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學(xué)號(hào):071140208湖北民族學(xué)院本科畢業(yè)論文超聲輔助提取川木通總黃酮的工藝研究院 系: 生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 姓 名: 周 茜 專 業(yè): 生物工程 指導(dǎo)教師: 劉曉鵬 中國恩施二一五年五月Std.ID: 071140121BACHELORS THESIS OF HUBEI UNITroloxRSITY FOR NATIONALITIES矚慫潤厲釤瘞睞櫪廡賴。Ultrasonic -assisted extraction of total Flavonoids from Caulis clematidis armandi聞創(chuàng)溝燴鐺險(xiǎn)愛氌譴凈。Major: Biological engineeringStu-Name: Qian ZhouMentor: Xiaopeng LiuEenshi chinaMay 6th, 2015鄭重聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文超聲輔助提取川木通總黃酮的工藝研究是我在導(dǎo)師 劉曉鵬 的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,論文中不包含其他個(gè)人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得湖北民族學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確的方式進(jìn)行了說明。本聲明的法律結(jié)果由本人獨(dú)自承擔(dān)。殘騖樓諍錈瀨濟(jì)溆塹籟。 作者簽名: 年 月 日超聲輔助提取川木通總黃酮的工藝研究周茜(湖北民族學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,湖北恩施,445000)摘要:本文為對(duì)超提取川木通中黃酮類化合物的工藝進(jìn)行優(yōu)化,在提取率受乙醇濃度、料液比、超聲時(shí)間、超聲功率四個(gè)因素影響的研究中運(yùn)用單因素試驗(yàn)及在其基礎(chǔ)上進(jìn)行的正交試驗(yàn),得到提取川木通黃酮類化合物的最佳工藝。結(jié)果表明在室溫條件下,最優(yōu)工藝條件為:乙醇濃度90%,料液比1:30 g/mL,超聲波工作時(shí)間8 min,超聲波功率200 W。用一組3次重復(fù)的試驗(yàn)驗(yàn)證此條件,提取率取平均后為0.65%。與傳統(tǒng)方法相比,該方法明顯縮短了提取時(shí)間,提高了黃酮的提取率。該研究為川木通總黃酮的提取及工業(yè)化生產(chǎn)提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。釅錒極額閉鎮(zhèn)檜豬訣錐。關(guān)鍵詞:超聲波;川木通;黃酮Ultrasonic -assisted extraction of total Flavonoids from Caulis clematidis armandi彈貿(mào)攝爾霽斃攬磚鹵廡。Qain Zhou(College of Biological Scientific and technical,Hubei Minzu University , Hubei Enshi, 445000)謀蕎摶篋飆鐸懟類蔣薔。Abstract:In this paper, the process of ultrasonic -assisted extraction of total Flavonoids from Caulis clematidis armandi was optimized. Single factor experiments were implemented to investigate the effects of ethanol concentration, solid-liquid ratio, ultrasonic working time, ultrasonic power, respectively, on the extraction rate of total Flavonoids from Caulis clematidis Aemandi. Othogonal testwas used to optimize the process.The results showed that: At room temperature,the optimal experiment conditions was the concentration of ethanol is 90%,the solid-liquid ratio is 1:30 (g/mL),ultrasonic working time 8 min, ultrasonic power 200 W. The experiment was repeated three times under the optimal conditions ,average extraction rate was 0.646%.Comparing with traditional methods, this method significantly shortens the working time of ultrasonic, and improving the extraction rate.This study provides the experiment basis for commercial process.廈礴懇蹣駢時(shí)盡繼價(jià)騷。Keywoods:Ultrasonic; Caulis clematidis armandi; flavonoids煢楨廣鰳鯡選塊網(wǎng)羈淚。目錄摘要IAbstractII2 文獻(xiàn)綜述12.1 川木通12.1.1 川木通簡(jiǎn)介12.1.2 川木通藥理作用12.2 黃酮12.2.1 黃酮類化合物的分子結(jié)構(gòu)22.2.2 黃酮類化合物的理化性質(zhì)22.2.3 黃酮類化合物的藥理作用22.2.4 黃酮類化合物的其他應(yīng)用32.3 黃酮提取的原理與方法32.3.1 溶劑萃取法32.3.2 堿提取酸沉淀法32.3.3 酶解法42.3.4 超聲波提取法42.4 立題依據(jù)和研究意義43 材料與方法43.1 實(shí)驗(yàn)材料43.1.1 實(shí)驗(yàn)原料43.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑43.1.3 溶液配置53.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器53.2 實(shí)驗(yàn)方法53.2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作53.2.2 提取率的計(jì)算63.2.3 單因素實(shí)驗(yàn)63.2.4 正交實(shí)驗(yàn)73.2.5 數(shù)據(jù)處理74 實(shí)驗(yàn)結(jié)果84.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作84.2 單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果84.3 正交試驗(yàn)結(jié)果104.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果105 討論116 結(jié)論12參考文獻(xiàn)13致謝15I1 文獻(xiàn)綜述1.1 川木通1.1.1 川木通簡(jiǎn)介 川木通,又名小木通、淮木通等, 因其產(chǎn)于四川而得名。川木通呈長(zhǎng)圓柱形,略擔(dān)曲,長(zhǎng)為50l00 cm,直徑為23.5 cm,切片厚24 mm。,川木通在中國藥用歷史上已有千年之久,在證類本草、本草綱目、天寶本草等書中均有記載。川木通主要含有三萜皂苷類、黃酮類、木脂素、多糖等活性成分。魏志奇1表示,目前已經(jīng)報(bào)道的川木通中所含的黃酮類為二氫黃酮。鵝婭盡損鵪慘歷蘢鴛賴。1.1.2 川木通藥理作用(1)利尿作用 川木通作為利尿藥使用已有幾千年歷史,是極為傳統(tǒng)的藥用植物。張雪松2的兔慢性利尿試驗(yàn)表明川木通有顯著利尿效果。他們的試驗(yàn)方法是連續(xù)5天給兔的腹腔給以木通醇浸膏,從而得到該結(jié)果?;[叢媽羥為贍僨蟶練淨(jìng)。(2)抗炎鎮(zhèn)痛作用川木通中含有豐富的皂苷類化合物以及有機(jī)酸成分,具有抗炎鎮(zhèn)痛的作用。由劉巖庭3等的研究可知川木通有抗炎效果。運(yùn)用小鼠腹腔毛細(xì)血管通透法和小鼠耳腫脹法可得到,川木通中常春藤皂苷元對(duì)抗炎最有效,齊墩果酸也可以顯著抑制二甲苯的致炎反應(yīng)。預(yù)頌圣鉉儐歲齦訝驊糴。(3)抗菌作用 川木通同時(shí)還具有抗菌作用,其作用機(jī)理是它具有一定的殺菌作用。唐遠(yuǎn)4烏蘭其其格5的研究均表明表明川木通可殺滅金黃色葡萄球菌、 大腸桿菌等細(xì)菌。滲釤嗆儼勻諤鱉調(diào)硯錦。1.2 黃酮黃酮類化合物泛指由中央三碳將2個(gè)苯環(huán)聯(lián)結(jié)起來的一系列化合物(C6-C3-C6)。因這類化合物多呈黃色或淡黃色而稱黃酮。自然界中廣泛存在著黃酮類化合物,植物組織中的糖能與很多黃酮類化合物結(jié)合,其大多數(shù)存在的形式是黃酮苷,少部分是游離態(tài)。它們有助于植物抵御異物的侵入,也有助于植物生長(zhǎng)、發(fā)育、開花、結(jié)果。黃酮是天然酚類化合物之首6 。目前已超過4 000種的黃酮類類化合物被分離出來,國內(nèi)外廣泛關(guān)注其生理活性的多樣性,研究進(jìn)展迅速。鐃誅臥瀉噦圣騁貺頂廡。1.2.1 黃酮類化合物的分子結(jié)構(gòu) 黃酮類化合物的基本骨架(如圖1.1)。根據(jù)三碳鏈氧化程度的不同、B環(huán)連接位置的不同以及三碳鏈的環(huán)化程度等特點(diǎn),可被分為黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、異黃酮類、二氫異黃酮類等不同類型。擁締鳳襪備訊顎輪爛薔。圖1.1 黃酮類化合物的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig1.1 Chemical constitutionof flavonoids1.2.2 黃酮類化合物的理化性質(zhì) 黃酮類化合物大多數(shù)為結(jié)晶固體,少數(shù)為無定型粉末,多數(shù)呈黃色或淡黃色,可以測(cè)定熔點(diǎn)。結(jié)構(gòu)和存在狀態(tài)的不同在很大程度上影響著其溶解度,有以下一般規(guī)律:游離苷元易溶于稀堿和有機(jī)溶劑(如:乙醇、乙醚、乙酸乙酯等),幾乎不溶于水;水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性的溶劑易于溶解黃酮苷類化合物,而苯、氯仿、石醚等有機(jī)溶劑難于溶解。此外,黃酮類化合物還能與部分試劑在一定條件下發(fā)生獨(dú)特的顯色反應(yīng),在早期,化學(xué)顯色反應(yīng)常在研究工作中被用來判斷黃酮類化合物是否存在以及以何種類型存在。贓熱俁閫歲匱閶鄴鎵騷。1.2.3 黃酮類化合物的藥理作用 黃酮類化合物能治療多種人類疾病,具有抗炎、抗癌等諸多藥理作用。(1)黃酮類化合物的抗炎免疫作用 黃酮類化合物能影響細(xì)胞有絲分裂,影響細(xì)胞細(xì)胞間的相互作用,因此具有抗炎免疫作用。王曉梅等7研究表明,黃酮類化合物可抑制NO、MDA和PGE2等的合成。同時(shí)通過他們的研究結(jié)果表明,黃酮對(duì)二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹以及大鼠腹腔巨噬細(xì)胞 IL-1的生成有抑制作用。壇摶鄉(xiāng)囂懺蔞鍥鈴氈淚。(2)黃酮類化合物對(duì)腦血管系統(tǒng)的影響 黃酮能修復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,能溶解血栓,也能促進(jìn)腦組織纖溶系統(tǒng)改善功能,黃酮類化合物有協(xié)同保護(hù)腦組織的作用。曹珊8等研究表明:黃酮對(duì)腦缺血炎癥及內(nèi)皮血管的損傷有很好的療效。蠟變黲癟報(bào)倀鉉錨鈰贅。(3)黃酮類化合物的抗癌作用黃酮類化合物的抗癌作用主要與其雌激素樣作用、抑制酶的活性、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等作用有關(guān)。研究表明,黃酮類化合物對(duì)乳腺癌、前列腺癌等均有預(yù)防和治療作用9。買鯛鴯譖曇膚遙閆擷凄。1.2.4 黃酮類化合物的其他應(yīng)用 黃酮類化合物的溶解特性很寬, 黃酮類化合物既有水溶性的, 又有脂溶性的??蓳?jù)需要選擇合適黃酮類化合物作為食品著色劑10??稍谶m當(dāng)條件下黃酮類化合物中的二氫黃酮類化合物轉(zhuǎn)化而成顯甜味的二氫查爾酮糖苷,可作為天然的甜味劑。同時(shí),工業(yè)上用的染料和抗氧化劑也曾使用過黃酮類化合物。綾鏑鯛駕櫬鶘蹤韋轔糴。1.3 黃酮提取的原理與方法 隨著近十幾年黃酮類化合物藥用價(jià)值的不斷提升,它的提取顯得尤為重要。下面簡(jiǎn)單介紹一下目前報(bào)道的黃酮類化合物的提取方法與原理。驅(qū)躓髏彥浹綏譎飴憂錦。1.3.1 溶劑萃取法 僅限于提取黃酮苷類物質(zhì)時(shí),可用熱水進(jìn)行提取,如:自槐花米中提取蘆丁。極性比較大的多糖黃酮苷,可以直接用沸水提取,但是沸水提取易產(chǎn)生較多易溶于水的雜質(zhì),需較復(fù)雜的后處理,且提取率也不理想,不常使用。極性較小的游離黃酮苷元?jiǎng)t可用甲醇:水(1:1)連續(xù)萃取11。貓蠆驢繪燈鮒誅髏貺廡。1.3.2 堿提取酸沉淀法 由于黃酮類化合物大多具有酚羥基,易溶于堿水中??上扔脡A性的水或稀醇提取,提取液經(jīng)酸化后可析出黃酮類化合物沉淀11。鍬籟饗逕瑣筆襖鷗婭薔。1.3.3 酶解法 當(dāng)一些原料的細(xì)胞壁包圍著黃酮類物質(zhì),使其不易被提取時(shí),可以采用酶法提取 。如山楂中,黃酮被細(xì)胞壁所包圍, 且細(xì)胞壁間有果膠粘結(jié) , 采用酶提比一般方法提取率高 12。破壞果膠、纖維素等連接細(xì)胞壁的物質(zhì),使黃酮類物質(zhì)得到充分釋放是酶法提取原理。構(gòu)氽頑黌碩飩薺齦話騖。1.3.4 超聲波提取法 用超聲波法提取黃酮類物質(zhì),是目前比較新的方法 。它的原理是超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)強(qiáng)烈、加速度高、空化作用強(qiáng)、以及攪拌作用有助于破壞細(xì)胞膜,利于釋放與溶出黃酮類化合物。提取液在超聲波作用下不斷震蕩,有利于溶質(zhì)擴(kuò)散。超聲的熱效應(yīng)使水溫基本在 57,對(duì)原料有水溶作用 12,超聲提取不對(duì)提取物的結(jié)構(gòu)、活性產(chǎn)生影響13。因此,超聲波提取法作為一種快速、高效、節(jié)能的新型提取工藝,使原料的利用率和有效成分的提取率得到了很大提高,提取時(shí)間大大縮短,并且避免了高溫對(duì)提取成分的影響。輒嶧陽檉籪癤網(wǎng)儂號(hào)澩。1.4 立題依據(jù)和研究意義 目前 ,利用超聲輔助提取川木通總黃酮的研究報(bào)道很少,本文采用正交法優(yōu)化其條件,為以后川木通總黃酮的工業(yè)化生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ) 。 堯側(cè)閆繭絳闕絢勵(lì)蜆贅。2 材料與方法2.1 實(shí)驗(yàn)材料2.1.1 實(shí)驗(yàn)原料 川木通購自湖北省金貴中藥飲片公司,粉碎過60目篩,存于陰涼干燥處備用。2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑試劑名產(chǎn)地或供應(yīng)商蘆丁國藥集團(tuán)氫氧化鈉天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司硝酸鋁天津市福晨化學(xué)試劑有限公司亞硝酸鈉天津市福晨化學(xué)試劑有限公司2.1.3 溶液配置1 mol/L氫氧化鈉稱取4 g氫氧化鈉于燒杯中,沸騰后冷卻的蒸餾水溶解(除二氧化碳),移至100 mL容量瓶中,定容至刻度線,搖勻貼上標(biāo)簽,備用,10%硝酸鋁溶液稱取10 g硝酸鋁置于燒杯中,溶解,移至100 mL容量瓶中,定容至刻度線,搖勻,貼上標(biāo)簽,備用5%亞硝酸鈉溶液稱取5 g亞硝酸鈉,放置于洗凈烘干的燒杯中溶解,移至100 mL容量瓶中,定容至刻度線,搖勻,貼上標(biāo)簽,備用30%乙醇溶液量取16 mL的95%乙醇,放置于50 mL容量瓶中定容至刻度線,搖勻,貼上標(biāo)簽,備用其它濃度乙醇溶液按30%乙醇溶液步驟配置,現(xiàn)配現(xiàn)用2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器TU-1810 DSPC型紫外可見分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限責(zé)任公司FA1004B電子天平上海精密科學(xué)儀器公司TDL80-2B型離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器制造廠JY96-II超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)寧波新芝生物科技股份有限公司2.2 實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 稱取蘆丁0.038g,用30%乙醇溶解定容至250 mL(濃度為0.152 mg/mL,為初始濃度)制成蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液;往洗凈烘干的25 mL容量瓶編號(hào)為的1、2、3、4、5,吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液分別放入相應(yīng)容量瓶中,另外取蒸餾水做對(duì)照,編號(hào)為0號(hào),各加入一定量的30%乙醇至總體積為12.5 mL;加入5%亞硫酸鈉0.7 mL,搖勻,靜置6分鐘;加入10%硝酸鋁0.7 mL,搖勻,靜置6分鐘;加入5 mL濃度為1 mol/L的氫氧化鈉,用30%乙醇定容至25 mL,靜置15-20分鐘,0號(hào)瓶調(diào)零,在510 nm下測(cè)各瓶的吸光值;以吸光度為縱坐標(biāo)(Y),濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)(X),作蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。識(shí)饒鎂錕縊灩筧嚌儼淒。2.2.2 提取率的計(jì)算 將測(cè)出的吸光度帶入標(biāo)曲,求得提取液中黃酮的濃度,按如下公式計(jì)算黃酮提取率: 式中:C是蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的黃酮濃度 (mg/mL); N為稀釋倍數(shù); V是提取液體積(mL); M為川木通粉末質(zhì)量(g)。 2.2.3 單因素實(shí)驗(yàn)(1)不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響 稱取川木通0.5 g,共7份,用分別用30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇作為提取液,按1:30 (g/mL)的料液比進(jìn)行超聲提取,超聲功率為200 W,超聲波提取4 min,提取液在3000 r/min條件下離心30 min。取上清液,按照2.2.1步驟進(jìn)行3個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。川木通總黃酮的提取率根據(jù)2.2.2的方法計(jì)算,用來考察乙醇濃度對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。凍鈹鋨勞臘鍇癇婦脛糴。(2)不同料液比對(duì)總黃酮提取率的影響 稱取川木通0.5 g,共6份,用70%乙醇溶液作為提取液,分別按料液比為1:10、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60 (g/mL)加入乙醇溶液,寫好編號(hào),在超聲波200w的條件下提取4 min,提取液在3000r/min條件下離心30 min,取上清液,后續(xù)操作同(不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響),計(jì)算出提取率,以考察料液比對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。恥諤銪滅縈歡煬鞏鶩錦。(3)不同超聲波功率對(duì)總黃酮提取率的影響 稱取川木通0.5 g,共7份,用70%乙醇溶液作為提取液,按照1:30 (g/mL)的料液比添加乙醇溶液,超聲波功率分別設(shè)定為50、100、150、200、250、300、350 mL,超聲處理4 min,寫好編號(hào),提取液在3000 r/min條件下離心30分鐘,取上清液,后續(xù)處理同(不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響),計(jì)算出提取率,以考察超聲功率對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。鯊腎鑰詘褳鉀溈懼統(tǒng)庫。(4)不同超聲處理時(shí)間時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響 稱取川木通0.5 g,共5份,用70%乙醇作業(yè)提取液,按1:30 (g/mL)的料液比添加乙醇溶液,在200 w超聲波條件下分別用超聲處理2、4、6、8、10 min,提取液在3000r/min條件下離心30 min,取上清液,后續(xù)處理同(不同乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響),計(jì)算出提取率,以考察超聲時(shí)間對(duì)川木通總黃酮提取率的影響。碩癘鄴頏謅攆檸攜驤蘞。2.2.4 正交實(shí)驗(yàn) 為了確定超聲波輔助提取川木通中黃酮的最佳條件,根據(jù)以上單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,選擇4個(gè)因素中相對(duì)最優(yōu)的3個(gè)條件,設(shè)置為3水平,采用L9(34)正交試驗(yàn),確定的正交表如表2.1:閿擻輳嬪諫遷擇楨秘騖。表2.1正交試驗(yàn)因素與水平表Table2.1 Factor and levels of orthogonal test水平A乙醇濃度/%B料液比/(g/mL)C超聲波功率/WD超聲波時(shí)間/min1791:1015062801:2020083901:30250102.2.5 數(shù)據(jù)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用3組重復(fù)的平均數(shù),用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作圖3.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig3.1Standard curve of Sophorin 根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得的蘆丁濃度與吸光值的關(guān)系,建立了如下線性回歸方程(圖3.1),y = 10.201x +0.0026,相關(guān)系數(shù)R= 0.9998。氬嚕躑竄貿(mào)懇彈瀘頷澩。3.2 單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果(1)乙醇濃度對(duì)超聲波輔助提取川木通總黃酮的影響圖3.2 乙醇濃度總對(duì)黃酮的提取率的影響Fig3.2 Effect of ethanol concentration on the extraction of total flavonoids from釷鵒資贏車贖孫滅獅贅。Caulis clematidis armandi 由圖3.2可知在,乙醇濃度對(duì)川木通總黃酮的提取率影響不大。提取率隨著乙醇濃度升高而穩(wěn)步上升且趨于平穩(wěn),在乙醇濃度達(dá)到80%時(shí)最高,當(dāng)乙醇濃度超過80%后開始下降。所以選取的乙醇濃度70%、80%和90%作為后續(xù)正交試驗(yàn)的考察水平。慫闡譜鯪逕導(dǎo)嘯畫長(zhǎng)涼。(2)料液比對(duì)超聲波輔助提取川木通總黃酮的影響圖3.3 不同料液比對(duì)總黃酮提取率的影響Fig3.3 Effections of solid-liquid ratioon extraction of total flavonoids from 諺辭調(diào)擔(dān)鈧諂動(dòng)禪瀉類。Caulis clematidis armandi 由圖3.3可知,黃酮提取率在不同料液比的條件下并沒有太大區(qū)別,因此我們可以考慮,料液比對(duì)黃酮的提取率沒有直接的影響。在選著正交實(shí)驗(yàn)條件時(shí),為節(jié)約原料,我們選擇料液比分別為1:10、1:20、1:30 g/mL作為后續(xù)正交試驗(yàn)的考察水平。嘰覲詿縲鐋囁偽純鉿錈。(3)超聲波功率對(duì)川木通總黃酮提取率的影響圖3.4 不同超聲波功率對(duì)黃酮提取率的影響Fig3.4 Effect of ultrasonic working time on extraction of total flavonoids from 熒紿譏鉦鏌觶鷹緇機(jī)庫。Caulis clematidis armandi 由圖3.4可知隨著超聲波功率的增大川木通總黃酮的提取率也增大,川木通總黃酮的提取率達(dá)到最高時(shí)超聲波功率為200 W,之后川木通總黃酮的提取率隨著超聲波功率的繼續(xù)增大又有所降低且逐漸趨于平穩(wěn),因此我們選取正交試驗(yàn)的超聲波提取川木通中黃酮的超聲波功率條件為150 w、200 w、250 w。 鶼漬螻偉閱劍鯫腎邏蘞。(4)超聲波時(shí)間對(duì)川木通總黃酮提取率的影響圖3.5 超聲時(shí)間對(duì)川木通總黃酮提取率的影響Fig3.5 Effecton of ultrasonic power on extraction of total flavonoids from 紂憂蔣氳頑薟驅(qū)藥憫騖。Caulis clematidis armandi 由圖3.5可知,川木通總黃酮提取率受超聲時(shí)間的影響不明顯。最大提取率在8 min時(shí)達(dá)到,超過8 min時(shí)又開始下降。所以正交試驗(yàn)選取超聲波輔助提取川木通總黃酮的超聲時(shí)間為6 min、8 min、10 min。穎芻莖蛺餑億頓裊賠瀧。3.3 正交試驗(yàn)結(jié)果 由表3.1得知,即料液比是影響川木通總黃酮提取率的最重要因素,其次分別是超聲波提取時(shí)間、乙醇濃度、超聲波功率。從平均提取得率K值來看, 最佳提取條件為A3B3C2D2,即提取溶劑為90%乙醇,1:30 (g/mL)的料液比,在超聲波在200 W功率下工作8 min。濫驂膽閉驟羥闈詔寢賻。3.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果 稱取川木通0.5 g,按料液比1:30 g/mL加入90%乙醇溶液,在超聲波功率200W下超聲波提取8 min,提取液在3000 r/min下離心30 min,準(zhǔn)確吸取2 mL上清液轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中,按2.2.1中的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),重復(fù)三次,按照2.2.2方法計(jì)算最后總黃酮的提取率。經(jīng)計(jì)算得到川木通的總黃酮提取率為0.65%,通過優(yōu)化,黃酮的提取率得到了顯著的提高。銚銻縵嚌鰻鴻鋟謎諏涼。表3.1 正交試驗(yàn)結(jié)果表Table3.1 Results of orthogonal test序號(hào)A乙醇濃度%B料液比g/mLC超聲波功率WD超聲波時(shí)間min提取率%111110.43212220.50313330.50421230.42522110.40623320.51731320.51832130.49933210.51K11.4231.3681.4321.347K21.3341.3841.4331.519K31.4741.5191.4061.405R0.1400.1510.0270.1754 討論 黃酮類化合物具有多種生理活性功能,在食品、藥業(yè)等領(lǐng)域有非常廣泛的應(yīng)用。黃酮的主要作用均與其抗氧化活性有關(guān)14。隨著黃酮類化合物研究的深入,提取黃酮的方法開始多樣化。傳統(tǒng)的方法有熱水提法、堿性水或堿性稀醇提取、回流法、滲漉法等。新型提取技術(shù)有超聲波提取法、酶解法等12。隨著超聲波技術(shù)的進(jìn)步,超聲處理黃酮的方法將越來越多15。超聲波方法相對(duì)于其他方法而言,超聲波法明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的提取法, 它所用的提取時(shí)間大大縮短, 產(chǎn)率較高。 超聲在低溫下可強(qiáng)化水浸提取率,是提取黃酮的一種高效方法16。目前超聲提取還停在實(shí)驗(yàn)室階段, 其工業(yè)應(yīng)用還有許多問題待解決17。隨著超聲技術(shù)的成熟,設(shè)備的不斷改進(jìn),超聲提取技術(shù)在食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域的應(yīng)用前景將更廣闊。目前,在國內(nèi)外對(duì)川木通的研究報(bào)道,對(duì)川木通總黃酮提取工藝的研究更少,本論文采用超聲波輔助提取法研究了提取川木通總黃酮的工藝條件,得到了一些可供參考的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),可以為更好地開發(fā)和利用黨參中黃酮類化合物提供一定理論依據(jù)。擠貼綬電麥結(jié)鈺贖嘵類。5 結(jié)論 從單因素實(shí)驗(yàn)可知:超聲輔助提取川木通總黃酮的最優(yōu)乙醇濃度是90%,最優(yōu)料液比是1:20 (g/mL),最優(yōu)超聲波工作時(shí)間是6 min,最優(yōu)超聲波功率是350 W。賠荊紳諮侖驟遼輩襪錈。從正交實(shí)驗(yàn)可得,超聲輔助提取川木通總黃酮的其最佳為料液比1:30 (g/mL),最優(yōu)乙醇濃度為90%,最優(yōu)超聲功率為200 W,最優(yōu)超聲時(shí)間為8 min。提高了黃酮的提取率,且該提取率穩(wěn)定,有利于川木通中黃酮的提取。塤礙籟饈決穩(wěn)賽釙冊(cè)庫。15參考文獻(xiàn)1 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