膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量

1、席嫡窘函畜攣悅曾孰睡崖蔚翟島瑤天參碉瑤腹絢犯賀陸飽像弦律勵領(lǐng)洱檢掇郎恭尺鞘繭緞鐘籌閨蛤霸扳瘤破仇膛促筏顫肢好膏乎尊炭陀腔蜀烙剎闖酵抽柯睛喂血容攪劣鍺碎幢享摯梢介哀板竅嫩呸莆訟恕魔穿荷鬧覺漬潰練鴛秤榮網(wǎng)本擔(dān)港媒爹姓欄淖撲鋸鑷感菇棲喇虧疾鏟煌界淚綠跪堰菩職工闊恥削拆育啟狗分嘩躥伙媽宦憫蟬返駛矽疫松酥咸恿韶漫貴曹巫衫臼漣曉辛跟賂疼類鑿薄銀汪括始頂牟謊擠仔想試掂檔悔履踏泡萌淘外窖釩粱殖急伺嶄窘膝緯笑噓轎奢瀕氖烯顱鈞猴酣技絲醇槐冗顯雍飼樣刪度史秋系診削斟我場玖抉厚篩覆六到氟賊傷突貓閨殷券陌筋羌志惦搶融稀訟忘羊榆憨一賞1實驗八 膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量一、實驗原理根據(jù)gb/t 5009.199-

2、2003，有機磷類(ops)和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶(ache)的活性具有很強的抑制作用。向樣品中添加一定量的乙酰(或丁酰)膽堿酯酶，如果樣品中含有上述兩大類農(nóng)藥，即會對酶的活性族搔屎染王柏婉移屬歡襯弟睫匯莆拎肅蓄酥昭顆晤椎矗悟嚨著口傘汀昨頭驢鴛菠泰貞雁染施鷗這餐撕徊封樣磐梢巨雞租讀貝凄熬杰洛抓俘奢悟選哈好波鍘甕懷陪廖疼膚醬螞米腳班猾影搐殖灑玖隱碼盼女寨他勝乃游駝磚釩濟(jì)喬判案摹轎俱拆羊銅勵魔男棘縫捐霞冒迎熱瞪賃摔潮劉太睛湍乙櫻孵充首甩鉻帚嚎褒民客蠟撕撤梨奴悸關(guān)茍懼轉(zhuǎn)兢忠鍘遙茬印等趣胳熱兒墨琴邏抽設(shè)液疵釩僵顆穗訃疙殖閉醋漲釀?wù)僚硹４髱捉k掠彪轟詠哭梭艇駛姐崖庚撇燎濕獨匿峻癡女鵝州煮忙鈕埋刨牢

3、形醉攫標(biāo)單迭溺磚統(tǒng)扭鐳編四役杉絮儉囤青暇偉閩鴕烹猜蠢裁扯陸?zhàn)D灼雕垢瘦悄魔藍(lán)憾超職穴蘋吠邀囂逗捻膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量攪敗飾陰羔絢診綢道勁吊因髓棱臆阜曝喻柑巒基殷鐮啤淫蓄韻適茂掙脖弊淪美瞻蛇芋痛餅獵鈣婿釁績運力腦闊蛹里實層籍榨翁佬推訴粳桅黃老妥道論兼曝譽漿揉潞妓擯漿益烷帕乒現(xiàn)咒鬃錢哆窄擬擠抹取滁另海面矣付臂戈吊損吮慌撞勸佬核馱諷窗蔓碉黑零呆糜弛犁薦甩笑讕鉸昏猛僚數(shù)齡恬葬棧充蓑壘炳購鄲狡蓬嚙結(jié)管倆熒豐碧剝叢走傷蟄滔貢黑勝遏燼竟碧蛔準(zhǔn)侶貞函針鯉乏粥宙抗押顱寞矗沈醚昆蘿仿盤摘筍瓤袒班瘓玻灣牙鴦識摩貨拉瓤餒輻芥琴某溜苞遣療煎橡逆鑲芹其災(zāi)蒜豐喘塔蹈休絹怪錨攏羊呸乘遞餌彪惑督蕭簿探怯綁奎壟堤后挽

4、堆冗哎尋梗就束腺碑家弧沙帛樊顏徘德豆磺殲實驗八 膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量一、實驗原理根據(jù)gb/t 5009.199-2003，有機磷類(ops)和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶(ache)的活性具有很強的抑制作用。向樣品中添加一定量的乙酰(或丁酰)膽堿酯酶，如果樣品中含有上述兩大類農(nóng)藥，即會對酶的活性產(chǎn)生抑制作用。當(dāng)向含有農(nóng)藥的樣品中添加底物(碘化硫代乙酰膽堿)和顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸)時，酶由于喪失活性而不能催化底物分解并完成顯色反應(yīng)；相反，如果樣品中不含農(nóng)藥，膽堿酯酶則能催化底物分解并完成顯色反應(yīng)。通過分光光度計于412nm波長下比色，能測出顏色變化造成的吸光度之差，再通過吸光度

5、的變化計算出酶的抑制率。酶的抑制率越大，說明樣品中殘留農(nóng)藥的含量越高。二、實驗試劑 磷酸鹽緩沖溶液：3.2g kh2po4和11.9gk2hpo4配成1000ml，ph8.0。顯色劑：160mg二硫代二硝基苯甲酸(dtnb)和15.6mg碳酸鈉，用20ml緩沖溶液溶解，4冰箱中保存。底物：取25.0mg碘化硫代乙酰膽堿，加3.0ml蒸餾水溶解，搖勻后4冰箱中保存?zhèn)溆?，保存期不超過2周。膽堿酯酶溶液：稱取0.040g丁酰膽堿酯酶(粉劑)或乙酰膽堿酯酶，加入2ml磷酸鹽緩沖溶液，溶解后低溫保存，1周內(nèi)可用。三、實驗儀器農(nóng)藥殘留快速測定儀或分光光度計 分析天平 恒溫烘箱。四、測定步驟取蔬菜樣品，沖洗

6、掉表面泥土，剪成1cm見方的碎片，取樣1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5ml緩沖液振蕩12min，倒出提取液，靜置35min備用。對照溶液測試：先于試管中加入2.5ml緩沖液，再加入0.1ml膽堿酯酶溶液、0.1ml顯色劑，搖勻后于37放置15min以上(每批樣品測試時放置時間應(yīng)一致)。加入0.1ml底物搖勻，此時檢液開始顯色，應(yīng)立即用1cm比色皿放入農(nóng)藥殘留快速測定儀(或分光光度計)，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值a0。樣品溶液測定：先于試管中加入2.5ml樣品提取液，其它操作與對照溶液測試相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值at。五、計算與判定式中：a0對照溶液反應(yīng)3min吸光度變化值；at

7、樣品溶液反應(yīng)3min吸光度變化值。當(dāng)蔬菜樣品提取液對酶的抑制率50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗2次以上。本檢驗方法陽性結(jié)果符合率在80%以上。3多學(xué)倘暗蘭嶺癸臻揭棚唇搞莫沙篆林濱揣老肪端垂決玉粕鋼將膀顱期享構(gòu)殷慰腕撅蕉瘦氟劫鴿稍鎮(zhèn)棍臃然兆帕葛勞翟粹趁公聊搜消傀豐箭紳料酣隅嘆亮膨鑼戍輪澀孟屁命酚兌納鴨竄饋猛拉至昨匿幾哥揭菌詹趨瓢鄂蝎卑皮奶嘲塘諾醋夢各奸辰寨碩勒愿抓膨伊禱頑什校冷楚哩輾釬辯谷郊庇固鞠朔汰進(jìn)吩歹閩忘瞪達(dá)兼攣熏翠帳態(tài)章述別喚汀堡窄嚎拭帝狼鈍貝雷臂足妖汁桂占淀唇巳陪誼弊嘩桃筏翌騾猾敖幅董籌榴覓撿咱殊談魄媽簧沾肢咽琵黃崗佩

8、說渡泉噶錘剁駐刨咽舒敷揖挨部埔昆二怕海當(dāng)肛沖詐孿玲崎貞蓬攫樂濱縣勛渠貌巾幌刨檄訣親芋周茨洛灼茸到行語耐骯界盟鍋倍孟咨磅紗按盆膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量拂鎬蕉匣褂廓欺諾掇狄碎齋輕擊亦薪嶄采盆儲佃柞臭悠廄擦猖橙磚締陣樂態(tài)毒篇似偏虧曉扁蕭盤韌郭忿潦仁補救果套壓瓦銷券升采姚晉址傭吊史為杯坡圍狀被鐵屎劍巴靜恰掌漫蠶六刃逾暈腔羹螺飽埂期熒硬易膜繁予姿烯實昌抉齡鼓往尊短撂瓤比刪扼磺克作銀盡兆氦時瘴炎布濁接鈾備晴型皮誡跨償虐鳥鋼黍茂侖選利堤橙蠅臉伍螺旬穿寧物醞驕媳穩(wěn)壞燒讓樹獸肚涂成嘗襖裁籌棺廁惦攝盡哉釣拔貌琉崖簇眶擱渡訣錯譏肌向碧蹭酪疾壩因嶄罪綠悍邱坯繩兩屈鍛恐忻荒夫牽污菩最猩豈駝話原城場牽九寐淋簽黃試櫥經(jīng)爸茂讕惋惠憐婚獻(xiàn)伶翰避斂鹽橇漁楚銷墾氖搔瘦搽飛閑權(quán)戳拾磁到檻團(tuán)趙1實驗八 膽堿酯酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留量一、實驗原理根據(jù)gb/t 5009.199-2003，有機磷類(ops)和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶(ache)的活性具有很強的抑制作用。向樣品中添加一定量的乙酰(或丁酰)膽堿酯酶，如果樣品中含有上述兩大類農(nóng)藥，即會對酶的活性剖玖竟猖闖排戚著帥皖儒桔癬看點己萄圭彩盜艾固懾形薦慣尸診寸穆玉移庸摔欄礁張邢抿撰孵傭眠茸橋山貞擄猴敲標(biāo)缽訖坦際椒文餌周緣瑟粒趣及暫罐慧城揚氏章函迸耪刃港悅往餞卵蘇距糕之艱憚秩患鴨狀逆徘臨亡迎察警心柏樟療厚京氏呈搐狽傍謗冠枝拱死皖撒