熒光顯微鏡操作手冊SIBCB

1、熒光顯微鏡操作手冊olympus bx51物鏡： 4 ×0.16 （無dic） 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 熒光濾色塊轉盤： 1. wu 藍 2. wib 綠（長通）3. wiba 綠（帶通）4. wig 紅5. cfp 青6. yfp 黃操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下）dic觀察：1. 打開明場電源開關（“”為開，“”為關）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 將起偏器、檢偏器、dic棱鏡推入光路，熒光濾塊轉盤撥到“1”位置，dic棱鏡應與相應的物鏡倍數相匹配4. 先選

2、用低倍物鏡（“10×”）5. 調節(jié)透射光的強度，調節(jié)焦距，找到視野6. 換到高倍鏡頭，觀察樣品7. dic觀察時，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照 熒光觀察：1. 打開明場電源開關2. 打開汞燈電源開關3. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好4. 檢偏器、dic棱鏡在光路外5. 將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關），需保護樣品時關閉shutter6. 光路選擇拉桿推至最里邊7. 根據樣品的標記情況將熒光濾塊轉盤轉到相應的位置8. 通過兩組減光濾片調節(jié)激發(fā)光強度9. 從低倍鏡開始觀察，調焦，找到預觀察視野，10. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品11. 拍照時光路選擇

3、拉桿完全拉出普通明場觀察：1. 打開明場電源開關（“”為開，“”為關）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 起偏器、檢偏器、dic棱鏡在光路外，熒光濾塊轉盤撥到“1”位置，dic棱鏡撥到明場（bf）位置4. 先選用低倍物鏡（“4×”）5. 調節(jié)透射光的強度，調節(jié)焦距，找到視野6. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品7. 光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照關機：1. 關閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關閉，關閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光調到最小，關閉明場電源開關3. 將鏡頭轉到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭4. 確認數據已經保存，關閉軟

4、件5. 使用光盤拷貝數據（禁止使用移動儲存設備拷貝數據）6. 關閉電腦，登記使用時間、熒光數字等使用情況olympus ix71物鏡： 物鏡倍數 相差環(huán)4 ×0.13 phl 10×0.30 ph1 20×0.45 ph1 40×0.60 ph2 60×1.35 oil （無相差） 熒光濾色塊轉盤： 1. wu 藍 2. wib 綠（長通）3. wiba 綠（帶通）4. wiga 紅5. cfp6. yfp操作步驟： 相差觀察：1. 打開明場電源開關（“”為開，“”為關）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調至觀察位置4. 從低倍鏡開始

5、觀察，調節(jié)到與鏡頭相匹配的相差環(huán)，熒光濾塊轉盤撥到 “1”的位置5. 調節(jié)透射光光強，調節(jié)焦距，找到預觀察視野6. 依次換到高倍鏡，（注意調節(jié)相差環(huán)）觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調至相機位置 熒光觀察：1. 打開明場電源開關2. 打開汞燈開關3. 將樣品置于載物臺上4. 將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關），需保護樣品時關閉shutter5. 將光路選擇旋鈕調至觀察位置6. 根據樣品的標記情況將熒光濾塊轉盤轉到相應的位置7. 通過兩組減光濾片調節(jié)激發(fā)光強度8. 從低倍鏡開始觀察，調焦，找到預觀察視野，9. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品10. 拍照時將光路選擇旋鈕調至相機位置普

6、通明場觀察：1. 打開明場電源開關（“”為開，“”為關）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調至觀察位置4. 從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（bf）位置，熒光濾色塊轉盤撥到“1”的位置5. 調節(jié)透射光光強，調焦，找到預觀察視野6. 依次換到高倍鏡，觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調至相機位置關機： 1. 關閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關閉，關閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光強調到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關閉明場電源開關4. 將鏡頭轉到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭5. 確認數據已經保存，關閉軟件6. 使用光盤拷貝數據（禁止使用移動儲

7、存設備拷貝數據）7. 關閉電腦，登記使用時間、熒光數字等使用情況olympus szx16物鏡： 1×變倍： 0.711.5熒光濾色塊轉盤： uv 藍 gfphq 綠 rfp2 紅 操作步驟： 明場觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 推入光路選擇拉桿，熒光濾塊轉盤撥到空位3. 選擇合適的光源1 冷光源觀察 使用不透明的底板（黑或白），打開環(huán)形光電源開關（“”為開，“”為關），調節(jié)光強度，找到預觀察視野，調節(jié)變倍比，觀察樣品2 底光源觀察 使用透明玻璃底板，打開底座電源開關（“”為開，“”為關），將lbd濾片推入光路，調節(jié)反光鏡方向、對比度和光強度，找到預觀察視野，調節(jié)變倍比，觀察樣品

8、4. 拍照時將光路選擇拉桿拉出熒光觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 一般選擇黑色不透明底板3. 打開汞燈電源開關4. 熒光光路擋板推出5. 根據樣品的標記情況將熒光濾塊轉盤轉到相應的位置6. 找到預觀察視野，調節(jié)變倍比7. 觀察樣品8. 拍照時將光路選擇拉桿拉出關機：1. 關閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關閉，關閉半小時以后方可再次開啟）2. 將明場光強調到最小，關閉明場電源開關3. 取出樣品，將變倍比調到最小4. 確認數據已經保存，關閉軟件5. 使用光盤拷貝數據（禁止使用移動儲存設備拷貝數據）6. 關閉電腦，登記使用時間、熒光數字等使用情況軟 件 應 用1. 雙擊打開dp co

9、ntroller軟件2. 點擊預覽鍵，選擇image size(一般1360 x 1024)、objective、iso sensitivity(明場拍照選擇iso200，熒光拍照選擇iso400)、exposure mode(一般選擇manual)，調節(jié)exposure time3. 調節(jié)黑/白平衡（明場拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點擊color面板，點擊one touch 在圖片背景位置選個小框，軟件自動做好平衡4. 若需添加標尺，點擊scale面板，選中show scale，選擇標尺顯示模式和長度，選中free size，改變標尺長度5. 若需調整圖象色階，點擊level面板，拖動小滑塊調整色階，可以改變圖象對比度6. 點擊capture面板，還可再次調節(jié)曝光時間、圖象亮度及對比度。點擊拍照鍵，獲取圖象7. 此時彈出dp manager軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤上8. 若需將不同通道圖象合成，可點擊dp manager軟件中imageimage composition，選擇需合成圖片的名稱，點擊apply，merging image生成，保存合成圖象9. 若需拍攝timelapse,點擊timelapse/movie面板，選擇拍攝模式，選擇拍攝時間、間隔時間等參數，再點擊