人參皂苷抗黑色素瘤探究進(jìn)展

1、人參皂昔抗黑色素瘤探究進(jìn)展【摘要】目的：隨著黑色素瘤治療的不斷發(fā)展，生 物化學(xué)治療、生物免疫治療、靶向治療、中藥制劑治療等療 法已被逐漸加以應(yīng)用，并取得了一定的療效。筆者研讀了 2002年以來的關(guān)于人參皂昔抗黑色素瘤的文獻(xiàn)，就人參皂昔 能夠通過抗腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抗腫瘤細(xì)胞 dna合成以及抑制腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖等方面作用于黑色 素瘤，從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長的作用展開綜 述。【關(guān)鍵詞】人參皂昔；黑色素瘤；細(xì)胞凋亡；血管內(nèi)皮 細(xì)胞【中圖分類號(hào)】r917【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a【文章編號(hào)】2095-6851 (2014) 04-0472-01黑色素瘤是一種高度惡性腫瘤，占皮膚腫瘤

2、死亡病例的 極大部分，且對常規(guī)放療化療有較強(qiáng)抵抗性，是一種臨床 治療上頗為棘手的惡性腫瘤。美國六家醫(yī)療單位通過過繼免 疫治療療法治療惡性黑色素瘤，結(jié)果顯示有效率為9% -35%1-2。在生物化學(xué)方面，eton： 3等報(bào)道了一組晚期 或轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤的臨床療效，其生物治療應(yīng)用的有效 率為60%,完全緩解率則為20%o公認(rèn)的抗黑色素瘤藥物達(dá) 卡巴嗪療效也是差強(qiáng)人意，僅為7. 5%12.2%,患者無進(jìn)展 生存(pfs)不到2月4-7。人參是傳統(tǒng)的名貴藥材，被 稱為“百草之王”。隨著天然化合物應(yīng)用于抗腫瘤治療研究 的深入，從人參中提取和分離出來的人參皂昔為難治性黑色 素瘤的治療帶來了新的曙光。1人

3、參皂昔的分離與提純金鳳燮等人8首先報(bào)道了酶轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)rh2等人參 稀有皂昔，提取效果較傳統(tǒng)方法提高了 500700倍，實(shí)現(xiàn) 了工業(yè)化生產(chǎn)，為人參皂昔的實(shí)際應(yīng)用提供了可行性。此后, 水提取法、有機(jī)溶劑提取法、滲漉法、蒸館法、超聲浸漬法 都有已被用來提取人參皂昔，且各有優(yōu)劣。近年來，張樂9 等人在實(shí)驗(yàn)條件為：壓力35 mpa,溫度50 °c,夾帶劑為70% 乙醇，夾帶劑用量為1. 7 ml/g下，通過超臨界二氧化碳流 體(sfe-c02)技術(shù)對人參皂昔進(jìn)行提取，結(jié)果證實(shí)與其他 提取技術(shù)提取效率相當(dāng)，并具有綠色環(huán)保、工藝簡單等優(yōu)點(diǎn)。2人參皂昔抗黑色素瘤作用機(jī)制2. 1人參皂昔rh2抗黑色素

4、瘤機(jī)制的研究人參皂-rh2是從人參中分離得到的原人參二醇型低 糖鏈皂昔單體，分子式為c36h6208o自20世紀(jì)80年代以來, 科學(xué)家從紅參中分離出含量僅為十萬分之一的稀有人參皂 就rh2,而且該成分僅存在于紅參中。2. 1. 1人參皂昔rh2抗黑色素瘤轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù) 雜的過程，而腫瘤細(xì)胞侵襲基底膜是其中的一個(gè)重要的環(huán) 節(jié)。陶麗華10等人通過b16黑色素瘤自發(fā)肺轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn) 以及體外重組人工基底膜侵襲試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)給藥組侵襲人 工基底膜的b16黑色素瘤細(xì)胞數(shù)與對照組比較，侵襲細(xì)胞數(shù) 明顯減少，有些組抑制率甚至達(dá)67%o可見20 ( r) -人參 皂昔rh2是一種具有顯著抑制惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的活性

5、成分， 其抑制惡性腫瘤轉(zhuǎn)移可能是與其降低癌細(xì)胞的侵襲能力有 關(guān)，其確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。2. 1.2人參皂昔rh2與其他化療藥物聯(lián)合應(yīng)用在許多腫 瘤的治療中，聯(lián)合用藥要比單一用藥多出許多的優(yōu)勢，如增 效作用以及減少耐藥性等。人參皂昔rh2與順鉗的聯(lián)合應(yīng)用 是否合理以及能否取得更佳的治療效果是人參皂昔抗黑色 素瘤研究方面的一個(gè)重要課題。樊錦坤等人11通過正交 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究人參皂昔rh2與順餡各劑量聯(lián)用對小鼠肉瘤重 量的影響研究表明，在順苗與人參皂昔rh2聯(lián)用時(shí)，其抗腫 瘤活性明顯提高，且以人參皂昔rh2 0. 5mg kg1與順鉗 0. 2 mg kg1時(shí)作用最為顯著。通過析因設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)也使上

6、訴結(jié)果得到了很好的重現(xiàn)和證實(shí)。這表明，人參皂昔rh2與 順鎧聯(lián)用可增強(qiáng)順鎧的抗腫瘤作用，在減少了順餡的使用劑 量同時(shí)又提高了療效，展現(xiàn)出來兩藥聯(lián)用抗腫瘤的良好前 景。2.2人參皂昔rg3抗黑色素瘤人參皂昔rg3系由日本學(xué)者北川勛于1980年首先從紅 參中制備出來，分子式為c42h72o13,屬原人參二醇型皂 昔，存在兩種同型異構(gòu)體，即20 (s)和20 (r) -人參 皂 <rg3o2. 2. 1 20 ( s) -人參皂昔rg3抑制黑色素瘤血管內(nèi)皮 細(xì)胞增殖與遷移腫瘤血管是腫瘤細(xì)胞的營養(yǎng)通道以及轉(zhuǎn)移途徑，因此阻 斷腫瘤血管對于抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移有重要的作用。血管內(nèi) 皮細(xì)胞作為形成腫瘤血

7、管的基礎(chǔ)，抑制其增殖已成為阻斷腫 瘤血管形成中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。血管活性因子(vegf)是一種 重要的促血管生成因子，許多血管活性因子也是通過上調(diào) vegf來發(fā)揮促血管生成的作用。vegf與其受體結(jié)合便能激 活內(nèi)皮細(xì)胞的生成過程。因此，阻斷vegf分泌或vegf與其 受體的相互作用，即可抑制腫瘤中血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和 遷移。辛穎等人12通過mtt法、pcna免疫熒光染色發(fā)現(xiàn), 黑色素瘤細(xì)胞條件培養(yǎng)液(bmcm)中由腫瘤細(xì)胞分泌的vegf 刺激了內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，在經(jīng)20 ( s)-人參皂昔rg3作 用后的培養(yǎng)液中其內(nèi)皮細(xì)胞的增殖明顯弱于無20 ( s)- 人參皂昔rg3作用的陽性空白對照組。這表明，

8、20 ( s)- 人參皂昔rg3有抑制黑色素瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用。辛穎 等人繼續(xù)通過遷移實(shí)驗(yàn)，利用boyden小室觀察20 ( s)- 人參皂昔rg3對內(nèi)皮細(xì)胞趨化性運(yùn)動(dòng)的影響，結(jié)果顯示，20(s)-人參皂昔rg3作用后，與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組中遷移過濾膜下面的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量明顯減少，說明20 ( s)人參皂昔rg3降低了 bmcm對內(nèi)皮細(xì)胞的趨化作用及內(nèi)皮細(xì) 胞的定向遷移能力。2. 2. 2 20 ( s) -人參皂昔rg3抗黑色素瘤細(xì)胞dna合 成研究發(fā)現(xiàn)pcna是dna多聚酶d的輔助蛋白，是dna合 成必不可少的因子，可作為一項(xiàng)評(píng)估腫瘤細(xì)胞增殖活性的指 標(biāo)。isozali等13也證實(shí)了腫瘤

9、直徑4cm組，其pcna陽 性率遠(yuǎn)高于直徑 2. 3人參皂昔rkl抗黑色素瘤關(guān)于人參皂昔rh2型及rg3型單體抗黑色素瘤的作用及 其機(jī)理國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)做了較為詳盡的研究，其抗腫瘤的機(jī) 理本文亦給出了相關(guān)闡述。除此之外，近幾年國外又出現(xiàn)關(guān) 于人參皂昔rkl抗黑色素瘤的相關(guān)報(bào)道。韓國學(xué)者ji seong kim 15等人研究發(fā)現(xiàn)人參皂昔rkl型對sk-mel-2人黑色素瘤有抑制作用，相比人們熟知rh2型及rg3型人參皂昔，rkl型人參皂昔對黑色素瘤亦有很強(qiáng)的細(xì)胞毒作用。人參皂昔rkl是從熱處理過的一種名叫太陽參中首先發(fā)現(xiàn)16,并通過髙速反電流層析法從韓國紅參中提取出來17 o研究表明，fas是一種

10、重要的細(xì)胞表面受體蛋白，通過與fasl連 接可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；bcl-2基因家族以及p53基因亦在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中扮演重要角色，而ji seong kim等人15的 研究表明，通過蛋白印記分析技術(shù)可以發(fā)現(xiàn)人參皂昔rkl可 以使黑色素瘤細(xì)胞中fas、fasl以及bax蛋白表達(dá)上調(diào)， 與此同時(shí)，用fas/fasl拮抗劑進(jìn)行預(yù)處理則抑制了人參皂 昔rhl對人皮膚黑色素瘤細(xì)胞sk-mel-2細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。 同時(shí)，人參皂昔rkl也使突變型p53和bcl-2蛋白表達(dá)減 少。這些結(jié)果證實(shí)了人參皂昔rkl是通過外源性途徑來誘導(dǎo) 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞sk-mel-2細(xì)胞的凋亡。另外，p53基因 被認(rèn)為是第一個(gè)與

11、細(xì)胞凋亡有關(guān)的腫瘤抑制基因。p53基因 突變主要發(fā)生在人類腫瘤中并且經(jīng)常與腫瘤晚期階段和患 者預(yù)后差有關(guān)18-19 o大多數(shù)皮膚黑色素瘤存在p53基因 突變，人黑色素瘤sk-mel-2細(xì)胞中也存在髙水平的p53基 因突變20 o ji seong kim等人15發(fā)現(xiàn)人參皂昔rkl作 用于細(xì)胞后，突變的p53基因的表達(dá)顯著減少，因此提出基 因突變型p53的功能獲得可能是由人參皂昔rkl引起的細(xì)胞 凋亡效應(yīng)之一。2.4展望黑色素瘤雖然不是高發(fā)病性腫瘤，但近幾年來其發(fā)病有 一定上升趨勢。一直以來，圍繞黑色素瘤的治療，國內(nèi)外學(xué) 者及臨床醫(yī)師都做了大量的研究與試驗(yàn)，無論是外科手術(shù)切 除，還是放療與化療的

12、應(yīng)用都無法取得令人滿意的效果。本 文就國內(nèi)外學(xué)者研究較多的人參皂昔單體抗黑色素瘤的作 用及其機(jī)制進(jìn)行了簡要的闡述，雖然國內(nèi)外的研究已表明人 參皂昔特別是人參皂昔rh2、人參皂昔rg3、人參皂昔rkl 等在抗黑色素瘤方面的應(yīng)用已顯示出一定成效，且與其他化 療藥物的聯(lián)合應(yīng)用也展示出良好的抗腫瘤效果。然而，將人 參皂昔抗黑色素瘤的作用推廣至臨床應(yīng)用仍然在理論和技 術(shù)上存在有不少現(xiàn)實(shí)問題。今后仍有以下幾個(gè)方面值得努 力：1、發(fā)現(xiàn)新的人參皂昔抗黑色素瘤作用機(jī)制，補(bǔ)充現(xiàn)有 理論不足；2、尋找人參皂昔的衍生物或者是其化學(xué)合成品， 并投入到抗黑色素瘤腫瘤的臨床治療中。參考文獻(xiàn)l rosenberg sa, l

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