最新臨床血液學(xué)和血液學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)（干貨分享）

1、臨床血液學(xué)和血液學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)臨床血液學(xué)和血液學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)（一）粒細(xì)胞系統(tǒng)1。 原始粒細(xì)胞(myeloblast）：01m,胞體圓或類圓形，核占細(xì)胞的2以上，居中或略偏位，核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀排列均勻，核仁2個(gè)、較小、清楚;胞漿量少，染天藍(lán)色，有透明感，無顆粒。2. 早幼粒細(xì)胞（promyelcte）：1220m，較原粒細(xì)胞大，核染色質(zhì)較原粒細(xì)胞粗糙,染色質(zhì)顆粒開始有聚集，核仁可見或消失；胞漿染淡藍(lán)色、藍(lán)色或深藍(lán)色,含大小不等、形態(tài)不一的紫紅色顆粒（即非特異性顆粒）。3.中幼粒細(xì)胞（meocyt）中性中幼粒(netopiic myelocye）:10m，胞核橢圓形或一側(cè)開始扁平,可有凹陷，其凹陷處

2、約占細(xì)胞的2/31/2，核染色質(zhì)聚集呈索塊狀,核仁隱約可見或消失；胞漿量多，染淡紅或少數(shù)區(qū)域略偏藍(lán),含大小一致的紅色顆粒、即特異性顆粒(致少有一個(gè)區(qū)域).嗜酸性中幼粒(osnohilic）:150m：核與中性中幼粒相似;胞漿內(nèi)充滿粗大而均勻、排列緊密的橘紅色特異性嗜酸性顆粒。嗜堿性中幼粒（basi）：15m，核圓形或橢圓形、但常常輪廓不清，核染色質(zhì)較模糊；胞漿內(nèi)及核上含有排列零亂、大小不等數(shù)量不多的紫黑色嗜堿性顆粒。、晚幼粒細(xì)胞（meamyeloyte）中性晚幼粒(nutropilic metamyocyte）：101m，核明顯凹陷呈腎形，馬蹄形，半月形,但其核凹陷程度不超過假設(shè)直徑的一半,核

3、染色質(zhì)粗糙，排列更緊密，無核仁;胞漿量多，淺紅色，充滿中性特異性顆粒。嗜酸性晚幼粒(eosinpic mtayocyte）：6m,核形及結(jié)構(gòu)與中性晚幼粒相似；胞漿內(nèi)充滿橘紅色的、大小一致的嗜酸性特異性顆粒.嗜堿性晚幼粒(bashilic metamyelcyte）:1014m，核固縮呈腎形,輪廓模糊；胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性非特異顆粒。桿狀核粒細(xì)胞(stab grlocye）中性桿狀核粒細(xì)胞（neutropilic sab granlocye)：115m，核凹陷程度超過假設(shè)直徑的一半，核徑最窄處大于最寬處1/3以上,呈帶狀彎曲,核染色質(zhì)粗糙呈塊狀；胞漿充滿中性顆粒。嗜酸性桿狀核粒細(xì)胞(os

4、nilic stb granuloyte)：116m,核與中性桿狀相似；漿內(nèi)充滿嗜酸性顆粒。嗜堿性桿狀核粒細(xì)胞(bsophl tab grauly）：012m，核呈模糊桿狀;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性顆粒。6 分葉核粒細(xì)胞（smete ganuocyte)中性分葉核粒細(xì)胞(neutrophlic egmtd granlocyte)：014，核呈分葉狀，葉與葉之間有細(xì)絲相連或全斷開,常分25葉，核染色質(zhì)已濃集呈粗的小塊狀,染深紫紅色；胞漿豐富，內(nèi)含淡紅色均勻細(xì)小顆粒.嗜酸性分葉核粒細(xì)胞(（eoinpilc segmented ganulcyte）:116m，核多分2葉,核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與中性分葉核

5、相似；胞漿內(nèi)充滿粗大均勻一致的橘紅色嗜酸性顆粒。嗜堿性分葉核粒細(xì)胞（aopili sgented ralo)：1012m，核可分34葉或分葉不明顯；胞漿分布有少量大小不等的紫黑色嗜堿性顆粒。（二）紅細(xì)胞系統(tǒng)原始紅細(xì)胞（proormolast）：1520m,呈圓形或橢圓形,邊緣常呈鈍角狀或瘤狀突起，核呈圓形，居中或偏位，約占細(xì)胞體的4/5左右，核染色質(zhì)呈顆粒狀較原粒細(xì)胞粗而密集,核仁13個(gè)不等,且大小不一，形狀不規(guī)則,呈淺藍(lán)色或暗藍(lán)色；胞漿量少，染深藍(lán)色、不透明，有油畫藍(lán)感,無顆粒。早幼紅細(xì)胞(arlynormoblast)：01m，核圓形或橢圓形，約占細(xì)胞的2/3以上,核染色質(zhì)顆粒有濃集現(xiàn)象，

6、較原紅細(xì)胞粗糙，核仁模糊或消失；胞漿量增多，染不透明藍(lán)色或深藍(lán)色，邊緣可見瘤狀突起。中幼紅細(xì)胞(olyhri ormoblst)：815m，核圓形，約占細(xì)胞的/2，核染色質(zhì)凝聚呈條索狀或塊狀,中間有明顯空隙,如壓碎餅干樣或打碎墨硯感，無核仁；胞漿量相對較多，漿內(nèi)由于已合成不等量的血紅蛋白，可染呈不同程度的嗜多色性。晚幼紅細(xì)胞（ortochromati norbat):710,核圓形居中或偏位，占細(xì)胞的/2以下，核染色質(zhì)致密聚集成結(jié)構(gòu)不清的紫黑色團(tuán)塊狀，無核仁；胞漿量較多，因已合成大量血紅蛋白，常染淺灰紅色或淺紅色。網(wǎng)織紅細(xì)胞（eticulc）：7。27。5m,為晚幼紅細(xì)胞剛脫核而成,是尚未完全

7、成熟的紅細(xì)胞，瑞氏染色為多嗜性紅細(xì)胞，用煌焦油藍(lán)活體染色后在細(xì)胞內(nèi)可見藍(lán)色細(xì)顆粒或呈線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。紅細(xì)胞（erythrcyte）：正常紅細(xì)胞平均為7.，呈雙面微凹之圓盤狀，中央較薄,染色淺,邊緣較厚，染色深，呈粉紅色，無核。(三)單核細(xì)胞系統(tǒng)原始單核細(xì)胞（mooblst）：1520m，胞體圓形或橢圓形，核較大圓形或類圓形，核染色質(zhì)纖細(xì)，呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁1個(gè);胞漿量較其它原始細(xì)胞豐富，灰藍(lán)色，不透明,邊緣不規(guī)則或有偽足狀突起。幼稚單核細(xì)胞(promonocy）:1525，核圓形或不規(guī)則形，易見扭曲、凹陷、切跡等改變，核染色質(zhì)較原始單核細(xì)胞粗糙疏松，核仁可有可無;胞漿淺灰藍(lán)色，不透明，可見細(xì)

8、小顆粒.單核細(xì)胞(monocyt):1220，核形態(tài)常不規(guī)則，有腎形，馬蹄形，“形，分葉狀，筆架形等，核染色質(zhì)疏松呈絲網(wǎng)狀或條紋狀結(jié)構(gòu)，無核仁；胞漿量較多，染不透明的灰藍(lán)色，可見細(xì)小紅色顆粒.(四）淋巴細(xì)胞系統(tǒng)1原始淋巴細(xì)胞（lyphobst）：01，胞體圓形或橢圓形,核呈圓形或橢圓形，核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁1個(gè);胞漿量少,呈淡藍(lán)色,透明,無顆粒.2.幼稚淋巴細(xì)胞（rlymphocyt）:101m,核圓形或橢圓形,核染色質(zhì)仍較細(xì)致,核仁可有可無;胞漿量較少，淡藍(lán)色,偶見有少許紅色顆粒.3.淋巴細(xì)胞（lmhoyte）大淋巴細(xì)胞:12，核圓形稍偏于一側(cè)，核染色質(zhì)排列緊密均勻,深紫紅色；胞漿量相對

9、較多，染透明淡藍(lán)色，可有少量大小不等的紅色嗜天青顆粒.小淋巴細(xì)胞：69m，核相對較小，呈圓形，核染色質(zhì)緊密呈大塊狀,結(jié)構(gòu)不清楚,染深紫紅色；胞漿極少，似裸核樣，如可見則呈淡藍(lán)色，一般無顆粒。（五)漿細(xì)胞系統(tǒng)。 原始漿細(xì)胞（plasmabls):118m,胞體圓形或橢圓形，核圓形,占細(xì)胞的2/3以上，居中或偏位,核染色質(zhì)呈粗顆粒網(wǎng)狀,染紫紅色，核仁2個(gè)；胞漿量多，染深藍(lán)色，不透明,無顆粒。2 幼稚漿細(xì)胞（poplasmacyte）：1216，胞體多呈橢圓形，核圓形或橢圓形，占細(xì)胞的1/2,居中或偏位，核染色質(zhì)較原漿細(xì)胞粗糙緊密,開始聚集，染深紫紅色,核仁模糊或消失；胞漿量多，深藍(lán)色或紫藍(lán)色或呈藍(lán)

10、色火焰狀，不透明,有時(shí)可有空泡及少數(shù)嗜天青顆粒。3。漿細(xì)胞(lasacyte)：815m,核明顯縮小，圓形，占細(xì)胞的1/以下,偏于一側(cè),核染色質(zhì)濃集成塊狀，常排列呈車輪狀，無核仁;胞漿量豐富,染藍(lán)色或紫藍(lán)色，不透明，有時(shí)有泡沫感，漿內(nèi)可含有小空泡及或少量嗜天青顆粒，偶見胞漿中有較大的紅色或淡藍(lán)色透明的球狀物,稱Russel小體,是球蛋白聚集而成.（六)巨核細(xì)胞系統(tǒng)。原始巨核細(xì)胞(megakryblast)：1530m，胞體圓形或不規(guī)則形，核大，呈圓形或不規(guī)則形,核染色質(zhì)較其他原始細(xì)胞粗,呈粗網(wǎng)狀或細(xì)條索狀結(jié)構(gòu)，染深紫紅色,核仁3個(gè)，淡藍(lán)色，不清晰,不規(guī)則；胞漿量較少，不均勻，不規(guī)則,染深藍(lán)色，

11、無顆粒。2.幼稚巨核細(xì)胞(promearyocte）:35,外形不規(guī)則，核亦不規(guī)則,有重疊,可扭轉(zhuǎn)呈腎形或分葉狀,核染色質(zhì)呈粗顆?；虼志W(wǎng)狀或局部濃集呈小塊狀,排列緊密,核仁可有可無；胞漿量增多,常有偽足狀突出，染藍(lán)色或淺藍(lán)色,在近核處出現(xiàn)或多或少的很細(xì)小紅色嗜天青顆粒。3巨核細(xì)胞（egayte）顆粒型巨核細(xì)胞：070m,可達(dá)00，外形不規(guī)則，核較大，形態(tài)不規(guī)則，多呈分葉狀，核染色質(zhì)較粗糙，排列緊密呈團(tuán)塊狀，紫紅色，無核仁；胞漿量豐富，染粉紅色，夾雜有藍(lán)色，內(nèi)含大量細(xì)小紅色顆粒，常聚集呈簇,但無血小板形成。產(chǎn)板型巨核細(xì)胞：4070m，可達(dá)10m,形態(tài)大致與顆粒型巨核細(xì)胞相似，唯有不同的一點(diǎn)是胞漿

12、內(nèi)充滿細(xì)小的紅色顆粒及數(shù)量不等的血小板.裸核型巨核細(xì)胞：是產(chǎn)板型 巨核細(xì)胞的胞漿解體后,釋放出大量血小板,僅剩一個(gè)細(xì)胞核,稱之為裸核。4.血小板(ll)：胞體很小，2m，呈圓形、橢圓形，逗點(diǎn)狀,不規(guī)則形,中心部位有細(xì)小紫紅色顆粒，無細(xì)胞核，涂片上血小板常三五成群堆集出現(xiàn).(七）其他細(xì)胞1。組織嗜細(xì)胞（ssue basophilic cell）:又稱肥大細(xì)胞（ms cl),20,呈圓形，橢圓形,梭形,三角形等，核小,呈圓形或橢圓形,居中或偏位，核染色質(zhì)模糊,結(jié)構(gòu)不清；胞漿充滿圓形、大小一致的深紫色嗜堿性顆粒。2內(nèi)皮細(xì)胞(enotela el）：82m,形態(tài)極不規(guī)則,多呈梭形，核呈圓形或橢圓形，核

13、染色質(zhì)呈網(wǎng)狀，多無核仁；胞漿量少,染淡藍(lán)色，邊緣常模糊不清，常沿核長軸的兩側(cè)或一端呈尾狀伸出,可有細(xì)小紫紅色顆粒.3.纖維細(xì)胞(fibocye）:胞體較大，不規(guī)則,多為長尾形,核圓形或橢圓形（1數(shù)個(gè)），核染色質(zhì)呈或細(xì)或粗的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，核仁2個(gè)，不清晰，成熟者無核仁；胞漿豐富，多在細(xì)胞兩端，染淡藍(lán)色,邊界模糊，內(nèi)含纖維網(wǎng)狀物及少許嗜天青顆粒。4.成骨細(xì)胞(seblat）：胞體較大,2m,長橢圓形或不規(guī)則形，單個(gè)或多個(gè)成群分布，核圓形或橢圓形,常偏于細(xì)胞一側(cè)，核染色質(zhì)排列呈粗網(wǎng)狀，染深紫紅色，核仁可有13個(gè);胞漿豐富,染深藍(lán)色或灰藍(lán)色，邊緣常呈模糊云霧狀。5破骨細(xì)胞（osteoast）：胞體巨大,0

14、m，形態(tài)不規(guī)則，頗象巨核細(xì)胞，核小、數(shù)量較多，3100個(gè)不等，圓形或橢圓形，大小大致相等，邊緣清晰，彼此獨(dú)立，無核絲相連，隨意排列,核染色質(zhì)呈粗網(wǎng)狀,幾乎每個(gè)核都有一個(gè)藍(lán)色核仁；胞漿豐富,染淡藍(lán)色或淺紅色，含大小不等的紫紅細(xì)小顆粒.6脂肪細(xì)胞(fatty ll）:350m，胞體圓形或橢圓形,核較小,形狀不規(guī)則,常被擠壓在一邊,核染色質(zhì)呈細(xì)致密網(wǎng)狀，無核仁;胞漿內(nèi)充滿大量空泡.7組織細(xì)胞（histioy)：胞體較大，2050，形態(tài)多樣，一般呈圓形或橢圓形及不規(guī)則形,核可有圓形，橢圓形，腎形，核染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，核仁24個(gè)不等；胞漿多少不一，染色也常不一致,有深藍(lán),淡藍(lán)，灰藍(lán)色等，邊緣多不規(guī)則

15、或不清楚,無顆粒或含有少量或細(xì)或粗或粗細(xì)不一的嗜天青顆粒，可有空泡或含異物等。.吞噬細(xì)胞(phaoye)：不是一種獨(dú)立的細(xì)胞,而是胞漿內(nèi)含有吞噬物質(zhì)的一組細(xì)胞的總稱。具有吞噬功能的細(xì)胞有單核細(xì)胞、組織細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞，纖維細(xì)胞等.吞噬細(xì)胞的形態(tài)極不一致，由吞噬物的類型及吞噬物的多少而定.其胞核圓形、橢圓形或不規(guī)則形,常一個(gè)核，有時(shí)為雙核，核常被擠壓至一側(cè)，核染色質(zhì)較疏松，核仁可有可無。胞漿多少不一,淡藍(lán)色或淡紅色，常有空泡，并有數(shù)量不等的吞噬物，吞噬物有空泡、色素、顆粒、有核細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、碳核、細(xì)菌等.有時(shí)吞噬細(xì)胞成堆存在。第二節(jié) 異常血細(xì)胞形態(tài)學(xué)（4學(xué)時(shí)）了解:初步認(rèn)識(shí)各種異常血細(xì)

16、胞形態(tài),并畫出每一臺(tái)顯微鏡下的細(xì)胞圖像。血細(xì)胞形態(tài)在病理情況下,可在胞體、胞核、胞漿等方面發(fā)生異常改變。(一）粒細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常1白血病時(shí)粒細(xì)胞改變胞體:大小不等、畸形。胞漿：Aer小體，顆粒粗大、增多.Auer小體:是在細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)均勻一致的紅色細(xì)棒狀小體.產(chǎn)生原因是嗜天青顆粒融合而成.常見于急性非淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞漿內(nèi)。胞核:畸形、切跡、折疊、凹陷、扭曲、分葉等.如急淋時(shí)核易破碎,核分裂象增多。核漿比:增大、發(fā)育不平衡（M2b).核仁：大、數(shù)量增多、亦可不清楚.2。巨大粒細(xì)胞：可見于中、晚、桿、分階段。常見巨晚幼、巨桿狀.形態(tài)特征:與同期相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)較同階段細(xì)胞細(xì)致。

17、形成原因：核酸代謝障礙。常見疾病:巨幼貧、M6、MDS、M2b、抗葉酸類藥物治療后。3中性粒細(xì)胞分葉過多:分5葉以上，常見于巨幼貧、嚴(yán)重感染恢復(fù)期.4。粒細(xì)胞中毒變性改變中毒顆粒：胞漿顆粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫紅色。見于嚴(yán)重感染、大面積燒傷等.空泡：漿或核內(nèi)空泡。見于嚴(yán)重感染。杜勒小體（Dohle)：藍(lán)斑,在細(xì)胞漿內(nèi)直徑約12的藍(lán)色區(qū)域。見于嚴(yán)重感染,肝硬化等。核變性:核固縮、核腫脹、核碎裂、核溶解。見于嚴(yán)重感染。(二）紅細(xì)胞系形態(tài)異常巨幼紅細(xì)胞形態(tài)特征:與同期細(xì)胞相比，胞體大、核大、核染色質(zhì)細(xì)致、排列疏松“幼核老漿”。產(chǎn)生原因：核酸代謝障礙。常見疾?。壕抻棕殹6、M、抗葉酸治療

18、后等.2.低色素性紅細(xì)胞形態(tài)特征：與同期細(xì)胞相比，漿量少、嗜堿性、著色偏藍(lán),核染色質(zhì)無明顯異常改變“幼漿老核”。成熟紅細(xì)胞中心淡染區(qū)明顯擴(kuò)大。產(chǎn)生原因：H合成障礙(不能說缺鐵)。常見疾?。篋、Hb病、慢性感染性貧血等。3紅細(xì)胞大小不等、形態(tài)不整：見于各種增生性貧血.4。球形紅細(xì)胞：64m，中心淡染區(qū)明顯縮小或消失。見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。5橢圓形紅細(xì)胞：橫徑/長徑N桿菌，病毒減低或無變化。但NP積分正常 ，不能除外細(xì)菌感染.（2）慢粒,類白。(3）ALL,ANLL.（）A，PN正常 。（5)惡組，反應(yīng)性組織細(xì)胞增多。(6）增性紅細(xì)胞增多癥,繼發(fā)性紅細(xì)胞增多正常 。(7）激素治療后NAP。(

19、8)妊娠期P。7. 質(zhì)量保證（1）孵育液、1硫化銨每次實(shí)驗(yàn)必須新鮮配制.（2）Trisl緩沖液的PH應(yīng)控制在9。9.8之間。（)溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在45左右（上下不超過1)。（4)涂片在孵育液中準(zhǔn)確溫育30分鐘。（5）涂片從孵育液中取出時(shí)不能沖洗,應(yīng)直接放入硝酸鈷，否則實(shí)驗(yàn)失敗。（6）涂片從硝酸鈷中取出時(shí)應(yīng)用自來水沖洗3分鐘,否則涂片太臟，結(jié)果不好觀察。（）每次染色必須作對照。(二）鐵染色1原理 骨髓小粒中的含鐵血黃素稱細(xì)胞外鐵,其中的三價(jià)鐵與分子中的蛋白質(zhì)結(jié)合不牢固,經(jīng)稀鹽酸處理后而游離,并能在酸性亞鐵氰化鉀溶液中產(chǎn)生普魯士藍(lán)反應(yīng)。細(xì)胞內(nèi)鐵也可用此法顯示。根據(jù)反應(yīng)的強(qiáng)弱了解骨髓中鐵的含量。2試劑

20、(1) 酸性亞鐵氰化鉀溶液 20g/亞鐵氰化鉀溶液 5份濃鹽酸 1份取20gL亞鐵氰化鉀溶液置于試管中，緩緩滴加濃鹽酸，邊滴邊搖勻,至出現(xiàn)白色沉淀，再滴加20g/L亞鐵氰化鉀溶液,亦邊滴邊搖勻,至白色沉淀消失為止,備用.（2)2/L核固紅硫酸鋁溶液取硫酸鋁2g溶于10l蒸餾水中，再加入核固紅0.g，置37水浴中1小時(shí),并隨時(shí)振搖,使溶解，過濾后使用。3.方法（1） 選髓粒豐富的骨髓片，用甲醇固定10分鐘。（2） 髓片上滴滿酸性亞鐵氰化鉀溶液，染色0分鐘。（3） 用蒸餾水沖洗后，用核固紅復(fù)染20分鐘。4結(jié)果判斷 幼紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)綠色顆粒為陽性。5. 正常參考值 正常:細(xì)胞內(nèi)鐵0%，細(xì)胞外鐵+.

21、DA:細(xì)胞內(nèi)鐵5，細(xì)胞外鐵陰性。6. 質(zhì)量保證（1） 需觀察外鐵時(shí)玻片最好作去鐵處理,取材涂片后應(yīng)盡量減少污染鐵，最好立即進(jìn)行染色。（2） 亞鐵氰化鉀溶液少量配制，如與鹽酸混合后出現(xiàn)藍(lán)色必須重配。（3） 酸性亞鐵氰化鉀溶液必須新鮮配制.（4） 選擇髓粒豐富的骨髓涂片。（5） 胞外鐵較規(guī)則,呈圓或橢圓,與細(xì)胞存在于同一平面，污染鐵與細(xì)胞不在同一平面。（6） 瑞氏染色后的骨髓片,用甲醇脫色后仍可作鐵染色。(7) 作陽性對照。7臨床意義（) 細(xì)胞內(nèi)、外鐵“”、吞噬細(xì)胞內(nèi)無貯存鐵，可診斷為IDA.（2） 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“”、吞噬細(xì)胞內(nèi)有貯存鐵，可診斷為ACD.（3） 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“/N”、紅

22、細(xì)胞形態(tài)小、低色素,提示可能為Hb病。（4) 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“/、環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞15%，可考慮為環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞性貧血(RA)。（5)DS、:細(xì)胞內(nèi)、外鐵均“”.（三)過氧化物酶染色法（POX）1.原理 細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶（roxida）能將底物的過氧化氫分解,產(chǎn)生新生態(tài)氧。后者將試劑中的聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍(lán),它是一種不穩(wěn)定的中間產(chǎn)物,無需酶的作用進(jìn)而變成棕色化合物沉淀于酶的所在部位。試劑(1）第一液聯(lián)苯胺 0.g30g/L亞硝基鐵氧化鈉飽和液 ml95%乙醇 加至10ml貯存于棕色瓶中，可保存一年。小瓶分裝備用.（）第二液(稀過氧化氫液，新鮮配制)過氧化氫 0。3ml蒸餾水 2ml方法(

23、1）于新鮮干燥血涂片或骨髓涂片上, 滴加第一液58滴，使蓋滿整個(gè)血膜，作用12分鐘。（2)滴加等量的第二液，混勻,染4分鐘。()勿傾去染液，直接用水沖洗。（4)干燥后再用瑞氏染液復(fù)染。4。結(jié)果 陰性:無藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒. 弱陽性:藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒小，分布較稀疏。 陽性:藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒略粗，分布較密集。強(qiáng)陽性：藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒粗大.5. 質(zhì)量保證（1) 聯(lián)苯胺配制在8%88的乙醇溶液中染色效果較好,勿用9095的乙醇，否則細(xì)胞表面蛋白質(zhì)很快凝固，妨礙試劑向內(nèi)滲入而作用減弱。(2) 過氧化氫需新鮮配制,其濃度與加入量勿隨意更改.6。臨床意義（1） 白血病類型：原始及幼稚細(xì)胞 陽性強(qiáng)：AM 陽性率

24、%:ANLL 弱陽性:MOL陽性率3:L（2)成熟中性粒細(xì)胞過氧化物酶變化（3） 活性：AL、LL、感染、AA等.活性：AML、MOL。（4） 惡組細(xì)胞：(-)二、血液生化試驗(yàn)（選做4學(xué)時(shí))掌握:Cbs試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn)、H電泳及HbF等試驗(yàn)的操作方法,結(jié)果判定,正常值及臨床意義。熟悉:oomb試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn)、H電泳及HbF等試驗(yàn)的原理。了解：oombs試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn)、電泳等試驗(yàn)的試劑配制方法。(一)抗人球蛋白試驗(yàn)（Coobs試驗(yàn),直接法）1原理 抗人球蛋白試驗(yàn)（Cmb試驗(yàn))是用于檢驗(yàn)不完全抗體的試驗(yàn)。用正常人血清、血漿或血漿球蛋白注射免疫家兔,使兔體內(nèi)產(chǎn)生抗人球蛋白抗體（溫反應(yīng)抗體）

25、.其方法有直接試驗(yàn)和間接試驗(yàn)兩種。直接試驗(yàn)的目的是檢查病人紅細(xì)胞表面的不完全抗體、即經(jīng)鹽水洗滌后的致敏紅細(xì)胞懸液中加入抗人球蛋白血清，觀察是否發(fā)生凝集，發(fā)生凝集者為oombs直接試驗(yàn)陽性。2。 試劑抗人球蛋白血清,生理鹽水。3. 方法（）取受檢者脫纖維紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次。然后配成2紅細(xì)胞生理鹽水懸液。（2） 將抗人球蛋白血清按1:2、1：4、:8、1:16的比例稀釋。（3) 取一塊白瓷板,將上述各稀釋度抗血清各滴，然后分別加紅細(xì)胞1滴,混勻，5分鐘后觀查結(jié)果。4 結(jié)果 不凝集為陰性，凝集為陽性.按效價(jià)報(bào)告。5。 正常參考值 正常紅細(xì)胞Cobs試驗(yàn)直接反應(yīng)呈陰性。6.質(zhì)量保證（1)標(biāo)本應(yīng)新

26、鮮。當(dāng)天進(jìn)行試驗(yàn)，否則反應(yīng)減弱甚至呈陰性。（2）紅細(xì)胞應(yīng)充分冼滌，除去吸附的血漿球蛋白，以免中和抗人球蛋白而出現(xiàn)假陰性.（3) 冷凝集素很高的血標(biāo)本,試驗(yàn)前應(yīng)保持在3，并用溫?zé)猁}水冼滌。（4) 抗凝劑對強(qiáng)抗體無明顯影響,但可能對弱抗體或補(bǔ)體有影響。因此以脫纖維蛋白血為好。.臨床意義(1）自身免疫性溶血性貧血時(shí)Coobs直接試驗(yàn)常為陽性。(2) 部分慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、傳染性單核增多癥、巨球蛋白血癥、g重鏈病、SLE、vn綜合征（T伴自免溶貧）可出現(xiàn)Cos直接試驗(yàn)陽性。（二）糖水試驗(yàn)1.原理 低離子濃度的庶糖溶液在37溫育條件下，可促進(jìn)補(bǔ)體成分與紅細(xì)胞膜的結(jié)合，使補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞形成小孔

27、，庶糖水溶液進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)引起紅細(xì)胞膜破裂，發(fā)生溶血現(xiàn)象。 2試劑100g/L蔗糖溶液，38L枸櫞酸鈉溶液。3。方法（1）取患者枸櫞酸鈉抗凝血05，放于4.5ml10g/L蔗糖溶液中。（）混合后置3水浴中分鐘.（3)低速離心，觀察上清液有無溶血.4結(jié)果陰性：無溶血；陽性：有溶血.。質(zhì)量保證器皿必須清潔干燥，以免溶血。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)作正常對照。.臨床意義() PN患者常呈陽性,AA-PH綜合征患者亦可陽性。（2）部分自身免疫性溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥患者可呈陽性。(3)健康人呈陰性反應(yīng)。(三)酸溶血試驗(yàn)(ms試驗(yàn))。原理 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH）病人的紅細(xì)胞由于膜有

28、缺陷，對補(bǔ)體溶血效應(yīng)的敏感性增加，在酸化的正常血清中（P666。）,經(jīng)37孵育,易破壞溶血。2試劑（）25o HC溶液。（2）8.5g/LnaCl溶液.3方法（1） 取患者血4ml于有小玻璃珠的三角燒瓶內(nèi)，輕搖使脫纖維，將此去纖維血用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次， 配成50紅細(xì)胞懸液。（2） 取患者血4ml（不抗凝）,待凝固后分離血清.() 按（1）、（2）方法取與患者同型或AB型正常對照的血制備紅細(xì)胞懸液和血清.(4） 取2支小試管，按下表操作。實(shí)驗(yàn)操作步驟反應(yīng)物 待測管 對照管健康人血清（m） 。 5患者50RBC懸液(） .02 健康人0懸液（m） 0.50.25olHCl（) 0.5 （5）

29、 兩管均加塞,置37水浴中1小時(shí).(6） 直接觀察或低速離心后觀察兩管有無溶血現(xiàn)象。4結(jié)果判斷待測管溶血、對照管無溶血為陽性；兩管均無溶血即為陰性。 質(zhì)量保證(1)本試驗(yàn)不用抗凝血，因抗凝劑會(huì)阻礙溶血,降低靈敏度。一般用脫纖維蛋白血或抽血后立即注入生理鹽水中洗滌。（2）一切用具要干燥，針頭要粗，紅細(xì)胞懸液要直接滴入液體，不要沿管壁流下，以免溶血。（3）正常血清要新鮮，以免補(bǔ)體失活，造成假陰性。(）血清酸化后試管用塞蓋好,避免因二氧化碳逸出降低了血清的酸度，以致溶血程度降低.6臨床意義 結(jié)果陽性主要見于PNH。（四)高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)（Hb-RT）1原理 高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)(methegob

30、in rectin test， Mb-RT）是用亞硝酸鈉使血液中的亞鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白,當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)的G6PD含量正常時(shí)，由磷酸戊糖代謝途徑生成的NDPH,可作為血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶，在遞氫體美藍(lán)的參與下,使高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白.如G6含量不足或缺乏時(shí)，則高鐵血紅蛋白還原速度減慢，甚至不能還原.通過測定高鐵血紅蛋白的還原速度來間接反應(yīng)G6PD活性。. 試劑：（1) 12。5g亞硝酸鈉葡萄糖溶液：亞硝酸鈉1。25g,葡萄糖5,加水至10ml，棕色瓶可保存一個(gè)月。（)0.004ol/美藍(lán)溶液:美藍(lán)15mg放乳缽中，加少量蒸餾水研磨后過濾，再加水至0ml，室溫可保存12個(gè)

31、月.（) 0。2M磷酸鹽緩沖液（PBS,pH7。）：N2HPO42295mg,KH2PO452。2m,加水至100m.3。 方法（1) 取靜脈血l,加入已有.3ml 38g/L枸櫞酸鈉和30g葡萄糖的抗凝管內(nèi).(）離心,使紅細(xì)胞與血漿之比為1：1(去掉多余的血漿)。（） 搖勻,取1.0ml全血，加亞硝酸鈉葡萄糖液和美藍(lán)溶液各0ul,顛倒混勻12次,使與空氣中的氧充分接觸。加塞,37水中浴孵育3小時(shí).剩余血未加試劑亦同時(shí)放入37水浴中孵育3小時(shí)。(4) 取出孵育后搖勻的全血0.1ml加入含1l 0。02B溶液的試管中,2in后于721分光光度計(jì)3n處比色，水調(diào)零，測其光密度為A。（5） 另取未加試劑的全血0。1m,同（）操作,測其光密度為B。再于此液中加亞硝酸鈉葡萄糖液滴，搖勻，放置5m后比色，測其光密度為。4. 計(jì)算 高鐵血紅蛋白還原率=()0%5. 正常參考值 高鐵血紅蛋白還原率5為正常，74%31為中間缺乏者(雜合子),30為顯著缺陷(半合子或純合子）。6。質(zhì)量保證（1） 紅細(xì)胞比積對結(jié)果有一定影響，比積30%時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率可明顯降低.故血漿與紅細(xì)胞之比應(yīng)嚴(yán)格控制在：(相當(dāng)于紅細(xì)胞比積5%45%）。(2） 抗凝劑以8g/L的枸櫞酸鈉或AD液為好。草酸鹽不適于本法.（3）血液保溫后必須充分混勻，再吸取，否則結(jié)果可能