試驗(yàn)報(bào)告設(shè)計(jì)葉綠體中色素的提取和分離

1、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)1 1、知識方面（1 1）探究葉綠體中含有幾種種色素：理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系（2 2）了解紙層析法的原理。2 2、能力方面 掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。3 3、情感態(tài)度與價(jià)值觀方面 認(rèn)識生物科學(xué)的價(jià)值，樂于學(xué)習(xí)生物科學(xué)，養(yǎng)成質(zhì)疑、求實(shí)、創(chuàng)新及勇于實(shí)踐的科學(xué) 精神和科學(xué)態(tài)度二、實(shí)驗(yàn)原理1 1、色素提取的原理：葉綠體中的色素能溶于有機(jī)溶劑中，故可用丙酮和無水乙醇提取色素。2 2、色素分離的原理：葉綠體中的各種色素在層析液中的溶解度不同。溶解度大的色素， 在濾紙上隨層析液的擴(kuò)散速度快；溶解度小的色素，在濾紙上隨層析液的擴(kuò)散速度慢。三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料：新鮮的綠葉（如新鮮菠

2、菜葉片） 。實(shí)驗(yàn)儀器及用具： 定性濾紙， 研缽，玻璃濾斗， 脫脂棉， 尼龍布，毛細(xì)吸管，剪刀， 藥勺， 量筒（10mL,天平，試管，試管架，滴管，培養(yǎng)皿，三角瓶，燒杯試驗(yàn)試劑：無水乙醇（或丙酮），層析液（CCICCI4）,石英砂（SiOSiO2）和碳酸鈣（CaCCaC四、實(shí)驗(yàn)步驟1 1 、葉綠體色素的提取（ 1 1 ）取菠菜新鮮葉片 5g5g ，洗凈，擦干，去掉中脈，剪碎，放入研缽中。（2 2）向研缽中加入少許碳酸鈣和二氧化硅，再加 10mL10mL 無水乙醇，進(jìn)行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸鈣可防止研磨中色素被破壞） 。（ 3 3）將研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一塊單層尼

3、龍布）中進(jìn)行過濾。將濾液收集到 試管中，及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。2 2、制備濾紙條用預(yù)先干燥處理過的定性濾紙，將濾紙剪成長1010 cmcm、寬 1cm1cm 的濾紙條，在濾紙條的一端剪去兩角（防止層析液在濾紙條的邊緣擴(kuò)散過快） ，并在距離這一端 1cm1cm 處用鉛筆畫一條 細(xì)的橫線。3 3、 畫濾液細(xì)線用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線均勻地畫出一條細(xì)而直的濾液細(xì)線。待 濾液干后，再畫二三次。4 4、 分離葉綠體中的色素將 3 3 mLmL 層析液到入燒杯中， 將濾紙條（有濾液細(xì)線的一端朝下） 略微斜靠著燒杯的內(nèi)壁, 輕輕地插入到層析液中，隨后用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒壞。注意，不能讓濾液細(xì)線觸及層析

4、液。5 5、 觀察與記錄 觀察濾紙條上出現(xiàn)了幾條色素帶，以及每條色素帶的顏色。將觀察結(jié)果記錄下來。五、結(jié)果分析1 1 、色素在濾紙條上的分布如下圖：2 2、葉綠體中的色素是有機(jī)化合物，不溶于水，能夠溶解在有機(jī)溶劑中，所以用丙酮、乙醇可以將存在于葉綠體類囊體膜上的色素溶解，從而提取色素。經(jīng)過提取、過濾得到的色素濾液為綠色，葉綠體色素見光易分解，應(yīng)將色素濾液避光保存。3 3、層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑，葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，溶解度低的在濾紙上擴(kuò)散得慢，所以用層析法來分離這四種色素。六、注意事項(xiàng)1 1、各種試劑用途總結(jié)：丙酮的用途是提?。ㄈ芙?/p>

5、）葉綠體中的色素，層析液的的用途是分離葉綠體中的色素；石英砂的作用是為了研磨充分，碳酸鈣的作用是防止研磨時(shí)葉綠體中的色素受到破壞；2 2、提取色素（1 1） 注意選材：應(yīng)選擇新鮮、濃綠、柔軟的葉片（色素含量多）。（2 2）研磨要充分、迅速，用紙蓋住研缽口，試管口要加塞。葉綠素不穩(wěn)定，已被細(xì)胞中 的葉綠素酶水解，迅速研磨可以盡量使葉綠素不被水解；充分研磨可以使葉綠體完全破裂， 便于提取較多的色素。（3 3）丙酮等有機(jī)溶劑的用量不宜過多，過多會影響色素的濃度，過少則不易過濾。（4 4） 用尼龍布過濾，不能使用濾紙。（濾紙會吸附色素）3 3、濾紙條（1 1）干燥，有利于色素?cái)U(kuò)散。（2 2）雙手盡量不

6、接觸紙面，以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。（3 3）剪角：邊緣擴(kuò)散快，剪角可使邊加長，保證色素水平擴(kuò)散。（4 4 ）濾紙條的高度要盡量高出燒杯，高出部分直角彎折，最好將其固定在培養(yǎng)皿蓋上。4 4、畫濾液細(xì)線（細(xì)、直、齊；干燥后再重復(fù)畫線，否則細(xì)線過粗，色素不易分開；重復(fù)： 增加色素量，使實(shí)驗(yàn)效果明顯）5 5、分離色素（1 1）層析液不能沒及濾液細(xì)線，否則色素將溶解在層析液中。（2 2 ）濾紙條尖端向下，斜靠壁。（貼壁會影響層析）（3 3）加蓋。（層析液易揮發(fā)，且有毒）6 6、色素的位置和功能葉綠體中的色素存在于葉綠體類囊體薄膜上。葉綠素 a a 和葉綠素 b b 主要吸收紅光和藍(lán)紫光；胡蘿卜素和葉黃素主要吸收藍(lán)紫光及保護(hù)葉綠素免受強(qiáng)光傷害的作用。MgMg 是構(gòu)成葉綠素分子必需的元素。葉綠素 a a （藍(lán)綠色） 葉綠素葉綠素 b b （黃綠色）嚴(yán)胡蘿卜素（橙黃色） 類胡蘿卜素Y 葉黃素（黃色）八、思考討論 1 1 為什么要選取新