植物可溶性糖含量的測(cè)定方法

1、科標(biāo)檢廁Science Standard Testing精準(zhǔn)每一刻植物可溶性糖含量的測(cè)定可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品質(zhì)的重要構(gòu)成性狀之一，尤其 是以果實(shí)為目的產(chǎn)品的果樹作物，可溶性糖與酸的含量及其配比是影響果實(shí)風(fēng)味 品質(zhì)的重要因素。對(duì)于鮮食品種，一般來(lái)講，高糖中酸，風(fēng)味濃，品質(zhì)優(yōu)；低糖 中酸，風(fēng)味淡，品質(zhì)差?？茦?biāo)檢測(cè)擁有國(guó)際先進(jìn)的檢測(cè)儀器和雄厚的技術(shù)力量，可以依據(jù)多種檢測(cè)標(biāo) 準(zhǔn)，提供檢測(cè)服務(wù)并出具資質(zhì)檢測(cè)報(bào)告。一、試材及用具1 .試材新鮮或冷凍的植物材料2 .儀器 及試劑 高速組織搗碎機(jī)、電熱恒溫水浴鍋、1000W/調(diào)溫電爐以及200mL 250mL容量瓶、250mL錐形并瓦及50

2、mL堿式滴定管等玻璃儀器；試劑主要包括費(fèi) 林試劑 及亞甲基藍(lán)溶液等。二、原理本實(shí)驗(yàn)的主要原理：在加熱條件下，用還原糖溶液滴定一定量的費(fèi)林試劑時(shí)， 將 費(fèi)林試劑中的二價(jià)銅還原為一價(jià)銅，以亞甲基藍(lán)為指示劑，稍過(guò)量的還原糖立即使藍(lán)色的氧化型亞甲基藍(lán)還原為無(wú)色的還原型亞甲基藍(lán)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)并掌握用費(fèi)林試劑滴定法測(cè)定可溶性糖的原理和方法。三、方法步驟（一）試劑配制1 .費(fèi)林試劑甲：稱取硫酸銅（CuSO4?5H2 0,分析純）34.6g溶于水中，稀釋 至500mL過(guò)濾，貯于棕色瓶?jī)?nèi)。2 .費(fèi)林試劑乙：稱取氫氧化鈉 50g和灑石酸鉀鈉（KNaC4 06 H4?4H2 0,分析 純）138g溶于水中，稀釋至

3、500mL用石棉墊漏斗抽濾。3 .轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取9.5g蔗糖（分析純）用水溶解后轉(zhuǎn)入 1000mL容量瓶 中，加入6mol/L HCl （分析純）10mL加水至100mL在2025c下放置三天 或在25c保溫24h,然后用水定容（此為酸化的1%專化糖液，可保存34個(gè)月）。 測(cè)定時(shí)，取1%?；且?5.00mL放入250mL容量瓶中，加入甲基紅指示劑一滴，0'科標(biāo)檢廁 Science Standard Testing 精準(zhǔn)每一刻用1mol/L NaOH溶液中和后用水定容，即為1mg/mL轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。4 .亞甲基藍(lán)溶液：稱取0.5g亞甲基藍(lán)（分析純）溶于10mL*中。5 .乙酸鋅

4、溶液：稱取21.9g乙酸鋅Zn（OAC）2 ?2H20,分析純?nèi)苡谒校颖?乙酸3mL稀釋至100mL6 .亞鐵氟化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氟化鉀K4 Fe（CN）6 ?3H20,分析純?nèi)苡?水，稀釋至100mL（二）樣品提取液制備取待測(cè)樣品適量，洗凈，用不銹鋼刀將可食部分切成適當(dāng)小塊充分混勻后，按四分法取樣。稱取100g鮮樣加入等重量的水，放入組織搗碎機(jī)中搗成1:1勻漿，有些材料勻漿比例可適當(dāng)調(diào)整，多汁果蔬類可直接搗漿。稱取勻漿25.0g或50.0g （相當(dāng)于樣品12.5g或25.0g）放入150m設(shè)杯中，含有機(jī)酸較多的材料加0.52.0g粉狀CaCO3H至中性（廣泛試紙檢試）。用水將樣

5、液全部轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，并調(diào)整體積約為200mL置80±2C水浴 保溫30 min,期間搖動(dòng)數(shù)次， 取出加入乙酸鋅溶液及亞鐵氟化鉀溶液各25mL冷卻至室溫后，用水定容，過(guò)濾備用。取已經(jīng)制備的待測(cè)液100mL于200mL容量瓶中，力口 6 mol/L HCl 10mL在80± 2c 水浴 加熱10min,放入冷水槽中冷卻后，加甲基紅指示劑二滴用6 mol/L及1mol/L NaOH溶液中和，用水定容。（三）可溶性總糖測(cè)定1 .費(fèi)林試劑的標(biāo)定：取費(fèi)林試劑甲、乙各5.00mL或在測(cè)定前先等體積混合后取 10.00mL混合液于250mLs形瓶中，放入玻璃珠45粒，先加入比預(yù)測(cè)

6、（預(yù)測(cè)見 2）僅少0.5mL的1mg/mL轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)液。將此混合液置1000W電爐上加熱，使其 在2min左右沸騰，準(zhǔn)確煮沸2 min ,此時(shí)不離開電爐，立即加入 0.5%甲基藍(lán) 指示劑23滴，并繼續(xù)以每45 S的滴速滴加標(biāo)準(zhǔn)糖液，直至二價(jià)銅離子完全 被還原生成磚紅色氧化亞銅沉淀，溶液藍(lán)色褪盡為終點(diǎn)。用準(zhǔn)確滴定標(biāo)準(zhǔn)糖液的毫升數(shù)V1 ,乘以標(biāo)準(zhǔn)糖液濃度mg/mL,即得10mL費(fèi)林試劑所相當(dāng)?shù)奶堑暮量?數(shù)。2.預(yù)測(cè)：取費(fèi)林試劑甲、乙各5.00mL或10.00mL混合液于250mL錐形瓶中，由13科標(biāo)檢廁 Science Standard Testing 精準(zhǔn)每一刻滴定管 加入待測(cè)糖液約15mL在電

7、爐上加熱至沸騰，約沸騰 15 S后迅速滴加 待測(cè)糖液，至呈現(xiàn)極輕微的藍(lán)色為止，此時(shí)加入 0.5%亞甲基藍(lán)指示劑23滴， 繼續(xù)滴加待測(cè)糖液，直至溶液藍(lán)色褪盡為止，記下待測(cè)糖液的用量V2 （毫升數(shù)）, 3.準(zhǔn)確測(cè)定：取費(fèi)林試劑甲、乙各5.00mL或10.00mL混合液加入錐形瓶中，由 滴定管加入比預(yù)測(cè)僅少0.5mL的待測(cè)糖液，并補(bǔ)加V1 -V2毫升水（標(biāo)準(zhǔn)費(fèi)林 試劑所消耗的標(biāo)準(zhǔn)糖液毫升數(shù) V1減去預(yù)測(cè)消耗的待測(cè)糖液毫升數(shù) V2 ,即為應(yīng) 補(bǔ)加水的毫升數(shù)），使其與標(biāo)定費(fèi)林試劑時(shí)的反應(yīng)體積一致。 以下按費(fèi)林試劑標(biāo) 定同樣操作，繼續(xù)滴至終點(diǎn)。前后沸騰時(shí)間須在 3 min分鐘左右。待測(cè)糖液消耗 量應(yīng)控制在1550mL范圍內(nèi)，不能大于標(biāo)定費(fèi)林試劑所用標(biāo)準(zhǔn)糖液體積 V1 , 否則應(yīng)增減稱樣量重新制備待測(cè)液。同法平行操作 3次，取平均值。（四）結(jié)果計(jì)算可溶性總糖（