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1、第一課時(shí)第1頁(yè)/共28頁(yè)課時(shí)目標(biāo):1簡(jiǎn)述基因工程的誕生過(guò)程和發(fā) 展歷程。2理解并闡釋基因工程的實(shí)質(zhì)。3說(shuō)出基因工程中基本工具的特 點(diǎn)及作用。第2頁(yè)/共28頁(yè)一、基因工程發(fā)展一、基因工程發(fā)展 20世紀(jì)70年代隨著DNA重組技術(shù)的出現(xiàn)而發(fā)展出來(lái)。對(duì)基因進(jìn)行加工,使生物體發(fā)展成為新的有機(jī)生物體。 各種生物工程在實(shí)施上大多離不開(kāi)基因工程手段,現(xiàn)代生物技術(shù)中,主要的是基因工程。第3頁(yè)/共28頁(yè)基因工程的理論鋪墊基因工程的理論鋪墊 艾弗里:證明是遺傳物質(zhì)艾弗里:證明是遺傳物質(zhì) 沃森和克里克:闡明雙螺旋結(jié)構(gòu)沃森和克里克:闡明雙螺旋結(jié)構(gòu) 尼倫貝格:破譯遺傳密碼尼倫貝格:破譯遺傳密碼1973年:美科恩:將兩種不
2、同來(lái)源的分子進(jìn)行體外重組,并首次實(shí)現(xiàn)了在大腸桿菌中的表達(dá),創(chuàng)立了定向改造生物的新技術(shù)基因工程19441953 1966第4頁(yè)/共28頁(yè)生物技術(shù)現(xiàn)狀如何?生物技術(shù)現(xiàn)狀如何? 世界生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀世界生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀 (20012001統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù))統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù))全球生物技術(shù)公司全球生物技術(shù)公司42844284家家 ;美國(guó);美國(guó)14571457家。家。全球收入全球收入384.7384.7億美元;美國(guó)億美元;美國(guó)253.19253.19億美元億美元 全球研發(fā)費(fèi)用全球研發(fā)費(fèi)用164.27164.27億美元;美國(guó)億美元;美國(guó)115.32115.32億美元億美元 我國(guó)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀我國(guó)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀30030
3、0家公司,有能力生產(chǎn)的家公司,有能力生產(chǎn)的150150家,上市家,上市4040多家。多家。產(chǎn)品總銷(xiāo)售額產(chǎn)品總銷(xiāo)售額200200億億RMBRMB?;蚬こ痰?頁(yè)/共28頁(yè)轉(zhuǎn)基因魚(yú)轉(zhuǎn)基因魚(yú)第6頁(yè)/共28頁(yè)轉(zhuǎn)基因蠶轉(zhuǎn)基因蠶轉(zhuǎn)基因猴 據(jù)日本共同社報(bào)道,日本宣布成功培養(yǎng)出了可結(jié)出綠、紅、橙3色熒光色蠶繭的轉(zhuǎn)基因蠶各兩三萬(wàn)只。 這種蠶被導(dǎo)入了水母、珊瑚等的熒光蛋白質(zhì)基因,所結(jié)的繭在自然光照射下呈淡綠色或粉色,但經(jīng)藍(lán)色發(fā)光二極管等光線照射后,通過(guò)濾鏡觀察則呈熒光色。該成果有望應(yīng)用于衣料及家裝等領(lǐng)域。第7頁(yè)/共28頁(yè)轉(zhuǎn)基因番茄世界上首例轉(zhuǎn)基因靈長(zhǎng)類動(dòng)物轉(zhuǎn)基因猴“安迪”美國(guó)俄勒岡保健科學(xué)大學(xué)稱,這只名為“安迪”
4、(Andi)的恒河猴于2000年10月2日誕生,它是由一粒被植入追蹤基因的未受精卵孕育而成的轉(zhuǎn)基因猴。它目前健康活潑,與另外兩只小猴生活在特制的“公寓”里。第8頁(yè)/共28頁(yè)轉(zhuǎn)基因番茄轉(zhuǎn)基因番茄問(wèn)題 以色列研究人員日前宣布,他們利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出一種具有檸檬和玫瑰香味的新品種番茄。生成類胡蘿卜素的其他農(nóng)作物和花也可以像番茄一樣,通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變氣味和口味。 吃個(gè)番茄也能抗乙肝,這絕非天方夜譚。每天坐在家里,吃上三五只西紅柿,人們體內(nèi)就能產(chǎn)生乙型肝炎病毒的抗體,達(dá)到和注射疫苗一樣的效果。 第9頁(yè)/共28頁(yè) 又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù),是指在體外,通過(guò)人工 “剪切”和“拼接”等方法,對(duì)生
5、物的基因進(jìn)行改造和重新組合,然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)并使重組基因在受體細(xì)胞中表達(dá), 產(chǎn)生人類需要的基因產(chǎn)物的技術(shù)。二、基因工程概念:場(chǎng)所:對(duì)象:過(guò)程:水平:結(jié)果:基因產(chǎn)物體外基因剪切 拼接 導(dǎo)入 表達(dá)分子第10頁(yè)/共28頁(yè) 基因工程培育抗蟲(chóng)棉的簡(jiǎn)要過(guò)程:導(dǎo)入重組DNA形成抗蟲(chóng)基因從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái)形成重組DNA重組DNA導(dǎo)入受體(棉花)細(xì)胞第11頁(yè)/共28頁(yè)三、DNA重組技術(shù)的基本工具分子手術(shù)刀限制性內(nèi)切酶分子針線DNA連接酶分子運(yùn)輸車(chē)運(yùn)載體第12頁(yè)/共28頁(yè)、“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶大腸桿菌(E.coli)的一種限制酶能識(shí)別GAATTC序列,并在G和A之間切開(kāi)。第13頁(yè)/共28頁(yè)
6、思考:限制酶所識(shí)別的序列有什么特點(diǎn)?限制酶在DNA的任何部位都能將DNA切開(kāi)嗎?黏性末端平末端第14頁(yè)/共28頁(yè) 限制酶所識(shí)別的序列,都可以找到一條中心軸線,中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。限制酶在DNA的任何部位都能將DNA切開(kāi)嗎?中軸線什么叫黏性末端?思考:限制酶所識(shí)別的序列有什么特點(diǎn)? 任何一種限制酶都只識(shí)別和切斷特定的核苷酸序列,這是由限制酶的性質(zhì)所決定的。被限制酶切開(kāi)的DNA兩條單鏈的切口,帶有幾個(gè)伸出的核苷酸,他們之間正好互補(bǔ)配對(duì),這樣的切口叫黏性末端。第15頁(yè)/共28頁(yè)(1 1)特點(diǎn):)特點(diǎn):(2 2)分布:)分布:(3 3)結(jié)果:)結(jié)果:(4 4)部位:)部
7、位:限制性核酸內(nèi)切酶(簡(jiǎn)稱限制酶)特異性,即識(shí)別特定核苷酸序列,在特定的切點(diǎn)切割DNA分子。產(chǎn)生黏性末端或平口末端主要在微生物中。磷酸二脂鍵第16頁(yè)/共28頁(yè) 要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端?要切兩個(gè)切口,產(chǎn)生四個(gè)黏性末端。 如果把兩種來(lái)源不同的DNA用同一種限制酶來(lái)切割,會(huì)怎樣呢? 會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端,然后讓兩者的黏性末端黏合起來(lái),就可以合成重組的DNA分子了。第17頁(yè)/共28頁(yè)、“分子針線”DNA連接酶DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái),是把梯子兩邊扶手的斷口連接起來(lái),這樣一個(gè)重組的DNA分子才能形成。思考:DNA連接酶連接的是什么部位
8、?第18頁(yè)/共28頁(yè)E.coliDNA連接酶(連接黏性末端)T4DNA連接酶(連接黏性末端和平末端)(1)部位:(2)種類:(3)結(jié)果:磷酸二脂鍵重組DNA分子DNA連接酶第19頁(yè)/共28頁(yè)AATTGCCTTAAG第20頁(yè)/共28頁(yè)思考:DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?不是一回事。(1)DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羥基上,形成磷酸二酯鍵;而DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,不是在單個(gè)核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。(2)DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板,將單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補(bǔ)的DNA鏈;而DNA連接酶是將
9、DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來(lái)。因此DNA連接酶不需要模板。第21頁(yè)/共28頁(yè)、運(yùn)載工具載體將外源基因送入受體細(xì)胞。 作用:條件:1)能夠自我復(fù)制。2)有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便目的基因插入到載體上去。3)具有某些標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選。常用: 質(zhì)粒、噬菌體和一些動(dòng)植物病毒。第22頁(yè)/共28頁(yè)大腸桿菌的質(zhì)粒:1. 最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒,其中常含有抗藥基因,如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒(méi)有決定性作用,但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成。第23頁(yè)/共28頁(yè)1.以下說(shuō)法正確的是 ( ) A、所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、運(yùn)載體必須具備的條件之一是:具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便與外源基因連接 D、DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵練 習(xí)第24頁(yè)/共28頁(yè)2.不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是( ) A、能復(fù)制 B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C、具有標(biāo)記基因 D、它是環(huán)狀DN
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