比色法測定妥布霉素滴眼劑的含量

1、比色法測定妥布霉素滴眼劑的含量摘要以鄰苯二甲醛(PHT)為顯色劑的比色法測定了妥布霉素滴眼劑的含量。平均回收率99.31，變異系數(shù)108。結(jié)果表明，本法具有快速、簡便、準確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，適合于產(chǎn)品中間體的質(zhì)量控制和醫(yī)院制劑的快速分析。關(guān)鍵詞比色法妥布霉素含量測定鄰苯二甲醛 妥布霉素為較新的氨基糖苷類廣譜抗生素，具有抗菌譜廣，耐藥性小，毒性低，臨床療效好的特點。美國藥典1和我國衛(wèi)生部頒標準均采用微生物檢定法。 該法結(jié)果準確可靠，但操作繁瑣，要求高，不適合產(chǎn)品中間體的質(zhì)量控制和快速分析。我們參考了有關(guān)文獻2，采用鄰苯二甲醛比色法測定了妥布霉素滴眼劑的含量， 結(jié)果滿意。1儀器與試藥UV1601紫

2、外可見分光光度計(日本)；妥布霉素標準品(中國藥品生物制品檢定所，效價862u/mg，批號3408901);妥布霉素原料藥(廣東新北江制藥股份有限公司)；妥布霉素滴眼劑(中山醫(yī)科大學眼科中心制劑室，5ml：15000u)；鄰苯二甲醛(德國)。2實驗方法與結(jié)果21鄰苯二甲醛(PHT)試液的配制3稱取鄰苯二甲醛100mg溶于適量pH值為10.5的硼酸鹽緩沖液中，加1ml巰基乙醇，再加硼酸鹽緩沖液至100ml，用飽和氫氧化鈉溶液調(diào)至pH值為105。2.2妥布霉素衍生物吸收光譜稱取妥布霉素適量，以水為溶劑配成100g/ml的標準溶液，精密吸取標準溶液15ml于10ml量瓶中，加異丙醇3ml，PHT試劑

3、2ml，以異丙醇稀釋至刻度，于60水浴加熱15min，以相應(yīng)試劑作空白，在200400nm波長范圍內(nèi)掃描，繪制吸收光譜，結(jié)果在333nm波長處有最大吸收峰。2.3妥布霉素衍生物穩(wěn)定性以本品15gml反應(yīng)液在333nm波長處立即測定，與在室溫放置05h、1h、15h、2h分別測得吸收度比較，結(jié)果幾乎無變化。 2.4重現(xiàn)性取妥布霉素15g/ml的反應(yīng)液5份，分別在333nm波長處進行測定，吸收度平均值為0.7754，標準差為00042，重現(xiàn)性良好。25標準曲線的繪制精密稱取妥布霉素標準品適量，以水為溶劑配成100g/ml的標準溶液，分別精密吸取標準溶液0.5ml、10ml、1.5ml、2.0ml、

4、2.5ml置10ml量瓶中，分別加異丙醇3ml，PHT試劑2ml，用異丙醇稀釋至刻度，以相應(yīng)試劑作空白，于60水浴加熱15min，冷卻至室溫，在333nm波長處依次測定吸收度，將數(shù)據(jù)進行回歸處理得回歸方程為A=0.04918C+0.0394(C：g/ml)，r=0.9997，妥布霉素衍生物線性范圍130g/ml。2.6樣品含量測定精密吸取妥布霉素滴眼劑2ml，置100ml量瓶中，以水稀釋至刻度。從上述溶液中精密吸取2ml于10ml量瓶中，加異丙醇3ml，PHT試劑2ml，用異丙醇稀釋至刻度，以相應(yīng)試劑作空白，于60水浴加熱15min，冷卻至室溫，在333nm波長處測定吸收度，利用回歸方程計算百

5、分含量。27回收率試驗按妥布霉素滴眼劑處方制備模擬制劑，照樣品測定項下操作，依法測得回收率，結(jié)果如表1。表1回收率試驗序號投入量(萬u/ml)測得量(萬u/ml)回收率(%)10.240.234897.8320.240236098.3330.300.299899.9340.300.297599.1750.360.3625100.6960.360.359699.89注：平均回收率為99.31%，RSD為1.08 2.8比色法與微生物法的比較分別用比色法和微生物法測定3批妥布霉滴眼劑的含量，結(jié)果如表2。表2微生物法與比色法測定結(jié)果比較(n=3)批號微生物法標示量(%)比色法標示量(%)P99100

6、799.6396.00991026100.72101.890.0500022294.4295.333討論 3.1妥布霉素滴眼劑處方中各輔料經(jīng)實驗驗證，對結(jié)果沒有影響。3.2實驗結(jié)果表明，兩法測定妥布霉素含量的結(jié)果，經(jīng)統(tǒng)計學處理，無顯著性差異(P 0.05)。何梅鳳（中山醫(yī)科大學中山眼科中心廣州 510080）黃彩燕（東莞市藥檢所）吳偉（中山醫(yī)科大學中山眼科中心廣州 510080）龔梅英（中山醫(yī)科大學中山眼科中心廣州 510080）黃強（中山醫(yī)科大學中山眼科中心廣州 510080）參考文獻1，USP ，1989：12812，Suchitra S,Dennis H. Comparison of new and existing spectrophotometric methods for the analysis of tobramycin a