cè)量。4 血液標(biāo)本特殊檢測(cè)應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)送檢。1.4 實(shí)驗(yàn)室拒收血液標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)1 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)填寫(xiě)的內(nèi)容需與標(biāo)本標(biāo)簽填寫(xiě)內(nèi)容完全一致，否則拒收。2 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)與標(biāo)本標(biāo)簽應(yīng)填寫(xiě)清晰，易于辨認(rèn)和識(shí)別，否則拒收。3 重度脂血、溶血的血標(biāo)本，標(biāo)本含量不足2.5ml者，拒收。4 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)和標(biāo)本容器受標(biāo)本玷污者，拒收。5 T淋巴細(xì)胞Ag-NORs檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)采用肝素抗凝，標(biāo)本凝固、標(biāo)本量不足1.0ml或溶血者，拒收。淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)采用EDTA抗凝，送檢時(shí)間每周三上午8:009:00，標(biāo)本凝固、溶血和標(biāo)本采集超過(guò)2小時(shí)者，拒收。2 尿液標(biāo)本2.1 收集尿液容器收集尿液標(biāo)本的容器多種多樣，留取標(biāo)本最基本的要求是使用清潔、干燥、方便的容器。無(wú)論采用何種容器，都必須滿足下列要求：1 送檢尿標(biāo)本容器上應(yīng)用標(biāo)簽，并注明病人的姓名、科別、床號(hào)、收集標(biāo)本的時(shí)間及檢測(cè)項(xiàng)目。2 容器只限一次性使用、清潔，不含有干擾實(shí)驗(yàn)的物質(zhì)，如做細(xì)菌培養(yǎng)應(yīng)使用無(wú)菌瓶。3 所用容器至少可容納50ml尿液，開(kāi)口應(yīng)大于4cm，底部要寬，以防止尿液濺出。4 容器應(yīng)方便運(yùn)輸，便于保存。5 對(duì)于兒科患者，特別是新生兒，可使用小型、特殊的容器。2.2 尿液標(biāo)本的種類(lèi)2.2.1 首次晨尿標(biāo)本、隨機(jī)尿標(biāo)本收集早晨起床后的第一次和隨機(jī)留取任何一個(gè)時(shí)間的尿液標(biāo)本，不受條件的限制，此類(lèi)標(biāo)本容易獲得，適合尿液常規(guī)檢查和2-微球蛋白檢測(cè)。2.2.2 12小時(shí)尿標(biāo)本即患者正常進(jìn)食，晚上8點(diǎn)排空膀胱的尿液，再收集以后12小時(shí)內(nèi)所有尿液標(biāo)本，用于微量白蛋白排泄率測(cè)定。2.3.3 24小時(shí)尿標(biāo)本病人于早晨8點(diǎn)排空膀胱的尿液，再收集以后24小時(shí)內(nèi)所有尿液標(biāo)本。此標(biāo)本用于體內(nèi)代謝產(chǎn)物的定量檢測(cè)，如各種蛋白定量檢查。2.3 收集尿標(biāo)本的注意事項(xiàng)1 臨床醫(yī)護(hù)人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)指導(dǎo)病人正確留取尿標(biāo)本的方法。2 容器應(yīng)清潔干燥。3 女性病人應(yīng)避免在月經(jīng)期留取尿標(biāo)本，防止混入陰道分泌物；男性則要避免前列腺或精液混入，必要時(shí)沖洗外陰后留取中段尿或?qū)颉? 新生兒及嬰幼兒收集尿標(biāo)本時(shí)，應(yīng)注意用0.1%新潔爾滅消毒尿道口、會(huì)陰部，然后將潔凈的標(biāo)本瓶緊貼尿道口收集尿標(biāo)本或采取特殊留尿方式。5 標(biāo)本留取后應(yīng)立即送檢，不能立即送檢的標(biāo)本應(yīng)妥善保存。6 應(yīng)根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)要求，留取不同種類(lèi)的尿液標(biāo)本及采用不同的取樣方式。每次收集尿標(biāo)本量應(yīng)不小于50ml，以備標(biāo)本的重復(fù)檢測(cè)。7 注意防腐劑使用的種類(lèi)、使用的方式，并囑咐病人注意防腐劑對(duì)自已的傷害。2.4 實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收尿液標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)1 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)應(yīng)清楚填寫(xiě)下列內(nèi)容：病人姓名、性別、年齡、科別、床號(hào)、病案號(hào)、住院號(hào)、申請(qǐng)序號(hào)、標(biāo)本類(lèi)型、臨床診斷或主要癥狀、應(yīng)用的藥物、收集標(biāo)本時(shí)間、實(shí)驗(yàn)室接收時(shí)間及申請(qǐng)檢查的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。2 尿標(biāo)本容器標(biāo)簽填寫(xiě)內(nèi)容應(yīng)與實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單的內(nèi)容是否完全一致。3 尿液標(biāo)本種類(lèi)、尿量，符合所申請(qǐng)實(shí)驗(yàn)的要求。4 尿液及時(shí)送檢并實(shí)施了相應(yīng)的正確防腐措施。5 收集尿標(biāo)本的容器、收集尿標(biāo)本的過(guò)程，符合實(shí)驗(yàn)要求。2.5 實(shí)驗(yàn)室拒收尿液標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)1 實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)單(化驗(yàn)報(bào)告單)填寫(xiě)的內(nèi)容必須與尿液標(biāo)本容器標(biāo)簽填寫(xiě)內(nèi)容完全一致，否則拒收。2 尿液特種蛋白檢查的標(biāo)本必須在留取標(biāo)本后2小時(shí)之內(nèi)送到，否則拒收。3 申請(qǐng)尿液特種蛋白排泄率檢查的標(biāo)本必須是規(guī)定時(shí)間內(nèi)全部尿液的混合液，并準(zhǔn)確記錄尿量，否則拒收。4 特種蛋白檢測(cè)的尿液量應(yīng)大于5ml，否則拒收。5 送檢的申請(qǐng)單和容器應(yīng)清潔衛(wèi)生，送檢的申請(qǐng)單和容器不能濺有標(biāo)本，否則拒收。特種蛋白測(cè)定1 ARRAY分析系統(tǒng)1.1 測(cè)定原理ARRAY 360特種蛋白分析系統(tǒng)采用激光速率散射比濁法：它是將抗原抗體的沉淀反應(yīng)與散射比濁分析技術(shù)相結(jié)合，對(duì)單位時(shí)間內(nèi)抗原與抗體的速度進(jìn)行動(dòng)力學(xué)測(cè)定。當(dāng)抗體的濃度固定于一定范圍內(nèi)時(shí)，速度峰值的高低與抗原的含量成正比，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，免疫復(fù)合物的量逐漸增多，抗原抗體結(jié)合的峰值在一定時(shí)間出現(xiàn)。不同抗原含量的樣本其速率峰值是不同的，通過(guò)微機(jī)處理可得到待測(cè)蛋白成分的含量。速率散射免疫比濁法測(cè)定最大優(yōu)點(diǎn)在于快速，檢測(cè)過(guò)程中不必去掉本底散射值的干擾，也不受本底散射值的影響，這無(wú)穎增加了準(zhǔn)確性，擴(kuò)大了免疫學(xué)檢測(cè)范圍。1.2 操作方法1.2.1 儀器的開(kāi)機(jī)1 在開(kāi)機(jī)之前，先檢查各種試劑量及廢液瓶。2 依次打開(kāi)主機(jī)、電腦、顯示器、打印機(jī)電源開(kāi)關(guān)。3 當(dāng)電腦屏幕出現(xiàn)“CONTIUNE”信息時(shí)，按F1鍵，屏幕出現(xiàn)“PLACE SYSTEM DISK 1 IN DRIVE AND PRESS THE ENTER KEY”插入第一張系統(tǒng)盤(pán)，按ENTER確認(rèn)，儀器將程序裝入系統(tǒng)內(nèi)存(大約需時(shí)1分鐘)，屏幕再次出現(xiàn)“PLACE SYSTEM DISK 2 IN DRIVE AND PRESS THE ENTER KEY”請(qǐng)取出第一張系統(tǒng)盤(pán)，插入第二張系統(tǒng)盤(pán)，按ENTER確認(rèn)，儀器將程序裝入系統(tǒng)內(nèi)存(大約需時(shí)1分鐘)，程序裝載完畢后，儀器開(kāi)始啟動(dòng)，完成初始化，打印出各種試劑定標(biāo)信息。1.2.2 儀器光路的檢查在每天進(jìn)行測(cè)試之前，應(yīng)該對(duì)儀器的左、右外光路進(jìn)行檢查，其左光路檢查方法如下：1 在“MASTER SCREENS”屏下按F4(SYSTEM SET UP)鍵，再按F2(OPTICS UPDATE)鍵，再按F1(LIFT OPTICS)鍵；屏幕出現(xiàn)“Draining optics flow cell”信息時(shí)，儀器自動(dòng)排空流動(dòng)池內(nèi)的液體；2 屏幕出現(xiàn)“Remove the flow cell and replace with the 120 cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用120校正單元替代流動(dòng)池，按ENTER確認(rèn)；3 屏幕出現(xiàn)“Reading scatter standard”信息，儀器正在讀取散射光120單元校準(zhǔn)，當(dāng)讀取完畢后，儀器屏幕出現(xiàn)“Replace the 120 cell with the black cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用黑棒替代120校正單元，按ENTER確認(rèn)，儀器正在讀取散射光；4 屏幕出現(xiàn)“Remove theblack cell with flow cell，press ENTER”信息時(shí)，用流動(dòng)池替代黑棒，按ENTER確認(rèn)。5 檢測(cè)完畢后，儀器屏幕會(huì)出現(xiàn)左光路外光路散射讀取的結(jié)果(FILTEEDRED SCATTER READING)。GAIN 1、2和3的結(jié)果必須為1203，GAIN 4的結(jié)果必須為“OVER”；ADJUST %的范圍必須為15。如果儀器ADJUST %的范圍超過(guò)15則要進(jìn)行內(nèi)光路設(shè)置(OPTICS SET)。重復(fù)此過(guò)程對(duì)右光路進(jìn)行檢查。1.2.3 常規(guī)操作測(cè)定樣本項(xiàng)目必須在儀器校準(zhǔn)通過(guò)的情況下，且每天測(cè)試前對(duì)儀器的外光路進(jìn)行檢查通過(guò)后才能進(jìn)行樣品測(cè)定，其操作過(guò)程：1 在“MASTER SCREENS”屏下按F1(Sample program)鍵；2 屏幕出現(xiàn)“SELECT to change reagent wheel，ENTER to accept”信息時(shí)，通過(guò)SELECT鍵選擇所需試劑盤(pán)號(hào)，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“Enter a single number or set(i. e. 1-5,8)，No value can exceed 40.”信息時(shí)，在CUP上輸入所測(cè)定樣本杯號(hào)(可以是單個(gè)號(hào)或一批號(hào)，但數(shù)字不超過(guò)40)，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“Enter text then press ENTER”信息時(shí)，在SAMPLE ID上輸入病人的ID號(hào)，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“Enter a single number or set(i. e. 1-5,8)，No value can exceed 9.”信息時(shí)，在PANEL輸入所測(cè)定的一批樣品項(xiàng)目的組合號(hào)，但數(shù)字不超過(guò)9(可以通過(guò)F2(select panels)鍵直接察看和選擇試驗(yàn)組合的序號(hào))，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“Enter a single number or set(i. e. 1-5,8)，No value can exceed 20.”信息時(shí)，在CHEM輸入所測(cè)定樣品項(xiàng)目的序列號(hào)，但數(shù)字不超過(guò)20，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“SELECT to change choice， then press ENTER”信息，在SEX通過(guò)ENTER選擇病人的性別，按ENTER確認(rèn)；屏幕出現(xiàn)“Enter a number 0 and 99”信息時(shí)，在AGE輸入病人的年齡，按ENTER確認(rèn)；3 通過(guò)F7(Nstd dil)選擇病人標(biāo)本的稀釋度，通過(guò)F8(Fluid agxs，pts)選擇病人標(biāo)本的種類(lèi)和是否需要抗原過(guò)量檢測(cè)，通過(guò)F3(Priority sample)選擇病人標(biāo)本的優(yōu)先權(quán)，通過(guò)F6(Program summary)察看所有病人標(biāo)本輸入測(cè)試項(xiàng)目是否正確后，按F1(Save cup) 存盤(pán)。4 檢查所有試劑的批號(hào)，試劑、各種液體的體積及各種試劑位置；確認(rèn)后按主菜單鍵，再按兩次“START”鍵進(jìn)行校準(zhǔn)，按F7鍵監(jiān)視儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況。1.2.4 儀器的標(biāo)準(zhǔn)儀器在進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)之前必須對(duì)儀器的光路進(jìn)行設(shè)定(OPTICS SET)，操作過(guò)程：1 在“MASTER SCREENS”屏下按F4(SYSTEM SET UP)鍵，再按F3(Optics set)鍵，再按F1(LEFT OPTICS)鍵；屏幕出現(xiàn)“Draining optics flow cell”信息時(shí)，儀器自動(dòng)排空流動(dòng)池內(nèi)的液體；2 屏幕出現(xiàn)“Remove the flow cell and replace with the black cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用黑棒替代流動(dòng)池，按ENTER確認(rèn)；3 屏幕出現(xiàn)“Locating baseling nulling point”信息，儀器正在設(shè)置散射基準(zhǔn)點(diǎn)，當(dāng)讀取完畢后，儀器屏幕出現(xiàn)“Replace the black cell with the 120 cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用120校正單元替代黑棒，按ENTER確認(rèn)；4 屏幕出現(xiàn)“Locating gain setting”信息，儀器正在設(shè)置Gain 1、Gain 2和Gain 3的散射，當(dāng)讀取完畢后，儀器屏幕出現(xiàn)“Replace the 120 cell with the black cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用黑棒替代120校正單元，按ENTER確認(rèn)；5 屏幕出現(xiàn)“Locating offset settings”信息，儀器正在設(shè)置Gain 4散射基準(zhǔn)，當(dāng)讀取完畢后，儀器屏幕出現(xiàn)“Replace the black cell with the 120 cell，press ENTER to continue”信息時(shí)，用120校正單元替代黑棒，按ENTER確認(rèn)；6 屏幕出現(xiàn)“Locating gain adjustment factors”信息，儀器正在調(diào)整Gain的散射因數(shù)，當(dāng)讀取完畢后，儀器屏幕出現(xiàn)“Optics set done. Replace old optics set values?”信息時(shí)，按F1確認(rèn)，按F2取消。7 屏幕出現(xiàn)“Replace the 120 cell with flow cell，press ENTER”信息時(shí)，用流動(dòng)池替代120校正單元，按ENTER確認(rèn)，光路校準(zhǔn)完畢。必須進(jìn)行儀器對(duì)試劑卡和校準(zhǔn)卡的讀取和儀器校準(zhǔn)兩方面，操作步驟：1 在“MASTER SCREENS”屏下按F2(Cal Status)鍵；2 在“Calibration Status Screen”屏出現(xiàn)“Move cursor to desired test，SELECT to change reagant，ENTER to accept”信息時(shí)，通過(guò)游標(biāo)和SELECT鍵選校正試驗(yàn)項(xiàng)目，確認(rèn)；3 按F1(Read AB cards)鍵讀取試劑卡，屏幕出現(xiàn)“Insert card in cardreader”信息時(shí)，插入試劑卡到儀器讀卡器，讀卡完畢按F1鍵確認(rèn)；4 當(dāng)所有試劑卡都讀取完畢后，按F2鍵讀取抗體卡：首先確認(rèn)校準(zhǔn)試劑的位置，然后插入抗體卡，讀取抗體卡信息，按F1鍵確認(rèn)；5 檢查所有試劑的批號(hào)，試劑、各種液體的體積及各種試劑位置；確認(rèn)后按主菜單鍵，再按兩次“START”鍵進(jìn)行校準(zhǔn)，按F7鍵監(jiān)視儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況。6 在每次對(duì)儀器定標(biāo)之前，應(yīng)仔細(xì)核對(duì)試劑卡上試劑批號(hào)與試劑的批號(hào)，校正卡上校準(zhǔn)液批號(hào)與校準(zhǔn)液的批號(hào)，使其完全一致后才能進(jìn)行校準(zhǔn)儀器，否則會(huì)因批間校準(zhǔn)液定標(biāo)濃度差異而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果的誤差。類(lèi)風(fēng)濕因子的校正試劑應(yīng)放在試劑盤(pán)的中孔。1.2 5 儀器的關(guān)機(jī)1 在“MASTER SCREENS”屏下按F4(SYSTEM SET UP)鍵，再F(Prime)鍵進(jìn)行清洗程序，根據(jù)儀器要求選擇“1、2、3或4”，再按“SELECT”鍵，最后按“PREV SCREEN”鍵進(jìn)行清洗(約需時(shí)6分鐘)，結(jié)束清洗后可關(guān)掉主機(jī)、電腦、打印機(jī)電源。1.3 ARRAY分析系統(tǒng)檢測(cè)范圍免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白輕鏈、免疫球蛋白輕鏈、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、1-酸性糖蛋白、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、類(lèi)風(fēng)濕因子、C-反應(yīng)蛋白、微量白蛋白、前白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。2 BNP蛋白分析系統(tǒng)2.1 測(cè)定原理BNP特種蛋白分析測(cè)定系統(tǒng)實(shí)質(zhì)上是透射比濁的一種改良，利用發(fā)光二極管(840nm)作為光源，檢測(cè)在前向角130240的散射光，由硅化光電二極管接收散射光信號(hào)，這種散射光的強(qiáng)度與免疫復(fù)合物濃度成正比。散射光電信號(hào)與貯存在計(jì)算機(jī)內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，然后轉(zhuǎn)換成檢測(cè)物的濃度單位。2.1.1 固定時(shí)間測(cè)定法BN 100分析儀可以通過(guò)固定時(shí)間來(lái)檢測(cè)血清特種蛋白濃度。固定時(shí)間法是利用兩個(gè)時(shí)間光散射檢測(cè)之間的差異，首先在免疫反應(yīng)混合物預(yù)溫10秒鐘后測(cè)定第一次光散射的值(t1)，然后在反應(yīng)6分鐘后測(cè)定第二次光散射的值(t2)。這兩點(diǎn)光散射強(qiáng)度的差異通過(guò)貯存在計(jì)算機(jī)內(nèi)校準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，即可得出該物質(zhì)的濃度。BN 100分析儀不需要抗原過(guò)量檢測(cè)，制造商使用了較寬的檢測(cè)范圍以保證檢測(cè)血清最大的可行性范圍。2.1.2 終點(diǎn)檢測(cè)法BN 100分析儀通過(guò)終點(diǎn)法來(lái)檢測(cè)用膠乳反應(yīng)的血清特種蛋白濃度，終點(diǎn)法是檢測(cè)預(yù)溫30分鐘后光散射的值(t1)。因?yàn)槟z乳顆粒具有較高的試劑空白值，所以測(cè)定空白值沒(méi)有必要。通過(guò)終點(diǎn)光散射強(qiáng)度與貯存在計(jì)算機(jī)內(nèi)校準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，即可得出該物質(zhì)的濃度。免疫膠乳濁度測(cè)定法為一種帶載體的免疫比濁法，其敏感度大大高于比濁法，操作也極為簡(jiǎn)便。選擇一種大小適中、均勻一致的膠乳顆粒，吸附抗體(IgG)后，當(dāng)遇到相應(yīng)抗原時(shí)，則發(fā)生凝集。單個(gè)膠乳顆粒在入射光波長(zhǎng)之內(nèi)，光線可透過(guò)。當(dāng)兩個(gè)膠乳顆粒凝集時(shí)，則使透過(guò)光減少，這種減少的程度與膠乳凝聚成正比，當(dāng)然也與抗原量成正比。2.2 操作方法2.2.1 儀器的開(kāi)機(jī)先打開(kāi)BN PROSPEC SYSTEM分析儀的電源開(kāi)關(guān)，在打開(kāi)電腦主機(jī)、顯示屏的開(kāi)關(guān)，最后打開(kāi)打印機(jī)的開(kāi)關(guān)。2.2.2 儀器的關(guān)機(jī)在主菜單下選擇STATUS鍵，在此屏下選擇EXIT鍵或在鍵盤(pán)上選shift+f12。出現(xiàn)對(duì)話框“shut down the analyzerYes：the analyzer will shut down and the viewer software will end.No：Only the viewer software will end.”關(guān)機(jī)選擇yes，分析儀進(jìn)行自動(dòng)沖洗。然后回到主屏。關(guān)掉分析儀電源，再關(guān)掉電腦主機(jī)、顯示屏。2.2.3 儀器的定標(biāo)在主菜單下選calibration，從分析列表中選則你要校正的項(xiàng)目，然后從試劑列表中選擇相應(yīng)試劑。把標(biāo)準(zhǔn)品放到相應(yīng)的位置，按mesure開(kāi)始進(jìn)行校正。因試劑的批號(hào)不同，所以每換一批試劑需重新定標(biāo)；同一批號(hào)的試劑需30天校正一次。2.2.4 質(zhì)控為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，每天測(cè)定標(biāo)本之前要進(jìn)行質(zhì)控。將質(zhì)控物放在質(zhì)控架上，裝入分析儀內(nèi)。按lab journal鍵，進(jìn)入后選擇右邊的control requests鍵。選擇所要做的質(zhì)控項(xiàng)目，按measure，開(kāi)始測(cè)定。2.2.5 標(biāo)本測(cè)量1.標(biāo)本的準(zhǔn)備將待測(cè)標(biāo)本離心，保證足夠的血清待測(cè)。將標(biāo)本編號(hào)順序放入標(biāo)本架上。2.標(biāo)本檢測(cè)前儀器的準(zhǔn)備在主菜單下按stastus鍵，檢查儀器所需液體(緩沖液、稀釋液、沖洗液)是否足夠，若儀器提示不足則需更換，更換后進(jìn)行沖洗。具體操作：在主菜單下選system，進(jìn)入此畫(huà)面后，按system liquide and prime鍵，選擇你要更換的液體，按save，儀器開(kāi)始自動(dòng)沖洗。檢查試劑是否足夠，若不夠，打開(kāi)新包裝的試劑更換，按loading鍵，連續(xù)按rengent，graphic鍵，點(diǎn)擊所要更換的試劑，然后按acess鍵，打開(kāi)儀器右蓋，把試劑放入相應(yīng)位置.關(guān)上右蓋，按close，儀器自動(dòng)識(shí)別試劑的條形碼。檢查稀釋杯和反應(yīng)杯是否足夠，把已用過(guò)的替換掉，操作步驟如下：在主菜單下選system，進(jìn)入此畫(huà)面后，按cuvettes&dilution cups鍵，進(jìn)入后按dilution cups或cuvettes，按select all，save，儀器提示打開(kāi)右蓋，更換稀釋杯或反應(yīng)杯，關(guān)上右蓋，按close鍵。3.患者信息輸入在主菜單下按lab joural，進(jìn)入此畫(huà)面后按new鍵，出現(xiàn)對(duì)話框，在sample ID處輸入標(biāo)本號(hào)，在batch input處輸入標(biāo)本個(gè)數(shù)(相同檢測(cè)項(xiàng)目)，在下面的speciman type處輸入需要測(cè)定的項(xiàng)目，選擇多個(gè)項(xiàng)目時(shí)：左手按住ctrl鍵，右手可選多個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目。輸入完畢后，在主菜單下選loading，屏幕上會(huì)出現(xiàn)標(biāo)本架的位置，然后根據(jù)標(biāo)本及標(biāo)本號(hào)分別對(duì)應(yīng)好。4.測(cè)定開(kāi)始顯示屏右上角提示測(cè)定所需時(shí)間。5 結(jié)果測(cè)定晚畢后結(jié)果出現(xiàn)在屏幕上，可通過(guò)打印機(jī)打印。2.3 BNP分析系統(tǒng)檢測(cè)范圍2-微球蛋白、超敏C-反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白E。3 免疫分析的質(zhì)量控制3.1 免疫分析前質(zhì)量控制3.1.1 標(biāo)本處理1 收到樣本后應(yīng)注意樣本是否符合項(xiàng)目要求。一般情況下，免疫學(xué)試驗(yàn)可用血清、分離膠處理的血標(biāo)本及各種體液標(biāo)本。標(biāo)本量是否足夠，標(biāo)本量不足很難完成其申請(qǐng)項(xiàng)目，尤其是用儀器進(jìn)行檢測(cè)時(shí)一般要求重新送標(biāo)本。查看標(biāo)本標(biāo)簽與申請(qǐng)單標(biāo)簽是否相符。2 標(biāo)本編號(hào)免疫學(xué)編號(hào)時(shí)根據(jù)情況系列編號(hào)，最好能做到每份樣本1個(gè)惟一編號(hào)，以免標(biāo)本放錯(cuò)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的錯(cuò)誤。3. 標(biāo)本離心用于免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的樣本一般離心為普通離心機(jī)2000rpm/min，5分鐘。離心后的標(biāo)本要求血清或血漿非常清亮，標(biāo)本完全無(wú)纖維蛋白絲，否則容易導(dǎo)致儀器檢測(cè)時(shí)塞針使檢測(cè)儀器故障或檢測(cè)結(jié)果失真。血脂標(biāo)本一般情況下影響免疫特種蛋白檢測(cè)結(jié)果。溶血標(biāo)本的爭(zhēng)議比較大，進(jìn)口試劑多數(shù)在小于10g/L的血紅蛋白量時(shí)不受影響。4 標(biāo)本的保存對(duì)于不能立即檢測(cè)的標(biāo)本，要按規(guī)定進(jìn)行保存。一般情況下，免疫學(xué)特種蛋白檢測(cè)的標(biāo)本采用冰箱保存即可。3.1.2 儀器與試劑免疫特種蛋白試驗(yàn)的好壞，很大程度上取決于儀器與試劑的質(zhì)量。因此實(shí)驗(yàn)室在購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)，最好多找?guī)讉€(gè)公司的儀器與試劑進(jìn)行比較，然后選出靈敏度和特異性都比較滿意的儀器與試劑。同時(shí)也應(yīng)注意試劑的批間差，應(yīng)該非常小而不影響檢測(cè)結(jié)果，如果采用儀器法是一步法的試劑，還應(yīng)注意HOOK效應(yīng)，應(yīng)了解試劑的線性范圍及HOOK效應(yīng)的濃度。3.1.3 實(shí)驗(yàn)環(huán)境1 環(huán)境溫度良好的環(huán)境溫度是實(shí)驗(yàn)室免疫學(xué)檢測(cè)的基礎(chǔ)，室溫一般指2228。儀器雖有自動(dòng)恒溫控制，但如果實(shí)驗(yàn)室溫度過(guò)低或過(guò)高，均會(huì)超出儀器控制范圍。因此實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持室溫恒定，最好控制在2225 。2 環(huán)境濕度儀器運(yùn)行一般要求相對(duì)濕度80%即可，但免疫學(xué)反應(yīng)的最適相對(duì)濕度為40%50%。相對(duì)濕度較低有利于實(shí)驗(yàn)設(shè)備的保護(hù)，但過(guò)分干燥的環(huán)境會(huì)造成水分的快速蒸發(fā)，增加空氣中粉塵的密度，對(duì)標(biāo)本的貯存，微量實(shí)驗(yàn)體積的控制以及一些水依賴(lài)性實(shí)驗(yàn)設(shè)備的運(yùn)轉(zhuǎn)與保養(yǎng)帶來(lái)一定的影響。3 實(shí)驗(yàn)室潔凈度免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)潔凈度要求比較高，最好能達(dá)到GMP級(jí)。如果空氣中微粒過(guò)多，易引起免疫學(xué)特種蛋白檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性。4 環(huán)境噪音噪音和高強(qiáng)度電磁波有害實(shí)驗(yàn)者身心健康，對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備的運(yùn)轉(zhuǎn)亦可能帶來(lái)一定影響，因此在實(shí)驗(yàn)室禁止使用帶高強(qiáng)度電磁波的設(shè)備。3.2 分析中質(zhì)量控制3.2.1 操作步驟在進(jìn)行標(biāo)樣分析操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，尤其應(yīng)避免個(gè)人操作之間的誤差。加樣時(shí)，應(yīng)對(duì)每個(gè)樣品杯進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)，以免放錯(cuò)樣品盤(pán)而導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果出現(xiàn)的差錯(cuò)。在起動(dòng)儀器分析之前，應(yīng)對(duì)儀器的各種試劑批號(hào)、試劑位置、試劑量進(jìn)行檢查，以免試劑批號(hào)不同，試劑位置放錯(cuò)而導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果出現(xiàn)的差錯(cuò)。3.2.2 質(zhì)量控制每天工作時(shí)，應(yīng)對(duì)每個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行質(zhì)量控制以監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)方法、檢驗(yàn)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。設(shè)立質(zhì)控靶值：為了確定靶值，新批號(hào)的質(zhì)控品應(yīng)與當(dāng)前使用的質(zhì)控品一起進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)20次質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)差，并為暫定標(biāo)準(zhǔn)差，以此作為下一個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。失控情況處理：操作者在測(cè)定質(zhì)控時(shí)，如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應(yīng)填寫(xiě)失控報(bào)告單，上交專(zhuān)業(yè)室主管(組長(zhǎng))，由專(zhuān)業(yè)室主管(組長(zhǎng))做出是否發(fā)出與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告的決定。失控信號(hào)一旦出現(xiàn)就意味著與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批標(biāo)本報(bào)告可能作廢。此時(shí)，首先要盡量查明導(dǎo)致失控的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測(cè)定結(jié)果是否可接受，對(duì)失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛?。?duì)判斷為真失控的情況，應(yīng)該在重做質(zhì)控結(jié)果在質(zhì)控范圍內(nèi)以后，對(duì)相應(yīng)的所有失控標(biāo)本患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定。如失控信號(hào)被判斷為假失控時(shí)，常規(guī)測(cè)定報(bào)告可以按原先測(cè)定結(jié)果發(fā)出，不必重做。失控原因分析：失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種因素的影響，這些因素包括操作者的失誤、試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效、儀器維護(hù)不良等等。當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘?hào)時(shí)，可以采用下列步驟去尋找原因：1.立即重新測(cè)定同一質(zhì)控品：此步主要是用以查明人為誤差，每一步都認(rèn)真仔細(xì)操作，以查明質(zhì)控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然誤差，則重測(cè)的結(jié)果應(yīng)在允許范圍內(nèi)(在控)。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則可以進(jìn)行一步操作。2.新開(kāi)一瓶質(zhì)控品，重測(cè)失控項(xiàng)目。如果新開(kāi)的質(zhì)控結(jié)果正常，那么原來(lái)那瓶質(zhì)控血清可能過(guò)期或在室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變，或者污染。如果質(zhì)控結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。3.新開(kāi)一批質(zhì)控品，重做失控項(xiàng)目。如果此批質(zhì)控結(jié)果在控，說(shuō)明前一批質(zhì)控血清可能有問(wèn)題，檢查它們的有效期和貯存環(huán)境，以查明問(wèn)題之所在。如果質(zhì)控結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。4.進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換，光路是否需要設(shè)置，比色杯是否需要清洗或更換，儀器是否需要清洗維護(hù)等。另外還要檢查試劑，此時(shí)更換試劑以查明原因。如果質(zhì)控結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。5.重新校準(zhǔn)儀器，重測(cè)失控項(xiàng)目。使用新的校準(zhǔn)液標(biāo)準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因，重新進(jìn)行質(zhì)控。如果質(zhì)控結(jié)果仍不在允許范圍，則只有請(qǐng)廠家技術(shù)支持，可能是儀器或試劑的原因。此時(shí)應(yīng)使用另一相同的儀器來(lái)進(jìn)行患者標(biāo)本的重新測(cè)定。3.2.3 實(shí)驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)實(shí)驗(yàn)報(bào)告由檢驗(yàn)人員正規(guī)書(shū)寫(xiě)在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上，不要涂改，并妥善保存；對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果異常者應(yīng)立即復(fù)查并注明。檢驗(yàn)人員在輸入檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)執(zhí)行-檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)異常結(jié)果應(yīng)重新檢測(cè)并注明；檢驗(yàn)結(jié)果經(jīng)上級(jí)檢驗(yàn)人員確認(rèn)后并打印出檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單。3.3 分析后質(zhì)量控制1 發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告所有實(shí)驗(yàn)已經(jīng)完畢，也完全符合每個(gè)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控要求。應(yīng)綜合各種數(shù)據(jù)，結(jié)合臨床病史，判斷該份報(bào)告是否可以發(fā)出，或需要復(fù)查。2 臨床反饋應(yīng)多與臨床醫(yī)師建立聯(lián)系，其結(jié)果的靈敏度與特異性是否滿足臨床需要，其結(jié)果對(duì)臨床有無(wú)指導(dǎo)意義。將反饋信息進(jìn)行總結(jié)，進(jìn)一步改進(jìn)我們的質(zhì)量。4 特種蛋白檢測(cè)的注意事項(xiàng)血漿特種蛋白的參考值范圍根據(jù)多個(gè)實(shí)驗(yàn)室選用的方法和蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品而有差異。不同年齡、性別與個(gè)體間的參考范圍亦存在著差異。4.1 年齡組的變異2-巨球蛋白、1-抗胰蛋白酶濃度在新生兒期顯著高于成人，白蛋白、纖維蛋白原、免疫球蛋白IgG與正常成人接近，其他各成分特別是免疫球蛋白IgM、IgA及補(bǔ)體C3、C4成分均有偏低。白蛋白在50歲前保持穩(wěn)定，50歲以后有下降趨勢(shì)；1-酸性糖蛋白在男30歲，女40歲后有下降趨勢(shì)；1-脂蛋白、1-抗胰蛋白酶40歲后有上升趨勢(shì)；觸珠蛋白隨年齡增加而增加；2-巨球蛋白在40歲前隨年齡增加而下降，到老年時(shí)又略有上升；轉(zhuǎn)鐵蛋白在男性40歲有隨年齡增加而逐步下降趨勢(shì)，女性則在30歲左右達(dá)高峰，以后亦逐步下降；免疫球蛋白IgA在出生前逐步上升，中年期達(dá)高峰；2-微球蛋白有隨年齡增加而逐步上升的趨勢(shì)。4.2 關(guān)于性別的差異1 男性成人略高于女性的有白蛋白、1-酸性糖蛋白、免疫球蛋白IgA等。2 女性略高于男性的有1-脂蛋白、銅藍(lán)蛋白、2-巨球蛋白。在妊娠期明顯增高的有銅藍(lán)蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。4.3 干擾因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響1 偽濁度的影響產(chǎn)生偽濁度的因素很復(fù)雜，主要是：抗血清的質(zhì)量：含有非特異的交叉反應(yīng)性抗體成份及污染和變質(zhì)等；增濁劑濃度和反應(yīng)時(shí)間等掌握不當(dāng)；樣品本身濁度及處理不當(dāng)；試劑污染和變質(zhì)；器材(包括比色杯)清潔度等。2 鉤狀效應(yīng)的影響現(xiàn)在許多儀器雖已具有檢查鉤狀效應(yīng)，一當(dāng)發(fā)現(xiàn)便可對(duì)樣品稀釋后復(fù)測(cè)的功能，但對(duì)它還應(yīng)警惕為好。當(dāng)病人癥狀與檢驗(yàn)結(jié)果明顯不符時(shí)，應(yīng)懷疑其存在。3 標(biāo)本對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響血液中脂蛋白成分的增加或乳糜會(huì)導(dǎo)致血清渾濁呈奶酪狀，常常會(huì)干擾免疫比濁試驗(yàn)，因此脂血或糜乳標(biāo)本應(yīng)重新抽血。4 特種蛋白的臨床意義4.1 血清免疫球蛋白A、G、M【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠坑捎谀挲g、性別、環(huán)境條件等影響，正常人免疫球蛋白有差異。正常健康人血清免疫球蛋白參考值為：IgA：0.693.82g/L；IgG：7.2316.85g/L；IgM：0.632.77g/L?！九R床意義】血清免疫球蛋白不正常可分成三類(lèi)：幾種不同的免疫球蛋白水平增加，可見(jiàn)于感染(慢性骨髓炎、慢性肺膿腫、慢性活動(dòng)性肝炎等)和自身免疫病(SLE、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、AIDS、淋巴肉芽腫等)。單一的免疫球蛋白水平增加，又稱(chēng)M-蛋白病。可見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、自發(fā)的冷球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病。一種或多種免疫球蛋白水平的減少，有原發(fā)性或繼發(fā)性的。前者屬于遺傳性，如性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥(Bruton)，選擇性IgM、IgA缺乏癥等。繼發(fā)性缺損與網(wǎng)狀淋巴系統(tǒng)的惡性疾病，免疫抑制性藥物，蛋白質(zhì)丟失或營(yíng)養(yǎng)不良有關(guān)。4.2 血清免疫球蛋白輕鏈【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定。【正常參考值】正常健康人血清免疫球蛋白輕鏈參考值為：輕鏈：5.9813.90g/L；輕鏈：2.806.65g/L?！九R床意義】血清免疫球蛋白輕鏈異常多見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤和輕鏈病。4.2 血清補(bǔ)體【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定。【正常參考值】正常健康人血清補(bǔ)體參考值為：補(bǔ)體C3：0.851.93g/L；補(bǔ)體C4：0.120.36g/L?！九R床意義】補(bǔ)體異常分先天性和獲得性兩類(lèi)。先天性的補(bǔ)體異常包括補(bǔ)體成分缺陷與遺傳性血管性水腫。獲得性補(bǔ)體異常有兩種，一種是補(bǔ)體含量升高，見(jiàn)于急性炎癥和組織損傷。另一種是補(bǔ)體含量減低：肝臟嚴(yán)重疾患，使補(bǔ)體合成減少；循環(huán)內(nèi)抗原-抗體復(fù)合物形成，使補(bǔ)體活化，如膜增殖性慢性腎小球腎炎、急性鏈球菌感染后腎小球腎炎、狼瘡性腎炎、分流性腎炎等。補(bǔ)體C3增高見(jiàn)于某些急性炎癥、傳染性疾病早期，腫瘤特別是肝癌以及移植排異反應(yīng)時(shí)。補(bǔ)體C3降低比增高意義更大，如SLE、冷球蛋白血癥、重癥類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝臟疾病、急性腎小球腎炎，慢性膜增殖性腎炎患者常補(bǔ)體C3持續(xù)降低。補(bǔ)體C4增高見(jiàn)于傳染病、組織損傷、急性腎炎、腫瘤特別是肝癌。補(bǔ)體C4降低見(jiàn)于SLE、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、胰腺癌晚期、急性淋巴細(xì)胞白血病、肝臟病、慢性活動(dòng)性肝炎、急性腎小球腎炎。在SLE，補(bǔ)體C4的降低早于其他補(bǔ)體成分，且較其他成分回升遲。4.3 C-反應(yīng)蛋白【標(biāo)本】靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等搜錍RP參考值為：08.0mg/L?！九R床意義】CRP是一種急性期蛋白，在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、心肌梗塞、手術(shù)創(chuàng)傷、放射損傷等時(shí)，其含量在病后數(shù)小時(shí)迅速升高，病情好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常。1 CRP對(duì)疾病的早期診斷和鑒別診斷組織的物理或化學(xué)損傷、感染、腫瘤和一系列急慢性炎癥性疾病，均有CRP明顯升高。妊娠時(shí)血清CRP也會(huì)升高。CRP連續(xù)升高比單次升高有意義，尤其對(duì)慢性炎癥患者。某些炎癥性疾病，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多肌炎、混合結(jié)締組織病和潰瘍性結(jié)腸炎等，CRP僅輕度升高或不升高，這在鑒別診斷方面有重要價(jià)值。另外，急性白血病患者死亡的常見(jiàn)原因是感染，其早期診斷很困難，因易被中性白細(xì)胞減少所掩蓋，但血清CRP濃度大于100mg/L時(shí)，可以作為白血病患者的感染指征。2.CRP對(duì)手術(shù)病人并發(fā)癥的預(yù)測(cè)各種手術(shù)后病人CRP升高，術(shù)后710天CRP水平下降。CRP不降低或再次升高，提示可能并發(fā)感染或血栓栓塞等。3.CRP對(duì)冠心病和心肌梗塞危險(xiǎn)性的預(yù)測(cè)雖然CRP是一種急性相反應(yīng)蛋白，但是現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)用超敏CRP水平監(jiān)測(cè)冠心病和心肌梗塞病人，是一個(gè)良好的預(yù)后診斷標(biāo)志物。1994年，Liuzzo首先報(bào)道了用入院前測(cè)定超敏CRP 3mg/L為區(qū)分低危病人(無(wú)急性心梗征兆，無(wú)死亡可能性)和高危病人(急需進(jìn)行血管再通/成形術(shù)的比率很高，25%的患急性心梗和10%在醫(yī)院治療過(guò)程中死亡)的最佳臨界值。4.4 類(lèi)風(fēng)濕因子【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等搜錜F參考值為：030IU/ml。【臨床意義】正常人血清中RF30IU/ml，隨年齡增長(zhǎng)而陽(yáng)性率增高，老年人陽(yáng)性率可達(dá)5%。因此在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷上，一般認(rèn)為RF只有參考價(jià)值而無(wú)特異性診斷價(jià)值。IgM-RF出現(xiàn)于6085%類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的病例，一般在得病半年后才出現(xiàn)RF陽(yáng)性，因此早期患者RF可以陰性。IgM-RF陽(yáng)性，尤其是高滴度的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人，其關(guān)節(jié)腫痛、關(guān)節(jié)活動(dòng)受限的平均人數(shù)明顯增加，預(yù)后較差，常有血管炎、類(lèi)風(fēng)濕結(jié)節(jié)等關(guān)節(jié)外病變。各種細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)感染，以及部分支原體感染的病人皆可出現(xiàn)RF陽(yáng)性。干燥綜合征者，RF陽(yáng)性率可達(dá)90100%。在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物療效評(píng)價(jià)上，RF是否陰轉(zhuǎn)或降低，被作為評(píng)價(jià)藥物是否為致緩解性藥物的一個(gè)指標(biāo)。4.5 免疫球蛋白E【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠縄gE受年齡的影響，正常健康成人血清IgE參考值為：0150IU/ml?！九R床意義】變態(tài)性疾病與血清IgE密切相關(guān)，故測(cè)定血清IgE對(duì)變態(tài)性疾病的診斷、治療及發(fā)病機(jī)制的探討都有重大意義。IgE增高見(jiàn)于IgE型多發(fā)性骨髓瘤，特發(fā)性哮喘，特發(fā)性皮炎，過(guò)敏性鼻炎，寄生蟲(chóng)感染，急慢性肝炎，SLE，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，熱帶嗜酸性粒細(xì)胞增多癥，乳糜尿及某些霉菌病。IgE降低見(jiàn)于原發(fā)性無(wú)丙球蛋白血癥，共濟(jì)失調(diào)-毛細(xì)血管擴(kuò)張癥，惡性腫瘤及細(xì)胞毒藥物治療后。4.6 血清2-微球蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等搜鍍?nèi)2-M濃度相當(dāng)恒定，0.82.0mg/L(平均為1.8mg/L)，臨界范圍是2.02.4mg/L，2.5mg/L以上為異常。【臨床意義】血清2-M增高見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、何杰金氏病、干燥綜合癥、淋巴瘤、白血病、愛(ài)滋病、肝炎等；血清2-M增高也見(jiàn)于腎濾過(guò)功能減退引起的各種腎功臟疾病。4.7 血清轉(zhuǎn)鐵蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等搜遛D(zhuǎn)鐵蛋白參考值范圍為：1.873.12g/L(20.834.7mol/L)?！九R床意義】血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白水平可用于貧血的診斷和對(duì)治療的監(jiān)測(cè)。在缺鐵性的低血色素貧血中轉(zhuǎn)鐵蛋白的水平增高(由于其合成增加)，但其鐵的飽和度很低(正常值在3038%)。相反，如果貧血是由于紅細(xì)胞對(duì)鐵利用障礙(如再生障礙性貧血)，則血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白正?；虻拖?，但鐵的飽和度增高，在鐵負(fù)荷過(guò)量時(shí)，轉(zhuǎn)鐵蛋白水平正常，但飽和度可超過(guò)50%，甚至達(dá)90%。血清轉(zhuǎn)鐵蛋白增高見(jiàn)于急性炎癥，急性肝炎，缺鐵性貧血，口服避孕藥，妊娠后期等。血清轉(zhuǎn)鐵蛋白降低見(jiàn)于惡性腫瘤，肝硬化，急慢性肝炎，先天性轉(zhuǎn)鐵蛋白缺乏癥，溶血性貧血，腎病綜合征，慢性腎功能衰竭，嚴(yán)重?zé)齻偷鞍踪|(zhì)丟失性胃腸病等。4.8 血清前白蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等搜迩鞍椎鞍讌⒖贾捣秶鸀椋?.170.42mg/L?！九R床意義】血清前白蛋白對(duì)蛋白質(zhì)熱量不足、營(yíng)養(yǎng)不良有早期診斷和治療監(jiān)測(cè)作用。血清前白蛋白增高見(jiàn)于何杰金氏病，口服避孕藥和使用類(lèi)固醇藥物。血清前白蛋白降低見(jiàn)于肝癌，慢性活動(dòng)性肝炎，阻塞性黃疸，急慢性炎癥，營(yíng)養(yǎng)不良。4.9 血清觸珠蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定。【正常參考值】正常健康人血清觸珠蛋白參考值范圍為：0.52.2g/L?！九R床意義】血清結(jié)合珠蛋白又名觸珠蛋白，是一種2-球蛋白，具有結(jié)合游離血紅蛋白能力，在血紅蛋白降解成膽紅素的代謝過(guò)程中具有重要作用。血清觸珠蛋白降低見(jiàn)于各種溶血性貧血，肝細(xì)胞損害性病變，傳染性單核細(xì)胞增多癥，先天性無(wú)結(jié)合球蛋白血癥等。血清觸珠蛋白增高見(jiàn)于感染，組織損傷，燒傷，肝外阻塞性黃疸，腎病綜合癥，惡性疾病等。4.10 血清銅藍(lán)蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠垦邈~藍(lán)蛋白參考值成人：200600mg/L；兒童：300650mg/L?！九R床意義】血清銅藍(lán)蛋白又名銅氧化酶，屬2-糖蛋白。血清銅藍(lán)蛋白檢測(cè)對(duì)Wilson病(肝豆?fàn)詈俗冃?有重大診斷價(jià)值，肝豆?fàn)詈俗冃允且环N常染色體基因缺損所致的遺傳性疾病，患者血清銅藍(lán)蛋白含量明顯下降。嚴(yán)重的低蛋白血癥，腎病綜合癥，嚴(yán)重肝病如原發(fā)膽汁性肝硬化、原發(fā)膽汁性閉鎖等疾病，血清銅藍(lán)蛋白含量下降。銅藍(lán)蛋白在膠原合成過(guò)程中，能促進(jìn)其纖維化，因此，血清銅藍(lán)蛋白在膠原合成亢進(jìn)的各種疾病如塵肺，實(shí)質(zhì)性惡性腫瘤中升高，且血清銅藍(lán)蛋白是塵肺最靈敏的早期診斷生化指標(biāo)，其升高早于肺部X線片的改變，并與塵肺分期有關(guān)。妊娠，口服避孕藥，血清銅藍(lán)蛋白亦可升高。4.11 血清1-酸性糖蛋白【標(biāo)本】空腹靜脈采血2ml，不抗凝，分離血清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠拷】党扇搜?-酸性糖蛋白參考值：0.551.40g/L。【臨床意義】血清1-酸性糖蛋白增高見(jiàn)于急性炎癥反應(yīng)，心肌梗死，組織損傷，妊娠，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病；惡性腫瘤如肝癌、骨髓瘤等，血清1-酸性糖蛋白大多增高。血清1-酸性糖蛋白降低見(jiàn)于營(yíng)養(yǎng)不良，腎病綜合癥等疾病；重癥肝炎，肝硬化等，血清1-酸性糖蛋白大多下降。4.12 尿微量白蛋白【標(biāo)本】12小時(shí)尿液或隨機(jī)尿液5ml，離心取上清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等四虬椎鞍椎膮⒖贾禐槌磕颍?.55.1mg/L；隨機(jī)尿：4.82.6mg/gCr；白蛋白排泌量：男：011.6g/分；女：015.9g/分。因標(biāo)準(zhǔn)化和臨床實(shí)踐的需要，國(guó)際上一致以尿白蛋白排泄率20g/分或24小時(shí)尿白蛋白30mg作為微量白蛋白的臨界值?！九R床意義】尿微量白蛋白測(cè)定可用于早期腎損傷的監(jiān)測(cè)：1.區(qū)分腎小球和腎小管損傷：腎小管損傷時(shí)，尿中白蛋白僅輕度升高并同時(shí)伴有2-微球蛋白的明顯增加；腎小球損傷時(shí)，尿中白蛋白排出量明顯升高，其升高程度與腎小球損傷的程度相關(guān)。2.可對(duì)糖尿病性腎病、重金屬及藥物中毒等腎病的早期發(fā)現(xiàn)、診斷和療效觀察提供參考依據(jù)。4.13 尿液免疫球蛋白【標(biāo)本】24小時(shí)尿液或晨尿，離心取上清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等顺磕蛎庖咔虻鞍讌⒖贾禐椋篒gA：0.70.3mg/L；IgG：0.30.2mg/L；IgM：0.030.01mg/L。【臨床意義】尿液免疫球蛋白測(cè)定可用于腎小球?yàn)V過(guò)功能的監(jiān)測(cè)，慢性腎炎與腎病綜合癥型尿中可出現(xiàn)免疫球蛋白A、G、M。尿中出現(xiàn)免疫球蛋白M提示腎小球病變嚴(yán)重，預(yù)后差。膀胱炎與腎盂腎炎時(shí)尿中免疫球蛋白A增加，有時(shí)免疫球蛋白G增加。4.14 尿液免疫球蛋白輕鏈【標(biāo)本】24小時(shí)尿液或晨尿5ml，離心取上清上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定?！菊⒖贾怠空＝】等顺磕蛎庖咔虻鞍纵p鏈參考值為：輕鏈5.0mg/L；輕鏈5.0mg/L?！九R床意義】輕鏈病與多發(fā)性骨髓瘤的關(guān)系最密切。約20%的骨髓瘤患者只分泌游離輕鏈，約50%的骨髓瘤病人既有單克隆血清免疲球蛋白，又有單克隆尿輕鏈，前者預(yù)后較差。輕鏈以型為多，其預(yù)后比鏈型差。血和尿中輕鏈濃度與產(chǎn)生輕鏈的單克隆細(xì)胞數(shù)、合成率和腎功能狀況有關(guān)。但對(duì)同一患者，分泌輕鏈細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成率通常不變。在腎功能正常的情況下，尿輕鏈的定量對(duì)骨髓瘤的診斷、分期、預(yù)后判斷有參考價(jià)值。慢性淋巴細(xì)胞白血病，巨球蛋白血癥，淀粉樣變性，惡性腫瘤和少數(shù)潛伏疾病患者尿中也可查到輕鏈。大量免疫球蛋白輕鏈從尿中排出可引起腎中毒，因此該蛋白質(zhì)的存在增加了腎功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)，預(yù)后不良。4.15 腦脊液免疫球蛋白【標(biāo)本】腦脊液1ml，上自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定。【正常參考值】正常健康人腦脊液免疫球蛋白參考值為：IgG：31.012.0mg/L；IgA：4.305.50mg/L；IgM：0mg/L?！九R床意義】正常人腦脊液中未見(jiàn)IgM，若腦脊液中出現(xiàn)IgM，常提示有中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，此外在多發(fā)性硬化癥、腫瘤、血管通透性改變時(shí)，腦脊液中亦可出現(xiàn)IgM。錐蟲(chóng)病患者腦脊液IgM也增高。IgG顯著增高見(jiàn)于亞急性硬化性全腦