透明質酸鈉和醋酸強的松龍對兔顳下頜關節(jié)影響的掃描電鏡研究

1、    透明質酸鈉和醋酸強的松龍對兔顳下頜關節(jié)影響的掃描電鏡研究          摘要：目的:通過掃描電鏡觀察透明質酸鈉和醋酸強的松龍對免顳下頜關節(jié)表面的作用。方法:在20只未成年日本大耳白兔的右側顳下頜關節(jié)下腔分別注射透明質酸鈉和醋酸強的松龍。術后第1、3、7、14 d分批處死各組白兔，將標本處理后用掃描電鏡觀察。結果:掃描電鏡觀察發(fā)現醋酸強的松龍使髁突表面和關節(jié)盤下腔面的表面凝膠樣物質分布不均勻，出現部分區(qū)域表面凝膠樣物質減少甚至消失，部分區(qū)域凝膠樣物質聚集成

2、團；而透明質酸鈉不改變關節(jié)表面凝膠樣物質的分布。結論:醋酸強的松龍可破壞顳下頜關節(jié)表面的超微結構，透明質酸鈉對顳下頜關節(jié)表面的超微結構無損害作用。關鍵詞：關節(jié)盤 髁突 關節(jié)下腔內注射 透明質酸鈉 強的松龍The Effect of Intra-articular Injection of Sodium Hyaluronate and Prednisolone on RabbitsTemporomandibular JointsSu Tong（Department of Stomatology, the Affilated Xiangya Hospital of Hunan Medical Un

3、iversity）Long XingLi Hongli（College of Stomatology, Hubei Medical University）Zhang Guozhi（Department of Stomatology, Shenzhen Peoples Hospital）Abstract：Objective：To evaluate the different effects of sodium hyaluronate and prednisolone on the surface of rabbits temporomandibular joints. Methods: 20 j

4、uvenile Japanese large ear rabbits were divided into 5 groups, including one control group and the other 4 experimental groups. In these groups, half of their right inferior cavity of temporomandibular joints were injected with sodium hyaluronate(25 mg/ml,0.1 ml), while others were injected with pre

5、dnisolone(1%,0.1 ml), then the rabbits were killed on the 1st, 3rd, 7th,and 14th days after injection. The specimens were evaluated by scanning electron microscope (SEM) to compare the different effects on the inferior superfacial structure of the articular disc and the surface of the condyle. Resul

6、ts: Prednisolone could change the uniform distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surface of the condyle. In the 1st-day and the 3rd-day groups, the agglutinating substance decreased in some areas and gathered in other areas. In the 7th-d

7、ay group, the distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surface of the condyle were more regular than that of the 1st-day and the 3rd-day groups. In the 14th-day group, the distribution of the agglutinating substance were almost as the same

8、 as that of the control group. But sodium hyaluronate didn't change the uniform distribution of the agglutinating substance in every group. Conclusion: Prednisolone can change the uniform distribution of the agglutinating substance on the inferior superfacial of the articular disc and the surfac

9、e of the condyle, while sudium hyaluronate don't have this effect.Key words：articular disc condyle intra-articular injection sodium hyaluronate prednisolone顳下頜關節(jié)是頜面部具有轉動和滑動運動的左右聯(lián)動關節(jié)，其解剖和運動都是人體最復雜的關節(jié)之一。當患顳下頜關節(jié)紊亂綜合征時，臨床上均主張實施以保守治療為主的綜合治療，并遵循逐步升級的治療原則。應用關節(jié)腔內注射藥物的方法來緩解癥狀是最常用的治療手段之一,因此，探討以何種藥物進行關節(jié)腔內注

10、射可獲最佳療效一直是國內外醫(yī)務工作者們致力研究的重要課題。本實驗就透明質酸鈉與臨床常用的醋酸強的松龍進行比較，作為臨床應用的基礎。1材料和方法1.1動物及分組20只日本大耳白兔,免齡3個月左右，體重2.0 kg左右，雌雄不分,隨機分成5組，每組4只。第1組：此組為正常對照組。任取其中2只行右側TMJ下腔穿刺,不注射任何藥物；另外2只右側TMJ下腔穿刺后注入生理鹽水0.1 ml。4只兔子均在術后第3天處死;第2組：任取2只兔子右側TMJ下腔穿刺注入透明質酸鈉，另2只右側TMJ下腔穿刺注入醋酸強的松龍。術后第1天處死;第3、4、5組方法同第2組，分別于術后第3、7、14 d處死。1.2注射藥物和劑

11、量本實驗采用濃度為25 mgml的醋酸強的松龍注射液，注射劑量為0.1 ml；透明質酸鈉由SIGMA化學有限公司生產，該產品由牛的氣管中提取，為純結晶粉末，注射前用生理鹽水配制成1%的濃度，注射劑量為01 ml。1.3注射方法固定兔子四肢，消毒右側TMJ區(qū)附近皮膚，在眶下緣與髁突后極之間作TMJ下腔穿刺，針尖指向前、內、下，進針約0.5 cm有落空感，抵到髁突表面，且針頭可隨兔下頜運動而同步運動，回抽無血，注射藥物后可回抽，即表示針尖已在關節(jié)下腔內，注入藥物后，退出針頭，壓迫止血。1.4標本處理取下術區(qū)標本后，將關節(jié)盤與髁突分離，注意勿傷及關節(jié)盤下腔面與髁突表面。然后用0.9%生理鹽水清洗3次

12、,2%戊二醛固定,酒精梯度脫水（50%、70%、80、95%、100%),自然干燥,真空噴金鍍膜,掃描電鏡（KYKY-AMARY 1000B，中國科學院儀器廠）觀察。2結 果2.1正常關節(jié)表面超微結構關節(jié)盤下腔面在鏡下見中央區(qū)較周邊平坦，中央區(qū)呈腦回狀，周邊存在著細小的平行排列的波紋狀結構；且整個關節(jié)盤下腔面均勻覆蓋一層凝膠樣物質（1）。髁突表面在鏡下可見中央區(qū)較平坦光滑，外周細小的波紋狀結構不如關節(jié)盤表面明顯，髁突表面亦均勻覆蓋了一層凝膠樣物質。1 正常關節(jié)表面結構 SEM ×10002.2醋酸強的松龍注射后關節(jié)表面超微結構注射后1 d、3 d，可見兔關節(jié)盤下腔面及髁突表面的波紋狀

13、結構仍存，但表面凝膠樣物質明顯分布不均勻，部分區(qū)域表現為凝膠樣物質減少甚至消失，部分區(qū)域則表現為凝膠樣物質聚集成團（2、3）；注射后7 d可見表面凝膠樣物質的分布仍不均勻，但較1 d，3 d組有明顯改善（4）；注射后14 d可見表面凝膠樣物質的分布基本正常（5）。2 強的松龍注射后1 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10103 強的松龍注射后3 d的關節(jié)表面結構 SEM ×20004 強的松龍注射后7 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10005 強的松龍注射后14 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10002.3透明質酸鈉注射后關節(jié)表面超微結構注射后的各組實驗動物均未

14、見有異常表現（69）。6 透明質酸鈉注射后1 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10007 透明質酸鈉注射后3 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10108 透明質酸鈉注射后7 d的關節(jié)表面結構 SEM ×10009 透明質酸鈉注射后14 d的關節(jié)表面結構 SEM ×20003討 論醋酸強的松龍作為糖皮質激素的一種，其生理作用表現為影響中間代謝,而超生理濃度的糖皮質激素則產生與生理作用完全不同的藥理作用，即抗炎、免疫抑制、抗毒和抗休克。其中抗炎和免疫抑制作用在減緩TMJDS的癥狀方面發(fā)揮了很大的作用。但早在1966年，Mankin就發(fā)現糖皮質激素有直接損傷髁突表面纖

15、維軟骨的作用1;Canelis（1984）認為糖皮質激素干擾軟骨細胞增殖的機制是抑制了細胞的蛋白質和DNA合成2；Pelletier（1989）認為激素注射間隔時間短、劑量大是造成關節(jié)軟骨損害的主要原因，如果用小劑量、間隔時間長的激素注射，不會造成關節(jié)損害3。本實驗通過掃描電鏡觀察后發(fā)現：糖皮質激素可導致髁突表面及關節(jié)盤下腔面的表面凝膠樣物質的分布發(fā)生改變。且隨著時間的推移，表面凝膠樣物質有逐漸自行恢復正常的能力，其機制尚有待進一步的研究,筆者認為與糖皮質激素可誘導膠原酶的合成有關。從上述結果可認為在TMJ腔內注射糖皮質激素后，一方面須限制關節(jié)運動，因為藥物引起關節(jié)表面凝膠樣物質結構改變，從而

16、增大了關節(jié)盤與髁突之間的摩擦系數，此時不恰當的關節(jié)運動將極易導致關節(jié)表面的損害，另一方面因關節(jié)表面的微觀結構可自行恢復正常，故經過較長的時間間隔后仍可再次注射。透明質酸由滑膜B型細胞分泌。其生理作用主要為潤滑作用。滑液中的透明質酸蛋白是關節(jié)表面的有效界面潤滑劑，關節(jié)盤及髁突表面微觀波紋結構能儲留滑液凝膠4；Hlavacek（1993）證明用透明質酸酶處理關節(jié)液后，關節(jié)的摩擦系數增加23倍5。當患骨關節(jié)病時，透明質酸對關節(jié)組織具有獨特的藥理作用。首先，它具有鎮(zhèn)痛作用。Gotoh（1988）將一組大白鼠膝關節(jié)內注入一種內源性致痛物質，發(fā)現大白鼠對疼痛不敏感；將另一組大白鼠膝關節(jié)先用透明質酸酶破壞透

17、明質酸后，再注入內源性致痛物質，大白鼠對疼痛很敏感。且注入0.05ml 1%的透明質酸后可鎮(zhèn)痛48 h，此時熒光標記透明質酸顯示其位于滑膜中。據此作者提出機體內的透明質酸有保護組織免受致痛物質刺激，而外源性透明質酸有鎮(zhèn)痛作用，并分析其鎮(zhèn)痛機理為透明質酸包裹了致痛物質或是封閉了疼痛感受器所致。其次，透明質酸可保護受損的軟骨細胞6，Toyoshima（1987）和吳海山（1996）均證明外源性透明質酸鹽能有效減輕兔骨關節(jié)炎模型中膝關節(jié)軟骨的退變7；此外，外源性透明質酸還有促進滑膜合成透明質酸的功能，可使滑液中透明質酸的濃度增加、粘彈性增大，而Nakagawa（1984）Furuhashi（1984）Suzuki（19