泮托拉唑鈉新型抗?jié)兯幩幮嶒灝厴I(yè)論文

1、前言泮托拉唑鈉是一種新型的抗?jié)兯? 直接作用于胃壁內(nèi)質(zhì)子泵, 抑制胃酸分泌, 可治療十二指腸潰瘍 ，胃潰瘍，中、重度反流性食管等 , 是二烷氧肌吡啶基苯并咪唑化合物，具有良好的靶位專一性和對酸的穩(wěn)定性。是德國的比克古爾頓勞姆貝爾格化學(xué)公司于1994 年在瑞士上市的是第三個上市 的 PPI。與傳統(tǒng)的抗酸劑和H2 受體阻斷劑相比具有療效高、起效快、副作用小、治療周期短等優(yōu)點, 與目前質(zhì)子泵抑制劑的代表藥物奧美拉唑和蘭索拉唑相比, 靶位專一性和對酸的穩(wěn)定性更好。由于它與細(xì)胞色素P450 系統(tǒng)相互作用更小, 與其他藥物共用有很高的安全性和有效性, 是一個很有發(fā)展前景的H+K+一ATP酶酶抑制劑。質(zhì)子

2、泵抑制劑泮托拉唑(pantoprazole)是一種新型胃酸分泌抑制藥，是近年來治療胃酸異常相關(guān)性疾病的主要藥物之一。消化性潰瘍是上消化道出血的最常見原因，而在消化道潰瘍形成過程中，胃酸的自身消化作用是決定性因素，故抗酸劑的應(yīng)用是 治療消化性潰瘍的重要措施之一。質(zhì)子泵抑制劑用于治療與酸相關(guān)的消化道潰瘍 ，是近年來藥物治療的一大進(jìn)展 ，其治療消化性潰瘍或消化性潰瘍伴出血的地位已被國內(nèi)外大量的臨床試驗所確立。泮托拉唑是一新型質(zhì)子泵抑制劑 ，能夠?qū)?胃酸分泌的最終環(huán)節(jié)質(zhì)子泵(即胃黏膜壁細(xì)胞上的 H+K+一ATP酶)發(fā)揮選擇性和持久的抑制作用 ，故抑酸能力強(qiáng)大。泮托拉唑通過肝細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞色素 P450酶

3、系的第 I系統(tǒng)進(jìn)行代謝 ，而且與肝臟細(xì)胞色素 P450的親和力較低 ，同時也可通過第 系統(tǒng)進(jìn)行代謝。當(dāng)與其他 通過 P450酶系代謝的藥物伍用時，泮托拉唑的代謝途徑可以通過第酶系統(tǒng)進(jìn)行，從而不易發(fā)生藥物代謝酶系的競爭性作用。從藥物相互作用方面考慮，泮托拉唑聯(lián)合其他藥物更為安全 。 目前其含量測定主要采用的方法有紫外分光光度法,高效液相色譜法。本品在合成過程中, 可能帶入原料、中間體、副產(chǎn)物等雜質(zhì), 且本品在強(qiáng)光、高溫下易產(chǎn)生分解產(chǎn)物, 故紫外分光光度法不能準(zhǔn)確地測定含量。因此, 選用專屬性強(qiáng)的HPLC 法, 對其能進(jìn)行有效分離, 雜質(zhì)也不干擾測定，故選用高效液相法。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證的目

4、的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求。在建立藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，分析方法需經(jīng)驗證，在藥品生產(chǎn)工藝變更，制劑的組成變更，原分析方法進(jìn)行修訂時，則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗證。為了更好地控制本公司產(chǎn)品質(zhì)量,按中國藥典規(guī)定的方法進(jìn)行了藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證。實驗部分1 方法學(xué)的選擇 參照泮托拉唑鈉腸溶膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-198)-2004Z，本品選用高效液相色譜法作為含量測定方法. 2 方法學(xué)的研究2.1 儀器與試劑試藥2.1.1 儀器:LC-10AT VP 日本島津公司SPD-10A VP 日本島津公司N2010色譜工作站 浙江大學(xué)智能信息工程研究所2.1.2 試劑乙腈（色譜純）、磷酸氫二鈉(

5、A.R), 磷酸二氫鈉(A.R)2.1.3 試藥2.1.3.1 樣品2.1.3.1.1.樣品名稱通用名稱：泮托拉唑鈉腸溶膠囊 英文名稱：Pantoprazole Sodium Enteric-Coated Capsules 漢語拼音名：Pantuolazuo Na Jiaonang2.1.3.1.2 樣品來源及批號制劑來源：海南長安國際制藥有限公司劑型：腸溶膠囊規(guī)格：40mg 批號：、市售品:湖南健郎藥業(yè)有限公司2.1.3.2.對照品來源對照品由泮托拉唑鈉原料自行精制,批號:.精制方法：加30.5g泮托拉唑鈉,以及200ml乙醇,攪拌下加熱回流5h,冷卻至10度以下,靜置析晶,抽濾,所得固體用

6、80%乙醇溶液重結(jié)晶得到28.5g泮托拉唑鈉對照品?，F(xiàn)將泮托拉唑鈉對照品按藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案測定，結(jié)果如表1-1：表1-1 泮托拉唑鈉對照品測定結(jié)果指標(biāo)性狀干燥失重（%）含量（%）結(jié)果白色結(jié)晶性粉末4.5199.8結(jié)果表明：自制的對照品符合泮托拉唑鈉對照品藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案的規(guī)定，可以作為本實驗的對照品使用。3 實驗方法3.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性實驗3.1.1色譜條件 色譜條件的選擇，參照泮托拉唑鈉腸溶膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-198)-2004Z，初步擬定如下色譜條件： 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉，1.12g與磷酸二氫鈉0.18g，加水溶解并稀釋至1000ml

7、)-乙腈(70:30)為流動相;柱溫：25； 流速：1.0 ml/min；檢測波長288nm。3.1.2 系統(tǒng)適用性實驗按上述擬定色譜條件進(jìn)行實驗，結(jié)果為：理論板數(shù)按泮托拉唑鈉峰計算均不低于2500，泮托拉唑鈉峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均大于1.5。參照中國藥典2005版二部對系統(tǒng)適應(yīng)性實驗的一般要求以及泮托拉唑鈉腸溶膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-198)-2004Z，初步擬定為：理論板數(shù)按泮托拉唑鈉峰計算應(yīng)不低于2500，泮托拉唑鈉峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。3.2 流動相的選擇 參照泮托拉唑鈉腸溶膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-198)-2004Z，選用磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉，1.12g與磷酸二氫

8、鈉0.18g，加水溶解并稀釋至1000ml)-乙腈(70:30)為流動相;作為含量測定的流動相。3.3 測定波長的選擇本品在200-400nm波長范圍內(nèi)掃描，在288nm有最大吸收，選擇288nm作為本品含量測定的檢測波長。 3.4 輔料預(yù)膠化淀粉的干擾試驗分別取泮托拉唑鈉腸溶膠囊與預(yù)膠化淀粉適量，加流動相溶解并制成濃度分別為0.2mg/ml與0.7mg/ml的溶液，按照含量測定相下方法測定，預(yù)膠化淀粉在上述條件下沒有吸收，故對泮托拉唑鈉腸溶膠囊無干擾。3.5 溶劑空白試驗 取流動相20ul注入液相色譜儀進(jìn)行分析,記錄色譜圖;從圖譜上看出溶劑對含量測定沒有干擾。3.6 含量測定方法取裝量差異項

9、下的內(nèi)容物,混合均勻,精密稱取適量(約相當(dāng)于泮托拉唑40mg),置100ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5ml,置于50ml量瓶中加流動相稀釋至刻度,搖勻,精密量取20ul注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取泮托拉唑鈉對照品,同法測定,按外標(biāo)法以峰面積計算,即得4 方法學(xué)驗證4.1 回收率試驗取泮托拉唑鈉對照品32mg、42mg、49mg 各3 份,精密稱定,其中80%,100%,120%分別作3個平行樣,置于9個100ml量瓶中,按處方量加入各種輔料,加流動相制成每1ml中各約含泮托拉唑鈉32ug,40ug,48ug溶液,按初步擬定的含量測定方法,結(jié)果如下:表1-2 回

10、收率試驗測定結(jié)果測定次數(shù)加入量(mg)實測量(mg)回收率平均回收率RSD（%）80%100%120%12345678931.732.131.941.941.342.048.949.248.631.9931.9631.9741.8541.4541.8048.9448.8848.8899.09100.4499.6699.88100.3699.52100.0899.35100.5899.88%0.52%試驗結(jié)果表明：本品平均回收率結(jié)果為99.88%.4.2 含量進(jìn)樣精密度試驗取本品197.5mg,置于100ml容量瓶,加流動相溶解稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5ml,置于50ml量瓶中加流

11、動相定容至刻度,搖勻,精密量取20ul注入液相色檢測器,記錄色譜圖,連續(xù)進(jìn)樣6次,測定結(jié)果如下|表1-3 含量進(jìn)樣精密度試驗結(jié)果 次數(shù)123456主峰面積 .8 .9.4 .3 .2.6平均峰面積.0RSD（%） 0.27試驗結(jié)果表明：RSD為0.27%2.0%,含量進(jìn)樣精密度能滿足本品的含量測定的要求.4.3 含量重復(fù)性試驗取本品6份,按初步擬定的含量測定方法,分別加流動相制成每1ml中約含0.04mg的供試品溶液,分別取20ul注入液相色譜儀,記錄色譜圖,結(jié)果如下:表1-4 含量重復(fù)性試驗結(jié)果樣重（mg）200.2199.5199.9200.6200.0200.7主峰面積.2.9.1.5.

12、2.5A/W20512.120483.120537.620580.420382.620416.9平均值 20485.5RSD（%）0.36試驗結(jié)果表明:RSD為0.36%含量重復(fù)性結(jié)果良好.4.4 專屬性試驗取本品適量，加流動相溶解制成每1ml中約含1.0mg的溶液，搖勻，作為母液。未破壞：量取母液5ml，置25mlr容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，作為專屬性對照，取20ul進(jìn)樣分析強(qiáng)堿破壞試驗：量取母液5ml，置25mlr容量瓶中，加5ml 1mol/L的氫氧化鈉溶液，于室溫下放置30分鐘后，加1mol/L的鹽酸溶液中和至PH值為5.0-6.0，再加流動相至刻度，搖勻，取20ul進(jìn)樣分析。強(qiáng)

13、酸破壞試驗：量取母液5ml，置25mlr容量瓶中，加5ml 1mol/L的鹽酸溶液，于室溫下放置30分鐘后，加1mol/L氫氧化鈉溶液中和至PH值為5.0-6.0，再加流動相至刻度，搖勻，取20ul進(jìn)樣分析。強(qiáng)氧化破壞試驗：量取母液5ml，置25mlr容量瓶中，加30%的H2O2溶液5ml ，于室溫下放置20分鐘后，調(diào)PH值至5.0-6.0，再加流動相至刻度，搖勻，取20ul進(jìn)樣分析。高溫破壞試驗：量取母液5ml，置25ml容量瓶中，于100攝氏度水浴中放置20分鐘后，取出于室溫下放涼，加流動相至刻度，搖勻，取20ul進(jìn)樣分析。強(qiáng)光破壞試驗：取樣品適量，置于光照箱中，在4500LX的條件下放置

14、5天后，稱取適量樣品，加流動相稀釋成每1ml中約含0.2mg的溶液，取20ul進(jìn)樣分析。專屬性試驗結(jié)果表明，泮托拉唑在酸性環(huán)境，強(qiáng)光條件，堿性環(huán)境，強(qiáng)氧化劑及高溫條件下各雜質(zhì)峰能很好地與主峰分離，說明專屬性良好。4.5 線性范圍 取泮托拉唑鈉對照品,精密稱定,按初步擬定的含量測定方法,加流動相制成每1ml中約含201.0ug的溶液,再分別精密量取該溶液1ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml,3.0ml于10ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻;取20ul注入液相色譜儀,記錄色譜圖,結(jié)果如下: 表1-5 含量測定線性關(guān)系試驗結(jié)果濃度（ug/ml）20.10 30.15 40.20 50.25

15、 60.30 主峰面積.9.7.5.8 .0經(jīng)回歸分析,在濃度為20.10-60.30ugml范圍內(nèi),直線方程為Y=X-47836,r=0.9998,線性關(guān)系非常好。4.6 檢測限精密稱取泮托拉唑鈉對照品12.5mg，置100ml的量瓶中，加流動相適量，振搖，使溶解并定容至刻度，搖勻，精密量取1ml，置100ml的量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，作為原液（其濃度為1.25ug/ml）再分別量取原液0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml置100ml的量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，作為系列供試品溶液，。分別取20ul進(jìn)樣測定，經(jīng)分析檢測限濃度（以泮托拉唑計）為0.0125ug/m

16、l（S/N=3）、最小檢出量為0.25ng；4.7 定量限 精密稱取泮托拉唑鈉對照品10mg，置100ml的量瓶中，加流動相適量，振搖，使溶解并定容至刻度，搖勻，精密量取1ml，置100ml的量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，作為原液（其濃度為1.00ug/ml）再分別量取原液0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml置10ml的量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，作為系列供試品溶液，。分別取20ul進(jìn)樣測定，經(jīng)分析定量限濃度（以泮托拉唑計）為0.1000ug/ml（S/N=10）、最低定量限為2.00ng。4.8 溶液穩(wěn)定性試驗 取本品，按初步擬定的含量測定方法，加流動相制成每1ml中

17、約含泮托拉唑鈉40ug的溶液，室溫下放置，分別于0，2，4，6，8小時取樣檢測，結(jié)果如下：表1-6 穩(wěn)定性試驗測定結(jié)果時間（h）02468峰面積.9.3.1.4.1平均峰面積.2RSD（%）0.28試驗結(jié)果表明，供試品溶液在8小時內(nèi)穩(wěn)定。5 含量測定方法的確定根據(jù)上述試驗結(jié)果并參照泮托拉唑鈉腸溶膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-198)-2004Z，以泮托拉唑鈉原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS1(X-117)-2003Z，確定本品含量的測定方法如下：色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉，1.12g與磷酸二氫鈉0.18g，加水溶解并稀釋至1000ml)-乙腈(70:3

18、0)為流動相;柱溫：25； 流速：1.0 ml/min；檢測波長288nm。理論板數(shù)按泮托拉唑鈉峰計算應(yīng)不低于2500。測定法 取裝量差異項下的內(nèi)容物,混合均勻,精密稱取適量(約相當(dāng)于泮托拉唑40mg),置100ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5ml,置于50ml量瓶中加流動相稀釋至刻度,搖勻,精密量取20ul注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取泮托拉唑鈉對照品,同法測定,按外標(biāo)法以峰面積計算,即得。6 三批樣品檢查結(jié)果按上述確定的測定方法對本品三批及市售品含量進(jìn)行檢測，結(jié)果如下：表1-7 標(biāo)示含量測定結(jié)果批號市售品標(biāo)示量（%）100.7101.1101.4101.2試驗

19、結(jié)果表明，本品三批及市售品含量測定結(jié)果均符合規(guī)定。7 結(jié)果本實驗研究結(jié)果如下：本品在濃度為20.10-60.30ugml范圍內(nèi),直線方程為Y=X-47836,r=0.9998,線性關(guān)系非常好。檢測限最小檢出量為0.25ng（S/N=3）；定量限，最低定量限為2.00ng （S/N=10）。穩(wěn)定性實驗結(jié)果表明RSD（%）=0.28%，2.0%，供試品溶液在8小時內(nèi)穩(wěn)定。精密度實驗結(jié)果表明RSD%=0.27%2.0%,含量進(jìn)樣精密度能滿足本品的含量測定的要求。重復(fù)性試驗結(jié)果RSD%=0.36%含量重復(fù)性結(jié)果良好.平均回收率結(jié)果為99.88%.結(jié)果良好。本制劑含量測定所采用的HPLC方法的條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉，1.12g與磷酸二氫鈉0.18g，加水溶解并稀釋至1000ml)-乙腈(70:30)為流動相;柱溫：25； 流速：1.0 ml/min；檢測波長288nm。8 討論在1.0ml/min的流速時無論對于色譜柱的平衡，還是對整個系統(tǒng)的壓力都是好的。檢測波長本品在200-400nm波長范圍內(nèi)掃描，在288nm有最大吸收。該方法線性范圍廣、靈敏、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，專屬性好，穩(wěn)定，可用于泮托拉唑鈉腸溶膠囊的含量測定。致謝 站在畢業(yè)實習(xí)的終點站，回首望這段辛苦且充實的日子，收獲頗為豐