合成抗菌類藥物的分析

1、第十七章第十七章 合成抗菌類藥物的分析合成抗菌類藥物的分析 合成抗菌藥，也稱化學(xué)殺菌劑。合成抗菌藥，也稱化學(xué)殺菌劑。包括包括喹諾酮類、磺胺類喹諾酮類、磺胺類、抗結(jié)核藥、抗、抗結(jié)核藥、抗真菌藥等真菌藥等第一節(jié)第一節(jié) 喹諾酮類藥物的分析喹諾酮類藥物的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)及性質(zhì)一、化學(xué)結(jié)構(gòu)及性質(zhì) 喹諾酮類喹諾酮類藥物藥物主要主要有有吡啶吡啶酮酸并聯(lián)酮酸并聯(lián)苯稠苯稠、吡啶環(huán)或嘧啶環(huán)組成的化合物、吡啶環(huán)或嘧啶環(huán)組成的化合物。環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能與吡啶相同環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能與吡啶相同 第二節(jié)第二節(jié) 喹啉類藥物喹啉類藥物 喹啉類藥物含有喹啉類藥物含有吡啶與苯稠和而成吡啶與苯稠和而成的喹啉雜環(huán)的喹啉雜環(huán)。環(huán)上雜

2、原子的反應(yīng)性能與。環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能與吡啶相同吡啶相同 代表藥物硫酸奎寧、硫酸奎尼丁、鹽代表藥物硫酸奎寧、硫酸奎尼丁、鹽酸環(huán)丙沙星酸環(huán)丙沙星 一一 基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì) （一）典型藥物的結(jié)構(gòu)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)NNHHHOONNHHHOO硫酸奎寧硫酸奎寧硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁NNNHFOOHO HCl H2ONNNHFOOHO HCl H2O鹽酸環(huán)丙沙星鹽酸環(huán)丙沙星二、化學(xué)性質(zhì): 1.堿性：喹啉環(huán)芳環(huán)氮堿性較弱，不能與硫酸成鹽，脂環(huán)氮堿性較強(qiáng)，可與酸成鹽。 2.旋光性：硫酸奎寧為左旋體，硫酸奎尼丁為右旋體，鹽酸環(huán)丙沙星無(wú)旋光性。 3.熒光特性 硫酸奎寧和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中

3、均顯藍(lán)色熒光。 三三.鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng)(一一)綠奎寧反應(yīng)綠奎寧反應(yīng) 反應(yīng)機(jī)制：反應(yīng)機(jī)制：奎寧和奎尼丁為奎寧和奎尼丁為6-位含氧喹啉，經(jīng)氯水位含氧喹啉，經(jīng)氯水（或溴水）氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠色的（或溴水）氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠色的二醌基亞胺的銨鹽。二醌基亞胺的銨鹽。(二二)光譜特征光譜特征 1. 紫外吸收光譜特征（紫外吸收光譜特征（Ch.P鹽酸環(huán)丙沙星的鑒別）鹽酸環(huán)丙沙星的鑒別） 2. 熒光光譜特征（硫酸奎寧及奎尼丁的鑒別）熒光光譜特征（硫酸奎寧及奎尼丁的鑒別） 3. 紅外吸收光譜特征（硫酸奎寧及鹽酸環(huán)丙沙星的鑒紅外吸收光譜特征（硫酸奎寧及鹽酸環(huán)丙沙星的鑒別）別）(三三)

4、無(wú)機(jī)酸鹽無(wú)機(jī)酸鹽 利用硫酸奎寧和硫酸奎尼丁中硫酸根，在酸性條件下利用硫酸奎寧和硫酸奎尼丁中硫酸根，在酸性條件下與氯化鋇反應(yīng)生成白色的沉淀。與氯化鋇反應(yīng)生成白色的沉淀。四四. 有關(guān)物質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)檢查(一一) 硫酸奎寧中有關(guān)物質(zhì)檢查硫酸奎寧中有關(guān)物質(zhì)檢查 有關(guān)物質(zhì)主要是生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的中間體有關(guān)物質(zhì)主要是生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的中間體及副產(chǎn)物。及副產(chǎn)物。 通過(guò)檢查酸度、三氯甲烷通過(guò)檢查酸度、三氯甲烷-乙醇中不溶物乙醇中不溶物質(zhì)和其他金雞納堿等加以控制。質(zhì)和其他金雞納堿等加以控制。 1. 酸度酸度 本項(xiàng)檢查通過(guò)測(cè)定本項(xiàng)檢查通過(guò)測(cè)定pH控制酸性物控制酸性物質(zhì)質(zhì) 2. 三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物質(zhì)乙醇中不

5、溶物質(zhì) 本項(xiàng)檢查控制藥物制備過(guò)程中引入的醇本項(xiàng)檢查控制藥物制備過(guò)程中引入的醇不溶性雜質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。不溶性雜質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。 3. 其他金雞納堿的檢查其他金雞納堿的檢查 主要控制硫酸奎寧中的其他生物堿，主要控制硫酸奎寧中的其他生物堿，采用采用HPLC和和TLC中的主成分自身對(duì)照法或中的主成分自身對(duì)照法或?qū)φ掌穼?duì)照法對(duì)照品對(duì)照法。 Ch.P TLC法法 BP HPLC法法 第三節(jié)第三節(jié) 托烷類藥物托烷類藥物 托烷類藥物大多數(shù)是由莨菪烷衍生托烷類藥物大多數(shù)是由莨菪烷衍生的氨基醇與不同的有機(jī)酸縮合成酯的生的氨基醇與不同的有機(jī)酸縮合成酯的生物堿，常見的有顛茄生物堿和古柯生物物堿，常見的有顛茄生物堿和古柯生物堿

6、。堿。 現(xiàn)僅以典型藥物硫酸阿托品和氫溴現(xiàn)僅以典型藥物硫酸阿托品和氫溴酸東莨菪堿為例進(jìn)行討論酸東莨菪堿為例進(jìn)行討論一一 基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)（一）典型藥物的結(jié)構(gòu)（二）主要化學(xué)性質(zhì)（二）主要化學(xué)性質(zhì)1.水解性 阿托品和東莨菪堿分子結(jié)構(gòu)中，具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。以阿托品為例，水解生成莨菪醇（I）和莨菪酸（II）2.堿性 阿托品和東莨菪堿的分子結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)上含有叔胺氮原子，因此，具有較強(qiáng)的堿性，易與酸成鹽。如阿托品的pKb1為4.35. 3.旋光性 氫溴酸東莨菪堿分子結(jié)構(gòu)中含有不對(duì)稱碳原子，呈左旋體。比旋度為-240至-270，而阿托品結(jié)構(gòu)中雖然也含有不對(duì)稱碳原

7、子，但因外消旋化而為消旋體，無(wú)旋光性。利用此性質(zhì)可區(qū)別阿托品與東莨菪堿。二 鑒別試驗(yàn)（一）托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn) 本類藥物為酯類生物堿，水解后生成的莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀醇溶液和固體氫氧化鉀作用，則轉(zhuǎn)成有色的醌型產(chǎn)物，開始呈深紫色。以阿托品為例，其反應(yīng)式為：鑒別方法：取供試品約鑒別方法：取供試品約10mg,10mg,加發(fā)煙硝酸加發(fā)煙硝酸5 5滴，置水滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙醇浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)爬?，加乙? 2一一3 3滴濕滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。 （二）氧化反應(yīng) 本類藥物水解

8、后，生成的莨菪酸，可與硫酸和重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味。（三）沉淀反應(yīng) 本類藥物具有堿性，可與生物堿沉淀劑生成沉淀。如阿托品與氯化汞醇試液反應(yīng)，則生成黃色沉淀，而東莨菪堿與氯化汞醇試液反應(yīng)，則生成白色復(fù)鹽沉淀。 （四）硫酸鹽與溴化物反應(yīng) 硫酸阿托品的水溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解；加醋酸鉛試液，也生成白色沉淀，但沉淀在醋酸胺或氫氧化鈉試液中溶解。 氫溴酸東莨菪堿的水溶液，加硝酸銀試液，即生成淡黃色凝乳沉淀，沉淀能在氨試液中微溶，但在硝酸中幾乎不溶；滴加氯試液，溴即游離，加氯仿振搖，氯仿層顯黃色或紅棕色。3 3 有關(guān)

9、物質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)檢查（一）氫溴酸東莨菪中有關(guān)物質(zhì)檢查（一）氫溴酸東莨菪中有關(guān)物質(zhì)檢查 氫溴酸東莨菪堿是從茄科植物顛茄、氫溴酸東莨菪堿是從茄科植物顛茄、白曼陀羅、莨菪等中提取得到的莨菪堿白曼陀羅、莨菪等中提取得到的莨菪堿的氫溴酸鹽。我國(guó)是從茄科植物白曼陀的氫溴酸鹽。我國(guó)是從茄科植物白曼陀羅的干燥品（洋金花）中提取東莨菪堿，羅的干燥品（洋金花）中提取東莨菪堿，然后制成氫溴酸鹽。然后制成氫溴酸鹽。 根據(jù)其制備工藝，本品在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中可能引人的特殊雜質(zhì)，通過(guò)酸度、其他生物堿和易氧化物檢查進(jìn)行控制。 1.酸度 東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿形成的鹽，通過(guò)其5%

10、水溶液的pH值為4.0-5.5，來(lái)控制本品中的酸性雜質(zhì)。 檢查方法：取本品0.l0g，加水2m1溶解后，分成兩等份：一份中加氨試液2一3滴，不得發(fā)生渾濁；另一份中加氫氧化鉀試液數(shù)滴，只許發(fā)生瞬即消失的類白色渾濁。 2.易氧化物 主要是檢查本品在生產(chǎn)過(guò)程中可能引入的雜質(zhì)阿撲東茛菪堿及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物質(zhì)，可使高錳酸鉀溶液褪色。 檢查方法：取本品0.15g，加水5m1溶解后，在15一20加高錳酸鉀滴定液（0.02mo1/L)0.05ml，l0min內(nèi)紅色不得完全消失。3.其他生物堿檢查 本品的水溶液加入氨試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其他生物堿，如阿撲阿托品、顛茄堿存在時(shí)，則產(chǎn)生混濁； 本品水溶液

11、加入氫氧化鉀試液，則有東莨菪堿析出顯渾濁，瞬間消失。因東莨菪堿在堿性條件下水解，生成異東莨菪醇和莨菪酸，前者在水中易溶；后者生成堿式鹽在水中也能溶解，故可使瞬即發(fā)生的渾濁消失。 （二）硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)檢查（二）硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)檢查 本品為消旋體，無(wú)旋光性，利用旋光本品為消旋體，無(wú)旋光性，利用旋光度測(cè)定法可對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查。度測(cè)定法可對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查。第四節(jié)第四節(jié) 吩噻嗪類藥物的分析吩噻嗪類藥物的分析 基本結(jié)構(gòu)硫氮雜蒽母核 NSRR12345678910一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)分析 1. 硫氮雜蒽母核 （1）含S、N的三環(huán)共軛的大體系，S、N與苯環(huán)形成p-共軛具有紫

12、外吸收光譜特征 10987654321NS（2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有還原價(jià)，具有還原性，易氧化呈色性，易氧化呈色 （3）結(jié)構(gòu)上的差異主要表現(xiàn)在母核2位上 取代基和10位上R取代基的不同。 通常為H、Cl、CF3、COCH3、SCH3等。R基團(tuán)為2-3個(gè)碳鏈的二甲或二乙氨基；或含氮雜環(huán)，如哌嗪，吡啶衍生物,RNSCH2CHN(CH3)2CH3HCl鹽酸異丙嗪NSCH2CH2CH2N(CH3)2ClHCl鹽酸氯丙嗪NSClCH2CH2CH2NN CH2CH2OH奮乃靜奮乃靜NSCH2CH2CH2CF3NN(CH2)2OCO(CH2)8CH3癸氟奮乃靜癸氟奮乃靜HC

13、lNSCH2CH2CH2CF3NN CH2CH2OH2鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜NSCH2CH2CH2NN CH3CF3HCl2鹽酸三氟拉嗪鹽酸三氟拉嗪鹽酸二氧丙嗪鹽酸二氧丙嗪HClNSOOCH2CH(CH3)N(CH3)2（二）性質(zhì) 1. 紫外與紅外吸收光譜紫外與紅外吸收光譜 本類藥本類藥物的紫外特征吸收，主要由物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)母核三環(huán)的的系統(tǒng)系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有所產(chǎn)生，一般具有三個(gè)峰值三個(gè)峰值。205nm、254nm、300nm。最強(qiáng)峰多最強(qiáng)峰多在在 254nm。 2位上的取代基（位上的取代基（R）不同，會(huì)）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。引起吸收峰發(fā)生位移。 其結(jié)構(gòu)中其結(jié)構(gòu)中-

14、2 價(jià)的硫，易氧化，氧價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。 吩噻嗪類藥物吩噻嗪類藥物隨取代基隨取代基 R 和和R的的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜。2 易被氧化呈色 硫氮雜蒽環(huán)上二價(jià)硫原子易氧化，遇不同氧化劑，硫酸，硝酸，三氯化鐵，過(guò)氧化氫等，母核易被氧化成亞砜和砜。隨取代基不同，有不同的顏色。 3 易與金屬離子絡(luò)合呈色未被氧化的硫可與金屬鈀形成配合物，氧化產(chǎn)物無(wú)此反應(yīng)。可進(jìn)行含量測(cè)定，有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的干擾。二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn) （一）（一）UV和和IR奮乃靜奮乃靜 ChP鑒別鑒別 取本品，加無(wú)水乙醇制成每取本品，加無(wú)

15、水乙醇制成每1ml 中含中含 7 g 的的溶液，照分光光度法溶液，照分光光度法（附錄（附錄A）測(cè)定，在）測(cè)定，在 258nm 的波長(zhǎng)的波長(zhǎng)處有最大吸收，吸收度約為處有最大吸收，吸收度約為0.65。 （3）本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照）本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集的圖譜（光譜集 243 圖）一致圖）一致（二） 顯色反應(yīng) 1. 氧化劑氧化顯色（反應(yīng)過(guò)程及產(chǎn)物復(fù)雜）氧化劑氧化劑 硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜 ChP鑒別鑒別 取本品取本品 5mg，加硫酸，加硫酸5ml溶解，溶解，即顯淡紅色，溫?zé)岷笞兂杉t褐色。即顯淡紅色，溫?zé)岷笞兂杉t褐色。吩噻嗪類藥物分子結(jié)

16、構(gòu)中的吩噻嗪類藥物分子結(jié)構(gòu)中的二價(jià)硫可二價(jià)硫可與金屬鈀離子形成紅色配合物與金屬鈀離子形成紅色配合物。而其。而其氧化產(chǎn)物砜和亞砜則無(wú)此反應(yīng)，專屬氧化產(chǎn)物砜和亞砜則無(wú)此反應(yīng)，專屬性強(qiáng)。性強(qiáng)。 2. 與鈀離子絡(luò)合顯色癸氟奮乃靜癸氟奮乃靜 ChP 鑒別鑒別 （2）取本品約）取本品約 5mg，加甲醇，加甲醇2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1% 氯化鈀溶液氯化鈀溶液 3ml，即有沉淀生成，并顯紅色，再，即有沉淀生成，并顯紅色，再加過(guò)量的氯化鈀溶液，顏色變深。加過(guò)量的氯化鈀溶液，顏色變深。三、有關(guān)物質(zhì)檢查三、有關(guān)物質(zhì)檢查 1. 鹽酸異丙嗪有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸異丙嗪有關(guān)物質(zhì)檢查 課下閱讀自學(xué)課下閱讀自學(xué)第五節(jié)第

17、五節(jié) 苯并二氮雜卓苯并二氮雜卓類藥物的分析類藥物的分析 該類藥物為該類藥物為苯環(huán)與含氮雜環(huán)苯環(huán)與含氮雜環(huán)稠合稠合而成的有機(jī)藥物，其中而成的有機(jī)藥物，其中1，4-苯并二苯并二氮雜卓類藥物是目前臨床應(yīng)用最廣泛氮雜卓類藥物是目前臨床應(yīng)用最廣泛的看焦慮，抗驚厥藥。的看焦慮，抗驚厥藥。NN12345671,4-二氮雜卓NN12345671,4-苯并二氮雜卓89 （一）母體結(jié)構(gòu)與典型藥物（一）母體結(jié)構(gòu)與典型藥物一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) NNNCH3OCl氯氮卓HNNClH3CO地西泮NNO2NOClH氯硝西泮氯硝西泮（二）主要化學(xué)性質(zhì)（二）主要化學(xué)性質(zhì) 1. 七元環(huán)的氮原子顯弱堿性，可非水七元環(huán)的氮原

18、子顯弱堿性，可非水滴定含量；滴定含量；2. 二氮原子性質(zhì)不同，不同二氮原子性質(zhì)不同，不同pH介質(zhì)中介質(zhì)中離子化狀態(tài)不同（質(zhì)子化、中性、去質(zhì)離子化狀態(tài)不同（質(zhì)子化、中性、去質(zhì)子）而影響其子）而影響其UV光譜特征；光譜特征；3. 在強(qiáng)酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯在強(qiáng)酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物。其水解物所呈現(xiàn)的某些特征甲酮衍生物。其水解物所呈現(xiàn)的某些特征可用于鑒別及測(cè)定可用于鑒別及測(cè)定 二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn) （一）化學(xué)反應(yīng) 1. 沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) 橙紅色碘化鉍試液氯氮卓、地西泮HCl氯氮卓氯氮卓【鑒別【鑒別】（2）取本品約）取本品約 10mg，加鹽，加鹽酸溶液（酸溶液（910

19、00）10ml 溶解后，加溶解后，加碘化鉍鉀試液碘化鉍鉀試液 1 滴，即生成橙紅色沉滴，即生成橙紅色沉淀。淀。2. 水解后呈芳伯氨基反應(yīng)水解后呈芳伯氨基反應(yīng) 氯氮卓、奧沙西泮氯氮卓、奧沙西泮 氯氮卓氯氮卓鑒別鑒別 （1）取本品約）取本品約 10mg，加鹽酸，加鹽酸溶液（溶液（12）15ml，緩緩煮沸，緩緩煮沸 15 分分鐘，放冷，溶液顯芳香第一胺類的鑒鐘，放冷，溶液顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)。別反應(yīng)。3. 硫酸硫酸熒光反應(yīng)熒光反應(yīng)苯并二氮雜卓類藥物溶于苯并二氮雜卓類藥物溶于硫酸后，在硫酸后，在紫外光（紫外光（365nm）下檢視，顯不同顏）下檢視，顯不同顏色熒光。色熒光。氯氮卓氯氮卓黃色黃色地西泮

20、地西泮黃綠色黃綠色稀硫酸中稀硫酸中氯氮卓氯氮卓紫色紫色地西泮地西泮黃色黃色4. 分解產(chǎn)物反應(yīng)分解產(chǎn)物反應(yīng)本類藥物多為含氯有機(jī)化合物，氧瓶本類藥物多為含氯有機(jī)化合物，氧瓶燃燒法破壞后，堿液吸收、硝酸酸化，燃燒法破壞后，堿液吸收、硝酸酸化，顯氯化物反應(yīng)。顯氯化物反應(yīng)。（二）（二）UV 和和 IR（三）（三）TLC三、有關(guān)物質(zhì)的檢查 1. 地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查 地西泮的原料及片劑地西泮的原料及片劑 TLC 高低濃度對(duì)比法高低濃度對(duì)比法 2. 氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查 氧化物、氨基物氧化物、氨基物 雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)對(duì)照品法 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì) 雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)

21、對(duì)照品法 TLC 高低濃度對(duì)比法高低濃度對(duì)比法 一、非水堿量法一、非水堿量法 在水中堿性較弱，不能順利地進(jìn)行中和在水中堿性較弱，不能順利地進(jìn)行中和滴定（滴定突躍不明顯，難以判斷滴定滴定（滴定突躍不明顯，難以判斷滴定終點(diǎn)）。終點(diǎn)）。 在酸性非水介質(zhì)中（如在酸性非水介質(zhì)中（如HAc中），則能中），則能顯示出較強(qiáng)的堿性，滴定突躍增大，可顯示出較強(qiáng)的堿性，滴定突躍增大，可以順利地進(jìn)行中和滴定。以順利地進(jìn)行中和滴定。 第六節(jié)含量測(cè)定第六節(jié)含量測(cè)定 1測(cè)定方法測(cè)定方法 供試品：以消耗滴定液供試品：以消耗滴定液8ml計(jì)算。計(jì)算。 溶劑：溶劑：HAc，一般用量，一般用量1030ml，滴定液：滴定液：0.1mo

22、l/L HClO4/無(wú)水無(wú)水HAc 溶液溶液 指示劑：結(jié)晶紫等指示劑：結(jié)晶紫等 做空白試驗(yàn)做空白試驗(yàn) 2問(wèn)題討論問(wèn)題討論 適用范圍適用范圍 Kb10-8的有機(jī)堿鹽。的有機(jī)堿鹽。 Kb為為10-810-10 選冰醋酸作溶劑選冰醋酸作溶劑Kb為為10-1010-12 選冰醋酸和醋酐作溶劑選冰醋酸和醋酐作溶劑Kb 10-12 選醋酐作溶劑選醋酐作溶劑4HClOABH HA不同，對(duì)滴定反應(yīng)的影響也不同。不同，對(duì)滴定反應(yīng)的影響也不同。置換滴定，即用強(qiáng)酸（置換滴定，即用強(qiáng)酸（HClO4）置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸（置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸（HA）.HAClOBH4HClO4、HBr、HCl、H2SO

23、4、HNO3 水中酸強(qiáng)度相等。 gHAc中酸強(qiáng)度不相同.HClO4HBr H2SO4 HClHNO3其它弱酸中難電離）（HAcHgXAcBHHgAcXBH 2222a. 氫鹵酸鹽的測(cè)定氫鹵酸鹽的測(cè)定氫鹵酸HAc中酸性較強(qiáng)，對(duì)滴定有影響。排除方法：加入過(guò)量的HgAc2/HAc溶液 b.硫酸鹽的測(cè)定硫酸鹽的測(cè)定 （以硫酸奎寧的測(cè)定為例（以硫酸奎寧的測(cè)定為例） 直接滴定法直接滴定法 注意硫酸鹽的結(jié)構(gòu)，正確判斷反應(yīng)的摩爾比。 N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 2 . H 2 S O 4 . 2 H 2 O （喹核堿） pKb=5.07 （喹啉環(huán)） pKb=9.7 兩個(gè)

24、N原子l喹啉N，屬于芳環(huán)族N，堿性較弱l喹核N，屬于脂環(huán)族N，堿性較強(qiáng) 在水中硫酸是二元酸，能夠解離出兩個(gè)氫離子，即42SOH4HSOH4HSO24SOHl 在冰醋酸中硫酸是一元酸，能夠解離出 一個(gè)氫離子，即42SOH4HSOH 奎寧與硫酸結(jié)合時(shí)，一分子的硫酸能與兩分子的奎寧結(jié)合，即： N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H + + S O 4 2 - . N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H

25、2 H + + S O 4 2 - . NCH(OH)NCH3OCHCH2HH+.ClO4.HSO4+-NCH(OH)NCH3OCHCH2HH+.ClO4+-.ClO4滴定反應(yīng)如下：+3HClO4+l用HClO4直接滴定硫酸喹寧時(shí)，摩爾比是1 3 硫酸奎寧片的測(cè)定 需先經(jīng)堿化處理，生成奎寧游離堿，然后用高氯酸滴定液滴定，此時(shí)硫酸奎寧與高氯酸反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量摩爾比為1 4OCOCHCH2OHN CH3.H2SO4.H2O2l用HClO4直接滴定硫酸阿托品硫酸阿托品（莨菪堿）的結(jié)構(gòu)如下：反應(yīng)的摩爾比是11 終點(diǎn)指示方法終點(diǎn)指示方法 最常用的指示劑是 結(jié)晶紫 Crystal Violet（CV）紫藍(lán)藍(lán)

26、綠黃綠黃（堿性區(qū)）（酸性區(qū)）終點(diǎn)的顏色應(yīng)用電位法校準(zhǔn)。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) a. 水分的影響及排除 HAc和HClO4中都含有一定量的水分排除法：配制時(shí)，根據(jù)HAc和HClO4含水量，加入計(jì)算量的醋酐。費(fèi)休氏（Fischer）水分測(cè)定法準(zhǔn)確測(cè)出gHAc和HClO4中含水量，準(zhǔn)確加入醋酐。 b. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的穩(wěn)定性 水的膨脹系數(shù)是0.2110-3/C HAc膨脹系數(shù)是1.110-3/C，較大，體積隨溫度變化較大，且還具有揮發(fā)性。 測(cè)定樣品與標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)溫度不同，應(yīng)對(duì)濃度進(jìn)行校正。)tt (0011.01FF0101l其中：l 0.0011：gHAc的膨脹系數(shù)l t0和t1：標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液和測(cè)定樣品時(shí)

27、的溫度l F0和F1：t0和t1所對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液的F值l說(shuō)明：lt1-t010Cl或貯存時(shí)間超過(guò)30天l則在臨用前必須重新標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。校正公式：二 氧化還原滴定法（1）溴酸鉀法）溴酸鉀法 ChP原料及制劑原料及制劑NCONHNH23+2KBrO3HClNCOOH3+3 N2 +3 H2O +2 KBr反應(yīng)摩爾比反應(yīng)摩爾比 3 2 mlmg429. 33214.13701667. 0ncMT 取本品約取本品約 0.2g，精密稱定，置，精密稱定，置 100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻；量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取精密量取25m1，加水，加水50m1、鹽酸、鹽酸

28、20ml與與甲基橙指示劑甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mo1/L）緩緩滴定（溫度保持在）緩緩滴定（溫度保持在1825）至粉紅色消失。每）至粉紅色消失。每1ml的溴酸的溴酸鉀滴定液（鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于3.429mg的的C6H7N3O。 （2）鈰量法如硝苯地平與硫酸鈰的化學(xué)及兩比 1:2優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化電位，且為一價(jià)還原；不存在對(duì)環(huán)電位，且為一價(jià)還原；不存在對(duì)環(huán)取代基的副反應(yīng)，專屬性高。取代基的副反應(yīng)，專屬性高。 本法既可用于原料，亦可用于本法既可用于原料，亦可用于片劑的測(cè)定片劑的

29、測(cè)定 3比色法比色法 (一一)、酸性染料比色法、酸性染料比色法1原理原理:在適當(dāng)在適當(dāng)pH溶液中溶液中,有機(jī)堿（有機(jī)堿（B）可以與氫離子結(jié)合成）可以與氫離子結(jié)合成陽(yáng)離子陽(yáng)離子,酸性染料（酸性染料（HIn）可解離成陰離子）可解離成陰離子,陰離子可陰離子可與有機(jī)堿陽(yáng)離子定量地結(jié)合成有色離子對(duì)，有色離與有機(jī)堿陽(yáng)離子定量地結(jié)合成有色離子對(duì)，有色離子對(duì)可被有機(jī)溶劑萃取進(jìn)行比色分析測(cè)定。子對(duì)可被有機(jī)溶劑萃取進(jìn)行比色分析測(cè)定。CH3CCH3BrBrHO(CH3)2HCSO3HCH(CH3)2Ol溴麝香草酚藍(lán)(BTB)lbrom thymol bluelpH 6.07.6（黃藍(lán)）2常用酸性染料CBrBrBrB

30、rHOCH3CH3SO3HOCBrBrBrBrHOSO3HOl溴甲酚綠(BCG)lbrom cresol greenlpH 3.65.2（黃藍(lán)）l溴酚藍(lán)(BPB)lbromophenol bluelpH 3.84.6（黃紫） 3影響因素影響因素 最主要條件是水相的pH。 要求： 能使有機(jī)堿全部以鹽的形式存在，酸性染料能夠解離成離子，以便它們定量地結(jié)合成離子對(duì)而轉(zhuǎn)溶于有機(jī)相，且又能將剩余的染料完全保留在水相。 B + H+ B H+ H I n H+ + I n H+ O H O H H+ pH（酸性）BH+，InBH+In-，有機(jī)溶劑提取的是HIn pH（堿性） In-，BH+BH+In-，有

31、機(jī)溶劑提取的是B還應(yīng)注意以下幾方面還應(yīng)注意以下幾方面1. 酸性染料的種類及濃度酸性染料的種類及濃度2. 有機(jī)溶劑的種類及性質(zhì)有機(jī)溶劑的種類及性質(zhì)3. 水分的影響水分的影響4. 酸性染料中有色雜質(zhì)的排除酸性染料中有色雜質(zhì)的排除 (二二).鈀離子比色法：鈀離子比色法： 原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)pH=20.1值的溶液中形成紅色的配合物，在500nm附近有最大吸收，借以進(jìn)行比色測(cè)定。Pd2+SS2Cl-NSRRPdCl2pH2 鈀離子只與未氧化的硫配合，而硫被氧化為砜和亞砜時(shí)，則不與鈀離子配位。利用空白對(duì)照法可以排除氧化產(chǎn)物不干擾準(zhǔn)確測(cè)定未被氧化的吩噻嗪藥物含量。 USP

32、采用此法對(duì)奮乃靜注射液，糖漿及片劑的含量測(cè)定。 四四 分光光度法分光光度法 （一）直接分光度法（一）直接分光度法 （二）萃取后分光光度法（二）萃取后分光光度法 （三）萃?。ㄈ┹腿?雙波長(zhǎng)分光光度法雙波長(zhǎng)分光光度法（一）直接分光光度法：（一）直接分光光度法：操作： 取10片，除去糖衣后，精稱，研細(xì)稱取粉末適量加水、鹽酸溶解過(guò)濾，取濾液于254nm處測(cè)定。已知：鹽酸氯丙嗪E=915，即可計(jì)算優(yōu)點(diǎn)：不需標(biāo)準(zhǔn)品缺點(diǎn)：儀器精密度要求高測(cè)定中注意問(wèn)題：避光、防止氧化。（二）萃取后分光光度法：（二）萃取后分光光度法： 某些制劑由于有干擾不能采用直接分光光度法，對(duì)此，可以進(jìn)行萃取后的分光光度法。鹽酸氯丙嗪注

33、射液鹽酸氯丙嗪注射液計(jì)算。為以，測(cè)定鹽酸氯丙嗪乙醚層氯丙嗪鹽酸氯丙嗪鹽酸萃取乙醚提取氨水堿化 915 E 1254 1%1cmmaxAnm（三） 萃取雙波長(zhǎng)分光光度法（1）原理）原理 在待測(cè)組分（在待測(cè)組分（a）的最大吸收波長(zhǎng)）的最大吸收波長(zhǎng)（測(cè)定波長(zhǎng)，（測(cè)定波長(zhǎng)， 1）處測(cè)定待測(cè)組分和干）處測(cè)定待測(cè)組分和干擾組分（擾組分（b）吸收度的總和；另選一適）吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長(zhǎng)（參比波長(zhǎng)，當(dāng)波長(zhǎng)（參比波長(zhǎng)， 2）測(cè)定吸收度，）測(cè)定吸收度，并使干擾組分在測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)處并使干擾組分在測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)處的吸收度相等，即的吸收度相等，即 ，而待測(cè)組，而待測(cè)組分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度的差值足夠大

34、。分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度的差值足夠大。bbAA21（2）定量依據(jù) 樣品在二波長(zhǎng)下吸收度差值（A）： abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA )()()(212121221121即，吸收度差值（A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。 （3）必要條件 干擾組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相等 待測(cè)組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相差足夠大 五 HPLC法 注意事項(xiàng)：由于空間位阻，烷基硅烷鍵和硅膠表面的硅烷基未全部硅烷化，分離時(shí)這些硅烷基可與堿性雜環(huán)藥物發(fā)生吸附和離子交換作用，造成拖尾、分離效能下降、保留時(shí)間過(guò)程、甚至不能被洗脫。 解決辦法：在流通相中加入含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑掃尾劑以抑制拖尾現(xiàn)象， 常用掃尾劑：醋酸氨、三乙胺、二乙胺、 乙腈1. 下列藥物中，哪一個(gè)藥物加氨制硝酸銀能產(chǎn)生銀鏡反應(yīng)A. 地西泮B. 阿司匹林C. 異煙肼D. 苯佐卡因E. 苯巴比妥 2用于吡啶類藥物鑒別的開環(huán)反應(yīng)有A. 茚三酮反應(yīng)B戊烯二醛反應(yīng)C坂口反應(yīng)D. 硫色素反應(yīng)E二硝基氯苯反應(yīng) 3. 異煙肼的測(cè)定方