臨床分子生物學檢驗試題

1、1/ 8臨床分子生物學檢驗試題填空題1.核酸的最大紫外吸收波長在，蛋白 質的最大吸收波長在。2.雙鏈 DNA 中的堿基對 有，。3根據分子和結構不同，RNA可以分 為，。4.核酸變性過程中 ,紫外光吸收達到最大值50%時溫度稱為 ,其主要與核酸的最終含量有關 .5. DNA水解后主要產物是 ,。6.核酸（DNA和RNA）分子除含有，四種元素外， 還含有大量的元素。7. PCR技術是當今分子生物學使用最多的 技術之一，它一般都有，三 個基本反應步驟構成。8.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以繼續(xù)水解得到和。9.通用遺傳密碼中代表終止密碼的三種密碼是UAA、和。2/ 810. PCR方法擴增DN

2、A片段是，在反應中除了用該DNA片段作為模板外，尚需加入、和。11.在DNA分子中還有大量的磷（P），P的含量大約為。二判斷題1.核酸變性時 , 堿基對之間的氫鍵斷開 ,堆積力也受到破壞 ,共價鍵斷裂 .（）2.核酸雜交原理就是根據核酸分子間互補.（）3 .在中性或堿性溶液中 ,核酸主要帶正電xx.（）4.核酸分子質量很大 ,因此核酸溶液具有很大粘性 .（）5.分子雜交可以發(fā)生在任何只有互補核苷酸順序兩條單股核酸單鏈之間，如 DNA/DNA、DNA/RNA、RNA/RNA等.（）6.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以繼續(xù)水解得到核苷和磷酸（）7.在高分子溶液中一般球形分子比線形分子的具有較大

3、的粘度。（）8核酸的最大吸收波長在280nm,而蛋白質的最大吸收波長在 260nm（）9酚一氯仿提取法是我們在提取 DNA時所用的經典方法，現在仍然被許多實驗室所采用。（）10.組成RNA的四種堿基是腺嘌呤（A）、鳥嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、胸 3/ 8腺嘧啶（T）o（）11. PCR技術是以DNA或RNA為模板進行核酸的體外擴增技術。（）12. PCR技術是現在常用的一種擴增技術，它的基本步驟的順序是退火、變 性、延伸。（）13.免疫印漬技術及 SouthernBlotting 是一種印漬技術和抗原抗體反應結合的 技術（）14.在臨床基因擴增檢驗診斷實驗室工作的實驗操作人員必須經過業(yè)務培訓

4、并取得上崗證書（）15.無論是DNA還是RNA,在多核苷酸鏈內既有酸性的磷酸基又有堿性的含氮雜環(huán)堿,因此核酸是兩性電解質。（）16.在PCR實驗中，退火是指在極端的PH和受熱條件下，核酸分子中的氫 鍵斷裂，DNA雙螺旋解開的一個過程。（）17.臨床基因擴增診斷實驗室的設置必須遵循一定的原則,而這些基本原則 制定的主要依據就是使建立的基因擴增診斷實驗室結果的準確性能夠得到保 證,能忠實的反映被檢的臨床樣本的真實情況。（）二選擇題1.核酸在波長為 260nm 光吸收強度大小排列正確的是（）A.GATCB.ATGCC.CGTAD.GCAT2 .鑒別RNA靶分子的雜交是（）ASouthernBlotB

5、NorthernBlotCWesternBlot D斑點雜交3.在做RNA檢測時，我們對全血抗凝最好用下列哪種抗凝 劑（）A.肝素 B.EDTA-K2C.EDTA-Na2草.酸卡鉀4/ 84一般DNA分子中的堿基數組成規(guī)律，下列哪一項是錯的（）A.A=C,G=TB.A+G=C+T不同DNA中堿基組成不相同D.同一個不同組織細胞 中DNA堿基組成相同5.核酸分子儲存和傳遞遺傳信息是通過（）來進行的A.核苷的結構B.磷酸二酯鍵C堿基順序D.核苷酸的結構6 .分子生物學對醫(yī)學的發(fā)展已經起到越來越大的作用，許多分子生物學的發(fā) 現對分子生物學的發(fā)展都起到里程碑的作用，基因就是由轉化功能的DNA所組成，最

6、早是由誰發(fā)現的（） A.Friderick Griffith B.Alfred Hershey C.Martha Chase D.Oswald Avery7基因擴增檢測方法也有檢測的靈敏度，一般適時熒光定量PCR的檢測下限是（）A.103拷貝 /mlB.104 拷貝/mlC.102 拷貝/mlD.105 拷貝/ml8. RNA和DNA徹底水解后的產物為（）A.核糖相同，部分堿基不同B.核糖不同，堿基相同C.核糖相同，堿基相同D.核糖不同，部分堿基不同9.下列哪種堿基僅存在于 RNA中而不存在于DNA中（）A.鳥嘌呤B尿嘧啶C胸腺嘧啶D腺嘌呤三討論題1.簡述核酸探針及其應用2.簡述PCR技術的基

7、本原理及基本反應步驟。3.什么叫人類基因組計劃，它對醫(yī)學上的研究具有哪些意義？4.簡述核酸分子雜交的基本原理、類別和應用。5.簡述基因診斷檢測的臨床應用6.核酸產物主要用哪些方法檢測，他們分別用在哪些情況下？7簡述DNA芯片技術的應用。分子生物學參考答案：5/ 8一填空題：1.260nm280nm2.A二TG二C3.tRNAmRNArRNAhnRNA4鏈溫度 G+C5磷酸脫氧核糖堿基6.CHONP7變性退火延伸8戊糖含氮堿基9.UAAUAGUGA1C耐熱 Taq酶引物 dNTP 11.9%r 10%二.判斷題：1. X 2. V3. X 4. V5. V6. V7. X 8. X 9. V10

8、. X 11. V12. X 13. X14. V15. V16. X 17. V三. 選擇題：1.B 2.B 3.C 4.A 5.C 6.D 7.A 8.D 9.B四. 討論題1.（1）一小段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素、和熒光染料標記它的末端或者全鏈，我們就把這一段多聚核苷酸序列稱為探針。（2）可以用于檢測特異DNA或RNA序列片段，可以用于遺傳病的基因診斷，用于限制性片段 長度多態(tài)性作疾病的相關分析，法醫(yī)學上的性別分析和性別鑒定。2.（1） PCR的基本原理是以需要擴增的 DNA為模板，以一對分別與模板的5,和3,末端相互補的寡核苷酸片段為引物，在 DNA聚合酶的作用下，按照半保

9、留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的 DNA 合成，重復這一過程，即可 使目的 DNA 片段得到擴增。(2) PCR的基本步驟包括：變性：將反應系統(tǒng)加熱至95C，使模板 DNA全部變性變成單鏈DNA。退火：將溫度下降至適當溫度，使引物與模板 DNA退火結合。延伸：將溫度升至72C, DNA聚合酶以dNTP底物催化DNA 的合成反應。上述三個步驟稱為一個循環(huán)，這樣的循環(huán)重復 25-30 次，就可以得到大量的目的 DNA。3.(1) 1991 年，由美國眾院批準的一個 15 年的人類基因組研究計劃，花費金額約為 30 億美元，該項目很快得到各國科學家和各國 政府的所重視， 1994 6/ 8年，

10、我國也加入到其中 的相關研究項目，人類基因組分析的主要內 容包括：遺傳圖分析，物理圖分析，轉錄圖 分析，基因組序列測定等。( 2)人類基因組 計劃的實施大大促進了醫(yī)學的發(fā)展， DNA 的遺傳作圖和物理作圖對于認識疾病相關 基因具有巨大的推動作用。遺傳性疾病的基 因定位，尤其是對多基因位點將可以進行全 基因組的定位掃描，使得確定致病基因的工 作更為容易。4.( 1)單鏈的核酸分子在合適的溫度和離子強度下，通過堿基互補形成雙鏈雜交體的一 類技術。（ 2）核酸分子雜交分為液相雜交， 固相雜交，原位雜交，基因芯片技術。（ 3） 主要應用SOUTHERNBLOTTING于未 知 DNA 的檢測，NORTHERN BLOTTING 用于檢測未知RNA原位雜交用于組織和 細胞中的基因定位。5主要應用于感染病原的檢測、遺傳病的 診斷、組織配型及腫瘤的早期診斷等。6.主要的檢測方法有：（ 1）凝膠電泳分析法： 主要用于PCR產物的檢測。（2）微孔板夾 心雜交法（PCR-ELIS）本法可避免電泳和 雜交的繁雜步驟，適于常規(guī)的 ELISA計數儀 檢測PCR反應的產物。（3）熒光探針標記 法：這種方法在PCR的反應過程中對PCR 產物中熒光強度的檢測，從而對 PC