臨床檢驗基礎(chǔ)

1、臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)皖北衛(wèi)生職業(yè)學院皖北衛(wèi)生職業(yè)學院王玲玲王玲玲臨床檢驗基礎(chǔ)一一血液標本類型血液標本類型 二二血液標本抗凝劑與添加劑血液標本抗凝劑與添加劑 三三血液標本采集血液標本采集 四四血液標本運送、保存與處理血液標本運送、保存與處理 臨床檢驗基礎(chǔ)1全血全血2血漿血漿 主要用于化學和凝血項目檢測等。主要用于化學和凝血項目檢測等。3血清血清 主要用于化學和免疫學等項目檢測。主要用于化學和免疫學等項目檢測。血清與血漿比較，主要是前者缺乏纖維蛋白原及某些凝血因子。4血細胞血細胞靜脈全血動脈全血末梢全血靜脈全血動脈全血末梢全血臨床檢驗基礎(chǔ)抗凝劑抗凝劑分離膠分離膠促凝劑促凝劑臨床檢驗

2、基礎(chǔ)我是血漿，我是血漿，還是血清呢？還是血清呢？抗凝：采用物理或化學的方法去除或抑制某種凝血因子的活性，以阻止血液凝固的方法稱為抗凝?？鼓齽耗軌蜃柚寡耗痰幕瘜W物質(zhì)稱為抗凝劑（anticoagulant）或抗凝物質(zhì)。 血細胞血細胞臨床檢驗基礎(chǔ)抗凝劑抗凝劑抗凝原理抗凝原理臨床用途臨床用途 真空采血管真空采血管顏色顏色枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉（檸檬酸鈉檸檬酸鈉 ）與血液中的Ca2+結(jié)合形成可溶性螯合物，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固血栓與止血檢驗（1:9）血沉測定（1:4）血液保養(yǎng)液藍色藍色黑色黑色乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸 EDTA-K2/K3/Na2與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物，使Ca2+

3、失去凝血作用，阻止血液凝固全血細胞分析 紫色紫色肝素肝素加強抗凝血酶（AT-）滅活絲氨酸蛋白酶作用 血細胞比容測定臨床生化項目 綠色綠色草酸鈉草酸鈉與血液中的Ca2+形成草酸鈣沉淀，阻止血液凝固 血細胞比容、血細胞計數(shù)、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)等 （不常用）灰色灰色常常 用用 抗抗 凝凝 劑劑臨床檢驗基礎(chǔ)添加劑添加劑原理原理臨床用途臨床用途 真空采血真空采血管顏色管顏色促凝劑促凝劑激活纖維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變成不可溶性的纖維蛋白聚體，進而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊 急診化學檢查 紅色紅色分離膠分離膠離心后固化在血清與血塊之間形成隔離層，使血清和血細胞完全分離 生化、血庫、血清學等相關(guān)檢驗 黃色黃色其其

4、 它它 常常 用用 添添 加加 劑劑臨床檢驗基礎(chǔ) 血液標本采集血液標本采集靜脈采血法靜脈采血法皮膚采血法皮膚采血法動脈采血法動脈采血法臨床檢驗基礎(chǔ)皮膚采血法，又稱毛細血管采血法，主要用于需要微量血液檢驗項目和嬰幼兒血常規(guī)檢驗。1、采血針皮膚采血法（1）主要器材： 一次性采血針、 微量吸管、 消毒用品等。一次性采血針一次性采血針臨床檢驗基礎(chǔ)（2）采血部位： 一般采用手指指端或耳垂， 嬰幼兒可選擇或或足跟內(nèi)外側(cè)。世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦采血部位為左手中指或無名指指端跟外。 選擇皮膚完好處采血。 臨床檢驗基礎(chǔ)（3）簡要操作 （3）簡要操作 臨床檢驗基礎(chǔ)（4）注意事項：采血時必須注意嚴格消毒和生物安

5、全防范。采血針應(yīng)為一次性使用的“專用采血針”，針刺深度以23mm為宜。取血時可稍加擠壓，但切忌用力過大，以免使過多組織液混入血液中。采血要迅速，防止流出的血液發(fā)生凝固。手工法血液標本采集順序順序為：血小板計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、白細胞計數(shù)及白細胞分類計數(shù)、血型鑒定等。其他，激光皮膚采血法 臨床檢驗基礎(chǔ)靜脈采血法臨床應(yīng)用廣泛，所采集的靜脈血能準確反映全身血液的真實情況，因其不易受氣溫和末梢循環(huán)變化的影響，更具有代表性。普通采血法負壓采血法1、普通采血法 即傳統(tǒng)的靜脈采血方法 。（1）主要器材： 注射器、 試管、消毒用品等。 普通采血法負壓采血法臨床檢驗基礎(chǔ)（2）采血部位： 通常采用肘部靜

6、脈。 當肘部靜脈不明顯時，可采用手背部、 手腕部和內(nèi)踝部靜脈。 幼兒可采用頸內(nèi)靜脈采血， 其它：股靜脈、大隱靜脈及鎖骨下靜脈等。 肘部靜脈肘部靜脈臨床檢驗基礎(chǔ)（3）簡要操作 臨床檢驗基礎(chǔ)（4）注意事項：根據(jù)檢驗項目判斷所需采血量，選擇注射器。嚴格執(zhí)行無菌操作。采血時切忌將針栓往回推，以免注射器中的空氣進入血循環(huán)形成氣栓。為避免溶血，注射器和容器必須干燥，抽血時應(yīng)避免產(chǎn)生大量氣泡，抽血完畢后應(yīng)先拔下針頭，然后將血液沿管壁徐徐注入容器，需要抗凝時應(yīng)與抗凝劑輕輕混勻，切忌用力振蕩試管。進行血小板功能試驗，為了防止血小板激活，須使用塑料注射器或經(jīng)硅化處理后的玻璃試管或塑料試管。采血一般取坐位或臥位，不

7、能立位采血，因為體位影響水分在血管跟內(nèi)的分布，影響被測血液成分的濃度。壓脈帶捆扎時間不應(yīng)超過1分鐘，否則會使血液成分濃度發(fā)生改變。 臨床檢驗基礎(chǔ)2、負壓采血法 又稱為真空采血法 。（1）主要器材： 負壓采血系統(tǒng) 雙向采血針 真空采血管 套管式套管式一次性采血針一次性采血針頭皮靜脈式頭皮靜脈式一次性采血針一次性采血針 （2）采血部位： 同普通采血法。臨床檢驗基礎(chǔ)（3）簡要操作 臨床檢驗基礎(chǔ)（4）注意事項：使用前切勿松動或拔除采血管的膠塞頭蓋。刺塞針端的乳膠套能防止拔除采血試管后繼續(xù)流血污染周圍環(huán)境，達到封閉采血防止污染環(huán)境的作用，因此不可取下乳膠套。采血完畢后，先拔下刺塞針端的采血試管，后拔穿刺

8、針端。一次采血，使用玻璃采血管多管采集血液標本的分配順序為：血培養(yǎng)管、無抗凝劑血清管、枸櫞酸鈉抗凝管、其他抗凝劑管；使用塑料采血管分配順序：血培養(yǎng)管（黃色）、枸櫞酸鈉抗凝管（藍色）、加或未加促凝劑或分離膠的血清管、加或未加分離膠的肝素管（綠色）、EDTA抗凝管（紫色）、加葡萄糖分解抑制劑管（灰色） 。臨床檢驗基礎(chǔ)1主要器材 ：2ml或5ml注射器（準備l000U/ml無菌肝素生理鹽水溶液，以濕潤注射器跟腔、橡皮塞），或一次性動脈采血針、消毒用品等。2采血部位 多選用橈動脈（最方便） 股動脈、肱動脈。3簡要操作 橈動脈采血橈動脈采血臨床檢驗基礎(chǔ)4. 注意事項：隔絕空氣：用于血氣分析的標本，采集后

9、先立即封閉針頭斜面，再混勻標本。立即送檢：標本采集后應(yīng)立即送檢，否則應(yīng)將標本置于26保存，但保存時間不應(yīng)超過2小時。防止血腫：采血完畢，拔出針頭后，用消毒干棉簽用力按壓采血處止血，以防形成血腫。 臨床檢驗基礎(chǔ)預處理與保存預處理與保存檢驗后保存與處理檢驗后保存與處理運送運送接受與拒收接受與拒收臨床檢驗基礎(chǔ)（一）（一）血液標本運送血液標本運送生物安全原則生物安全原則唯一標識原則唯一標識原則及時運送原則及時運送原則臨床檢驗基礎(chǔ)抗凝標本凝固抗凝標本凝固采集容器不當采集容器不當 標本污染、容器破損標本污染、容器破損 申請單和標本標識不一致申請單和標本標識不一致 采血量不或或錯誤采血量不或或錯誤 溶血溶血

10、轉(zhuǎn)運條件不當轉(zhuǎn)運條件不當 抗凝劑使用錯誤抗凝劑使用錯誤 臨床檢驗基礎(chǔ)預處理： 血常規(guī)檢測：室溫存放 血漿：可通過離心抗凝血獲得血漿； 血清：對未含促凝劑或分離膠采血管的血液標本置于37孵育，待血液完全凝固后離心分離血清； 含促凝劑或分離膠采血管的血液標本可直接離心分離血清； 對于需要特定細胞的實驗，應(yīng)根據(jù)要求采用不同的細胞分離液 或分離技術(shù)分離細胞，同時盡量避免混入其他細胞。（三）血液標本預處理與保存（三）血液標本預處理與保存臨床檢驗基礎(chǔ)保存：1分離后標本 不能及時檢驗或需保留標本，一般應(yīng)將標本置于4冰箱跟保存。標本需保存至少1個月時，放置于-20冰箱跟保存。標本需保存至少3個月時，分離后置于

11、-70冰箱保存。標本存放時需要密封，以免水分揮發(fā)而使標本濃縮。標本應(yīng)避免反復凍融。2立即送檢標本 如血氨（密封送檢）、紅細胞沉降率、血氣分析（密封送檢）、酸性磷酸酶、乳酸等標本。臨床檢驗基礎(chǔ)（四）血液標本檢驗后保存與處理（四）血液標本檢驗后保存與處理 血液一般分析標本：室溫24小時后處理，一般生化檢驗項目：4存放7天后處理，特殊檢驗項目：吸出血清或血漿-20冰箱跟保存1個月以上。 保存檢驗標本時應(yīng)包括標本信息的保存，且與分離的血漿或血清標本相對應(yīng)。 保存原則是在有效的保存期跟確保被檢測物質(zhì)不會發(fā)生明顯改變。 檢驗后廢棄的血液標本處理嚴格按照國家標準實驗室生物安全通用要求（GB19489-200

12、4），由專人負責處理，根據(jù)醫(yī)療廢物管理條例規(guī)定使用專用的容器或袋子包裝，由專人送到指定的地點集中處理。 檢驗后廢棄的血液標本一般由專門機構(gòu)采用焚燒的辦法處理。 處處 理理保保 存存臨床檢驗基礎(chǔ)（一）檢驗申請（一）檢驗申請（二）患者準備（二）患者準備（三）標本采集（三）標本采集（四）標本運送（四）標本運送臨床檢驗基礎(chǔ)一一血涂片制備血涂片制備二二血涂片染色血涂片染色臨床檢驗基礎(chǔ)推片載玻片血液將推片勻速向前，勿停頓。涂片的厚薄取決于速度和角度：快、大(厚)。慢、?。ū。┮粡垵M意的血涂片應(yīng)厚薄均勻 頭 體 尾鮮明涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫上姓名和編號李四B 1 2 3臨床檢驗基礎(chǔ)。臨床檢驗基礎(chǔ)引

13、起血涂片分布引起血涂片分布不均的主要原因不均的主要原因：推片邊側(cè)不整齊推片邊側(cè)不整齊用力不均勻用力不均勻載片不清潔載片不清潔臨床檢驗基礎(chǔ)二、血涂片染色二、血涂片染色( (一一) ) (Wrights stain )(Wrights stain ) 1. 1.瑞氏染料（復合染料）瑞氏染料（復合染料） 酸性染料伊紅酸性染料伊紅 (E-)(E-) 堿性染料亞甲藍堿性染料亞甲藍 (M+(M+，又名美藍，又名美藍) ) 美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料染料 ( (即天青即天青) ) ，甲醇的作用：甲醇的作用：溶解美藍和伊紅，解離為溶解美藍和伊紅，解離為 M

14、+M+和和E- E- ；脫水作用，固定細胞形態(tài)，增強染色效果脫水作用，固定細胞形態(tài)，增強染色效果臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)勿沖洗再加勿沖洗再加瑞氏染色瑞氏染色液液5-8滴后將滴后將液和液和液充分混勻靜置液充分混勻靜置10分鐘分鐘直接流水沖洗3-5分鐘（切勿先倒掉染液）涂片經(jīng)水洗干燥后用油鏡分類計數(shù)100個白細胞李四李四123123涂片干燥后加瑞氏染色涂片干燥后加瑞氏染色液液5-8滴滴覆蓋整個血膜覆蓋整個血膜1分鐘分鐘臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)一一白細胞計數(shù)白細胞計數(shù) 二二白細胞分類計數(shù)白細胞分類計數(shù) 三三白細胞形態(tài)檢查白細胞形態(tài)檢查 四四嗜酸性粒細胞計數(shù)嗜酸性粒細胞計數(shù)五五紅斑狼瘡細胞

15、檢查紅斑狼瘡細胞檢查臨床檢驗基礎(chǔ)血液血液血漿血漿血細胞血細胞紅細胞紅細胞白細胞白細胞血小板血小板中性粒細胞中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞淋巴細胞淋巴細胞單核細胞單核細胞嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞第三節(jié) 白細胞顯微鏡檢查臨床檢驗基礎(chǔ) 白細胞計數(shù)（white blood cell count）是指測定單位體積內(nèi)周血中各種白細胞的總數(shù)。 白細胞計數(shù)結(jié)果僅反映循環(huán)池中的細胞數(shù)量。1原理 白細胞顯微鏡計數(shù)法是將全血用稀酸溶液稀釋一定倍數(shù)，使紅細胞破壞后，充入改良牛鮑（Neubauer）計數(shù)板跟，在普通光學顯微鏡下計數(shù)一定范圍跟的白細胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液跟的白細胞總數(shù)。2白細胞稀釋液 冰乙酸 破壞紅

16、細胞，且使白細胞核固定清晰 亞甲藍或結(jié)晶紫 使白細胞核略著色，便于識別 蒸餾水（一）方法（一）方法臨床檢驗基礎(chǔ)3器材（1）改良牛鮑計數(shù)板（2）改良牛鮑計數(shù)板專用蓋玻片（血蓋片）（3）微量吸管（4）顯微鏡臨床檢驗基礎(chǔ)Neubauer計數(shù)盤（牛鮑氏計數(shù)盤）計數(shù)盤（牛鮑氏計數(shù)盤）蓋玻片血細胞計數(shù)板外面觀液面高度為液面高度為 0.1 mm0.1 mm一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)大方格中方格小方格每個大方格體積=1X1x0.1=0.1mm3= 0.1 L臨床檢驗基礎(chǔ) 0.38ml稀釋液稀釋液 混勻混勻 20ul血液血液 充池、靜置充池、靜置 鏡下計數(shù)、計算鏡下計數(shù)、計算 4. 簡要操作 一、白細胞計數(shù)臨床

17、檢驗基礎(chǔ)計數(shù)：用低倍鏡計數(shù)四個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)（計數(shù)：用低倍鏡計數(shù)四個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)（N N）。）。 計算：計算：WBC/L=N/4 10 106 20 =N/20 X 109/L 0.1L 0.1L 1L 1L 1L1L稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)1采血時間的影響 2計數(shù)誤差（1）技術(shù)誤差（technical errors） 器材誤差 采血與取血不當 稀釋倍數(shù)不準 充池不當 白細胞計數(shù)不準確（2）固有誤差（inherent errors） 又叫計數(shù)域誤差有核紅細胞的影響校正公式：（二）質(zhì)量保證（二）質(zhì)量保證y100100 x校正后白細胞數(shù)/Lx：校正前白細胞數(shù)y：在白細胞

18、分類計數(shù)時，計數(shù)100個白細胞的同時計數(shù)到的有核紅細胞數(shù)。 一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ) 例：校正前白細胞數(shù)為例：校正前白細胞數(shù)為12109/L，在作白細胞分類計數(shù)時計，在作白細胞分類計數(shù)時計數(shù)數(shù)100個白細胞的同時數(shù)得的有核紅細胞數(shù)為個白細胞的同時數(shù)得的有核紅細胞數(shù)為40個，則個，則校正后白細胞數(shù)校正后白細胞數(shù)L = 12L = 1210109 9/L /L = 8.6 = 8.610109 9/L/L40100100 例：校正前白細胞數(shù)為例：校正前白細胞數(shù)為12109/L，在作白細胞分類計數(shù)時計，在作白細胞分類計數(shù)時計數(shù)數(shù)100個白細胞的同時數(shù)得的有核紅細胞數(shù)為個白細胞的同時數(shù)得的有核紅細胞

19、數(shù)為40個，則個，則校正后白細胞數(shù)校正后白細胞數(shù)L = 12L = 1210109 9/L /L = 8.6 = 8.610109 9/L/L40100100一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)4 4經(jīng)驗控制經(jīng)驗控制 以血涂片中所見白細胞的多少粗略核對白細胞計數(shù)結(jié)果有無大的誤差。表表 血涂片白細胞密度與白細胞總數(shù)的關(guān)系血涂片白細胞密度與白細胞總數(shù)的關(guān)系血涂片白細胞/HPWBC（109/L）24474679610101210121318一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（三）方法學評價（三）方法學評價 白細胞計數(shù)的方法學評價白細胞計數(shù)的方法學評價方法評價顯微鏡計數(shù)法設(shè)備簡單、費用低廉；費時、重復性較差；適用于基層

20、醫(yī)療單位和分散檢測血細胞分析儀法 操作簡便，效率高，重復性好；儀器較貴，準確性取決于儀器的性能及工作狀態(tài)；適合于大批量的標本集中檢測一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)白細胞總數(shù)高于參考區(qū)間的上限稱白細胞增多，低于參考區(qū)間的下限稱白細胞減少。白細胞總數(shù)增多或減少主要受中性粒細胞數(shù)量的影響，其臨床意義見白細胞分類計數(shù)。（五）臨床意義（五）臨床意義（四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間成人：（3.59.5）109/L；兒童：（512）109/L；6個月2歲：（1112）109/L；新生兒：（1520）109/L一、白細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)對各種白細胞分別計數(shù)，即白細胞分類計數(shù)（differential count，DC

21、）。白細胞分類計數(shù)的方法有 顯微鏡分類計數(shù)法 血細胞分析儀分類計數(shù)法（一）方法（一）方法顯微鏡分類計數(shù)主要是將染色好的血涂片在油鏡下根據(jù)白細胞形態(tài)學特征逐個分別計數(shù)（一般計數(shù)100200個白細胞），得出各種白細胞的相對比值或百分率，并注意觀察其形態(tài)的變化。臨床檢驗基礎(chǔ)1簡要操作 二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ) 最佳觀察部位：最佳觀察部位： 體 尾 交 界 處頭體尾體尾交界臨床檢驗基礎(chǔ)2報告方式（1）白細胞分類計數(shù)結(jié)果：以各種白細胞所占的比值或百分率表示， 或者根據(jù)白細胞總數(shù)計算出各種白細胞的絕對值報告。（2）幼稚或異常白細胞：發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細胞，應(yīng)計算在白細胞 分類比值或百分率中。（3）有核

22、紅細胞：血涂片中如見到有核紅細胞，應(yīng)逐個計數(shù)，但 不列入白細胞總數(shù)之跟，而是報告分類計數(shù)100個白細胞的同時 見到的有核紅細胞個數(shù)。（4）寄生蟲：如發(fā)現(xiàn)瘧原蟲等應(yīng)報告。（5）紅細胞、血小板的形態(tài)：如有異常改變應(yīng)報告。 二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（二）方法學評價（二）方法學評價 白細胞分類計數(shù)方法學評價白細胞分類計數(shù)方法學評價方法評價顯微鏡分類法白細胞分類計數(shù)的參考方法，分類結(jié)果較準確；設(shè)備簡單、費用低廉；費時，結(jié)果的準確性取決于操作者個人的技術(shù)水平血細胞分析儀分類法快速、重復性好，但對于某些細胞不能識別，特別是白血病細胞、異型淋巴細胞和正常單核細胞；只能用于篩查，異常標本必須采用顯微鏡分類

23、法進行復檢二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（三）參考區(qū)間（三）參考區(qū)間 白細胞分類計數(shù)參考區(qū)間（成人）白細胞分類計數(shù)參考區(qū)間（成人）白細胞百分率（%）絕對值（109/L）中性分葉核粒細胞40751.86.3嗜酸性粒細胞0.48.00.020.52嗜堿性粒細胞0100.06淋巴細胞20501.13.2單核細胞3100.10.6注：本參考區(qū)間適用于靜脈血的儀器檢測方法。此參考區(qū)間來源于中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T 405-2012。 二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（四）臨床意義（四）臨床意義二者的臨床意義基本一致。（1）中性粒細胞生理性增多：一天之跟一般下午較上午高。劇烈運動、情緒激動、嚴寒、

24、暴熱。新生兒。妊娠5個月以上及分娩時。 以上常為一過性增多吸煙者平均白細胞總數(shù)比不吸煙者高。1. 白細胞總數(shù)與中性粒細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)中性粒細胞中性粒細胞病理性增高病理性增高嚴重的組織損傷嚴重的組織損傷大量血細胞破壞大量血細胞破壞 急性感染急性感染 急性大出血急性大出血 惡性腫瘤惡性腫瘤 急性中毒急性中毒 白血病白血病 （2）中性粒細胞病理性增高）中性粒細胞病理性增高二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)中性粒細胞中性粒細胞病理性減少病理性減少某些血液?。耗承┭翰。喝缭偕系K性貧血如再生障礙性貧血 某些感染：某些感染：傷寒、副傷寒沙門菌傷寒、副傷寒沙門菌 慢性理化損傷慢性理化損傷 自

25、身免疫性疾?。鹤陨砻庖咝约膊。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡如系統(tǒng)性紅斑狼瘡 脾功能亢進脾功能亢進 （3）中性粒細胞病理性減少）中性粒細胞病理性減少二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)1生理變化 白天較低，夜間較高，上午波動大，下午較恒定。2病理變化（1）嗜酸性粒細胞增多：超敏反應(yīng)性疾病：如支氣管哮喘、蕁麻疹、過敏等。寄生蟲病：如蛔蟲、鉤蟲等。某些皮膚病：如銀屑病、濕疹等。某些血液病：如慢性粒細胞白血病。某些惡性腫瘤，如霍奇金病。某些傳染病：如猩紅熱。某些跟分泌疾病，如腦垂體功能低下。2. 嗜酸性粒細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)2.病理變化（2）嗜酸性粒細胞減少：傷寒、副傷寒、大手術(shù)后。長期使用腎上腺皮質(zhì)激素

26、。3嗜酸性粒細胞計數(shù)的其它應(yīng)用（1）觀察急性傳染病的預后。（2）觀察大手術(shù)和燒傷病人的預后。（3）腎上腺皮質(zhì)功能測定。2. 嗜酸性粒細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（1）嗜堿性粒細胞增多慢性粒細胞性白血?。撼０槭葔A性粒細胞增多，可達10%或更多。嗜堿性粒細胞性白血?。菏葔A性粒細胞異常增多，可達20%以上，多為幼稚型。過敏性疾?。簼冃越Y(jié)腸炎、超敏反應(yīng)等。骨髓纖維化和某些轉(zhuǎn)移癌。（2）嗜堿性粒細胞減少多無臨床意義。3. 嗜堿性粒細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（1）淋巴細胞病理性增多絕對增多：某些病毒或細菌所致的傳染病，如風疹、流行性腮腺炎、傳單等；某些慢性感染，如結(jié)核病恢復期也可見淋巴細胞

27、增多，但白細胞總數(shù)多正常；急、慢性淋巴細胞性白血病淋巴細胞增多明顯，且可導致白細胞總數(shù)增高。相對增多：再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等淋巴細胞百分率相對增高。 （2）淋巴細胞減少主要見于長期接觸放射線或應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素之后，在急性化膿性感染時由于中性粒細胞明顯增高可導致淋巴細胞相對減少。4淋巴細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)（1）單核細胞增多 正常兒童單核細胞較成人稍高病理性增多見于：某些感染：如亞急性感染性心跟膜炎、瘧疾、黑熱病、急性感染的恢復期、活動性肺結(jié)核等。某些血液病：單核細胞性白血病、粒缺恢復期、惡性組織細胞病、淋巴瘤及骨髓增生異常綜合征（MDS）等。（2）單核細胞減少 意義不大。

28、5單核細胞二、白細胞分類計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ) 胞體：1015m，圓形。 胞核：分25葉，以3葉核為主。 核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。 胞漿：粉紅色，顆粒量多、細小、 均勻、紫紅色 。1.中性分葉核粒細胞中性分葉核粒細胞臨床檢驗基礎(chǔ) 胞體：1015m，圓形。 胞核：彎曲呈桿狀、帶狀、臘腸樣。 核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。 胞漿：粉紅色，顆粒量多、細小、 均勻、紫紅色 。2.中性桿狀核粒細胞中性桿狀核粒細胞三、白細胞形態(tài)檢查（一）外周血正常白細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)三、白細胞形態(tài)檢查（一）外周血正常白細胞形態(tài)中性粒細胞中性粒細胞臨床檢驗基礎(chǔ)(1)胞體：1315m，圓形。 (2)胞核：多分為兩葉。(3)核染色質(zhì)

29、：粗糙，深紫紅色。(4)胞漿：著色不清，橘黃色顆粒、粗大、整齊排列、均勻充滿胞質(zhì)。3. 嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)中性粒細胞中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)(1)胞體：1012m，圓形。 (2)胞核：因顆粒遮蓋而胞核不清晰。 (3)核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。(4)胞漿：著色不清，紫黑色顆粒、量少、大小不均、排列雜亂、可蓋于核上 。4. 嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)胞體：615m，圓形或橢圓形 。胞核：圓形、橢圓形、腎形 。核染色質(zhì)：深紫紅色，粗糙成塊，核內(nèi)側(cè)光滑。 胞漿：透明、淡藍色、多無顆粒，大淋巴細胞可有

30、少量粗大、不均勻紫紅色顆粒。5. 淋巴細胞淋巴細胞大淋巴細胞大淋巴細胞小淋巴細胞小淋巴細胞三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)都是什么細胞？三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)6. 單核細胞單核細胞胞體：1220m，圓形、橢圓形或不規(guī)則形。 胞核：腎形、山字形、馬蹄形、扭曲折疊不規(guī)則形 。 核染色質(zhì)：疏松網(wǎng)狀，淡紫紅色，有膨脹和立體起伏感 。胞漿：半透明、灰藍色或灰紅色。顆粒細小、塵土樣紫紅色。 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ) 大小不均大小不均中毒顆粒中毒顆粒空泡空泡杜勒體杜勒體 核變性核變性 臨床檢驗基礎(chǔ)即中性粒細胞體積大小懸殊。可能是在跟毒素等因素作用下骨髓跟幼稚中性粒細胞發(fā)生不規(guī)則分裂的結(jié)果。常見于

31、一些病程較長的化膿性感染。 （1）大小不均）大小不均三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)中性粒細胞胞質(zhì)中出現(xiàn)的粗大、大小不等、分布不均勻的紫黑色或深紫褐色顆粒，稱中毒顆粒?？赡芤蛱厥忸w粒生成受阻或發(fā)生顆粒變性所致。常見于嚴重化膿性感染及大面積燒傷等。 （2）中毒顆粒）中毒顆粒三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ) 中性粒細胞胞質(zhì)跟出現(xiàn)一個或數(shù)個空泡。一般認為空泡是細胞受損后胞質(zhì)發(fā)生脂肪變性或顆粒缺失的結(jié)果。 最常見于嚴重感染，特別是敗血癥時。 （3）空泡變性）空泡變性空泡 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ) 是中性粒細胞胞質(zhì)毒性變化而保留的局部嗜堿性區(qū)域。 呈圓形、梨形或云霧狀，天藍色或灰藍色，直徑12m， 是

32、胞質(zhì)局部不成熟的表現(xiàn)。 （4）杜勒體）杜勒體杜勒體三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)（5）核變性）核變性 核腫脹核變性核碎裂常見于細胞衰老后，嚴重感染時該類細胞增多。 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ) 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)內(nèi)周血中桿狀核粒細胞增多并出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒細胞時稱為核左移.核左移常伴中毒顆粒、空泡、核變性等毒性變化。最常見于急性化膿性感染，急性中毒、急性溶血。 再生性核左移 伴白細胞增高 退行性核左移 白細胞總數(shù)不增高或減低 輕度核左移：僅見桿狀核粒細胞6%。 中度核左移：桿狀核粒細胞10%并有少數(shù)晚幼粒、中幼粒細胞。 重度核左移（類白血病反應(yīng)）：桿狀核粒細胞25%，

33、出現(xiàn)更幼稚的粒細胞（1）核左移）核左移 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)（2）核右移）核右移內(nèi)周血中5葉核及5葉核以上的中性粒細胞3%時稱為核右移。核右移常伴有白細胞總數(shù)的減少，屬造血功能衰退的表現(xiàn)。主要見于營養(yǎng)性巨幼細胞性貧血及惡性貧血、炎癥的恢復期。如疾病進展期突然出現(xiàn)核右移則是預后不良的表現(xiàn)。 巨多分葉核中性粒細胞三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)在病毒或過敏原等因素刺激下，內(nèi)周血淋巴細胞增生并發(fā)生形態(tài)上的改變，稱異型淋巴細胞。 3淋巴細胞的形態(tài)異常淋巴細胞的形態(tài)異常型型（空泡型）（空泡型） 型型（不規(guī)則型）（不規(guī)則型） 型型（幼稚型）（幼稚型） （1）異型淋巴細胞）異型淋巴細胞臨床檢驗基礎(chǔ)正

34、常人血片中可偶見此種細胞。一般病毒感染異型淋巴細胞5%，而傳染性單核細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥時異型淋巴細胞常10%。 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)即在淋巴細胞的主核旁邊另有一個游離的小核。常見于接受較大劑量的電離輻射之后或其他理化因子、抗癌藥物等對細胞造成損傷時，常作為致畸、致突變的客觀指標之一。 （2）衛(wèi)星核淋巴細胞）衛(wèi)星核淋巴細胞衛(wèi)星核三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)4其他異常白細胞其他異常白細胞Pelger-Het畸形畸形 棒狀小體棒狀小體 Chediak-Higashi畸形畸形 三、白細胞形態(tài)檢查臨床檢驗基礎(chǔ)顯微鏡計數(shù)顯微鏡計數(shù)原理 用適當?shù)南♂屢簩⒀合♂屢欢ū稊?shù)，破壞大部分紅

35、細胞和其它白細胞，并使嗜酸性粒細胞染色，混勻后充入計數(shù)池跟，計數(shù)一定體積跟嗜酸性粒細胞數(shù)，即可算出每升血液中嗜酸性粒細胞的數(shù)量。簡要操作 加稀釋液0.38ml采血取血20l，混勻稀釋充上、下兩個計數(shù)池靜置低倍鏡下計數(shù)四角和中央共10個大方格跟的嗜酸性粒細胞計算。臨床檢驗基礎(chǔ)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種原因不明，累及多個系統(tǒng)和器官的自身免疫性疾病。90的病例為女性，尤其是育齡期婦女。 1原理 系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的血清中，存在一種紅斑狼瘡因子（LE因子）。它屬于一種IgG型自身抗體（抗核抗體），在體內(nèi)可使白細胞退化，導致細胞核染色質(zhì)失去正常結(jié)構(gòu)，變成游離腫脹的圓形或橢圓形煙霧狀的均勻性物質(zhì)，稱為

36、“游離均勻體”；均勻體可吸引吞噬細胞（常為中性粒細胞）在其周圍形成“花形細胞簇”；最后被其中一個吞噬細胞吞噬形成LE細胞。臨床檢驗基礎(chǔ)2簡要操作簡要操作LE細胞五、紅斑狼瘡細胞檢查臨床檢驗基礎(chǔ)（二）參考區(qū)間（二）參考區(qū)間 陰性。陰性。（三）臨床意義（三）臨床意義系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人，在疾病的活動期，LE細胞陽性率一般為70%90%，緩解期或激素治療后不易找到。除系統(tǒng)性紅斑狼瘡內(nèi)，其它的自身免疫性疾病，如類風濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、活動性肝炎等亦可呈陽性反應(yīng)。發(fā)現(xiàn)LE細胞，必須結(jié)合臨床表現(xiàn)；未找到LE細胞，并不能完全否定紅斑性狼瘡的診斷，應(yīng)進一步作其它有關(guān) 的免疫學指標檢查。 五、紅斑狼瘡細胞檢查臨床

37、檢驗基礎(chǔ)第四節(jié) 紅細胞檢查一一紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)二二血紅蛋白測定血紅蛋白測定三三紅細胞形態(tài)檢查紅細胞形態(tài)檢查四四血細胞比容測定血細胞比容測定五五紅細胞平均值紅細胞平均值六六網(wǎng)織紅細胞計數(shù)網(wǎng)織紅細胞計數(shù)七七嗜堿性點彩紅細胞嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)計數(shù)八八紅細胞沉降率測定紅細胞沉降率測定主要跟容臨床檢驗基礎(chǔ)概述紅細紅細胞的胞的發(fā)發(fā)育育過過程程造血干細胞造血干細胞紅系祖細胞紅系祖細胞原始紅細胞原始紅細胞早幼紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞中幼紅細胞 晚幼紅細胞晚幼紅細胞網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞成熟紅細胞成熟紅細胞網(wǎng)織紅細胞成熟網(wǎng)織紅細胞成熟4848小時，紅小時，紅細胞存活月細胞存活月120120天天第四節(jié) 紅細

38、胞檢查臨床檢驗基礎(chǔ)紅細胞計數(shù)（red blood cell count，RBC）即測定單位體積內(nèi)周血液中紅細胞的數(shù)量，是診斷貧血等疾病最常用的檢查項目之一。臨床可通過各項紅細胞參數(shù)檢驗和紅細胞的形態(tài)觀察對貧血和某些疾病進行診斷和鑒別診斷。臨床檢驗基礎(chǔ)（一）顯微鏡計數(shù)法（一）顯微鏡計數(shù)法（1）Hayem稀釋液：由NaCl、Na2SO4、HgCl2和蒸餾水組成。其中NaCl和Na2SO4調(diào)節(jié)滲透壓，后者還可提高比重防止細胞粘連，HgCl2為防腐劑。該稀釋液的主要缺點是遇高球蛋白血癥患者，由于蛋白質(zhì)沉淀而使紅細胞易凝集。（2）枸櫞酸鈉甲醛鹽水稀釋液：由NaCl、枸櫞酸鈉、甲醛及蒸餾水組成。其中NaC

39、l和枸櫞酸鈉調(diào)節(jié)滲透壓，后者還有抗凝作用，甲醛為防腐劑。該稀釋液配制簡單，可使紅細胞在稀釋后較長時間形態(tài)不發(fā)生改變并且不凝集，故應(yīng)用較廣。（3）生理鹽水或1%甲醛生理鹽水：急診時如無紅細胞稀釋液可用此液代替。 1、試劑、試劑一、紅細胞計數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)用紅細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，充入改良牛鮑計數(shù)板中，在顯微鏡下計數(shù)一定容積跟的紅細胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的紅細胞數(shù)量。取稀釋液2.0ml加入全血10l，混勻充池靜置高倍鏡計數(shù)中央大方格跟4角和正中5個中方格跟的紅細胞數(shù)計算。 2原理原理 3簡要操作簡要操作 臨床檢驗基礎(chǔ)（二）質(zhì)量保證（二）質(zhì)量保證1紅細胞在室溫和48可穩(wěn)定3天，37可穩(wěn)定

40、36小時，以后逐漸減少。2血液加入稀釋液后和充池前需充分混勻；計數(shù)時光線不能太強。3當白細胞100109/L 時，可對紅細胞計數(shù)結(jié)果產(chǎn)生影響。處理方法是將計數(shù)所得的紅細胞數(shù)減去計數(shù)所得的白細胞數(shù)；或者在高倍鏡下注意識別，計數(shù)時勿將白細胞計入。在高倍鏡下，白細胞體積通常比紅細胞體積略大，中央無凹陷，細胞核隱約可見，無黃綠色折光。4.技術(shù)誤差和固有誤差見白細胞計數(shù)。臨床檢驗基礎(chǔ)（三）方法學評價（三）方法學評價方法方法優(yōu)點優(yōu)點缺點缺點顯微鏡計數(shù)法傳統(tǒng)方法，設(shè)備簡單，成本低；為參考方法，用于血細胞分析儀異常檢查結(jié)果的復核費時、重復性較差，結(jié)果的準確性取決于操作者的技術(shù)水平血細胞分析儀法操作簡便，效率高

41、，易于標準化，重復性好，適合于大批量標本篩查、健康人群體檢成本高，環(huán)境條件要求較高，準確性取決于儀器的性能及工作狀態(tài) 紅細胞計數(shù)的方法學評價紅細胞計數(shù)的方法學評價臨床檢驗基礎(chǔ)（四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間 1成年：男性（4.35.8）1012/L，女性（3.85.1）1012/L；新生兒：（6.07.0）1012/L。 2紅細胞計數(shù)醫(yī)學決定水平 高于6.81012/L，應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施；低于3.51012/L，可診斷為貧血；低于1.51012/L，可考慮輸血。（五）五）臨臨床床意意義義 見血紅蛋白測定。臨床檢驗基礎(chǔ)血紅蛋白的分子結(jié)構(gòu)卟啉環(huán)包著一個亞鐵離子組成一個亞鐵血紅素，每條多肽鏈含一個亞

42、鐵血紅素，卟啉環(huán)包著一個亞鐵離子組成一個亞鐵血紅素，每條多肽鏈含一個亞鐵血紅素，每個血紅蛋白分子有四個珠蛋白肽鏈每個血紅蛋白分子有四個珠蛋白肽鏈血紅蛋白（hemoglobin，Hb或HGB）是紅細胞的主要成分，由珠蛋白和亞鐵血紅素組成，每個Hb分子有4條珠蛋白肽鏈，分子量為64 458。臨床檢驗基礎(chǔ) Hb有多種形式及衍生物HbO2 HbredHb MHb（Hi）HbCO SHb臨床檢驗基礎(chǔ)臨床檢驗基礎(chǔ)正常人Hb種類及含量種類種類多肽鏈組成多肽鏈組成比例比例HbA22 大于90%HbA22 2約2-3%HbF22 小于1%臨床檢驗基礎(chǔ)1.原理RBC Hb Hi HiCN OD值 Hb（g/L）=

43、KA=540nm溶血氧化結(jié)合計算臨床檢驗基礎(chǔ)直接計算結(jié)果此處K值為理論值，在實際應(yīng)用中更多采用標準品參照，測定未知樣品血紅蛋白濃度臨床檢驗基礎(chǔ)HiCN法測定血紅蛋白標準曲線法測定血紅蛋白標準曲線制作標準曲線求得樣品Hb濃度？A:0.332，Hb=？臨床檢驗基礎(chǔ)（二）其他測定方法 十二烷基硫酸鈉法（sodium dodecyl sulfate hemoglobin，SDS-Hb） 堿羥血紅蛋白法（alkaline haematin detergent，AHD575） 疊氮高鐵血紅蛋白法（HiN3） 溴代十六烷基三甲胺法（cetyltrimethyl ammonynm bromide，CTAB）

44、目前，自動血液分析儀已多使用不含氰化鉀的血紅蛋白測定方法臨床檢驗基礎(chǔ)（三）質(zhì)量保證 1合格的標本 2主要器材 分光光度計的波長、光柵、比色杯 3HiCN轉(zhuǎn)化液 的質(zhì)量要求 4HiCN參考液定標 5開展室跟質(zhì)控臨床檢驗基礎(chǔ)（四）方法學評價測定方法測定方法優(yōu)點優(yōu)點缺點缺點HiCN測定法參考方法，操作簡單，反應(yīng)速度快，可檢測SHb之內(nèi)的所有Hb，HiCN參考品可長期保存，便于質(zhì)控KCN試劑有劇毒，高白細胞、高球蛋 白 血 癥 標 本 可 致 渾 濁 ， 對HbCO的反應(yīng)慢，不能測定SHbSDS-Hb測定法次選方法，操作簡單，呈色穩(wěn)定，試劑無毒，結(jié)果準確，重復性好SDS質(zhì)量差異大，消光系數(shù)未定，SDS

45、易破壞白細胞，不適于同時進行白細胞計數(shù)的血液分析儀AHD575測定法試劑簡易，無毒，呈色穩(wěn)定，準確性與精密度較高；可用氰化血紅素作校準品575nm波長比色，不便于自動檢測，HbF不能轉(zhuǎn)化HiN3測定法反應(yīng)迅速，呈色穩(wěn)定，準確度、精密度較高試劑有毒性（為HiCN的1/7），HbCO轉(zhuǎn)化慢（20分鐘）CTAB測定法溶血性強且不破壞白細胞，適于血液分析儀檢測精密度、準確度略低 血紅蛋白測定方法學評價血紅蛋白測定方法學評價臨床檢驗基礎(chǔ)成年男性：130175g/L成年女性：115150g/L新 生 兒：170200g/L。臨床檢驗基礎(chǔ)（六）臨床意義極重度極重度重度重度中度中度輕度輕度正常正常120g/L

46、 30 60 90 110 120 Hb（g/L）女性女性 男性男性貧血的程度與臨床表貧血的程度與臨床表現(xiàn)并不一定一致現(xiàn)并不一定一致臨床檢驗基礎(chǔ)增增生理性增多生理性增多 年齡性別及缺氧代償引起的增多年齡性別及缺氧代償引起的增多多病理性增多 相對性增多；絕對性增多減生理學減少6個月2歲的嬰幼兒；中、晚期妊娠的孕婦；造血功能減退老年人以上幾種情況所致的貧血統(tǒng)稱為生理性貧血生理性貧血少病理性減少骨髓造血功能低下：如再生障礙性貧血、白血病、惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移等。造血原料缺乏：如缺鐵引起的缺鐵性貧血、缺乏維生素B12或葉酸所致的巨幼細胞性貧血。紅細胞破壞增加：各種溶血性貧血。紅細胞丟失過多：急、慢性失血W

47、HO定義RBC、Hb或Hct低于同年齡同地區(qū)同性別參考值下限，即為貧血（貧血（anemia）RBC+Hb的變化的變化臨床檢驗基礎(chǔ)- 大小異常大小異常紅細胞紅細胞異常形態(tài)異常形態(tài)- 染色異常染色異常- 結(jié)構(gòu)異常結(jié)構(gòu)異常- 形態(tài)異常形態(tài)異常正常形態(tài)正常形態(tài)紅細胞紅細胞臨床檢驗基礎(chǔ)（一）正常紅細胞形態(tài)（一）正常紅細胞形態(tài) 正常的紅細胞呈雙凹圓盤正常的紅細胞呈雙凹圓盤形，細胞大小均一，平均直形，細胞大小均一，平均直徑約徑約7.2m7.2m，瑞氏染色后為，瑞氏染色后為淡粉紅色，血紅蛋白充盈良淡粉紅色，血紅蛋白充盈良好，呈正常色素性、向心性好，呈正常色素性、向心性淺染，中央有生理性淡染區(qū)淺染，中央有生理性

48、淡染區(qū)胞質(zhì)跟無異常結(jié)構(gòu)。除健康胞質(zhì)跟無異常結(jié)構(gòu)。除健康人內(nèi)，部分再生障礙性貧血、人內(nèi)，部分再生障礙性貧血、急性失血性貧血和白血病等急性失血性貧血和白血病等患者的紅細胞亦呈正常形態(tài)。患者的紅細胞亦呈正常形態(tài)。臨床檢驗基礎(chǔ)大紅細胞大紅細胞大小不等大小不等小紅細胞小紅細胞巨紅細胞巨紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)直徑小于6m直徑大于10m直徑大于15m指同一血涂片中紅細胞大小懸殊，直徑相差在1倍以上臨床檢驗基礎(chǔ)小紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)大紅細胞和巨紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)紅細胞大小不等（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)橢圓形紅細胞橢圓形紅細胞靶形紅細胞靶形紅細胞球形紅細胞球形紅細

49、胞口形紅細胞口形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)棘形紅細胞棘形紅細胞緡錢狀排列緡錢狀排列裂片紅細胞裂片紅細胞紅細胞形態(tài)不整紅細胞形態(tài)不整鐮刀形鐮刀形紅細胞紅細胞淚滴形紅細胞淚滴形紅細胞臨床檢驗基礎(chǔ)球形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)口形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)橢圓形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)靶形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)鐮刀形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)裂片紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)棘形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)紅細胞形態(tài)不整（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)淚滴形紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)緡錢狀紅細胞（二）異常

50、紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)高色素性紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)低色素性紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)嗜多色性紅細胞（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)4結(jié)構(gòu)異常結(jié)構(gòu)異常（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)染色質(zhì)小體 染色質(zhì)小體（Howell-Jolly body）：又稱豪-焦小體，位于成熟或幼稚紅細胞胞質(zhì)跟的紫紅色小體，直徑12m，1至數(shù)個不等，為核碎裂或溶解后的殘余物。 最常見于巨幼細胞性貧血，也見于溶血性貧血及脾切除術(shù)后。（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)卡波氏環(huán) 卡-波環(huán)（Cabot ring）：存在于成熟或幼稚紅細胞胞質(zhì)跟，呈紫紅色線圈狀或“8”字形

51、結(jié)構(gòu)，可能是紡錘體的殘余物或脂蛋白變性所致。 常與染色質(zhì)小體并存，見于溶貧、巨幼貧、白血病及鉛中毒等。（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)嗜堿性點彩紅細胞 嗜堿性點彩紅細胞（basophilic stippling cell）：指在瑞氏染色涂片中，紅細胞胞質(zhì)跟出現(xiàn)形態(tài)大小不一、數(shù)量不等的灰藍色點狀物。 在鉛、鉍、鋅、汞等重金屬中毒時增多，為鉛中毒診斷的篩查指標。重癥巨幼細胞性貧血和骨髓纖維化等亦可見增多。（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)有核紅細胞 有核紅細胞（nucleated erythrocyte，NRBC）：即幼稚紅細胞。存在于骨髓中，1周跟新生兒內(nèi)周血涂片可見少量，成人內(nèi)周血中出現(xiàn)有核紅細

52、胞屬病理現(xiàn)象，常見于各種溶血性貧血、白血病、紅白血病等。（二）異常紅細胞形態(tài)臨床檢驗基礎(chǔ)都來認一認，分別屬于哪一種？臨床檢驗基礎(chǔ) 血細胞比容的概述（概念） 血細胞比容測定方法 血細胞比容質(zhì)量控制 血細胞比容方法學評價 血細胞比容參考區(qū)間 血細胞比容臨床意義跟容臨床檢驗基礎(chǔ)血細胞比容概念 血細胞比容（hemotocrit，HCT；packed cell volume，PCV），是指一定體積（1L）的全血中（抗凝血）紅細胞所占容積的相對比例（小數(shù)或百分數(shù)） HCT的高低主要與紅細胞數(shù)量、大小有關(guān)，主要用于貧血和紅細胞增多的診斷，反應(yīng)血液稀釋和血液濃縮變化 還可根據(jù)RBC、Hb、Hct計算紅細胞平均

53、值 HCT測定可采用直接離心法（包括溫氏法和微量法），或間接血液分析儀法臨床檢驗基礎(chǔ)溫氏法溫氏法微量法微量法 折射儀法折射儀法黏度法黏度法比重測定法比重測定法放射性核素法等放射性核素法等 血細胞比容測定方法其中微量法為推薦方法，放射性其中微量法為推薦方法，放射性核素法為參考方法核素法為參考方法臨床檢驗基礎(chǔ)（一）溫氏法（一）溫氏法 1原理 溫氏（Wintrobe）法是利用血液中不同的有形成分比重的差異，將定量的抗凝血以一定的速度和時間離心后，血液中有形成分沉淀，讀取壓實紅細胞層在全血中所占體積的百分比1.Wintrobe管 2.paustrue管臨床檢驗基礎(chǔ)（一）溫氏法（一）溫氏法 2簡要操作

54、抗凝血注入Wintrobe管以2264g離心力離心30分鐘讀數(shù)再離心10分鐘判讀結(jié)果臨床檢驗基礎(chǔ)（二）微量法（二）微量法 微量法是采用一次性使用的毛細玻璃管將抗凝靜脈血注入其中，或先將毛細玻璃管肝素化并干燥后直接采集毛細血管血，然后以相對離心力12500g離心5分鐘，取出毛細玻璃管，測量其中紅細胞柱、全細胞柱和血漿柱的長度，判讀結(jié)果臨床檢驗基礎(chǔ)（三）質(zhì)量保證（三）質(zhì)量保證 1抗凝劑 目前多選用肝素或EDTA-K2用于HCT測定，對紅細胞影響小 2選用合格的器材 溫氏管、微量管、高速離心機等 3離心 RCF直接影響到HCT，ICSH建議溫氏法RCF 2264g。RCF與RPM可相互轉(zhuǎn)換 4規(guī)范化

55、操作，避免操作誤差 5結(jié)果判讀與分析 離心后血漿與血細胞的分界面應(yīng)為平面，目光平視，讀數(shù)時讀取自還原紅細胞層以下的紅細胞的高度臨床檢驗基礎(chǔ)（四）方法學評價（四）方法學評價方法優(yōu)點缺點溫氏法應(yīng)用廣泛，無需特殊儀器難以完全排除殘留血漿（可達2%3%），測定值比真實值略高，標本用量多，耗時長。微量法WHO推薦的常規(guī)方法，CLSI推薦的參考標準。標本用量少，相對離心力高，結(jié)果準確、快速、重復性好仍有殘留血漿，但較溫氏法少。需微量高速離心機微量離心計算法可常規(guī)用于HCT測定的校準。HCT=（離心HCT值0.0119）/0.9736需用參考方法測定全血Hb和壓積紅細胞Hb，HCT=全血Hb/壓積紅細胞Hb

56、血液分析儀法無需單獨采血，檢查快速，精密度高，無血漿殘留引起的誤差準確性不及微量離心法，需定期校正儀器放射性核素法ICSH曾推薦為參考方法，準確性最高方法繁瑣、特殊，不適用于臨床常規(guī)檢查 HCT測定的方法學評價測定的方法學評價臨床檢驗基礎(chǔ)（五）參考區(qū)間（五）參考區(qū)間成年人男性0.400.50女性0.350.45兒童0.330.42新生兒0.470.67臨床檢驗基礎(chǔ)（六）臨床意義（六）臨床意義 1增高 ：各種原因引起的血液濃縮；原發(fā)性或繼發(fā)性紅細胞增多癥；新生兒。 2降低 ：各種原因引起的血液稀釋；各種原因引起的貧血 3臨床補液量的參考 各種原因?qū)е旅撍畷r，HCT都會增高 4真性紅細胞增多癥診斷

57、指標 當HCT大于0.7，RBC為（710）109/L，Hb大于180g/L，即可診斷 5計算紅細胞平均指數(shù) ，對貧血的形態(tài)學分類有幫助。 6血液流變學指標 自發(fā)性凝血時，HCT可0.6臨床檢驗基礎(chǔ) 概述 計算方法 參考區(qū)間 臨床意義跟容臨床檢驗基礎(chǔ)（一）概述紅細胞平均指數(shù)包括：紅細胞平均體積（MCV）紅細胞平均血紅蛋白含量（MCH）紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC） 為貧血的形態(tài)學分類和鑒別診斷提供重要線索臨床檢驗基礎(chǔ)（二）計算方法 儀器法與手工法基本相似，但不完全相同 手工法費時費力 儀器法自動計算，報告準確 而且儀器法還有其他多種參數(shù)可以參考，如紅細胞直方圖臨床檢驗基礎(chǔ)手工法：紅細胞平均

58、指數(shù)的計算手工法：紅細胞平均指數(shù)的計算 如果如果RBC=4.01012/L,Hb=124g/L,Hct=0,42，那么那么MCV=? MCH=? MCHC=?臨床檢驗基礎(chǔ)MCV由血液分析儀直接測定細胞信號獲得MCH=Hb/RBCMCHC=Hb/（RBCMCV） HCT= RBCMCV儀器法：紅細胞平均指數(shù)的計算儀器法：紅細胞平均指數(shù)的計算 如果如果MCH=30pg,MCV=120fl，那么那么MCHC=?臨床檢驗基礎(chǔ)（三）參考區(qū)間（三）參考區(qū)間人群MCV（fl）MCH（pg）MCHC（g/L）成人80100273431435413歲791042532280350新生兒8612027362503

59、70 MCV、MCH、MCHC參考區(qū)間臨床檢驗基礎(chǔ)（四）臨床意義（四）臨床意義貧血形態(tài)學分類MCVMCHMCHC臨床意義正常細胞性貧血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障礙性貧血、白血病等大細胞性貧血增高增高正常巨幼細胞性貧血單純小細胞性貧血降低降低正常慢性炎癥、尿毒癥等小細胞低色素性貧血降低降低降低缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、慢性失血等貧血形態(tài)學分類及臨床意義貧血形態(tài)學分類及臨床意義臨床檢驗基礎(chǔ)網(wǎng)織紅細胞定義網(wǎng)織紅細胞形態(tài)網(wǎng)織紅細胞染色方法網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法網(wǎng)織紅細胞計數(shù)參考區(qū)間網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的臨床意義網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)臨床檢驗基礎(chǔ)網(wǎng)織紅細胞（reticulocyte，Ret）是介于

60、晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡階段細胞，其胞質(zhì)中尚殘留部分嗜堿性物質(zhì)（核糖體和核糖核酸），可被某些染料活體染色后呈藍色或紫色的網(wǎng)狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)，故名為網(wǎng)織紅細胞。Ret體積略大于成熟紅細胞（直徑8.09.5m），仍具有合成血紅蛋白的能力，約12天后，過渡為成熟紅細胞。ICSH將網(wǎng)織紅細胞分成IIV型。定義I I型（絲球型）型（絲球型） 型（網(wǎng)型）型（網(wǎng)型） IIIIII型（破網(wǎng)型）型（破網(wǎng)型） 型（點粒型）型（點粒型）臨床檢驗基礎(chǔ)網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞類類型及特征型及特征分型分型形態(tài)特征形態(tài)特征正常存在部位正常存在部位I型（絲球型）RBC幾乎被網(wǎng)織物充滿僅存在于正常骨髓II型（網(wǎng)型）位于RBC