乳酸菌鈣奶飲料中食品添加劑的使用與檢測(cè)技術(shù)

1、乳酸菌 飲料中食品添加劑的檢測(cè)技術(shù)一、乳酸菌飲料中食品添加劑的使用1、羧甲基纖維素鈉（ CMC-Na ）1）性質(zhì) 白色纖維狀或顆粒狀粉末。無(wú)臭、無(wú)味，易溶于水成高 黏度溶液， 不溶于乙醇等多種溶劑。 可提高飲料的黏稠性和穩(wěn)定性。 在水中分散度與醚化度和其相對(duì)分子質(zhì)量有關(guān)。 1% 水分散液的 PH 為6.5 8.5。PH7時(shí)，羧甲基纖維素鈉溶液的黏度最高，PH4 11 時(shí)，較穩(wěn)定。2）用量 果汁、牛奶中最大用量為 5.0g/kg 。3）應(yīng)用 我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ GB2760 2007） 規(guī)定羧甲基纖維素鈉可用作增稠劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、保形劑、成 膜劑、膨化機(jī)和保鮮劑?？砂瓷a(chǎn)需要適量適

2、用于各類(lèi)食品中。2、磷酸1 ）性質(zhì) 使用磷酸為濃度 85%98%的無(wú)色透明稠狀液體，無(wú)臭， 味酸。磷酸的潮解性強(qiáng)， 能與水、乙醇混溶，接觸有機(jī)物則著色。 85% 的磷酸的相對(duì)密度為1.59，易吸水，極易溶于水和乙醇，加熱到150 C 時(shí)則成為無(wú)水物，215 C時(shí)變?yōu)榻沽姿幔?00 C左右轉(zhuǎn)變?yōu)槠姿帷?）應(yīng)用 在食品中磷酸屬?gòu)?qiáng)無(wú)機(jī)酸， 酸味強(qiáng)度為檸檬酸的 2.32.5 倍。酸感不如檸檬酸等有機(jī)酸好，有強(qiáng)烈的收斂味和澀味，主要作為 特征酸用于可樂(lè)型飲料的生產(chǎn)，用量為 0.2%0.6%，也可作為清涼飲料的酸度調(diào)節(jié)劑。還可作為抗氧化劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、增香劑、 增稠劑、整合劑、水分保持劑和面粉處理劑

3、。3、檸檬酸（枸櫞酸）1）性質(zhì) 檸檬酸有一水合物和無(wú)水物兩種， 為無(wú)色半透明結(jié)晶， 或 白色結(jié)晶、粉末，無(wú)臭，有強(qiáng)酸味。極易溶于水、乙醇、乙醚，有吸 濕性。檸檬酸具有良好的防腐性能， 能抑制細(xì)菌增殖， 可做防腐劑。 可以增強(qiáng)抗氧化劑的抗氧化作用， 延緩油脂酸敗可做抗氧化劑， 檸檬 酸含有 3 個(gè)羥基， 有很強(qiáng)的螯合離子的能力， 可做金屬螯合劑。 還可 用作色素穩(wěn)定劑，防止果蔬褐變。2）應(yīng)用 檸檬酸是所有有機(jī)酸中最可口的，易與多種香料配合而產(chǎn) 生清爽的酸味，在各類(lèi)食品中廣泛使用。檸檬酸與甜味劑、色素、香 精協(xié)調(diào)使用量為 0.1%-1.0% 。，無(wú)水檸檬酸多用于粉末制品，其酸 度強(qiáng)，用量較一水和檸

4、檬酸少 10% 。4、三聚磷酸鈉（三磷酸五鈉、三磷酸鈉）1）性質(zhì) 白色顆?；蚍勰谐苯庑?。分為無(wú)水鹽和六水鹽。25 C 時(shí)，產(chǎn)品的溶解度為 13% ，其水溶性呈堿性。三聚磷酸鈉在水溶液 中水解，水解產(chǎn)物為焦磷酸鹽和正磷酸鹽。2）應(yīng)用 三聚磷酸鈉可作為水分保持劑、 品質(zhì)改良劑、 酸度調(diào)節(jié)劑、 金屬螯合劑。最大用量為 1.2g/kg 。5、檸檬酸鈉（枸櫞酸鈉、檸檬酸三鈉）1） 性質(zhì) 白色結(jié)晶顆?；蚍勰瑹o(wú)氣味，味咸而涼爽。加熱至150 C 時(shí)失去結(jié)晶水，繼續(xù)加熱會(huì)分解。溶于水，難溶于乙醇，水溶液 PH 約為 8，在空氣中穩(wěn)定，有吸濕性和風(fēng)化性。2）應(yīng)用 檸檬酸鈉可作為食品加工的酸度調(diào)節(jié)劑、 緩沖

5、劑和螯合劑。 用于清涼飲料可緩和酸味，改進(jìn)口味。還能與金屬螯合，防止風(fēng)味物 質(zhì)的迅速氧化或催化變色反應(yīng)。在釀造中加入檸檬酸可促進(jìn)糖化作 用，用量約 0.3% ；冰淇淋制造使用的乳化劑和穩(wěn)定劑， 用量為 0.2% 0.3% 。用于乳制品中，防止其酸敗。6、單硬脂酸甘油脂1 ）性質(zhì) 乳白至微黃色蠟樣固體，無(wú)臭、無(wú)味；溶于乙醇、熱脂肪 油和烴類(lèi)，不溶于水，強(qiáng)烈振蕩于熱水中可分散成乳液態(tài)；單甘酯具 有良好的親油性，是乳化性很強(qiáng)的水包油型（ W/O ）乳化劑。2）應(yīng)用 我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ GB2760 2007 ）單 硬脂酸甘油脂的使用范圍與最大使用量為：葡萄酒 0.018g/kg ；發(fā)酵 乳

6、5.0g/kg ;黃油20g/kg ;嬰幼兒配方食品、咖啡飲料類(lèi)則按生產(chǎn)需 要適量使用。7、蔗糖脂肪酸酯1 ）性質(zhì) 白色至微黃色粉末、蠟樣塊狀或無(wú)色至微黃色稠厚凝膠， 無(wú)臭或微臭。溶于乙醇、微溶于水。水溶液有黏性和濕潤(rùn)性，乳化作 用良好。軟化點(diǎn)50 70 C, 120 C以下穩(wěn)定，140 C以上可分解，在 酸性或堿性條件下加熱可皂化。 有旋光性， 對(duì)淀粉有特殊的防老化作2）應(yīng)用 我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ GB2760 2007 ）規(guī) 定蔗糖脂肪酸酯的使用范圍與最大使用量為：調(diào)配乳 3.0g/kg ；冷凍 飲品、八寶粥罐頭 1.5g/kg ；調(diào)味品、果醬 5.0g/kg 。8、山梨酸鉀1 ）

7、性質(zhì) 無(wú)色至白色鱗片狀結(jié)晶或結(jié)晶粉末。 無(wú)臭或稍有臭氣， 在 空氣中不穩(wěn)定，能被氧化分解變色，有吸濕性，熔點(diǎn) 270 C。易溶于 水，溶解于丙二醇、乙醇。 1%山梨酸鉀水溶液的 PH 為 78。山梨 酸鉀具有強(qiáng)抑制腐敗菌和霉菌的作用，在酸性介質(zhì)中具有防腐作用， 山梨酸鉀除用作防腐劑外還可做抗氧化劑和穩(wěn)定劑。2）應(yīng)用 我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ GB2760 2007）規(guī) 定：氫化植物油、果醬、鹽漬的蔬菜、乳脂和凝膠糖果、面包糕點(diǎn)、 復(fù)合調(diào)味料、乳酸菌飲料 1.0g/kg ；風(fēng)味冰、蜜餞涼果醬及醬制品、 飲料類(lèi)果凍 0.5g/kg ；濃縮果蔬汁 2.0g/kg ；配制酒 0.2g/kg ；葡萄

8、酒、 果酒 0.6g/kg 。9、阿斯巴甜（含苯丙氨酸）1）性質(zhì) 白色結(jié)晶狀粉末，無(wú)臭、微溶于水，難溶于乙醇，不溶于 油脂。僅在 PH 為 35 的環(huán)境中較穩(wěn)定，在強(qiáng)酸堿及中性溶液中或 高溫加熱后易水解，甜味下降，而且生成苦味的苯丙氨酸。2）應(yīng)用 阿斯巴甜可作為甜味劑和風(fēng)味增效劑應(yīng)用于各種食品、 飲 料。它是一種二肽化合物，進(jìn)入人體后可被消化吸收，并提供 16.72KJ/g 的能量，由于其能量值低， 也可作為防齲齒食品的甜味劑。10、安塞蜜1） 性質(zhì) 白色結(jié)晶狀粉末，對(duì)光、熱穩(wěn)定，是穩(wěn)定性最好的穩(wěn)定劑。 甜度為蔗糖的200倍，甜味純正而強(qiáng)烈，甜味持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。其水溶 液甜度不隨溫度上升而下降。高

9、濃度時(shí)會(huì)略帶苦味。2）應(yīng)用 我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB2760 2007 ）規(guī) 定其使用范圍和最大使用量，安塞蜜用于冷凍飲品、水果罐頭、果醬、 蜜餞類(lèi)、八寶粥罐頭、果凍、飲料類(lèi)，最大使用量為 0.3g/kg ;調(diào)味 和果味發(fā)酵乳0.35g/kg。11、濃縮乳清蛋白粉1）性質(zhì) 濃縮乳清蛋白是噴霧干燥的，平淡無(wú)味的米色粉末，可自 由流動(dòng)，不結(jié)塊。它是一種特別設(shè)計(jì)的乳清蛋白濃縮物，他展示高 度的遇熱而膠化的特性。由新鮮且具甜味的乳清所制成的，然后經(jīng)過(guò) 特殊的超濾程序，將蛋白質(zhì)濃縮至 80%的程度。2） 應(yīng)用 奶粉冰淇淋巧克力保健食品烘烤食品（包括低脂）冷凍乳制甜點(diǎn)沙拉醬奶精蛋黃醬面糊和裹上面包

10、粉加工過(guò)乳及素食乳酪酸奶（可舀取的或飲用的）其他發(fā)酵乳制品肉汁、果汁等。12、碳酸鈣1）性質(zhì) 白色微晶細(xì)粉。無(wú)臭無(wú)味。相對(duì)密度2.52.7。易吸收臭 氣?？諝庵蟹€(wěn)定。強(qiáng)熱至825896.6 C分解（產(chǎn)生CO2變?yōu)檠趸}）。 幾乎不溶于水和乙醇。如有銨鹽或二氧化碳存在，可提高其在水中的 溶解度，而氫氧化堿則可降低溶解度。輕微吸濕。溶于稀酸（乙酸、 稀鹽酸、稀硝酸）并產(chǎn)生CO2。難溶于稀硫酸。按粉末大小可分為重質(zhì)碳酸鈣（3050）,輕質(zhì)酸酸鈣（5 gm），膠體碳酸鈣（0.030.05 口）三種。我國(guó)多使用輕質(zhì)碳酸鈣。其中膠體碳酸鈣最易被人體吸收。 與氯化銨溶液共煮則分解產(chǎn)生氨、二氧化碳?？勺鲏A性劑

11、、營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ) 劑、面團(tuán)調(diào)節(jié)劑、固化劑、酵母食料、抗結(jié)塊劑、疏松劑、發(fā)酵劑、膠姆糖助劑和改性劑、白色色素（食品表面著色劑）。2）應(yīng)用 按照我國(guó)食品添加劑和營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)， 沉淀碳 酸鈣作疏松劑用于配置發(fā)酵粉和罐頭中，一般是品種用量為 1 %。作 為食品強(qiáng)化劑，用于小麥粉及其制品中用量為 4-8g/kg ;飲液及乳飲 料1-2g/kg ;嬰幼兒米粉中為7.5-15 g/kg。13、維生素A （視黃醇）1）性質(zhì) 淡黃色針狀結(jié)晶物，在空氣中易被氧化，紫外線照射也可 破壞，對(duì)熱酸、堿都比較穩(wěn)定，屬脂溶性維生素。2）應(yīng)用 作為營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑，通常添加表面活性劑使其能分散于水中。用于香腸、人造奶油、面包、

12、孚L制品、果汁粉、花生白脫、花生油、調(diào)和油等。我國(guó)食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)維生素 A在乳制 品中的添加量為 3 9mg/kg ;在乳及乳飲料中的添加量為 0.6 1mg/kg ;在干酪制品中其最大添加量為 3 9mg/kg ;在風(fēng)味發(fā)酵乳 及風(fēng)味酸乳中，維生素 A的最大添加量為0.6 1mg/kg。14、維生素D （鈣化醇）1）性質(zhì) 白色結(jié)晶，溶于脂肪和有機(jī)溶劑，其化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定。在中性和堿性溶液中耐咼熱和氧化， 對(duì)光敏感，易被紫外線照射而破 壞，在酸性溶液中維生素 D 逐漸被分解，脂肪酸敗也可引起維生素 D 破壞。2）應(yīng)用 我國(guó)食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 中維生素 D 在乳制 品中的添加

13、量為 63 125ug/kg ；在乳及乳飲料中的添加量為 10 40ug/kg ；在干酪和其他乳制品中其最大添加量為 63125ug/kg ；在 風(fēng)味發(fā)酵乳及風(fēng)味酸乳中其最大添加量為 1040ug/kg 。 二、乳酸菌飲料中食品添加劑檢測(cè)技術(shù)（一）羧甲基纖維素鈉1.感官指標(biāo)的檢驗(yàn) 取樣至于玻璃平面上，觀察是否為白色或微黃色纖維狀粉末。2.理化指標(biāo)的檢驗(yàn)1）試劑：鹽酸、硫酸銅 10g/L2）試驗(yàn)溶液的制備：取 2g 試樣，置于 100ml 溫?zé)崴校瑪嚢?均勻，繼續(xù)攪拌至膠狀，冷取至室溫。3）鑒別方法： 取上述試液 30ml, 加入 3ml 鹽酸，產(chǎn)生白色沉淀。 取上述試液 50ml, 加入 1

14、0ml 鹽酸，產(chǎn)生絨毛狀淡藍(lán)色沉淀。 用鹽酸濕潤(rùn)鉑絲， 先在無(wú)色火焰上灼燒至無(wú)色， 再蘸取試液少 許，在無(wú)色火焰上灼燒，火焰即成鮮黃色。（二）磷酸.1.試劑和溶液：氫氧化鈉 0.5mol/L 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液按 GB601 配制與標(biāo)定百里香酚酞： 1， 0.1g 百里香酚酞指示劑溶于 100ml 乙醇中。2. 測(cè)定方法 :稱(chēng)取試樣 1 克,準(zhǔn)確至 0.0002 克，移入 250ml 錐形瓶中，加 25ml蒸餾水，調(diào)節(jié)溫度至約15 C加5滴百里香酚酞指示液，用氫氧化鈉 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴至藍(lán)色即為終點(diǎn)。磷酸含量（）按下式計(jì)算：磷酸（）=（VXC>0.04900 X100）怖式中：C :氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)

15、之物質(zhì)的量濃度，mol/ L V:消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液試樣的體積 mL, M:試樣的質(zhì)量，g ; 0.04900 :與 1.00mL（C（Na0H）=1.000 mol/ L）相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜牧姿岬馁|(zhì)量。所 得結(jié)果應(yīng)表示至一位小數(shù)。（三）檸檬酸1. 理化指標(biāo)的檢驗(yàn)1）試劑和溶液: 硫酸、高錳酸鉀 0.1mol 溶液、乙酸、氯化鈣 7.5% 溶液、鹽酸 24%溶液、氫氧化鈉 4.3% 溶液、氨水 40%溶液、硝酸銀 0.1mol 溶液硫酸汞:稱(chēng)取 5g 黃色氧化汞加 40ml 水中,緩慢加入 20ml 硫酸,邊 加邊攪拌,再加 40ml 水?dāng)嚢枋怪咳芙狻?）測(cè)定方法 取少量試樣，用火灼燒

16、，使之緩慢分解但不發(fā)生焦糖臭。 試樣溶液用 4.3% 的氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加硫酸汞溶液加 熱至沸，再加 1 滴 0.1mol 高錳酸鉀溶液，振蕩紫色即消退，并產(chǎn)生 白色沉淀。 試樣溶液用 4.3% 的氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加過(guò)量的 7.5%氯 化鈣溶液，冷時(shí)無(wú)變化，煮沸即發(fā)生白色顆粒狀沉淀。在一部分中加 入 4.3% 氫氧化鈉溶液，沉淀不溶解，另一部分中加 2.4% 的鹽酸溶液， 則溶解。試樣溶液用 4.3% 的氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，加過(guò)量的 0.1mol 的硝酸銀溶液，即發(fā)生白色沉淀。白色沉淀能在硝酸或 40% 氨溶液 中溶解，取氨溶液于試管中，在水浴上加熱至6070 攝氏度。管壁無(wú)銀產(chǎn)

17、生。（四）三聚磷酸鈉1.測(cè)定方法（離子色譜法）：將三聚磷酸鈉用電阻率大于或等于18.2M Qcm超純水稀釋約500倍后，經(jīng)0.45微米微孔濾膜過(guò)濾，用 注射器注入帶 AS11-HC 型陰離子交換樹(shù)脂離子色譜儀， 控制流速在 0.7-1.2mL/min，柱溫30C,抑制器電流 172mA和淋洗液濃度在 25-99mM 之間對(duì)正磷酸根、焦磷酸根、三聚磷酸根、三偏磷酸根進(jìn) 行測(cè)定。（五）檸檬酸鈉1. 理化指標(biāo)的檢驗(yàn)1 ）試劑：高氯酸 0.1mol 標(biāo)準(zhǔn)溶液、 0.5%結(jié)晶紫、冰乙酸溶液、乙酸酐2)測(cè)定方法：取試樣約 0.15g, 加冰乙酸 10ml, 加熱溶解后放冷。 加乙酸酐10ml,加0.5%結(jié)

18、晶紫溶液2滴，用O.lmol的高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶 液滴定至溶液顯藍(lán)綠色，同時(shí)做空白滴定實(shí)驗(yàn)。(六) 單硬脂酸甘油酯1.理化指標(biāo)檢驗(yàn)：(碘值的測(cè)定)1)試劑和溶液：鹽酸(GB 622):化學(xué)純密度1.19g/mol ;高 錳酸鉀(GB 643):化學(xué)純。 .碘(GB 675):化學(xué)純。冰乙酸(GB 676):化學(xué)純。.三氯甲烷(GB 682):化學(xué)純。碘化鉀(GB 1272): 化學(xué)純，15 %溶液。.0.5 %淀粉指示液：按GB 603方法配制。 0.05mol/L(0.1N) 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液： 按 GB 601 方法配制和標(biāo)定。 氯氣：用鹽酸滴加于高錳酸鉀中，使產(chǎn)生的氯氣先通入盛有密度1.84

19、 硫酸洗氣瓶 干燥后，再通入碘溶液中。 韋氏液：先溶13g碘于1000mL冰乙酸中，溶解時(shí)可略加熱，溶液盛于1000mL棕色瓶里，冷卻后作為碘溶液。從中倒出100200mL 于另一棕色瓶中，置陰暗處供調(diào)整韋氏溶液之用。再通氯氣 于所剩碘溶液內(nèi)， 待其色由深色漸漸變淡直至桔紅色透明為止。 氯氣 通入量應(yīng)使滴定所耗用硫代硫酸鈉溶液量接近未通氯氣前耗用硫代 硫酸鈉溶液量的一倍。 通氯氣也可適當(dāng)過(guò)量， 然后用預(yù)先留存之碘液 加以調(diào)整。其校正方法為：各取 25mL 碘液及新配 制的韋氏溶液， 各加入 15% 碘化 鉀溶 液 20mL ， 再各加 100mL 蒸餾水， 用 0.05mol/L(0.1N)

20、硫 代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色時(shí)，加 1 2mL 淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失為止。新配制的韋氏溶液所消耗的硫代硫酸鈉溶液量應(yīng)將近一倍于碘溶液2) 測(cè)定方法：稱(chēng)取樣品2g(準(zhǔn)確至0.0002g)于碘量瓶中，加入20mL 三氯甲烷，待樣品溶解后由滴定 管加入 10mL 韋氏溶液 ,搖勻, 以少 量15 %碘化鉀溶液濕潤(rùn)瓶塞，在1520 C放置暗處30min后取出， 再加入15 %碘化鉀溶液20mL及100mL蒸餾水，用0.05mol/L(0.1N) 硫代硫酸鈉溶液 滴定，至溶液呈淡黃色時(shí)，加入 12mL 淀粉指示 液，再繼續(xù)滴定至溶液藍(lán)色消失為止。 同時(shí)在相同條件下作空白試驗(yàn)。3) 計(jì)算

21、(V0-V1)>0.2538X=W0>m式中：X-碘值；V0-空白試驗(yàn)所用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL ;V1-試樣所用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL； n-硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液摩爾濃度， mol/L； m-樣品質(zhì)量， g； 0.2538- 碘的毫摩爾質(zhì)量， g/mol 。(七) 蔗糖脂肪酸脂1. 理化指標(biāo)的檢驗(yàn)1) 儀器和試劑：酸度計(jì)；電磁攪拌器；四氫咲喃。 氫氧化鉀 (GB 2303) c(KOH)=0.1mol L 標(biāo)準(zhǔn)溶液。 pH9.18標(biāo)準(zhǔn)溶液 溶解3.81g硼砂(GB 628)至1000ml水中，25 C時(shí)此溶液pH值為9.18。2) 測(cè)定方法：用 pH 標(biāo)準(zhǔn)溶液 (pH9

22、.18) 校正 pH 計(jì)。準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品約lg（稱(chēng)準(zhǔn)至0.0002g）于150ml燒杯中，加入 40ml 四氫呋喃及 20ml 水在水浴上加熱溶解， 放置至室溫， 置電磁攪 拌 器 上 ， 連 接 好 電極 及 pH 計(jì) ， 用 氫 氧 化 鉀 或標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 c（KOH）=0.1mol /L滴至pH8.20。同時(shí)作空白試驗(yàn)。（八）山梨酸鉀1 .理化指標(biāo)的檢驗(yàn) （HPLC 法）1 ）試劑：甲醇（色譜純）。山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度為 1mg/mL 。再用水稀釋 10 倍配制成 100 血/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。2）儀器： 高效液相色譜儀 （帶紫外檢測(cè)器 ）、離心機(jī)、 pH 計(jì)。色譜儀工作條件色譜柱（C1

23、8） 5呵，125 Mmm ;流動(dòng)相：甲醇- 乙酸銨緩沖溶液 （pH4.6）（60+40） ；流速： 1.0mL/ min 。掃描波長(zhǎng)： 200.0300.0 ;測(cè)定波長(zhǎng)： 220.0。3）樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱(chēng)取 3.000-5.000g ，放入 50ml 比色管中， 并加水至刻度， 振蕩、搖勻、靜置半小時(shí)后， 用定量濾紙過(guò)濾， 備用。 取上述過(guò)濾液用1+1氨水調(diào)至pH7，經(jīng)0.45呵濾膜過(guò)濾后作為待 測(cè)液2。4）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：取100血/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0,0.5,1.0,2.0 ,5.0 mL 于 10mL 容量瓶中 ,用水定容至刻度 ,配制成 0, 5,10,20, 50血/mL混合標(biāo)

24、準(zhǔn)系列，取10山注入高效液相色譜儀中， 記錄各色譜峰保留時(shí)間 ,峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5）樣品測(cè)定：取10山樣品待測(cè)液注入液相色譜儀中，比較樣品 與標(biāo)準(zhǔn)組分的保留時(shí)間 ,吸收光譜特性進(jìn)行定性 ,用外標(biāo)法定量測(cè)定。（九）阿斯巴甜1 理化指標(biāo)的檢驗(yàn)（ HPLC 法）1 ）儀器與設(shè)備：高效液相色譜儀、 配紫外檢測(cè)器；色譜柱； 高速 離心機(jī)； 超純水器 ;Votexgenie22 型旋渦混勻器。2）試劑和溶液： 阿斯巴甜 （純度 99% ） 標(biāo)準(zhǔn)貯備液 ： 稱(chēng)取阿斯巴甜 10 . 0mg, 用冰乙酸水溶液 （體積比為 1% ） 定容至 10 . 0mL , 濃度為 1 . 0mg ? mL。阿斯巴甜標(biāo)

25、準(zhǔn)貯備液用水配制成濃度分別為 1 . 0、 5 . 0、 10 . 0、 25 . 0、 50 . 0Lg? mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液。工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。 磷酸二氫鉀 （分析純 ） ; 乙腈（色譜純） ; 冰乙酸 （色譜純 ） ; 磷酸 （分析純 ）。 磷酸二氫鉀水溶液 （1 0mmol ? L , 用磷酸調(diào) pH = 3 . 5） ; 卡瑞 ©液：稱(chēng)取22g乙酸鋅，加入3mL冰乙酸，溶解于水中并稀釋至 100mL ;卡瑞e液：稱(chēng)取10 . 6g亞鐵氰化鉀溶解于水中并稀釋至 100mL 。3）樣品處理：取 5mL 試樣超聲脫氣 10m in 后用 0 . 45L m 濾膜 過(guò)濾 , 濾液直接進(jìn)高效液相色譜儀測(cè)定。4）色譜條件色譜柱：迪馬 InertsilODS2 C18 （5L m, 150 M . 6mm ）;流動(dòng)相：磷 酸二氫鉀水溶液 ; 檢測(cè)器波長(zhǎng) :210nm; 流速: 1 . 0mL ? m in; 進(jìn)樣量: 20L L;柱溫:30 C。（十）安賽蜜1 樣品與試劑：乳酸菌 AD 鈣奶樣品、甲醇（色譜純）、乙酸銨 （分析純）超純水2標(biāo)樣和樣品處理1 ）流動(dòng)相（甲醇：