血清(漿)脂類及脂蛋白測定說課材料

1、血清(漿)脂類及脂蛋白測定血脂的運輸形式脂蛋白脂蛋白1 1、定義：、定義： 指指血漿脂質(zhì)與載脂蛋白組成的可溶性的生物大分子。磷脂膽固醇載脂蛋白甘油三酯膽固醇酯2 2、結(jié)構(gòu)：、結(jié)構(gòu)：脂蛋白微粒表面核心3 3、分類、分類 (1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM(2)按電泳時區(qū)帶的泳動位置不同 CMHDLVLDLLDLCM-LP前前-LP -LP -LP前前-LP-LPCM臨床血脂測定的常見項目：實驗實驗51： 磷鎢酸磷鎢酸-鎂沉淀法測定高密度脂鎂沉淀法測定高密度脂蛋白膽固醇（蛋白膽固醇（HDL-C）提取HDL 測定膽固醇 實驗原理： 超速離心法 層析法 電泳法沉淀法提取HDL的方法：沉淀法

2、原理： ApoB + 多陰離子化合物 沉淀硫酸葡聚糖-Mg2+肝素-Mn2+磷鎢酸-Mg2+多陰離子（polyanion）化合物 過氧化物酶膽固醇 + O2 膽甾烯酮 + H2O2H2O2 + 酚 + 4-氨基安替比林 亞胺醌亞胺醌 + H2O膽固醇測定（酶法）：試劑：沉淀劑酶試劑參考血清（TC測定用的定值血清）操作步驟： 取血清和沉淀劑各200l，充分混勻，置室溫放置10min后，2500r/min，15min，吸取上清液按表進行操作。 1、提取HDL加入物(l)空白管標準管測定管上清液50參考血清50蒸餾水50酶試劑200020002000混勻，37水浴15min；空白管調(diào)零，0.5cm比

3、色杯，500nm比色。 2、測定膽固醇計算：參考值：HDL-C (mmol/L)測定管吸光度標準管吸光度 =定值血清膽固醇濃度5.170.92.0mmol/L2注意事項：1、血清標本要及時測定（在室溫條件下，各型脂蛋白之間會發(fā)生脂質(zhì)交換）；（游離的膽固醇會不斷酯化）。2、離心過程中防止溫度過高（室溫1525），離心后放置時間不能過長。（溫度過高使沉淀不完全）。臨床意義： 具有抗動脈粥樣硬化作用，是冠心病的保護因素。磷酸甘油氧化法測定血清甘磷酸甘油氧化法測定血清甘油三酯（油三酯（TG）實驗實驗49： 甘油三酯(TG)的結(jié)構(gòu)： 甘油三酯測定的方法： 化學法酶法 化學法（KOH） （過碘酸）皂化氧化

4、抽提 甘油 甲醛 顯色甘油三酯甘油甲醛變色酸紫紅色紫紅色甘油三酯3-磷酸甘油 + ADP+ ATPO2 、H2O + 磷酸二羥丙酮 + H2O2甘油 + 脂肪酸+酚、4-氨基安替比亞胺醌亞胺醌 + H2OLPLGKGPOPOD酶法（磷酸甘油氧化酶法）試劑：酶試劑 2.26mmol/L的三油酸甘油酯標準液 操作：加入物(l) 空白管標準管(2)測定管(2)上清液20參考血清20酶試劑20002000200037水浴10min；空白管調(diào)零，0.5cm比色杯，500nm比色。 計算：TG (mmol/L)測定管吸光度標準管吸光度 =標準液濃度參考值：0.561.70mmol/L2.26mmol/L臨床意義：增高: 與動脈粥樣硬化關(guān)系密切、家族性的脂代謝紊亂、糖尿病等。降低: 營養(yǎng)不良、消化吸收綜合征、消耗性疾病等。注意事項：標本： 標本要求是餐后12-14h的空腹血液（血清TG易受飲食影響）。 標本存放不宜超過3天（避免TG水解而釋放出甘油）。試劑： 酶試劑應(yīng)4避光保存，出現(xiàn)紅色不可再用 。 免疫透射比濁法測定血清載脂蛋白A1和載脂蛋白B 實驗實驗53： 抗原抗原抗體復合物抗體+ApoA1 ApoB ApoA1抗體ApoB抗體比色原理：ApoA1 與高脂血癥、冠心病呈負相關(guān)；ApoB 與高脂血癥、冠心病呈正相關(guān)。臨