5基因的體外重組和轉(zhuǎn)化_第1頁
5基因的體外重組和轉(zhuǎn)化_第2頁
5基因的體外重組和轉(zhuǎn)化_第3頁
5基因的體外重組和轉(zhuǎn)化_第4頁
5基因的體外重組和轉(zhuǎn)化_第5頁
已閱讀5頁，還剩51頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1.同種酶產(chǎn)生的黏末端的連接dna連接酶討論： 連接后的重組分子還能被這兩種限制酶切割么？ ibamhi（1）在引物上添加酶切位點(diǎn)！注意添加保護(hù)序列nprimer1: 5 gcggggatcctatggtgagcaagggcgagganprimer2: 5 gcggggatcctcttgtacagctcgtccatgcc引入的酶切位點(diǎn)是單一的35t載體載體35載體載體t3535aapcr產(chǎn)物產(chǎn)物taq 酶pcr擴(kuò)增+335pcr產(chǎn)物產(chǎn)物aa5t載體載體tt5533連接連接轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化藍(lán)白篩選藍(lán)白篩選 目的片段目的片段 cacl2 轉(zhuǎn)化項(xiàng)目cacl2受體菌dna液體lb皿a陽性對(duì)照10ulpbr322dna100ul 1b陰性對(duì)照10ul2ul連接液100ul 2c陰性對(duì)照10ul100ul 3d連接液轉(zhuǎn)化組60ul6ul連接液600ul 4具體操作：具體操作：冰浴30；42 2 ；冰浴2 ；加37預(yù)熱lb培養(yǎng)45；表中a、b、c各取100ul/皿涂布，連接液轉(zhuǎn)化組d梯度涂布 i 50ul2皿；ii.500ul濃縮后2皿）37倒置培養(yǎng)過夜 ；檢查細(xì)菌生長情況。 質(zhì)粒的質(zhì)量和濃度質(zhì)粒的質(zhì)量和濃度 試劑

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論