HPLC驗(yàn)證方案

1、設(shè)備/系統(tǒng)名稱：高效液相色譜儀設(shè)備/系統(tǒng)型號(hào)：Waters515泵、2487檢測(cè)器方案編號(hào)： VM-QC-001-01方案制備姓名：日期：方案審核姓名：日期：姓名：日期：方案審核/批準(zhǔn)姓名：日期：姓名：日期：目錄1 .目的儀器編號(hào)：R211-JY-04與分工4. 偏差解決5. 變更控制6. 確認(rèn)內(nèi)容6.1安裝確認(rèn)6.2運(yùn)行確認(rèn)6.3性能確認(rèn)127. 驗(yàn)證結(jié)果匯總及評(píng)價(jià) 8 .驗(yàn)證周期.9.設(shè)備確認(rèn)總結(jié)報(bào)告10.附件1410.1偏差記錄1510.2.偏差和解決報(bào)告1610.3 .附錄文件清單1711.方案完成后審核/批準(zhǔn)181.目的為確認(rèn)waters515HPLC+waters UV2487高效

2、液相色譜系統(tǒng)測(cè)試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，性能穩(wěn)定，特制訂本驗(yàn)證方案，對(duì)高效液相色譜儀進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證過程應(yīng)嚴(yán)格按照本方案規(guī)定的內(nèi)容進(jìn)行。2.范圍2.1 設(shè)備驗(yàn)證內(nèi)容包括：安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)。2.2 該方案適用于本公司實(shí)驗(yàn)室高效液相色譜系統(tǒng)的驗(yàn)證。3.組織與分工部門姓名職務(wù)3.1成員組成:分工3.2(1)由QC負(fù)責(zé)制訂本驗(yàn)證方案。(2)由QA負(fù)責(zé)確認(rèn)本驗(yàn)證方案。由QC負(fù)責(zé)進(jìn)行本驗(yàn)證方案的具體執(zhí)行。由QC負(fù)責(zé)編寫驗(yàn)證報(bào)告。3.3.職責(zé)劃分:(1)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)本驗(yàn)證方案的設(shè)計(jì)、批準(zhǔn)及實(shí)施。(2) QC負(fù)責(zé)按本驗(yàn)證方案對(duì)受試儀器進(jìn)行驗(yàn)證，并及時(shí)報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果，提供驗(yàn)證原始數(shù)據(jù)。(3)驗(yàn)證小組組長全面協(xié)調(diào)各

3、項(xiàng)驗(yàn)證工作，負(fù)責(zé)報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果、審核驗(yàn)證的評(píng)價(jià)與建議以及相應(yīng)的結(jié)論，并在驗(yàn)證過程中提供相關(guān)的技術(shù)支持。4.偏差解決偏差指的是任何的測(cè)試失敗，偏離規(guī)格，缺失文件，或重大偏離已建立的程序而導(dǎo)致潛在的GMF符合性影響。對(duì)于一個(gè)偏差事件，偏差必須被審核并評(píng)估確定導(dǎo)致偏差的根源。另外，根據(jù)設(shè)備的狀態(tài)對(duì)偏差的影響進(jìn)行分析。如必要，必須進(jìn)行偏差原因的調(diào)查，將調(diào)查結(jié)果包括在“偏差和解決報(bào)告”中，偏差的解決(如需要采取的糾正措施，或不采取任何糾正措施但接受該偏差)和說明也包括在“偏差和解決報(bào)告”中，如需要糾正措施將會(huì)影響部分確認(rèn)，這些部分的確認(rèn)測(cè)試將延遲至改正措施完成。偏差還需要完整的記錄在“偏差記錄”中并在最終

4、總結(jié)報(bào)告中討論。所有的偏差報(bào)告和相關(guān)的文件必須包括在最終的確認(rèn)文件中。5.變更控制所有的變更和修正將根據(jù)相應(yīng)的變更程序進(jìn)行。如果需要進(jìn)行變更，應(yīng)對(duì)其作單獨(dú)評(píng)估以決定是否有必要進(jìn)行再確認(rèn)。6.驗(yàn)證內(nèi)容6.1安裝確認(rèn)6.1.1儀器基本情況:設(shè)備名稱液相色譜儀設(shè)備編號(hào)R211-JY-04型號(hào)Waters515+UV2487生產(chǎn)廠家美國waters公司操作軟件浙江智達(dá)N2000安裝位置精密儀器室日期:檢查人:復(fù)核人:日期:6.1.2安裝確認(rèn)所需文件資料工程部在設(shè)備開箱驗(yàn)收后建立設(shè)備檔案，整理使用手冊(cè)等技術(shù)資料，歸檔保存。資料檔案數(shù)量存放處Waters515泵使用說明書1工程部UV2487使用說明書1工

5、程部AT-330柱溫箱使用說明書1工程部浙江智達(dá)N2000工作站1質(zhì)量部合格證1工程部資料檔案:檢查人:日期:日期:復(fù)核人:6.1.3設(shè)備的外觀檢查項(xiàng)目結(jié)果設(shè)備是否無損壞。設(shè)備部件是否無缺失。設(shè)備是否易于拆卸、清洗。設(shè)備安裝、固定是否牢靠。設(shè)備工作環(huán)境是否符合說明書要求。設(shè)備安裝位置是否恰當(dāng)，是否留有足夠的空間。電氣接線連接是否正確，是否有可靠的接地保護(hù)。電纜 是否無損壞。管路連接是否正確，管路和各連接處是否無泄露。檢查人:日期:日期:復(fù)核人:6.1.4高效液相色譜儀主要部件名稱型號(hào)編號(hào)液相色譜泵Waters515E04515 795M紫外檢測(cè)器Waters uv2487E04487 719M

6、柱溫箱AT-330檢查人:日期:日期:復(fù)核人:6.1.5備注/備件核實(shí)備品/備件名稱型號(hào)數(shù)量生產(chǎn)廠家色譜柱4.6mm*200mm*0.5i m1支大連依利特氘燈LH-36X21個(gè)sonn tek針孔濾頭0.45 卩 m*13mm*10個(gè)/ 包8包德國 MEMBRANE小系濾膜0.45 卩 m *50nm*50 張/盒ITTL6盒德國 MEMBRANE日期:復(fù)核人:6.1.6.設(shè)備安裝環(huán)境檢查確認(rèn)設(shè)備的安裝環(huán)境和地點(diǎn)符合儀器說明書要求。檢查結(jié)果在下表記錄。確認(rèn)項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)結(jié)果項(xiàng)目結(jié)論設(shè)備安裝檢查1、電源：電壓：220 10% 頻率，50/60HZ可靠接地電壓： 頻率： 接地：符合不符合2、

7、環(huán)境檢查溫度：4 40C,濕度：20%- 95%溫度：濕度：符合不符合結(jié)論:日期:日期:檢查人:復(fù)核人:6.2運(yùn)行確認(rèn)6.2.1按waters高效液相色譜儀操作規(guī)程進(jìn)行操作，進(jìn)行控制旋鈕的測(cè)試。1. 通電測(cè)試：接通儀器電源，將電源開關(guān)按向上，則指示燈亮。2. 斷電測(cè)試：關(guān)閉儀器電源，則指示燈滅。3.泵測(cè)試：增加流速時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定，并有廢液流出；降低流速速時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定。6.2.2測(cè)試結(jié)果，在下表記錄。項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果結(jié)論waters高效液相色譜儀操作規(guī)程應(yīng)通過審核、批準(zhǔn)符合不符合通電測(cè)試接通儀器電源，將電源開關(guān)按向上，則 指示燈亮。符合不符合斷電測(cè)試關(guān)閉儀

8、器電源，則指示燈滅。符合不符合泵測(cè)試增加流速時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直 至穩(wěn)定，并有廢液流出；降低流速速時(shí)， 顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定。符合不符合結(jié)論:復(fù)核人:日期:6.3性能確認(rèn)檢定項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)泵流量設(shè)定值誤差泵流量設(shè)定值誤差Ss 2%泵流量設(shè)定值誤差流量穩(wěn)定性誤差SR 2%定性測(cè)量重復(fù)性（5次定量進(jìn)樣）RSDC 1.5%.定量測(cè)量重復(fù)性（5次定量進(jìn)樣）RSDC 1.5%UV檢測(cè)器波長準(zhǔn)確性示值誤差 3nm基線漂移. 5 X 10 (AU/h)基線噪聲 5 X 10 (AU最小檢測(cè)濃度（靜態(tài)）4 X 10-7g/ml （萘的甲醇溶液）631驗(yàn)證項(xiàng)目和技術(shù)要求序號(hào)名 稱儀器編號(hào)規(guī)格校準(zhǔn)日

9、期有效期至1秒表2電子分析天平3容量瓶4溫濕度表6.3.2確認(rèn)使用的檢定設(shè)備校正情況，結(jié)果在下表記錄。結(jié)論:檢查人:日期:復(fù)核人:日期:6.3.3試劑 D-鹽酸氨基葡萄糖、重鉻酸鉀、甲醇、硫酸等。6.4證方法及結(jié)果6.4.1泵流量設(shè)定值誤差Ss、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定。將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器連接好，以甲醇為流動(dòng)相，按表1設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集10-25分鐘，稱量。按下式計(jì)算 Ss和SR流量設(shè)疋值 ml/mi n0.51.01.5表1測(cè)量次數(shù)333收集流動(dòng)相時(shí)間min251510允許誤差Ss3%2%

10、2%SR3%2%2%計(jì)算公式：Ss=（Fm-Fs）/Fs * 100%SR=（Fmax-Fmi n）/F*100%式中Ss為流量設(shè)定值誤差（%W2Fm=（W2-W1）p .t 為流量實(shí)測(cè)值（ml/min ）； 容量瓶+流動(dòng)相的重量（g）;W!容量瓶的重量（g）;Fs流量設(shè)定值（ml/mi n ）；實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度（g/cm2）；收集流動(dòng)相的時(shí)間（min）；SR流量穩(wěn)定性誤差（% ;Fmax同一組測(cè)量中流量最大值（ml/min）；Fmin同一組測(cè)量中流量最小值（ml/min）；同一組測(cè)量的算術(shù)平均值（ml/min）；流量設(shè)疋值（ml/min ）0.51.01.5流量實(shí)測(cè)值（ml/min ）

11、平均值流量設(shè)定值誤差S S （%平均值流量穩(wěn)定性誤差（%泵流量設(shè)定值誤差Ss、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定結(jié)論:檢定人:日期:日期:復(fù)核人:642定性、定量測(cè)量重復(fù)性的驗(yàn)證將儀器聯(lián)接好，使之處于正常工作狀態(tài)，用進(jìn)樣閥的定量管注入穩(wěn)定的待分析樣品溶液(D-鹽酸氨 基葡萄糖)，記錄保留時(shí)間和峰面積，連續(xù)測(cè)量 5次，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 RSD色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以流動(dòng)相A:流動(dòng)相B (90/10) 為流動(dòng)相(流動(dòng)相 A為磷酸：辛烷磺酸鈉：水=0.08ml : 0.12g : 99.8ml ;流動(dòng)相B為乙腈)，檢測(cè) 波長為195 nm。測(cè)定法：取D-鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品

12、適量，精密稱定，加蒸餾水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5mg的溶液;搖勻，取20卩l(xiāng)注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 定性、定量測(cè)量重復(fù)性的檢定檢定人:日期:日期:復(fù)核人:6.4.3紫外檢測(cè)器性能 643.1 UV檢測(cè)器波長準(zhǔn)確性方法：已知苯在 233.9nm 238.9nm 243.3nm、248.5nm、254.5nm、260.6nm有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液運(yùn)行“ Sample scan ”程序。波長誤差均應(yīng)小于 3nn。 波長準(zhǔn)確性規(guī)定實(shí)測(cè)誤差規(guī)定實(shí)測(cè)誤差233.9nm248.5nm238.9nm254.5nm243.3nm260.6nm結(jié)論:檢定人:日期:復(fù)核人:日

13、期:643.2基線漂移和基線噪聲的測(cè)定將儀器的各部分連接好，紫外檢測(cè)器波長調(diào)到254nm流動(dòng)相為100%甲醇，流速為1.0ml/min ,紙速為5mm/min吸收度范圍選擇最靈敏檔，開機(jī)，待基線穩(wěn)定后，記錄基線3040分鐘，計(jì)算基線漂移和噪聲。基線漂移應(yīng)W 5XlO-3(AU/h),基線噪聲應(yīng)W 5X 10-4(AU)。 基線漂移和基線噪聲的測(cè)定旨標(biāo) 項(xiàng)目、標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果結(jié)論基線噪聲(RIU)-4 5X 10基線漂移(RIU/h)-3 5X 10(RIU/h)結(jié)論:檢定人:日期:復(fù)核人:日期:6.4.3.3最小檢測(cè)濃度檢定在靜態(tài)條件下，用注射器注入 4X 10-7g/ml萘的甲醇溶液，樣品峰高應(yīng)大于

14、或等于兩倍基線燥聲峰 高，按下式計(jì)算最小檢測(cè)濃度。Ct=2 HN C/H式中：Ct:最小檢測(cè)濃度(g/ml )HN:噪聲峰高(記錄儀格數(shù)或?qū)崪y(cè)高度 cm)C:樣品濃度(g/ml )H:樣品峰高(記錄儀格數(shù)或?qū)崪y(cè)高度 cm)結(jié)論:檢定人:日期:復(fù)核人:日期:7. 驗(yàn)證結(jié)果匯總及評(píng)價(jià)驗(yàn)證條件電壓:環(huán)境溫度:相對(duì)濕度認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果泵流量設(shè)定值誤差Ssv 2%; 流量穩(wěn)定性誤差S R2%疋性測(cè)重復(fù)性誤差（5次疋量管進(jìn)樣）RSDC 1.5%定量測(cè)重復(fù)性誤差（5次定量管進(jìn)樣）RSDC 1.5%基線漂移W 5X 10-3 (RlU/h ); 基線噪聲 5X 10( RIU)檢測(cè)器波長準(zhǔn)確性 3nm最小檢測(cè)濃度4X 10-8g/ml驗(yàn)證項(xiàng)目輸液系統(tǒng)UV檢測(cè)器性能結(jié)論日期:日期:檢定人: 復(fù)核人:8. 驗(yàn)證周期液相色譜儀的驗(yàn)證周期為兩年，當(dāng)更換部件或?qū)x器性能有懷疑時(shí)，應(yīng)隨時(shí)驗(yàn)證，并記錄驗(yàn)證結(jié)果。9. 設(shè)備驗(yàn)證總結(jié)報(bào)告10. 附件11. 方案完成后審核/批準(zhǔn)設(shè)備驗(yàn)證總結(jié)報(bào)告設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)執(zhí)行總結(jié)：確認(rèn)項(xiàng)目測(cè)試描述通過/失敗有無偏差？安裝確認(rèn)文件核實(shí)通過 失敗有 無主要部件核實(shí)通過失敗有 無設(shè)備的外觀檢查通過失敗有無備件/改換部件核實(shí)通過失敗有無SOP的核實(shí)通過失敗有無運(yùn)行及性能 確認(rèn)關(guān)鍵儀表校驗(yàn)的核實(shí)通過失敗有無儀器運(yùn)行及性能測(cè)試的核 實(shí)。通過失敗有無偏差總結(jié):后續(xù)措施和負(fù)責(zé)人: