第一節(jié) 工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生

1、編輯課件 將大鼠的將大鼠的生長激素基生長激素基因因?qū)氲叫∈笫芫阎校瑢氲叫∈笫芫阎?，得到的得到的“超級鼠超級鼠”?人耳鼠人耳鼠遺傳工程遺傳工程第一章第一章 基因工程基因工程 廣義的廣義的“遺傳工程遺傳工程”包括細胞水平上的遺包括細胞水平上的遺傳操作傳操作( (細胞工程細胞工程) )和分子水平上的遺傳操作和分子水平上的遺傳操作( (基因工程基因工程) )。 基因工程基因工程又叫做又叫做基因拼接技術(shù)基因拼接技術(shù)或或DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種種基因提取出來，

2、加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，生物的細胞里，定向定向地改造生物的地改造生物的遺傳性狀遺傳性狀。編輯課件第第1 1節(jié)節(jié) 工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生 G A A T T CC T T A A GGC T T A A黏性末端：黏性末端：被限制酶切開的被限制酶切開的DNADNA兩條單鏈兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，它們之的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，它們之間堿基正好互補配對。間堿基正好互補配對。A A T T C G 存在于存在于許多細菌以許多細菌以及酵母菌等及酵母菌等生物中，是生物中，是細胞染色體細胞染色體外能自主復外能自主復制的很小的制的很小的環(huán)狀

3、環(huán)狀DNADNA分分子。子?；蚬こ滩僮鞯墓ぞ呋蚬こ滩僮鞯墓ぞ呔庉嬚n件剪切剪切拼接拼接導入導入表達表達第第2 2節(jié)節(jié) 基因工程的原理和技術(shù)基因工程的原理和技術(shù)1 1、篩選含有目的基因的受體細胞、篩選含有目的基因的受體細胞2 2、目的基因的表達、目的基因的表達人工合成人工合成u利用利用PCRPCR技術(shù)擴增技術(shù)擴增已知序列：已知序列：從基因文庫獲得從基因文庫獲得未知序列：未知序列：( DNA library )( DNA library )聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)(Polymerase Chain Reaction)氫鍵斷裂，形成單鏈氫鍵

4、斷裂，形成單鏈DNADNA。引物與引物與DNADNA模板結(jié)合，模板結(jié)合，形成局部雙鏈。形成局部雙鏈。 在酶的作用下，不斷延在酶的作用下，不斷延伸，合成雙鏈伸，合成雙鏈DNADNA。多次循環(huán)，獲得大量多次循環(huán)，獲得大量雙鏈雙鏈DNADNA分子。分子。uPCRPCR技術(shù)擴增技術(shù)擴增鳥槍法：散彈射擊法供體細胞DNA限制酶許多DNA片段載入運載體導入受體細胞擴增產(chǎn)生特定性狀分離目的基因從基因文庫獲得目的基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA（目的基因）蛋白質(zhì)氨基酸序列推測mRNA的核苷酸序列推測結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列化學合成目的基因逆轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸序列直接合成DNA1.1.基因工程中常用的受

5、體細胞有哪些？基因工程中常用的受體細胞有哪些？2.2.導入過程如何？導入過程如何？大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細胞母菌和動植物細胞借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑受體細胞：細菌CaCl2細胞壁的通透性增大重組質(zhì)粒進入受體細胞目的基因隨受體細胞的繁殖而復制1 1、篩選含有目的基因的受體細胞、篩選含有目的基因的受體細胞2 2、目的基因的表達、目的基因的表達通過檢測標記基因的有無，來判斷目的基因是否導入受體細胞。目的基因?qū)胧荏w細胞后，受體細胞必須表現(xiàn)特定的性狀。C下列不是基因載體必須具備的條件的是下列不是基因載體必須具備的條件的是 ( )( ) A A、能自我復制、能自我復制 B B、有多個限制酶切點、有多個限制酶切點 C C、具有標記基因、具有標記基因 D D、它是環(huán)狀、它是環(huán)狀DNADNADD3.3.有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是 （ ） A A、DNADNA連接酶將黏性末端的堿基對連接起來連接酶將黏性末端的堿基對連接起來 B B、限制性核酸內(nèi)切酶用于目的基因的獲得、限制性核酸內(nèi)切酶用