中藥含量測定技術(shù)ppt課件

1、第四章第四章- -復(fù)習(xí)復(fù)習(xí)n雜質(zhì)雜質(zhì)n概念概念n來源來源n分類分類n重金屬重金屬n概念概念n檢查緣由檢查緣由n檢查方法檢查方法n干擾物排除干擾物排除n最終產(chǎn)物最終產(chǎn)物n砷鹽砷鹽n檢查緣由檢查緣由n藥典收載方法藥典收載方法n檢查中酸性檢查中酸性SnCl2SnCl2作用？作用？ 中藥制劑中藥制劑含量測定技術(shù)含量測定技術(shù) 方法方法化學(xué)方法化學(xué)方法* *儀器分析方法儀器分析方法有效成分有效成分目的性成分目的性成分毒性成分毒性成分 分析成分分析成分中藥制劑含量測定技術(shù)中藥制劑含量測定技術(shù)高效液相色譜法高效液相色譜法薄層掃描法薄層掃描法可見可見-紫外分光光度法紫外分光光度法氣相色譜法氣相色譜法原子吸收分光

2、光度法原子吸收分光光度法方法方法儀器分析方法儀器分析方法滴定法滴定法浸出物測定法浸出物測定法分量法分量法揮發(fā)油測定法揮發(fā)油測定法總氮測定法總氮測定法化學(xué)方法化學(xué)方法儀器分析法之儀器分析法之紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法KCLA A:A:吸光度吸光度K:K:吸收系數(shù)吸收系數(shù)C:C:溶液濃度溶液濃度L:L:液層厚度液層厚度 根本原理根本原理:Lamber-Beer:Lamber-Beer定律定律紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法%1110cmEM紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法%11cmE*紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法n吸收光譜吸收光譜n吸收曲線：吸收曲線：

3、n定性根據(jù)定性根據(jù): :n 吸收峰吸收峰maxmaxn 吸收谷吸收谷minminn 肩峰肩峰shshn定量根據(jù)定量根據(jù): :吸收峰吸收峰maxmax鎢燈或鹵鎢燈：可見光源鎢燈或鹵鎢燈：可見光源 350 3501000nm1000nm氫燈或氘燈：紫外光源氫燈或氘燈：紫外光源 200 200360nm360nm吸收池：吸收池： 玻璃玻璃-能吸收能吸收UVUV光，僅適用于可見光區(qū)光，僅適用于可見光區(qū) 石英石英-不能吸收紫外光，適用于紫外和可不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)見光區(qū) 要求：匹配性對光的吸收和反射應(yīng)一致要求：匹配性對光的吸收和反射應(yīng)一致光光源源紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法

4、測定波長的選擇：測定波長的選擇： maxmax吸光度讀數(shù)范圍的選擇：吸光度讀數(shù)范圍的選擇：A=0.3A=0.30.70.7UV 吸光度丈量的條件選擇吸光度丈量的條件選擇樣樣參參調(diào)理光路調(diào)理光路光學(xué)性質(zhì)和厚度一樣光學(xué)性質(zhì)和厚度一樣樣品池樣品池樣品溶液樣品溶液，參比池參比池空白溶液空白溶液樣品池樣品池參比池參比池配制樣品的溶劑配制樣品的溶劑空白溶液空白溶液A AT TA A+ += = =+ +% %1001000 0樣品樣品A值值UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法對照品溶液：一系列不同濃度的對照品溶液對照品溶液：一系列不同濃度的對照品溶液 一樣條件下一樣條件下A為縱坐標(biāo)，為縱坐標(biāo)，C為橫坐標(biāo)為橫坐標(biāo)規(guī)范

5、曲線任務(wù)曲線規(guī)范曲線任務(wù)曲線樣品的濃度和含量樣品的濃度和含量一系列一系列A值值規(guī)范曲線又稱任務(wù)曲線。如吸光光度法，在繪制時(shí)，規(guī)范曲線又稱任務(wù)曲線。如吸光光度法，在繪制時(shí)，首先在一定條件下配制一系列具有不同知濃度吸光首先在一定條件下配制一系列具有不同知濃度吸光物質(zhì)的規(guī)范溶液，然后在確定的波長和光程等條件物質(zhì)的規(guī)范溶液，然后在確定的波長和光程等條件下，分別丈量系列溶液的吸光度，繪制下，分別丈量系列溶液的吸光度，繪制A-cA-c曲線，曲線，從而得到一條經(jīng)過原點(diǎn)的直線，即規(guī)范曲線。當(dāng)需從而得到一條經(jīng)過原點(diǎn)的直線，即規(guī)范曲線。當(dāng)需求對某未知液的濃度求對某未知液的濃度cxcx進(jìn)展測定時(shí)，只需求在一樣進(jìn)展測

6、定時(shí)，只需求在一樣條件下測得未知液的吸光度條件下測得未知液的吸光度AxAx，就可由，就可由cx=Ax/bcx=Ax/b計(jì)算得出或直接在規(guī)范曲線上查得計(jì)算得出或直接在規(guī)范曲線上查得cxcx。在實(shí)踐操作。在實(shí)踐操作中，應(yīng)留意調(diào)整中，應(yīng)留意調(diào)整cxcx的大小，使其對應(yīng)的的大小，使其對應(yīng)的AxAx處于規(guī)范處于規(guī)范曲線的直線范圍線性范圍之內(nèi)。曲線的直線范圍線性范圍之內(nèi)。UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法 規(guī)范曲線的直線部分所對應(yīng)的被測物規(guī)范曲線的直線部分所對應(yīng)的被測物質(zhì)濃度或含量的范圍稱為該方法的線質(zhì)濃度或含量的范圍稱為該方法的線性范圍。性范圍。 規(guī)范曲線是根據(jù)規(guī)范系列的濃度或含量和其

7、相對應(yīng)的相應(yīng)信號丈量值規(guī)范曲線是根據(jù)規(guī)范系列的濃度或含量和其相對應(yīng)的相應(yīng)信號丈量值來繪制的。如濃度或含量分別為來繪制的。如濃度或含量分別為x1,x2xnx1,x2xn，其相應(yīng)信號，其相應(yīng)信號( (吸光度吸光度) )的丈量的丈量值分別為值分別為y1,y2yny1,y2yn，用簡單的方法很難繪制出能準(zhǔn)確反映，用簡單的方法很難繪制出能準(zhǔn)確反映y y與與x x之間關(guān)系的規(guī)之間關(guān)系的規(guī)范曲線。通常，用范曲線。通常，用“一元線性回歸法來給出一元線性回歸法來給出y y與與x x的關(guān)系式的關(guān)系式 y=a+bx y=a+bx 1-11-1式中其中式中其中 式式(1-1)(1-1)稱為一元線性回歸方程，稱為一元線

8、性回歸方程，b b稱為回歸系數(shù)，即回歸直線的斜率，稱為回歸系數(shù)，即回歸直線的斜率，a a為截距。為截距。xbyaxxyyxxbniiniii121)()(nyiynxixnini11UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法當(dāng)兩個(gè)變量之間直線關(guān)系不夠嚴(yán)厲，數(shù)據(jù)的偏離較嚴(yán)重時(shí)，雖然當(dāng)兩個(gè)變量之間直線關(guān)系不夠嚴(yán)厲，數(shù)據(jù)的偏離較嚴(yán)重時(shí)，雖然也可以求得一條回歸線，但是，實(shí)踐上只需當(dāng)兩個(gè)變量之間存也可以求得一條回歸線，但是，實(shí)踐上只需當(dāng)兩個(gè)變量之間存在某種線性關(guān)系時(shí)，這條回歸線才有意義。判別回歸線能否有在某種線性關(guān)系時(shí)，這條回歸線才有意義。判別回歸線能否有意義，可用相關(guān)系數(shù)意義，可用相關(guān)系數(shù)r r來檢驗(yàn)。來檢驗(yàn)。相關(guān)系

9、數(shù)的定義式為：相關(guān)系數(shù)的定義式為：r r值在值在-1.0000-1.0000與與+1.0000+1.0000之間。相關(guān)系數(shù)的物理意義如下：之間。相關(guān)系數(shù)的物理意義如下：1 1r r=1=1時(shí)，時(shí)，y y與與x x之間存在嚴(yán)厲的線性關(guān)系，一切的之間存在嚴(yán)厲的線性關(guān)系，一切的yiyi值都值都在回歸線上。在回歸線上。2 2 r r=0=0時(shí)，時(shí)， y y與與x x之間完全不存在線性關(guān)系。之間完全不存在線性關(guān)系。3 3 0 0r r11時(shí)，時(shí)， y y與與x x之間存在一定的線性關(guān)系。之間存在一定的線性關(guān)系。r r值愈接近值愈接近1 1，線性關(guān)系就愈好，線性關(guān)系就愈好UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法-相關(guān)系

10、數(shù)相關(guān)系數(shù)rniniiiniiiniiniiyyxxyyxxyyxxbr112211212)()()()()(例：用光度法測定合金鋼中例：用光度法測定合金鋼中Mn的含量，吸光度與的含量，吸光度與Mn的含量間有以下關(guān)系：的含量間有以下關(guān)系：Mn的質(zhì)量的質(zhì)量/g 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 未知樣未知樣吸光度吸光度/A 0.032 0. 0.187 0.268 0.359 0.435 0.511 0.242試求出規(guī)范曲線的回歸方程及其相關(guān)系數(shù)試求出規(guī)范曲線的回歸方程及其相關(guān)系數(shù)r并計(jì)算未知樣品中并計(jì)算未知樣品中Mn的含量的含量解：此組數(shù)據(jù)中，組分濃度為零時(shí)，吸光

11、度不為零，這能夠是在試劑中解：此組數(shù)據(jù)中，組分濃度為零時(shí)，吸光度不為零，這能夠是在試劑中含有少量含有少量MnMn，或者含有其它在該丈量波長下有吸光的物質(zhì)。，或者含有其它在該丈量波長下有吸光的物質(zhì)。設(shè)設(shè)MnMn含量值為含量值為x x，吸光度值為，吸光度值為y y，按公式計(jì)算回歸系數(shù)，按公式計(jì)算回歸系數(shù)a a，b b值。值。n=7n=7。所以所以該規(guī)范曲線的回歸方程為該規(guī)范曲線的回歸方程為 y=0.038+3.95x y=0.038+3.95x712710112. 0)(;0442. 0)(;275. 0;06. 0iiiiixxyyxxyx038. 006. 095. 3275. 095. 30

12、112. 00442. 0)()(71271xbyaxxyyxxbiiiiiUV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法-實(shí)例實(shí)例n未知樣品的吸光度為未知樣品的吸光度為y=0.242y=0.242n 0.242=0.038+3.95x 0.242=0.038+3.95xn所以所以x=0.052x=0.052g gn故求出樣品中含故求出樣品中含MnMn為為0.0520.052g gn( (注：該題可用計(jì)算機(jī)方便統(tǒng)計(jì)處置注：該題可用計(jì)算機(jī)方便統(tǒng)計(jì)處置) )9993. 0175. 00112. 095. 3)()(1212niiniiyyxxbr相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法-實(shí)例實(shí)例-特點(diǎn)：用于可見分光

13、光度法特點(diǎn)：用于可見分光光度法 批量消費(fèi)批量消費(fèi) 曲線可多次運(yùn)用曲線可多次運(yùn)用UV-規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法UV-對照品比較法對照品比較法 對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為：對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為：供試品溶液中被測成分標(biāo)示量的供試品溶液中被測成分標(biāo)示量的100%100%10% 10% C供供=A供供/A對對C對對 供試的含量供試的含量% %= =C C供供D D供供 V VW供供100%對照品、樣品：各配制兩份對照品、樣品：各配制兩份吸收系數(shù)法吸收系數(shù)法含量含量% %= =ADVL100W100%11cmE留意：儀器波長留意：儀器波長 空白校正空白校正 吸收度準(zhǔn)確度的檢定吸收度準(zhǔn)確度的檢

14、定 雜散光的檢查雜散光的檢查優(yōu)點(diǎn)：無需對照品，方法簡便優(yōu)點(diǎn)：無需對照品，方法簡便AD1%VLW%11cmE含量含量% %= =100%本卷須知本卷須知 光源選擇光源選擇波長波長吸收池種類吸收池種類溶液高度溶液高度吸收度讀數(shù)范圍吸收度讀數(shù)范圍供試品應(yīng)取供試品應(yīng)取2 2份份 對照品比較法，對照品普通也應(yīng)取對照品比較法，對照品普通也應(yīng)取2 2份份平行操作，平均偏向應(yīng)在平行操作，平均偏向應(yīng)在0.5%0.5%以內(nèi)以內(nèi)例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定n本品為黃楊寧經(jīng)加工制成的片劑。每片本品為黃楊寧經(jīng)加工制成的片劑。每片含環(huán)維黃楊星含環(huán)維黃楊星D 0.5mgD 0.5mg或或

15、1mg1mg?？捎脤φ??？捎脤φ掌繁容^法測其含量。品比較法測其含量。n 環(huán)維黃楊星環(huán)維黃楊星D D測定原理：酸性染料比色法測定原理：酸性染料比色法B + H+BH+HInH+In-(BH+In-)(BH+In-)水相有機(jī)相例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定n對照品溶液的制備對照品溶液的制備n精細(xì)稱取經(jīng)精細(xì)稱取經(jīng)105枯燥至恒重的環(huán)維黃楊枯燥至恒重的環(huán)維黃楊星星D對照品對照品25mg實(shí)踐稱取實(shí)踐稱取24.94mg)，置置250ml量瓶中，加甲醇量瓶中，加甲醇70ml使溶解，用使溶解，用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，精

16、細(xì)量取搖勻，精細(xì)量取10ml，置，置100ml量瓶中，量瓶中，用用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，即得每度，搖勻，即得每1ml含黃楊星含黃楊星D10g的的對照溶液實(shí)踐濃度對照溶液實(shí)踐濃度C對對=9.976g/mln試寫出計(jì)算過程試寫出計(jì)算過程例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定n供試品溶液的制備供試品溶液的制備n取本品取本品20片標(biāo)示量為片標(biāo)示量為0.5mg/片，精細(xì)稱定片，精細(xì)稱定2.050g)，研細(xì)，精細(xì)稱取適量約相當(dāng)于黃楊寧，研細(xì)，精細(xì)稱取適量約相當(dāng)于黃楊寧0.5mg(稱取稱取0.1021g)，置，置50ml量瓶中，

17、加量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至近刻度，磷酸二氫鈉緩沖液至近刻度，80水浴水浴恒溫恒溫1.5小時(shí)后取出，冷卻至室溫，加小時(shí)后取出，冷卻至室溫，加0.05mol/L磷磷酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，離心酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，離心6分鐘分鐘3000轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/分，取上清液，即可分，取上清液，即可n假設(shè)標(biāo)示量為假設(shè)標(biāo)示量為1mg/片，其他數(shù)值不變，試求取樣范片，其他數(shù)值不變，試求取樣范圍？圍？例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定n測定法測定法n精細(xì)量取對照品溶液與供試品溶液各精細(xì)量取對照品溶液與供試品溶液各5ml，分，分別置分液漏斗中，各精細(xì)參與溴麝香草酚藍(lán)

18、溶別置分液漏斗中，各精細(xì)參與溴麝香草酚藍(lán)溶液取溴麝香草酚藍(lán)液取溴麝香草酚藍(lán)18mg，置，置250ml量瓶中，量瓶中，加甲醇加甲醇5ml使溶解，加使溶解，加0.05mol/L磷酸二氫鈉磷酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，即得緩沖液至刻度，搖勻，即得5ml，搖勻，立，搖勻，立刻分別精細(xì)參與三氯甲烷刻分別精細(xì)參與三氯甲烷10ml，振搖，振搖2分鐘，分鐘，靜置靜置1.5小時(shí)，分取三氯甲烷層，置含小時(shí)，分取三氯甲烷層，置含0.5g無無水硫酸鈉的具塞試管中，振搖，靜置，取上清水硫酸鈉的具塞試管中，振搖，靜置，取上清液，照分光光度法在液，照分光光度法在410nm處分別測定吸光度處分別測定吸光度A對對=0.454,

19、A樣樣=0.445，計(jì)算，即得。，計(jì)算，即得。藥品規(guī)范規(guī)定每片含環(huán)維黃楊星藥品規(guī)范規(guī)定每片含環(huán)維黃楊星DC26H46N2O，應(yīng)為標(biāo)示量的，應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%110%n試寫出計(jì)算公式試寫出計(jì)算公式例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定n計(jì)算計(jì)算n藥品規(guī)范規(guī)定每片含黃楊寧以環(huán)維黃楊星藥品規(guī)范規(guī)定每片含黃楊寧以環(huán)維黃楊星D DC26H46N2OC26H46N2O計(jì)算，應(yīng)為標(biāo)示量的計(jì)算，應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%90.0%110.0%110.0%。n 100%(A(A供供/A/A對對)C)C對對50.050.0平均片重平均片重(mg)(mg)標(biāo)示量標(biāo)示量%=%=W W供標(biāo)示量

20、供標(biāo)示量(mg)(mg)例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量例題：黃楊寧片中黃楊寧的含量測定測定六味地黃顆粒中牡丹皮的含量測定六味地黃顆粒中牡丹皮的含量測定 n取裝量差別項(xiàng)下的本品約取裝量差別項(xiàng)下的本品約2g2g，研細(xì)，精細(xì)稱，研細(xì)，精細(xì)稱定，用水蒸汽蒸餾，搜集餾出液約定，用水蒸汽蒸餾，搜集餾出液約450ml450ml，置置500ml500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法在照分光光度法在274nm274nm波優(yōu)點(diǎn)測定吸收度，波優(yōu)點(diǎn)測定吸收度，按丹皮酚按丹皮酚C9H10O3C9H10O3的吸收系數(shù)為的吸收系數(shù)為862862計(jì)算，計(jì)算，即得。藥品規(guī)范規(guī)定每袋裝量

21、為即得。藥品規(guī)范規(guī)定每袋裝量為5g5g含牡含牡丹皮按丹皮酚丹皮按丹皮酚 C9H10O3 C9H10O3 計(jì)，不得少于計(jì)，不得少于6.0mg6.0mg。 1g1g供試品中含牡丹皮按丹皮酚計(jì)，含量為：供試品中含牡丹皮按丹皮酚計(jì)，含量為： 含量含量%=A供供1%500.01000862m供供每袋六味地黃顆粒每袋六味地黃顆粒5g5g裝含牡丹皮按丹皮酚計(jì)裝含牡丹皮按丹皮酚計(jì)含量為：含量為：含量含量mg/g=A供供1%500.01000平均裝平均裝量量862m供供六味地黃顆粒中牡丹皮的含量測定六味地黃顆粒中牡丹皮的含量測定 儀器分析法之儀器分析法之薄層掃描法薄層掃描法TLCSn概念：指用一定波長的光照射在

22、薄層板上，對薄層色概念：指用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)產(chǎn)生熒譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)產(chǎn)生熒光的斑點(diǎn)進(jìn)展掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于光的斑點(diǎn)進(jìn)展掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥質(zhì)量量檢測的方法藥質(zhì)量量檢測的方法n色譜條件：選擇性好，組分能完全分別，斑點(diǎn)對稱、色譜條件：選擇性好，組分能完全分別，斑點(diǎn)對稱、均勻、不拖尾。均勻、不拖尾。n丈量方法：多運(yùn)用反射法丈量方法：多運(yùn)用反射法n光源光源n氘燈：氘燈：200370nm200370nmn鎢燈：鎢燈：370700nm370700nmn氙燈氙燈n汞燈汞燈薄層掃描法薄層掃描法n薄層

23、掃描法有外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。常用外標(biāo)法薄層掃描法有外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。常用外標(biāo)法n外標(biāo)法系指將一定量的供試品溶液和對照品溶液分別交叉點(diǎn)加外標(biāo)法系指將一定量的供試品溶液和對照品溶液分別交叉點(diǎn)加在同一塊薄層板上，展開，顯色，定位，掃描待測組分和對照在同一塊薄層板上，展開，顯色，定位，掃描待測組分和對照品斑點(diǎn)，測定相應(yīng)的吸光度或熒光強(qiáng)度積分值，計(jì)算被測成分品斑點(diǎn)，測定相應(yīng)的吸光度或熒光強(qiáng)度積分值，計(jì)算被測成分的含量。的含量。n外標(biāo)一點(diǎn)法：規(guī)范曲線經(jīng)過原點(diǎn)，馬錢子散等個(gè)別種類外標(biāo)一點(diǎn)法：規(guī)范曲線經(jīng)過原點(diǎn)，馬錢子散等個(gè)別種類n外標(biāo)兩點(diǎn)法：規(guī)范曲線不經(jīng)過原點(diǎn)，絕大多數(shù)種類采用外標(biāo)兩點(diǎn)法：規(guī)范曲線不經(jīng)過原點(diǎn)，絕大多

24、數(shù)種類采用n所謂一點(diǎn)法是指在一塊薄層板上對照品的濃度為一種點(diǎn)樣濃度，所謂一點(diǎn)法是指在一塊薄層板上對照品的濃度為一種點(diǎn)樣濃度，兩點(diǎn)法那么是指在一塊薄層板上對照品的濃度為兩種點(diǎn)樣濃度。兩點(diǎn)法那么是指在一塊薄層板上對照品的濃度為兩種點(diǎn)樣濃度。n操作方法：操作方法：n供試品溶液：兩份或以上供試品溶液：兩份或以上n點(diǎn)樣：供試品和對照品交叉點(diǎn)樣，每份原點(diǎn)不得少于點(diǎn)樣：供試品和對照品交叉點(diǎn)樣，每份原點(diǎn)不得少于2 2個(gè)個(gè)n展開：展距為展開：展距為15cm15cm薄層掃描法薄層掃描法n掃描方式：掃描方式： 單波長單波長 雙波長雙波長n測定波長測定波長n 被測組分被測組分maxmax， n參比波長參比波長n 組分

25、無吸收位置上組分無吸收位置上n 假設(shè)背景有均勻污染時(shí)，假設(shè)背景有均勻污染時(shí)，可選擇背景光譜中與測定可選擇背景光譜中與測定波長的等吸收處。波長的等吸收處。薄層掃描薄層掃描法法薄層掃描法薄層掃描法n計(jì)算n外標(biāo)一點(diǎn)法n外標(biāo)二點(diǎn)法供供供對供對對對 或 AAmmCCAA12mf Af大小1大小-mmfAA小大大小2大小-m Am AfAA 薄層掃描法薄層掃描法n馬錢子散中馬錢子的含量測定：【含量測定】取裝量差別項(xiàng)馬錢子散中馬錢子的含量測定：【含量測定】取裝量差別項(xiàng)下的本品約下的本品約0.5g0.5g，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參與三氯，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參與三氯甲烷甲烷20ml20ml，

26、濃氨試液，濃氨試液1ml1ml，悄然搖勻，稱定分量后，于室溫放置，悄然搖勻，稱定分量后，于室溫放置2424小時(shí)，再稱定分量，用三氯甲烷量補(bǔ)足減失分量，充分振搖小時(shí)，再稱定分量，用三氯甲烷量補(bǔ)足減失分量，充分振搖，濾過，濾液作為供試品溶液。另取士的寧對照品，加三氯甲，濾過，濾液作為供試品溶液。另取士的寧對照品，加三氯甲烷制成每烷制成每1ml1ml含含1mg 1mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法附錄附錄 B B實(shí)驗(yàn)，分別汲取供試品溶液實(shí)驗(yàn)，分別汲取供試品溶液8l8l和對照品溶液和對照品溶液4l4l，交叉點(diǎn)于同一硅膠，交叉點(diǎn)于同一硅膠GF254GF254薄

27、層板上，以甲苯薄層板上，以甲苯- -丙酮丙酮- -乙醇乙醇- -濃氨濃氨試液試液16:12:1:416:12:1:4的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。照薄層色譜法附錄照薄層色譜法附錄 B B薄層色譜掃描法進(jìn)展掃描，波長：薄層色譜掃描法進(jìn)展掃描，波長：S=257nmS=257nm，RR300nm300nm，丈量供試品與對照品吸光度積分值，丈量供試品與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。計(jì)算，即得。n實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：m m對對=24.90mg,mS=0.5324,A=24.90mg,mS=0.5324,A對對=22000.73,A=22000.73,A供供

28、=15659.12=15659.12n本品每袋含馬錢子以士的寧計(jì)本品每袋含馬錢子以士的寧計(jì)C21H22N2O2C21H22N2O2應(yīng)為應(yīng)為7.27.28.8mg8.8mg。薄層掃描法薄層掃描法n馬錢子散中馬錢子的含量測定馬錢子散中馬錢子的含量測定供對供對9.960415659.122010822000.730.67.99（/ 袋）0.5324含量SSmgACDVCDVAmmmm薄層掃描法薄層掃描法n大山楂丸中山楂的含量測定：【含量測定】大山楂丸中山楂的含量測定：【含量測定】 取分量差別項(xiàng)下的本品，剪碎取分量差別項(xiàng)下的本品，剪碎，混勻，取約，混勻，取約3g3g，精細(xì)稱定，加水，精細(xì)稱定，加水30

29、ml30ml， 60 60水浴溫?zé)崾钩浞秩苌?，加硅水浴溫?zé)崾钩浞秩苌?，加硅藻土藻?g2g，攪勻，濾過，殘?jiān)盟?，攪勻，濾過，殘?jiān)盟?0ml30ml洗滌，洗滌，100100烘干，連同濾紙一并置索烘干，連同濾紙一并置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流提取氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流提取4 4小時(shí)，提取液回收溶劑至干，殘小時(shí)，提取液回收溶劑至干，殘?jiān)檬兔言檬兔?0306060浸泡浸泡2 2次每次約次每次約2 2分鐘，每次分鐘，每次5ml5ml，傾去石油醚，傾去石油醚液，殘?jiān)訜o水乙醇液，殘?jiān)訜o水乙醇- -三氯甲烷三氯甲烷3:23:2的混合溶液適量，微熱使溶解，轉(zhuǎn)的混合溶液適量，微熱

30、使溶解，轉(zhuǎn)移至移至5ml5ml量瓶中，用上述混合溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另量瓶中，用上述混合溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取熊果酸對照品適量，精細(xì)稱定，加無水乙醇制成每取熊果酸對照品適量，精細(xì)稱定，加無水乙醇制成每1ml1ml含含0.5mg0.5mg的溶液，的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法附錄作為對照品溶液。照薄層色譜法附錄VI BVI B實(shí)驗(yàn)，分別精細(xì)汲取供試品實(shí)驗(yàn)，分別精細(xì)汲取供試品溶液溶液5l5l、對照品溶液、對照品溶液4l4l與與8l8l，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G G薄層板上，以薄層板上，以環(huán)己烷環(huán)己烷- -三氯甲烷三氯甲烷- -乙酸乙酯

31、乙酸乙酯- -甲酸甲酸20:5:8:0.120:5:8:0.1為展開劑，展開，取出，為展開劑，展開，取出，晾干，噴以晾干，噴以10%10%硫酸乙醇溶液，在硫酸乙醇溶液，在110110加熱至斑點(diǎn)顯色明晰，在薄層板上加熱至斑點(diǎn)顯色明晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法附錄覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法附錄 B B薄層薄層色譜掃描法進(jìn)展掃描，波長：色譜掃描法進(jìn)展掃描，波長：S=535nmS=535nm； R=650nm R=650nm，丈量供試品吸光，丈量供試品吸光度積分值與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。度積分值與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。n測

32、得數(shù)據(jù)：測得數(shù)據(jù)：A A供供=5659.12=5659.12、A A對對1=2057.731=2057.73、A A對對2=7901.252=7901.25。n本品每丸含山楂以熊果酸本品每丸含山楂以熊果酸C30H4803C30H4803計(jì)，不得少于計(jì)，不得少于7.0mg7.0mg。薄層掃描法薄層掃描法n大山楂丸中山楂的含量測定大山楂丸中山楂的含量測定大小1大小-0.49848 - 0.498440.0003412-7901.252057.73mmfAA小大大小2大小-0.498447901.250.498482057.731.2927901.25-2057.73m Am AfAA供1 供20.

33、00034125659.121.2923.21（6g）mf Af供3.216595含量=9.33（/ 丸）3.1023SCDVmmgm補(bǔ)補(bǔ): :分析天平運(yùn)用和稱量分析天平運(yùn)用和稱量n感量感量n0.1mg0.1mgn0.01mg0.01mgn0.001mg0.001mgn用途：較精細(xì)的檢驗(yàn)任務(wù)稱量用途：較精細(xì)的檢驗(yàn)任務(wù)稱量n含量測定含量測定n對照品稱量對照品稱量n滴定液標(biāo)化滴定液標(biāo)化n微量水分測定微量水分測定補(bǔ)補(bǔ): :分析天平運(yùn)用前預(yù)備分析天平運(yùn)用前預(yù)備n精度選擇：精細(xì)稱定精度選擇：精細(xì)稱定n大于大于100mg100mg，感量為，感量為0.1mg0.1mg天平天平n10010mg10010mg，

34、感量為，感量為0.01mg0.01mg天平天平n小于小于10mg10mg，感量為，感量為0.001mg0.001mg天平天平n檢查該天平的運(yùn)用登記表檢查該天平的運(yùn)用登記表n檢查水準(zhǔn)器內(nèi)的氣泡：水準(zhǔn)器圓的中心位置檢查水準(zhǔn)器內(nèi)的氣泡：水準(zhǔn)器圓的中心位置n檢查硅膠檢查硅膠n軟毛刷輕刷天平軟毛刷輕刷天平n調(diào)好零點(diǎn)調(diào)好零點(diǎn)n在經(jīng)典液相色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)根底上建立的一種液相色在經(jīng)典液相色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)根底上建立的一種液相色譜法譜法n適用范圍適用范圍n溶解后能制成溶液的樣品溶解后能制成溶液的樣品n不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制n分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差及高分子和離子型樣分子量大、

35、難氣化、熱穩(wěn)定性差及高分子和離子型樣品均可檢測品均可檢測n用途廣泛，占有機(jī)物的用途廣泛，占有機(jī)物的80%80%n特點(diǎn)特點(diǎn)n高柱效高柱效n=104n=104片片/ /米米n高靈敏度高靈敏度n高選擇性高選擇性n分析速度快分析速度快n儀器儀器n高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜系統(tǒng)、檢測系高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)統(tǒng)、數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)n1.1.儲液罐；儲液罐；2.2.脫氣安裝；脫氣安裝；3.3.梯度洗脫；梯度洗脫；4.4.高壓高壓輸液泵；輸液泵；5.5.流動相流量顯示；流動相流量顯示；6.6.柱前壓力表；柱前壓力表；7.7.輸液泵頭；輸液泵頭；8.8.過濾器；過濾器；9.9.阻尼

36、器；阻尼器；10.10.進(jìn)樣進(jìn)樣安裝；安裝；11.11.色譜柱；色譜柱；12.12.檢測器；檢測器；13.13.數(shù)據(jù)處置數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)；系統(tǒng)；14.14.廢液儲罐廢液儲罐n儀器儀器n高壓輸液系統(tǒng)高壓輸液系統(tǒng)n貯液罐：盛裝流動相貯液罐：盛裝流動相n過濾器：過濾流動相中的塵?；虿蝗苄缘念w粒物質(zhì)過濾器：過濾流動相中的塵粒或不溶性的顆粒物質(zhì)n高壓輸液泵：完成流動相的保送義務(wù)高壓輸液泵：完成流動相的保送義務(wù)n進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)n六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣：定量環(huán)定量和微量注射器定量六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣：定量環(huán)定量和微量注射器定量n自動進(jìn)樣器自動進(jìn)樣器n色譜系統(tǒng)：色譜柱和柱溫箱色譜系統(tǒng)：色譜柱和柱溫箱n檢測系統(tǒng)：紫外檢測器檢測

37、系統(tǒng)：紫外檢測器UVDUVD、二極管陣列檢測器、二極管陣列檢測器DVDDVD、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、示差折、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、示差折光檢測器、電化學(xué)檢測器和質(zhì)譜檢測器光檢測器、電化學(xué)檢測器和質(zhì)譜檢測器n數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)nHPLCHPLC進(jìn)樣安裝進(jìn)樣安裝n隔膜進(jìn)樣高分子有機(jī)硅膠墊隔膜進(jìn)樣高分子有機(jī)硅膠墊進(jìn)樣室進(jìn)樣室HPLCHPLC系統(tǒng)壓系統(tǒng)壓力太大，必需停泵進(jìn)樣早期力太大，必需停泵進(jìn)樣早期n閥進(jìn)樣：不用停泵，六通閥閥進(jìn)樣：不用停泵，六通閥透明透明( (棕色棕色) )玻璃樣品瓶玻璃樣品瓶 自動進(jìn)樣器自動進(jìn)樣器n色譜柱色譜柱- ODS- ODS柱柱n非極性固定相非極性固定

38、相n反相色譜法反相色譜法n流動相：極性流動相流動相：極性流動相n甲醇甲醇- -水水n乙腈乙腈- -水水n洗脫洗脫n梯度洗脫梯度洗脫n等度洗脫等度洗脫n極性大組分先出柱，極性小的組分后出極性大組分先出柱，極性小的組分后出柱柱 管時(shí)間即組分在流動相中的所耗費(fèi)的時(shí)間，管時(shí)間即組分在流動相中的所耗費(fèi)的時(shí)間，或流動相充溢柱內(nèi)空隙體積占據(jù)的空間所需求或流動相充溢柱內(nèi)空隙體積占據(jù)的空間所需求的時(shí)間，又稱流動相保管時(shí)間的時(shí)間，又稱流動相保管時(shí)間n調(diào)整保管時(shí)間調(diào)整保管時(shí)間tRtR：組分的保管時(shí)間與死時(shí)間：組分的保管時(shí)間與死時(shí)間之差值，即組分在固定相中滯留的時(shí)之差值，即組分在固定相中滯留的時(shí)mRRttt0tttR

39、R或n色譜圖及其參數(shù)見圖色譜圖及其參數(shù)見圖n保管時(shí)間保管時(shí)間tR tR ：定性：定性n峰高峰高h(yuǎn) h ：峰頂?shù)交€的間隔?？捎糜诙浚悍屙?shù)交€的間隔?？捎糜诙縩半峰寬半峰寬W1/2W1/2：峰高一半處的寬度：峰高一半處的寬度n峰寬峰寬W W：從色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)作切線與基線相交：從色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)作切線與基線相交部分部分n峰面積峰面積A A：色譜峰與基線之間所包括的面積，：色譜峰與基線之間所包括的面積，常用來定量常用來定量不對稱因子不對稱因子ABAAWfhs2)(205. 0fs在在0.951.05之間之間fs小于小于0.95fs大于大于1.05n系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：n實(shí)際塔板數(shù)實(shí)際

40、塔板數(shù)n n：n分別度分別度R R：n反復(fù)性反復(fù)性n對照溶液待測物質(zhì)或其他延續(xù)進(jìn)樣對照溶液待測物質(zhì)或其他延續(xù)進(jìn)樣3 35 5次次n相對規(guī)范偏向應(yīng)不大于相對規(guī)范偏向應(yīng)不大于2.0%2.0%n拖尾因子拖尾因子T T： 0.95 0.951.051.0521)(212WWttRRR22212)(16)(54. 5)(WtWttnRRR理105.02dWThn分別度計(jì)算分別度計(jì)算n相臨兩組分間峰頂間間隔是峰底寬平均值相臨兩組分間峰頂間間隔是峰底寬平均值的幾倍衡量色譜分別條件優(yōu)劣的參數(shù)的幾倍衡量色譜分別條件優(yōu)劣的參數(shù))2(21)1 (21122112)(177. 1)(2WWttWWttRRRRR完全未

41、分開完全分離基本分離0 . 165 . 140 . 1RtRtRRR22112WWttRRR峰寬和之半峰寬和之半保管值之差峰頂間距保管值之差峰頂間距n操作方法操作方法n操作前的預(yù)備：操作前的預(yù)備：n儀器檢查儀器檢查n流動相的制備純化流動相的制備純化n供試品和對照品溶液配制各兩份供試品和對照品溶液配制各兩份n系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)n測定法測定法n定量根據(jù)：峰面積或峰高定量定量根據(jù)：峰面積或峰高定量n雜質(zhì)含量：峰面積法雜質(zhì)含量：峰面積法 n含量測定含量測定n面積歸一法面積歸一法n C%=Ai/A C%=Ai/A100%100%n內(nèi)標(biāo)加校正因子法：少用內(nèi)標(biāo)加校正因子法：少用n外標(biāo)法外標(biāo)法: :

42、常用常用對對內(nèi)內(nèi)CACAf/內(nèi)內(nèi)供供ACAfC對供對供AACCn三黃片小片中大黃的測定三黃片小片中大黃的測定n檢驗(yàn)根據(jù)檢驗(yàn)根據(jù) 20212021年版一部年版一部457457頁頁n【處方】大黃【處方】大黃300g 300g 鹽酸小檗堿鹽酸小檗堿5g 5g 黃芩浸膏黃芩浸膏21g21gOHOHCH3HOOOOHOHCH3HOOn【含量測定】大黃【含量測定】大黃 照高效液相色譜法附錄照高效液相色譜法附錄 D D測定。測定。n色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇；甲醇-0.1%-0.1%磷酸溶液磷酸溶液85:1585:15

43、為流動相；檢測波長為為流動相；檢測波長為254nm254nm。實(shí)際板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于實(shí)際板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于20002000。n對照品溶液的制備對照品溶液的制備 取大黃素對照品和大黃酚對照品適量，精細(xì)取大黃素對照品和大黃酚對照品適量，精細(xì)稱定，加無水乙醇稱定，加無水乙醇- -乙酸乙酯乙酸乙酯2:12:1混合溶液制成每混合溶液制成每1ml1ml含大黃含大黃素素10g10g、大黃酚、大黃酚25g25g的混合液，即得。的混合液，即得。n供試品溶液的制備供試品溶液的制備 取本品取本品2020片，除去包衣，精細(xì)稱定，研細(xì)片，除去包衣，精細(xì)稱定，研細(xì)過三號篩，取約過三號篩，取約0.26g0.

44、26g，精細(xì)稱定，置錐形瓶中，精細(xì)加乙醇，精細(xì)稱定，置錐形瓶中，精細(xì)加乙醇25ml25ml，稱定分量，加熱回流，稱定分量，加熱回流1 1小時(shí)，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的分小時(shí)，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的分量，濾過，精細(xì)量取續(xù)濾液量，濾過，精細(xì)量取續(xù)濾液10ml10ml，置燒瓶中，蒸干，加，置燒瓶中，蒸干，加30%30%乙醇乙醇- -鹽酸鹽酸10:110:1混合溶液混合溶液15ml15ml，置水浴中加熱水解，置水浴中加熱水解1 1小時(shí)，立刻冷小時(shí)，立刻冷卻，用三氯甲烷強(qiáng)力振搖提取卻，用三氯甲烷強(qiáng)力振搖提取4 4次，每次次，每次15ml15ml，合并三氯甲烷液，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)脽o水乙醇，蒸干，

45、殘?jiān)脽o水乙醇- -乙酸乙酯乙酸乙酯2:12:1的混合溶液溶解，轉(zhuǎn)的混合溶液溶解，轉(zhuǎn)移至移至25ml25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。n測定法測定法 分別精細(xì)汲取對照品溶液和供試品溶液各分別精細(xì)汲取對照品溶液和供試品溶液各10l10l，注入液，注入液相色譜儀，測定，即得。相色譜儀，測定，即得。n本品每片含大黃以大黃素本品每片含大黃以大黃素C15H10O5C15H10O5和大黃酚和大黃酚C15H10O4C15H10O4總總量計(jì)，小片不得少于量計(jì)，小片不得少于1.55mg1.55mg；大片不得少于；大片不得少于3.1mg3.1

46、mg。n流動相的配制流動相的配制 取甲醇色譜純?nèi)〖状忌V純425ml425ml和和0.1%0.1%磷酸溶液磷酸溶液75ml75ml混合均勻，用混合均勻，用0.45m0.45m的濾膜過濾，超聲處置的濾膜過濾，超聲處置30min30min，即得。，即得。n對照品溶液的制備對照品溶液的制備 分別精細(xì)稱取大黃素對照品分別精細(xì)稱取大黃素對照品25mg25mg和大黃酚和大黃酚對照品對照品63mg63mg，置，置25ml25ml量瓶中，加無水乙醇量瓶中，加無水乙醇- -乙酸乙酯乙酸乙酯2:12:1混合溶液至刻度，搖勻，精細(xì)量取混合溶液至刻度，搖勻，精細(xì)量取1ml1ml，置，置100ml100ml量瓶中，加量

47、瓶中，加無水乙醇無水乙醇- -乙酸乙酯乙酸乙酯2:12:1混合溶液至刻度，搖勻，用混合溶液至刻度，搖勻，用0.45m0.45m的濾膜過濾，即得。的濾膜過濾，即得。n供試品溶液的制備供試品溶液的制備 取本品取本品2020片，用小刀除去包衣留意勿損片，用小刀除去包衣留意勿損失內(nèi)容物，精細(xì)稱定，置研缽中研細(xì)后，過三號篩，取約失內(nèi)容物，精細(xì)稱定，置研缽中研細(xì)后，過三號篩，取約0.26g0.26g，置錐形瓶中，依法操作，即得。，置錐形瓶中，依法操作，即得。n測定，照高效液相色譜法測定。測定，照高效液相色譜法測定。n實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：2020片總分量為片總分量為5.3100g5.3100g；m m供供=

48、0.2610g=0.2610g、m m對大黃對大黃素素=0.02509g=0.02509g、m m對大黃酚對大黃酚=0.06286g=0.06286g；A A供大黃素供大黃素=285721=285721、A A供大黃酚供大黃酚=538079=538079、A A對大黃素對大黃素463379463379、A A對大黃酚對大黃酚=1300561=1300561。6對（大黃素）0.0250911010.04（ g/ml）25100C6對（大黃酚）0.062861=1025.14（ g/ml）25100C供（大黃素）供(大黃素)對（大黃素）對（大黃素）28572110.046.191（ g/ml）46

49、3379ACCA供（大黃酚）供(大黃酚)對（大黃酚）對（大黃酚）53807925.1428.25（ g/ml）478910ACCA供（大黃素）-3大黃素含量256.19110255.3100100.394（mg / 片）0.261020SCDVmm-32528.2510255.310010大黃酚含量1.796（mg / 片）0.261020含量大黃素含量大黃酚含量0.3941.7962.1902.19（mg/片）n【處方】黃連【處方】黃連165g 165g 大黃大黃500g 500g 黃芩黃芩250g250gn【含量測定】照高效液相色譜法【含量測定】照高效液相色譜法( (附錄附錄 ) )測定。

50、測定。n色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇，以甲醇0.2mol/L0.2mol/L磷酸二氫鈉緩沖液用磷酸調(diào)理磷酸二氫鈉緩沖液用磷酸調(diào)理pHpH值至值至2.72.7(4258)(4258)為流動相；檢測波長為為流動相；檢測波長為275nm275nm。實(shí)際板數(shù)按黃芩苷峰。實(shí)際板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于計(jì)算應(yīng)不低于50005000。n對照品溶液的制備精細(xì)稱取黃芩苷對照品對照品溶液的制備精細(xì)稱取黃芩苷對照品12.5mg12.5mg，置，置250ml250ml量量瓶中瓶中, ,加甲醇加甲醇10ml10ml使溶解使溶解, ,

51、用水稀釋至刻度用水稀釋至刻度, ,搖勻搖勻, ,即得即得( (每每1ml1ml中含中含黃芩苷黃芩苷50g)50g)。n供試品溶液的制備取本品裝量差別項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約供試品溶液的制備取本品裝量差別項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.75g0.75g，精細(xì)稱定，置，精細(xì)稱定，置100ml100ml量瓶中量瓶中, ,加甲醇加甲醇10ml10ml，超聲處置功，超聲處置功率率250W250W，頻率，頻率50kHz50kHz1010分鐘，放冷，加水稀釋至刻度分鐘，放冷，加水稀釋至刻度, ,搖勻，離搖勻，離心，取上清液，即得。心，取上清液，即得。n測定法分別精細(xì)汲取對照品溶液與供試品溶液各測定法分別精細(xì)汲取對照

52、品溶液與供試品溶液各10l,10l,注入液注入液相色譜儀相色譜儀, ,測定，即得。測定，即得。n本品每袋含黃芩以黃芩苷本品每袋含黃芩以黃芩苷(C21H18O11)(C21H18O11)計(jì)，不得少于計(jì)，不得少于21mg21mg。n氣相色譜法：以氣體為流動相的柱色譜分別技術(shù)氣相色譜法：以氣體為流動相的柱色譜分別技術(shù)n分類分類n按固定相分按固定相分n氣氣- -固色譜固色譜n氣氣- -液色譜液色譜n按分別原理分按分別原理分n吸附色譜吸附色譜n分配色譜分配色譜n按柱子粗細(xì)分按柱子粗細(xì)分n填充柱色譜填充柱色譜n毛細(xì)管柱色譜毛細(xì)管柱色譜n適用性適用性n分析氣體、易揮發(fā)的液體及固體分析氣體、易揮發(fā)的液體及固體

53、n不適宜分析不易氣化或不穩(wěn)定性物質(zhì)不適宜分析不易氣化或不穩(wěn)定性物質(zhì)n樣品的衍生化使運(yùn)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)展樣品的衍生化使運(yùn)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)展n 流出曲線色譜圖：電信號強(qiáng)度隨時(shí)間變化曲線流出曲線色譜圖：電信號強(qiáng)度隨時(shí)間變化曲線色譜峰：流出曲線上突起部分色譜峰：流出曲線上突起部分不對稱因子不對稱因子ABAAWfhs2)(205. 0fs在0.951.05之間fs小于0.95fs大于1.05n操作前預(yù)備操作前預(yù)備n樣品溶液和對照品溶液的制備：定量測定時(shí)，對樣品溶液和對照品溶液的制備：定量測定時(shí)，對照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別配制照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別配制2 2份。份。n儀器檢查儀器檢查n系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

54、：同高效液相色譜法系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：同高效液相色譜法n實(shí)際板數(shù)實(shí)際板數(shù)n分別度分別度n反復(fù)性：相對規(guī)范偏向應(yīng)不大于反復(fù)性：相對規(guī)范偏向應(yīng)不大于2.0%2.0%n拖尾因子拖尾因子22212)(16)(54. 5)(WtWttnRRR理21)(212WWttRRR105.02dWThn定量分析：以峰高或峰面積定量定量分析：以峰高或峰面積定量n歸一化歸一化n法前提：試樣中一切組分都產(chǎn)生信號并能檢出色譜法前提：試樣中一切組分都產(chǎn)生信號并能檢出色譜峰峰n根據(jù)：組分含量與峰面積成正比根據(jù)：組分含量與峰面積成正比n優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)n 簡便，準(zhǔn)確簡便，準(zhǔn)確n 定量結(jié)果與進(jìn)樣量、反復(fù)性無關(guān)前提定量結(jié)果與進(jìn)樣量、反復(fù)性無關(guān)

55、前提柱子不柱子不超載超載 n 色譜條件略有變化對結(jié)果幾乎無影響色譜條件略有變化對結(jié)果幾乎無影響n缺陷：缺陷：n 一切組分必需在一定時(shí)間內(nèi)都出峰一切組分必需在一定時(shí)間內(nèi)都出峰 n 必需知一切組分的校正因子必需知一切組分的校正因子n 不適宜微量組分的測定不適宜微量組分的測定%100%100%11nniiiiiiiiifAfAfAfAfAfACn不需求校正因子，不需求一切組分出峰不需求校正因子，不需求一切組分出峰n結(jié)果受進(jìn)樣量、進(jìn)樣反復(fù)性和操作條件影響大結(jié)果受進(jìn)樣量、進(jìn)樣反復(fù)性和操作條件影響大n每次進(jìn)樣量應(yīng)一致，否那么產(chǎn)生誤差每次進(jìn)樣量應(yīng)一致，否那么產(chǎn)生誤差n內(nèi)標(biāo)物與待測物保管時(shí)間應(yīng)接近且內(nèi)標(biāo)物與待

56、測物保管時(shí)間應(yīng)接近且R1.5R1.5n內(nèi)標(biāo)物為高純度規(guī)范物質(zhì)或含量知物質(zhì)內(nèi)標(biāo)物為高純度規(guī)范物質(zhì)或含量知物質(zhì)內(nèi)內(nèi)對對/ACfAC供內(nèi)供內(nèi)ACCfA薄荷腦對照品氣相色譜圖 川貝枇杷糖漿氣相色譜圖液漏斗中，冷凝管及揮發(fā)油測定管內(nèi)壁用少量環(huán)己烷洗液漏斗中，冷凝管及揮發(fā)油測定管內(nèi)壁用少量環(huán)己烷洗滌，并入分液漏斗中，分取環(huán)己烷液，水液再用環(huán)己烷滌，并入分液漏斗中，分取環(huán)己烷液，水液再用環(huán)己烷提取提取2 2次，每次次，每次3ml3ml，用鋪有無水硫酸鈉，用鋪有無水硫酸鈉0.5g0.5g的漏斗濾過，的漏斗濾過，合并環(huán)己烷液，置合并環(huán)己烷液，置20ml20ml量瓶中，精細(xì)參與內(nèi)標(biāo)溶液量瓶中，精細(xì)參與內(nèi)標(biāo)溶液1m

57、l1ml，加環(huán)己烷至刻度，搖勻，即得。汲取加環(huán)己烷至刻度，搖勻，即得。汲取1l1l，注入氣相色，注入氣相色譜儀，測定，即得。譜儀，測定，即得。n本品每本品每1ml1ml含薄荷腦含薄荷腦C10H20OC10H20O應(yīng)不少于應(yīng)不少于0.20mg0.20mg。內(nèi)A內(nèi)75.1510.7515（mg/ml）520C對73.2610.7326（mg/ml）520C內(nèi)內(nèi)對對/851302.0/0.75151.040/798023.5/0.7326ACfAC供內(nèi)供內(nèi)814180.50.75151.0400.7561（mg/ml）841603.2ACCfA供20含量0.75610.30240.302（mg/ml

58、）50CDn檢驗(yàn)根據(jù)檢驗(yàn)根據(jù) 20212021年版一部年版一部12221222頁頁n【檢查】乙醇量【檢查】乙醇量 應(yīng)為應(yīng)為60%60%70%70%附錄附錄 M Mn測定測定: :精細(xì)量取恒溫至精細(xì)量取恒溫至2020的顛茄酊的顛茄酊8ml8ml和正丙醇和正丙醇5ml5ml，置，置100ml100ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精細(xì)量取恒溫至搖勻，作為供試品溶液。精細(xì)量取恒溫至2020的的無水乙醇無水乙醇5ml5ml和正丙醇和正丙醇5ml5ml，置，置100ml100ml容量瓶中，加容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻，作為規(guī)范溶液。取規(guī)純化水稀

59、釋至刻度，搖勻，作為規(guī)范溶液。取規(guī)范溶液和供試品溶液各范溶液和供試品溶液各2l2l，延續(xù)進(jìn)樣，延續(xù)進(jìn)樣3 3次，測得次，測得校正因子校正因子f f分別為分別為0.69250.6925、0.69210.6921、0.69180.6918。AX/ASAX/AS分別為分別為1.4661.466、1.4581.458、1.4311.431。求出該供試。求出該供試品乙醇量及其相對規(guī)范偏向品乙醇量及其相對規(guī)范偏向RSDRSD。/./.123（3 （0 69250 69210 6918）30 6921）ffff/%.%.%5乙醇量（）1000 6921 1 46610063 418SXSXVAV VfAV/

60、%.%.%5乙醇量（）1000 6921 1 45810063 078SXSXVAV VfAV/%.%.%5乙醇量（）1000 6921 1 43110061 908SXSXVAV VfAV/%.%.%.% /.%62.8%乙醇量（）（63 4163 0761 90 ）362 79V V().%210 79211niiXXSn%.%. %（ ）1001 261 3SRSDX適用性適用性浸出物測定浸出物測定有效成分不清楚的有效成分不清楚的無定量方法的無定量方法的有效成分溶解性能有效成分溶解性能藥用部位藥用部位制劑處方制劑處方溶劑溶劑浸出物浸出物含量含量質(zhì)量質(zhì)量n測定方法測定方法n水溶性浸出物測定