分子生物學(xué)題庫(kù)

1、.七、問(wèn)答題1闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止。 (1)轉(zhuǎn)錄終止的兩種主要的機(jī)制是什么? (2)描述翻譯怎樣能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止。 (3)為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Pho因子? (4)怎樣能阻止轉(zhuǎn)錄的終止?2復(fù)制 DNA的聚合酶(DNA依賴(lài)的 DNA聚合酶)也有校正功能，解釋為什么RNA聚合酶沒(méi)有這種功能。3討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性。假如核糖體從3端到5端讀它的模板 mRNA的話(huà)，那么將會(huì)發(fā)生什么情況?4概括細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。5. 概括典型原核生物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)和功能，并解釋什么是保守序列。6轉(zhuǎn)錄如何在基因或基因組末端終止?7(1)如何區(qū)分由啟動(dòng)子起始轉(zhuǎn)錄的RNA片段與5端被加工

2、過(guò)的RNA片段; (2)證明多肽是從氨基端到羧基端方向合成的。8比較 Ecoli rRNA和 tRNA的轉(zhuǎn)錄和加工。9區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控。10衰減作用如何調(diào)控E. coli中色氨酸操縱子的表達(dá)?11比較并指出細(xì)菌和真核生物RNA 翻譯機(jī)理的異同。12什么是搖擺假說(shuō)?13指出E.coli和真核生物翻譯起始的不同。14SN Cohen于1973年構(gòu)建了三個(gè)重組體， pSC102， pSC105， pSC109請(qǐng)說(shuō)明這三個(gè)重組體是如何獲得的?各說(shuō)明了什么?15基因克隆是如何使含有單個(gè)基因的 DNA片段得到純化的?16什么是細(xì)菌的限制修飾系統(tǒng)(restriction-modificaton

3、system, R-M system)17細(xì)菌的限制修飾系統(tǒng)有什么意義? 18說(shuō)明限制性?xún)?nèi)切核酸酶的命名原則要點(diǎn)。19類(lèi)限制酶具有哪些特點(diǎn)?在基因工程中有什么作用?20類(lèi)限制酶有哪些特點(diǎn)?21何謂限制性?xún)?nèi)切核酸酶的切割頻率?22什么是限制性?xún)?nèi)切核酸酶的星號(hào)活性?受哪些因素影響?23雙酶消化法(double digests)繪制限制性?xún)?nèi)切核酸酶酶譜的原理。24什么是 DNA多態(tài)性(DNA polymorphism)?25限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)。26計(jì)算下列三種酶各自在某染色體 DNA序列上識(shí)別位點(diǎn)間的平均

4、距離： Alu ：5AGCT 3” EcoR : 5GAATTC 3 3 TCGA 5 3CTTAGG 5Acy:5GPuCGPyC 3 3CPyGCPu5 (注： Py=任何一種嘧啶； Pu=任何一種嘌呤)圖15.1酶切電泳圖譜12：Hind 切割；34：coRV 切割；56：Hind +co RV；1、3、5是質(zhì)粒 DNA： 2、4、6是15號(hào)克隆。圖15.2 用EcoR 、Hpa 單獨(dú)切割及用這兩種酶混合切割30kbBamH片段產(chǎn)生的 DNA帶27在細(xì)菌質(zhì)粒 pBP1的四環(huán)素抗性基因 tetR的中間有一個(gè)Hind的切點(diǎn)。用Hind 切割果蠅基因組 DNA，以 pBP1為載體構(gòu)建基因組文庫(kù)

5、。分子雜交證明克隆15帶有果蠅的目的基因。用Hind和EcoRV對(duì)克隆15進(jìn)行了酶切分析，電泳結(jié)果如圖15.1(用酶切的 pBP1質(zhì)粒DNA作對(duì)照)，旁邊標(biāo)出了片段的大小。 (1)繪制含有插入片段和不含插入片段時(shí)的 pBPl的限制性圖譜，并標(biāo)明四環(huán)素抗性 基因的位置; (2)如果用克隆在另一個(gè)與 pBP1完全不同源載體上的四環(huán)素抗性基因作為探針，進(jìn) 行 Southern印跡雜交，預(yù)測(cè)上述電泳圖會(huì)出現(xiàn)什么樣的雜交帶? (3)如果用克隆15的果蠅 DNA片段作為探針進(jìn)行 Southem印跡雜交，放射自顯影 的結(jié)果又是如何?28為什么大多數(shù)內(nèi)切酶被稱(chēng)為“限制”酶。29據(jù)Science雜志報(bào)道:一種重

6、要的遺傳疾病可由導(dǎo)致 DNA中堿基替換的誘變劑在體外進(jìn)行人工誘導(dǎo)。設(shè)計(jì)一種快速用以鑒定疾病基因型的檢測(cè)方法。30為了繪制長(zhǎng)為3.0kb BamH 限制性片段的限制性圖譜，分別用EcoR 、Hpa EcoR 十 Hpa消化這一片段的三個(gè)樣品，然后通過(guò)凝膠電泳分離 DNA片段，溴化乙錠染色后觀(guān)察DNA帶型(圖15.2)。請(qǐng)根據(jù)這些結(jié)果，繪制一個(gè)限制性圖譜，要標(biāo)明E.coR 和Hpa識(shí)別位點(diǎn)間的相對(duì)位置，以及它們之間的距離(kb)。311967年，有5個(gè)實(shí)驗(yàn)室?guī)缀跬瑫r(shí)獨(dú)立發(fā)現(xiàn)了DNA 連接酶，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)有什么特點(diǎn)?32簡(jiǎn)述 DNA和RNA連接酶的催化反應(yīng)機(jī)制。33. 影響 DNA連接酶催化連接

7、反應(yīng)的因素有哪些?34什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?35. 如何利用 T4 DNA聚合酶制備3隱含末端或雙鏈平末端?36. 如何利用 T4 DNA聚合酶進(jìn)行雙鏈 DNA的3末端標(biāo)記?37如何利用 T4 DNA聚合酶制備平末端?38反轉(zhuǎn)錄酶有兩種類(lèi)型，一是來(lái)源于禽類(lèi)骨髓母細(xì)胞瘤病毒(AMY, aviam myeloblastosis virus)，另一種來(lái)源于鼠類(lèi)莫洛尼氏白血病毒(MMLV，Moloney murine leukemia virus)，它們之間有什么不同?39與E.coli RNA聚合酶相比，細(xì)菌噬菌體的 SP6RNA聚合酶、 T7 RNA聚合酶和 T

8、3 RNA聚合酶具有哪些優(yōu)越性?40什么是多核苷酸激酶的向前反應(yīng)和交換反應(yīng)?41細(xì)菌堿性磷酸酯酶和小牛腸堿性磷酸酯酶有什么不同?在基因工程中有什么用途?42外切核酸酶(lambda exonuclease)基本活性是什么?在基因工程中有什么應(yīng)用?43Mn2+、 Mg2+對(duì) DNase (deoxyribonuclease )的活性有什么影響? DNase 在基因工程中有什么作用?44比較 S1-Mapping和 Footprinting在原理上、方法上、應(yīng)用上有何不同?45什么是復(fù)制子(replicon)?46什么是質(zhì)粒的相容性?什么是不相容群?機(jī)制是什么?47什么是質(zhì)粒的帶動(dòng)轉(zhuǎn)移?48說(shuō)明變

9、性定位法和限制性?xún)?nèi)切核酸酶定位法研究質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)的原理。49 Co1El衍生質(zhì)粒拷貝數(shù)調(diào)節(jié)機(jī)理的機(jī)理是什么?50 R1質(zhì)?？截悢?shù)受到怎樣的調(diào)節(jié)控制?51質(zhì)粒如何維持在細(xì)胞中的穩(wěn)定?52. 引起質(zhì)粒不相容性的主要原因是什么?53由于基因工程是人為改變遺傳信息的操作，因此必須注意被操作基因的安全，進(jìn)行 嚴(yán)格的監(jiān)控，質(zhì)粒載體的安全性是十分重要的。請(qǐng)問(wèn)質(zhì)粒載體的安全條件包括哪幾個(gè)方面?54請(qǐng)指出質(zhì)粒 pSC101的一些生物學(xué)特性(包括結(jié)構(gòu)和遺傳)及在基因工程中的作用。55. 自然界中具備理想條件的質(zhì)粒載體為數(shù)不多，即使是 Co1E1和 pSC101這兩個(gè)自然質(zhì)粒也不盡人意，通常需要進(jìn)行改造，請(qǐng)問(wèn)質(zhì)粒改

10、造包括哪些基本內(nèi)容?56. 質(zhì)粒改造的發(fā)展過(guò)程如何?57. 在質(zhì)粒中如何增減酶切點(diǎn)?58有人用限制性?xún)?nèi)切核酸酶EcoR I分別切割松弛型質(zhì)粒 Co1E1和嚴(yán)緊型質(zhì)粒 pSC101(各有一個(gè)切點(diǎn))，然后重組連接形成一個(gè)雜種質(zhì)粒 pSC134，請(qǐng)推測(cè)這種質(zhì)粒有什么特性和用途。59現(xiàn)分離了4種新的大腸桿菌 Hfr菌株，通過(guò)中斷接合實(shí)驗(yàn)，針對(duì)每一菌株確定了高頻轉(zhuǎn)移的標(biāo)記基因和它們進(jìn)入 F受體的時(shí)間分別為：標(biāo)記基因和第一次進(jìn)入的時(shí)間Hfr1Hfr2Hfr3Hfr4man13minmal29lys16pur6trp6met14arg9trp3his23thr4mal2thr31pur3uvr20his32

11、lac23gal14(gal、lac、mal、man不能發(fā)酵半乳糖、乳糖、麥芽糖和甘露糖；arg、his、met、trp 生長(zhǎng)需要精氨酸、組氨酸、賴(lài)氨酸、甲硫氨酸、嘌呤和色氨酸；uvr：紫外線(xiàn)敏感)。任何沒(méi)有給出的標(biāo)記都是不能高頻轉(zhuǎn)移的。上述數(shù)據(jù)能夠說(shuō)明大腸桿菌的染色體是環(huán)狀的嗎?以分鐘表示圖距構(gòu)建一個(gè)大腸桿菌染色體的連鎖圖。假定整個(gè)染色體用了100分鐘轉(zhuǎn)移，而且蘇氨酸被認(rèn)為位于0分鐘或10O分鐘處。60YAC克隆載體常出現(xiàn)哪些問(wèn)題?61為什么野生型的噬菌體 DNA不宜作為基因工程載體?62什么是藍(lán)白斑篩選法?63藍(lán)白斑篩選法為什么也會(huì)有假陽(yáng)性?64什么是c篩選法?65噬菌體載體具有哪些優(yōu)點(diǎn)與

12、不足?66什么是 M13的IG序列區(qū)?有何特點(diǎn)和功能?67將野生型的 M13改造成基因工程載體，首先是進(jìn)行酶切位點(diǎn)的改造，請(qǐng)問(wèn) M13中的EcoR 最初是如何引入的?68以置換型噬菌體作為載體進(jìn)行克隆時(shí)，為什么說(shuō)能夠形成噬菌斑的就一定是重組體?69 M13系列載體具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?70粘粒載體具有哪些特點(diǎn)與不足?71輔助噬菌體 DNA和相應(yīng)的噬菌粒是如何協(xié)同工作的?72. 克隆的 DNA在質(zhì)量上有什么要求?73為什么從細(xì)胞中分離 DNA時(shí)往往會(huì)斷裂?74為什么苯酚要重蒸飽和后才能用于 DNA的分離?75為什么氧化變色的酚不能直接用于DNA的分離?應(yīng)如何處置?76. 在DNA分離過(guò)程中，酚通常與氯

13、仿聯(lián)合使用，即使不聯(lián)合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，為什么?77. 說(shuō)明溴化乙錠氯化鉤密度梯度離心(ethidium bromide-caesium chloride gradient centrifugation)純化DNA的原理。78. 采用什么措施保證 DNA化學(xué)合成的定時(shí)性和專(zhuān)一性?79何謂簡(jiǎn)并引物(degenerate primer)?80簡(jiǎn)并引物設(shè)計(jì)的一般原則是什么?81雙脫氧法(dideoxynucleotide method)測(cè)序的基本原理是什么?82在古生物學(xué)中，尚不知道恐龍是否是溫血爬行動(dòng)物，而不像今天的變溫爬行動(dòng)物。 假如你得到一些恐龍的 DNA，你如何通過(guò) PC

14、R和基因克隆來(lái)檢測(cè)恐龍是否是溫血 爬行動(dòng)物?83如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過(guò)何種方法 克隆該基因?84何謂定位克隆(positional cloning)?85何謂染色體步移(chromosome walking)?86在染色體步移中，用哪些方法獲得克隆的末端?87何謂表型克隆(phenotype cloning)?88什么是基因文庫(kù)?89什么是基因組文庫(kù)(genomic librarY)?構(gòu)建基因組文庫(kù)，涉及哪些基本過(guò)程?它同遺傳學(xué)上的基因庫(kù)有什么不同?90什么是 cDNA文庫(kù)(complement DNA libraly)?同基因組文庫(kù)有何差別?91粘性

15、末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點(diǎn)，但是也有一些不足，請(qǐng)指出 這些不足之處，92什么是同聚物加尾連接法(homopolymer tails joining)?用何種方法加尾?具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?93何謂接頭連接法(Iinker ligation)?94什么是同裂酶?為什么說(shuō)用同裂酶進(jìn)行體外重組效率最高?95如何使用甲基化酶對(duì)克隆 DNA進(jìn)行保護(hù)?有什么意義?96何謂稀有酶?(舉例說(shuō)明)97為了大量獲得許多用于生化鑒定的產(chǎn)物，你想將擬南芥中的一個(gè)序列已知、編碼單體酶蛋白的基因在單細(xì)胞微生物中表達(dá)，你如何確保最終能得到產(chǎn)物?98若在進(jìn)行 DNA重疊群分析時(shí)，你發(fā)現(xiàn)在一個(gè)編碼有價(jià)值但不穩(wěn)定蛋白質(zhì)

16、的可讀框 之后，緊接著另一個(gè)可讀框，它可在蛋白質(zhì)的 C末端加上一個(gè)穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。舉出至少兩種獲得被修飾蛋白產(chǎn)物的方法。99某一質(zhì)粒載體具有 Tetr和 Kanr的表型，在 Kan抗性基因內(nèi)有一Bgl 的切點(diǎn)。現(xiàn)用Bgl 切割該載體進(jìn)行基因克隆，問(wèn)：(1)轉(zhuǎn)化后涂皿時(shí)應(yīng)加什么樣的抗生素?(2)培養(yǎng)后長(zhǎng)出的菌落具有什么樣的抗性基因型?(3)如何利用抗性變化篩選到含有插人片段的重組體?100限制性?xún)?nèi)切核酸酶 Bam H 和 Pst 切割某一DNA序列，結(jié)果示于圖20.1。 圖20.1 BomH 和Pst 識(shí)別序列處的切割，只顯示識(shí)別位點(diǎn)的核苷酸序列 (1)指出被切割 DNA分子的5端和3端； (2)如果

17、你將切割后的 DNA同 DNA聚合酶、4種 dNTP 在一起溫育，這些DNA末端會(huì)有什么樣的變化?(3)經(jīng)過(guò) B中的反應(yīng)后，你還能夠用 T4 DNA連接酶將BamH 末端連接起來(lái)嗎? Pst 末端呢？（T4DNA連接酶能夠連接平末端和黏性末端）(4)(3)中的連接后，能夠重新形成BamH I位點(diǎn)嗎？Pst I位點(diǎn)呢？101什么是遺傳學(xué)檢測(cè)法?102以 pBR322 DNA作為載體，從四環(huán)素抗性基因區(qū)克隆外源 DNA時(shí)，可采用環(huán)絲氨酸富集法篩選重組體，說(shuō)明其基本原理和基本操作過(guò)程。103放射性抗體檢測(cè)法(radioactive antibody test)的基本原理是什么?104何謂液相雜交?舉

18、例說(shuō)明在分子生物學(xué)中的應(yīng)用。105. 什么是活體標(biāo)記法(in vivo labeling)?106. 單鏈RNA作為探針，具有哪些單鏈 DNA探針?biāo)鶝](méi)有的優(yōu)點(diǎn)?107. 什么是隨機(jī)引物(random primer)?如何標(biāo)記 DNA?108良好的固相支持物必須具備哪些優(yōu)良特性?109以硝酸纖維素濾膜(nitrocellulose filter membrane)作為雜交的固相支持物具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?110什么是印跡(blotting)雜交?111什么是斑點(diǎn)雜交(dot hybridization)與狹縫雜交(slot hybridizatlon)?112什么是原位菌落雜交(colony hybr

19、idization)?113說(shuō)明 Southern雜交的原理和方法。114Northern印跡與 Southern印跡有什么不同?115建立了一個(gè)基因文庫(kù)后，如何鑒定一個(gè)攜帶目的基因的克隆?116說(shuō)明原核生物基因表達(dá)的正控制誘導(dǎo)型（positive inducible control）和負(fù)控制阻遏型（Negative-represible control）調(diào)控的遺傳機(jī)理。117一個(gè)四核苷酸序列的DNA分子，經(jīng)羥胺處理后，再經(jīng)過(guò)兩次復(fù)制，會(huì)產(chǎn)生什么樣的DNA分子？（5分）118有一段多肽鏈的C端氨基酸殘基的Tyr-Pro-Asn-Val-Thr-Cys-Glu,其對(duì)應(yīng)的DNA序列為（SS-1）

20、GATAAGCGTGCATGTAAGCCCCAT（SS-2） CTATTCGCACGTACATTCGGGGTA119. 已知E.Coli基因組DNA含有4.2×106bp，Cot/2為4。雞管狀細(xì)胞內(nèi)DNA含有7×108，其復(fù)性動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)為：請(qǐng)求出雞細(xì)胞DNA中，中度重復(fù)序列組分每一重復(fù)單位的核苷酸？及重復(fù)頻率？120. 將一個(gè)重組質(zhì)粒PMR1分別感染三個(gè)被phage溶原的E. coli菌株（三菌株的差別為phage的pRoR區(qū)段分別為或w.t 或oR1或oR2），培養(yǎng)于含ONPG（鄰硝基苯半乳糖苷）的培養(yǎng)皿中，在加入不同的IPTG（異丙基D硫代半乳糖苷，類(lèi)似于乳糖，作為效

21、應(yīng)物分子）的培養(yǎng)皿中，檢測(cè)被LacZ酶分解ONPG的黃色色度，并換算成Z酶酶活，請(qǐng)根據(jù)測(cè)定結(jié)果判斷這三條曲線(xiàn)分別代表哪一個(gè)測(cè)驗(yàn)菌株？為什么？121. 某一生物DNA的chemicai complexity=8.82×108bp，復(fù)性動(dòng)力學(xué)研究表明約有40%的DNA其Cot(1/2)=5, 請(qǐng)較詳細(xì)地說(shuō)明這部分DNA的特點(diǎn)。（E. coli DNA kinetic complexity=chemical complexity=4.2×108bp，Cot(1/2)=4）122分別說(shuō)明 phage以下突變型的表現(xiàn)型并簡(jiǎn)述其分子機(jī)理： c , c, hfl, cro123. 說(shuō)明c

22、onstitutive splicing與alternative splicing, cis-splicing與trans-splicing之間在概念及機(jī)制上的區(qū)別。124E. Coli阿拉伯糖（Arabinose）分解酶操縱子（ara operon）的調(diào)節(jié)基因I發(fā)生突變后，即使在培養(yǎng)基中加入效應(yīng)物（Arabinose），操縱子仍處于關(guān)閉狀態(tài)。將構(gòu)建的i/I基因的部分二部體E. Coli培養(yǎng)在含有阿拉伯糖的培養(yǎng)基中，操縱子處于開(kāi)放狀態(tài)。請(qǐng)說(shuō)明ara operon的調(diào)控類(lèi)型，并推測(cè)i突變基因的基因型。（簡(jiǎn)述推論的理由）125簡(jiǎn)述phage選擇溶原途徑（lysogenic pathway）的分子生

23、物學(xué)原理。126. 請(qǐng)說(shuō)明一種利用PCR技術(shù)進(jìn)行目標(biāo)基因定點(diǎn)突變的技術(shù)路線(xiàn)及原理。127擬應(yīng)用蘇云金稈菌中的一個(gè)毒素蛋白基因培育抗蟲(chóng)作物品種。請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)從基因分離開(kāi)始到品種推廣為止的實(shí)驗(yàn)方案。并指出值得注意的關(guān)鍵問(wèn)題。128說(shuō)明不同種屬的植物基因組共線(xiàn)性發(fā)現(xiàn)的理論和實(shí)踐意義。129基因組研究對(duì)作物遺傳改良將會(huì)產(chǎn)生哪些影響？130你正在克隆一個(gè)基因?，F(xiàn)在你己得到了數(shù)個(gè) DNA片段。下一步你將如何從中鑒定出你所希望得到的目標(biāo)基因。131談?wù)劵蚬こ痰幕静襟E，說(shuō)明重要工具酶在各個(gè)步驟中的作用。132根據(jù)你對(duì)分子克隆載體的了解，對(duì)克隆載體的類(lèi)別，用途及各自的特殊性加以簡(jiǎn)述。133以 E.Coli為例

24、，簡(jiǎn)述其基因重組的類(lèi)型，作用機(jī)理及其在分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用。134如何解釋抗體生成多樣性的分子機(jī)理。135如果你發(fā)現(xiàn)了一種新蛋白質(zhì)，你將如何進(jìn)行下一步研究?請(qǐng)按先后順序列出基本方案。136應(yīng)用生物技術(shù)創(chuàng)建作物新的種質(zhì)有哪些途徑和方法。137分子標(biāo)記輔助選擇在作物育種中有那些重要作用?如何實(shí)施?138說(shuō)明真核生物前體 RNA加工的類(lèi)別及機(jī)理。139說(shuō)明原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄元件(cis and trans)的特點(diǎn)。140簡(jiǎn)述人類(lèi)基因組研究近年來(lái)的進(jìn)展。141. 說(shuō)明DNA芯片(含Oligonucleotide chip and cDNA microarray)技術(shù)的基本概念和可能的用途。142

25、. 如何確定細(xì)菌的某一個(gè)遺傳表型是由染色體控制還是由質(zhì)?？刂频?。143. 簡(jiǎn)述 DNA重組的幾種不同方式及分子機(jī)理。144. 比較說(shuō)明原核生物與真核生物在基因表達(dá)水平上的異同。145至少列舉三例 (除 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)外)說(shuō)明核酸分子結(jié)構(gòu)的研究成果對(duì)分子生物學(xué)理論發(fā)展的重要貢獻(xiàn)146說(shuō)明生物體保證自身穩(wěn)定遺傳的機(jī)制。147說(shuō)明蛋白質(zhì)與 DNA之間序列非線(xiàn)性相關(guān)的因素。148在核苷酸測(cè)序的操作中，利用哪幾個(gè)途徑分別獲得一個(gè)片段兩條單鏈的序列?各自的理論依據(jù)是什么?試言簡(jiǎn)意賅地加以論述。149到目前為止，在高等生物中根據(jù)性狀表現(xiàn)分離未知產(chǎn)物基因采用哪些途徑?請(qǐng)說(shuō)明各種途徑的基本原理并各舉一例。15

26、0請(qǐng)以基因組研究的新進(jìn)展為例，討論分子生物學(xué)發(fā)展與生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的關(guān)系。151試述作物遺傳資源的重要性，何謂作物遺傳資源的創(chuàng)新?152利用分子標(biāo)記進(jìn)行基因定位的遺傳群體有幾種?各有什么優(yōu)、缺點(diǎn)?153就你所熟悉的某一作物，簡(jiǎn)述作物雜種優(yōu)勢(shì)研究與利用的現(xiàn)狀。154你對(duì)“基因工程育種”有何評(píng)價(jià)?155何謂斷裂基因( split gene)?何謂重疊基因( overlapping gene)?它們?cè)谏镞M(jìn)化與適應(yīng)上有何意義?156何謂分子標(biāo)記?分子標(biāo)記的種類(lèi)有哪些?可以開(kāi)展哪些領(lǐng)域的研究?157自花授粉作物與異花授粉作物的育種方法有何異同?數(shù)量性狀如何進(jìn)行改良?158在提取由 ColEI所衍生的質(zhì)粒

27、(如pBR322)時(shí)，常在培養(yǎng)攜帶質(zhì)粒的大腸桿菌搖瓶中加入一定濃度的氯霉素或壯觀(guān)霉素以擴(kuò)增質(zhì)粒DNA。質(zhì)粒DNA擴(kuò)增的理論依據(jù)是什么?這種質(zhì)粒DNA擴(kuò)增的方法為何并不具有普遍性?159E. Coli K12菌株的限制一修飾系統(tǒng)分別由R. M基因控制現(xiàn)有K12的三個(gè)突變菌系，當(dāng)用A噬菌體分別感染三個(gè)突變株后，將放出的噬菌體再去感染這三個(gè)菌株。得到如下不同的eop值，請(qǐng)判斷這三個(gè)突變株的有關(guān)（R. M）基因型。放出A的原始菌株K12-1K122K123K12-1111K12210-211K123111160現(xiàn)有兩種DNA片段： 1）ATTCCAGGATCCTGGCACCGTAAGGTCCTAGGA

28、CCGTGGC 2）CGATCTCCTAGATCTCAC GCTAGAGGATCTAGAGTG分別用形成等列序列的同裂酶<Isoschizomer>MboI和Sau3A消化后，混合，加入連接酶，會(huì)形成什么樣的DNA片段。161現(xiàn)有枯草桿菌dnaG基因的一個(gè)終止突變型菌株，當(dāng)用HA處理后，會(huì)得到什么結(jié)果？說(shuō)明理由。162下表中，a、b、c代表E. coli的Lac operon中的i、o、z三個(gè)基因。A）根據(jù)不同試驗(yàn)菌株在效應(yīng)物有無(wú)的條件下，測(cè)定Z酶的表達(dá)結(jié)果，說(shuō)明a、b、c各代表哪個(gè)基因。B）用i、o、z三個(gè)基因代號(hào)寫(xiě)出第、菌株的可能基因型。菌 株 基 因 型有Lac無(wú)Lac a-

29、b+c+ a+b+c-+ a+b-c+/F-a-b+c-+ a+b+c-/F-a-b-c+- a-b=c+/F-a=b-c-+163. 一位科學(xué)研究噬菌體的一個(gè)蛋白質(zhì)的功能時(shí)，獲得了以下幾個(gè)試驗(yàn)結(jié)果。A、當(dāng)用HA處理野生型噬菌體后，分離得到一個(gè)突變體a(mu+a)，它只產(chǎn)生該蛋白質(zhì)的一個(gè)片段。B、當(dāng)用5Bru處量muta后，又分離出兩個(gè)突變體，mu+b, mu+c，它們也只產(chǎn)生與muta后相同長(zhǎng)度的該蛋白質(zhì)的一個(gè)片段。 C、mu+a，mu+b, mu+c分別可以在不同的Su+ 基因型細(xì)胞內(nèi)合成該蛋白質(zhì)的正常多肽鏈。基因型Su-Su2+Su4+Su6+Su-Su+的DNA序列突變5°C

30、GA 33°GCT 55°CTA 33°GAT 5TTGAACTTAAATCCAGGTTCAAGTmu+amu+bmu+c+D、當(dāng)感染有mu+a的Su4+細(xì)菌分別與感染有mu+b的Su2+感染有mu+c的Su6+細(xì)菌結(jié)合后，沒(méi)有野生型重組噬菌體產(chǎn)生，不能在野生型Su-受菌體內(nèi)繁殖，但當(dāng)感染有mu+b的Su2+與感染有 mu+c的Su6+細(xì)菌結(jié)合后的極少數(shù)野生型噬菌體產(chǎn)生。請(qǐng)推測(cè)mu+a, mu+b, mu+c分別在su4+、su2+ 、su6+細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)與野生型合成的該蛋白質(zhì)的差異，并解釋A、B、C、D結(jié)果。（CAA為谷氨酰胺的密碼子：UCG為絲氨酸的密碼

31、子；UGG為色氨酸的密碼子）164大豆phasealin(菜豆朊)是在種子內(nèi)特異表達(dá)的一種分泌性蛋白，請(qǐng)用線(xiàn)段示意出該基因在DNA水平上的全部結(jié)構(gòu)區(qū)域，以及Pre-mRNA，mature-mRNA，多肽鏈的對(duì)應(yīng)區(qū)域，并標(biāo)明各區(qū)域的名稱(chēng)。（提示：該基因的各區(qū)域包括：Promoter（含3個(gè)重要的Site 或 Box）,Terminator, Leader Seq., Trailer seq., Signal seq., Chambon rule, Shine-Dalgarno seq., 2個(gè)Intron, 3個(gè)Exon, Adding trailer signaler, Repeat seq.

32、 in CTU.）165有人錯(cuò)誤地認(rèn)為“E. coli trp synthetase operon ic的突變型是由于ic基因產(chǎn)物可以分解效應(yīng)物分子所形成的”，正確的理解是什么？如何用遺傳學(xué)試驗(yàn)否認(rèn)這一說(shuō)法？166 用HA處理W.t枯草桿菌，得到分別兩個(gè)不同位點(diǎn)上發(fā)生了無(wú)意突變的菌株，mut1, mut2，并證明這兩個(gè)無(wú)意突變的序列不同。當(dāng)再用HA處理這兩個(gè)突變株后得到了以下結(jié)果。mut1mut2誘發(fā)DNA水平發(fā)生回復(fù)突變-誘發(fā)一種無(wú)意序列變成另一種無(wú)意序列+-167將E.coli Lac operon中的IPO片段與yeast的HO基因構(gòu)成的重組DNA分子與帶Leu+基因的質(zhì)粒連接，轉(zhuǎn)化到Y(jié)east 27B菌株中（基因型為HML a Leu-MAT HMRa SIR. ho）將轉(zhuǎn)化子涂于分別含有Lactose, Maltose, Lactose +Glucose的培養(yǎng)皿中，當(dāng)長(zhǎng)出菌苔后，再分別涂上DC14菌株（a 結(jié)合型），DC17菌株（結(jié)合型），請(qǐng)判斷在哪些培養(yǎng)皿中會(huì)出現(xiàn)二倍體的雜合菌落，并說(shuō)明推論的依據(jù)。27BMa