酶的特性實(shí)驗(yàn)課件

1、1 實(shí)驗(yàn)十：酶的特性實(shí)驗(yàn)十：酶的特性 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模杭由顚?duì)酶的性質(zhì)的認(rèn)識(shí)。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)內(nèi)容： 溫度對(duì)酶活力的影響 pH對(duì)酶活力的影響 酶的激活及抑制劑 1.酶的專一性 2 溫度對(duì)酶活力的影響溫度對(duì)酶活力的影響 一、原理：一、原理： 酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫度下，酶 的反應(yīng)速度最高。大多數(shù)動(dòng)物酶的最適溫度為37 40，植物酶的最適溫度為5060 。 酶對(duì)溫度的穩(wěn)定性與其存在形式有關(guān)。有些酶的 干燥制劑，雖加熱到100，其活性并無(wú)明顯改變， 但在100的溶液中卻很快地完全失去活性。 低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。 3 二、器材：二、器材： 試管及試管架 恒溫水浴 冰

2、浴 1)沸水浴 三、試劑和材料：三、試劑和材料： 含0.2淀粉的0.3NaCl溶液150ml，需新鮮 配制 稀釋200倍的唾液50ml：用蒸餾水漱口，以清 除事物殘?jiān)?，再含一口蒸餾水，半分鐘后使 其流入量筒并稀釋200倍，混勻備用。 KI碘溶液50ml：將KI20g及碘10g溶于100ml 水中。使用前稀釋10倍。 4 四、操作方法：四、操作方法： 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色。糊精按其分子的大小，淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色。糊精按其分子的大小， 遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色或紅色。最簡(jiǎn)單的糊精遇碘遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色或紅色。最簡(jiǎn)單的糊精遇碘 不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下，淀粉

3、被不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色。在不同溫度下，淀粉被 唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色 來(lái)判斷。來(lái)判斷。 取三支試管，編號(hào)后按下表加入試劑：取三支試管，編號(hào)后按下表加入試劑： 管號(hào)管號(hào) 123 淀粉溶液（淀粉溶液（ml） 1.51.51.5 稀釋唾液（稀釋唾液（ml） 11 煮沸過(guò)的稀釋煮沸過(guò)的稀釋 唾液（唾液（ml） 5 搖勻后，將搖勻后，將1號(hào)、號(hào)、3號(hào)兩試管放入號(hào)兩試管放入37 恒恒 溫水浴中，溫水浴中，2 2號(hào)試管放入冰中，號(hào)試管放入冰中，10min10min后去后去 處，（將處，（將2 2號(hào)管內(nèi)液體分為兩半）用號(hào)管內(nèi)

4、液體分為兩半）用KIKI碘碘 溶液來(lái)檢驗(yàn)溶液來(lái)檢驗(yàn)1 1、2 2、3 3管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶 水解的程度。記錄并解釋結(jié)果，將水解的程度。記錄并解釋結(jié)果，將2 2號(hào)管剩號(hào)管剩 下的一半溶液放入下的一半溶液放入3737水浴中繼續(xù)保溫水浴中繼續(xù)保溫 10min10min后，再用碘液實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如何？后，再用碘液實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如何？ 6 pH對(duì)酶活性的影響對(duì)酶活性的影響 一、原理一、原理 酶的活力受環(huán)境酶的活力受環(huán)境pH的影響極為顯著。不同酶的最適的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不同。本實(shí)驗(yàn)觀值不同。本實(shí)驗(yàn)觀 察察pH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適對(duì)唾液淀粉酶活性的影響，唾液

5、淀粉酶的最適pH約為約為6.8。 二、器材二、器材 試管及試管架試管及試管架 吸管吸管 滴管滴管 50ml錐形瓶錐形瓶 恒溫水浴恒溫水浴 三、試劑和材料三、試劑和材料 新配制的溶于新配制的溶于0.3NaCl的的0.5淀粉溶液淀粉溶液 250ml 稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 100ml 0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液磷酸氫二鈉溶液 600ml 0.1mol/L檸檬酸溶液檸檬酸溶液 400ml KI碘溶液碘溶液 50ml pH試紙：試紙： pH=5、 pH=5.8、 pH=6.8、 pH=8四種四種 7 四、操作方法：四、操作方法： 取四個(gè)標(biāo)有號(hào)碼的取四個(gè)標(biāo)有號(hào)碼的50ml錐形瓶。用吸

6、管按下表添錐形瓶。用吸管按下表添 加加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和磷酸氫二鈉溶液和0.1檸檬酸溶液以制備檸檬酸溶液以制備 pH5.08.0的四種緩沖液。的四種緩沖液。 從四個(gè)錐形瓶中各取緩沖液從四個(gè)錐形瓶中各取緩沖液3ml，分別注入，分別注入4支支 帶有號(hào)碼的試管中，隨后于每個(gè)試管中添加帶有號(hào)碼的試管中，隨后于每個(gè)試管中添加0.5淀淀 粉溶液粉溶液2ml和稀釋和稀釋200倍的唾液倍的唾液2ml。向各試管中加入。向各試管中加入 稀釋唾液的時(shí)間間隔各為稀釋唾液的時(shí)間間隔各為1min。將各試管內(nèi)容物混。將各試管內(nèi)容物混 勻，并依次置于勻，并依次置于37 恒溫水浴中保溫。恒溫水浴中保溫。 第四管加

7、入唾液第四管加入唾液2min后，每隔后，每隔1min由第由第3管取出一管取出一 滴混和液，置于白瓷板上，加滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴小滴KI碘溶液，檢碘溶液，檢 驗(yàn)淀粉的水解程度。待混和液變?yōu)樽攸S色時(shí)，向所驗(yàn)淀粉的水解程度。待混和液變?yōu)樽攸S色時(shí)，向所 有試管依次添加有試管依次添加12滴滴KI碘溶液。添加碘溶液。添加KI碘溶碘溶 液的時(shí)間間隔從第一管起，亦均為液的時(shí)間間隔從第一管起，亦均為1min。 觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析pH對(duì)唾液對(duì)唾液 淀粉酶活性的影響。淀粉酶活性的影響。 8 錐形瓶錐形瓶 號(hào)碼號(hào)碼 0.2mol/L磷酸氫二磷酸氫二 鈉（鈉（m

8、l） 0.1 mol/L檸檸 檬酸（檬酸（ml） pH 15.154.855.0 26.053.955.8 37.722.286.8 49.720.288.0 9 唾液淀粉酶的活化和抑制唾液淀粉酶的活化和抑制 一、原理一、原理 酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀粉酶酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀粉酶 的活化劑，銅離子為其抑制劑。的活化劑，銅離子為其抑制劑。 二、器材：二、器材： 恒溫水浴恒溫水浴 試管及試管架試管及試管架 三、試劑和材料：三、試劑和材料： 0.1的淀粉溶液的淀粉溶液 150ml 稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 150ml 1NaCl溶液溶液

9、50ml 1硫酸銅溶液硫酸銅溶液 50ml 1硫酸鈉溶液硫酸鈉溶液 50ml 1)KI碘溶液碘溶液 100ml 10 四、操作方法：四、操作方法： 管號(hào)管號(hào)1234 0.1的淀粉溶液（的淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5 稀釋唾液（稀釋唾液（ml）0.50.50.50.5 1硫酸銅溶液（硫酸銅溶液（ml）0.5 1NaCl溶液（溶液（ml）0.5 1硫酸鈉溶液（硫酸鈉溶液（ml）0.5 蒸餾水（蒸餾水（ml）0.5 37 恒溫水浴、保溫恒溫水浴、保溫10min KI碘溶液（滴）碘溶液（滴）23232323 現(xiàn)象現(xiàn)象 注：保溫時(shí)間可根據(jù)各人唾液淀粉酶活力調(diào)整 解釋說(shuō)明，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)第3管的意

10、義 11 酶的專一性酶的專一性 一、原理一、原理 酶具有高度的專一性。本實(shí)驗(yàn)以唾液淀酶具有高度的專一性。本實(shí)驗(yàn)以唾液淀 粉酶和蔗糖酶的作用為例，來(lái)說(shuō)明酶的專粉酶和蔗糖酶的作用為例，來(lái)說(shuō)明酶的專 一性。一性。 淀粉和蔗糖無(wú)還原性，唾液淀粉酶水淀粉和蔗糖無(wú)還原性，唾液淀粉酶水 解淀粉生成由還原性的麥芽糖，但不能催解淀粉生成由還原性的麥芽糖，但不能催 化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn)化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn) 生還原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉生還原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉 的水解。用的水解。用Benedict試劑檢查糖的還原性。試劑檢查糖的還原性。 12 二、器材：二、器材：

11、 恒溫水浴恒溫水浴 沸水浴沸水浴 試管及試管架試管及試管架 三、試劑和材料：三、試劑和材料： 2蔗糖溶液蔗糖溶液 150ml 溶于溶于0.3NaCl的的1淀粉溶液（需新鮮配制）淀粉溶液（需新鮮配制） 150ml 稀釋稀釋200倍的新鮮唾液倍的新鮮唾液 100ml 蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml 將啤酒廠的鮮酵母用水洗滌將啤酒廠的鮮酵母用水洗滌23次（離心），然后放在濾紙上自然次（離心），然后放在濾紙上自然 干燥。取干酵母干燥。取干酵母100g，置于乳缽內(nèi)，添加適量蒸餾水及少量細(xì)沙，置于乳缽內(nèi)，添加適量蒸餾水及少量細(xì)沙， 用力研磨，提取約用力研磨，提取約1h，再加蒸餾水使總體積約為原體積的，再

12、加蒸餾水使總體積約為原體積的10倍。離倍。離 心，將上清液保存于冰箱中備用。心，將上清液保存于冰箱中備用。 Benedict氏試劑氏試劑 200ml 無(wú)水硫酸銅無(wú)水硫酸銅1.74g溶于溶于100ml熱水中，冷卻后稀釋至熱水中，冷卻后稀釋至150ml。取檸檬。取檸檬 酸鈉酸鈉173g，無(wú)水碳酸鈉，無(wú)水碳酸鈉100g和和600ml水共熱，溶解后冷卻并加水至水共熱，溶解后冷卻并加水至 850ml。再將冷卻的。再將冷卻的150ml硫酸銅溶液傾入。本試劑可長(zhǎng)久保存。硫酸銅溶液傾入。本試劑可長(zhǎng)久保存。 13 四、操作方法：四、操作方法： 1.淀粉酶的專一性： 管號(hào)管號(hào)123456 1淀粉溶液（滴）淀粉溶液（滴）444 2蔗糖溶液（滴）蔗糖溶液（滴）444 稀釋唾液（稀釋唾液（ml）11 煮沸過(guò)的稀釋唾液煮沸過(guò)的稀釋唾液 （ml） 11 蒸餾水（蒸餾水（ml）11 37 恒溫水浴恒溫水浴15min Benedict試劑（試劑（ml）111111 沸水浴沸水浴23min 現(xiàn)象現(xiàn)象 解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果（提示：唾液除含淀粉酶外還含有少量麥芽糖酶）解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果（提示：唾液除含淀粉酶外還含有少量麥芽糖酶）