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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)2-2填充色譜柱的柱效測(cè)定實(shí)驗(yàn)者學(xué)號(hào)合作者一、目的要求(1) 了解氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理與操作技術(shù);(2) 學(xué)習(xí)色譜柱的柱效測(cè)定方法;(3) 掌握有效塔板數(shù)及有效塔板高度的計(jì)算方法。二、基本原理色譜柱的柱效能是評(píng)價(jià)色譜性能的一項(xiàng)重要指標(biāo),混合物能否在色譜柱中得到分 離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因 素有關(guān)。在一定的色譜操作條件下,色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高 度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多,或塔板高度愈小,色譜柱的分離效能愈好。是 實(shí)際工作中,使用有效塔板數(shù)n有效及有效塔板高度H有效來表示柱效更為準(zhǔn) 確,更能真實(shí)反應(yīng)色譜柱分離的好壞,它
2、們的計(jì)算公式為:n 有效 ”tRtR2=5.54()=16()2 YYH 有效=L/n 有效 tR = tRtM式中tR為組分的調(diào)整保留時(shí)間,tR為組分的保留時(shí)間,tM為空氣的保留時(shí)間, 丫為色譜峰的峰底寬度,L為色譜柱的長度。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)不同,因而同一色譜柱對(duì)各組分的柱效也不相同,所以在報(bào)告n有效時(shí),應(yīng)注明對(duì)何種組分而言。三、實(shí)驗(yàn)儀器和試樣氣相色譜儀、色譜柱、氮?dú)怃撈?、皂膜流量?jì)、微量進(jìn)樣器、甲苯和鄰二甲苯的 混合試劑(1:1)。四、實(shí)驗(yàn)條件(實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)根據(jù)使用的儀器種類及色譜柱條件做相應(yīng)調(diào)整)1、色譜柱2、流動(dòng)相氫氣3、柱溫110C4、氣化溫度150 C5、檢測(cè)溫
3、度110C6、量程:檢測(cè)器電流110mA7、進(jìn)樣量:4mL五、實(shí)驗(yàn)步驟1根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件,將色譜儀按儀器操作步驟調(diào)節(jié)至可進(jìn)樣狀態(tài),將儀器上的電 路和氣路系統(tǒng)達(dá)到平衡,色譜工作站或記錄儀上基線平直時(shí),即可進(jìn)樣。2、為測(cè)定死時(shí)間,吸取10U1空氣進(jìn)樣,用色譜工作站或記錄儀記錄空氣的色譜 數(shù)據(jù)。3、吸取4UI混合試樣進(jìn)樣,用色譜工作站或記錄儀記錄色譜數(shù)據(jù),并重復(fù)兩 次。4、實(shí)驗(yàn)完成后,以乙醚抽洗微量進(jìn)樣器數(shù)次,按儀器操作步驟中的 有關(guān)細(xì)節(jié)關(guān)閉儀器。六、數(shù)據(jù)記錄及處理柱長L=0.6m,空氣保留時(shí)間及死時(shí)間tM=0.093min1、鄰二甲苯tR 所以 n 有效 1=16( tR /Y)2=21.786H 有
4、效 1=0.6/21.786=0.028同理計(jì)算得到n有效2=27.002 H有效2=0.022n 有效 3 =32.555 H 有效 3=0.018有效所以鄰二甲苯的有效塔板數(shù) n=27.114 =1/3 (21.786+27.002+32.555平均有效塔板高度 H有效=1/3( 0.028+0.022+0.018)=0.0232、甲苯tR 起點(diǎn)時(shí)間落點(diǎn)時(shí)間193123123甲苯0, 2820. 2220. 2380. 215G. 1530. 1900, 6360. 5140. 612鄰:屮苯0, 7030. 5230. 56B0, 1700. 3620. 3900.91B0. 6930. 723tR 有效仁 16( tR Y 2=3.225H 有效 1=L/ n 有效 1=0.6/3.225=0.186同理計(jì)算n 有效 2=2.043 H 有效 2=0.294n 有效 3 =1.889 H 有效 3=0.318所以甲苯的平均有效塔板數(shù)n 有效=1/3 (3.225+2.043+1.889)=2.386平均有效塔板高度 H有效=1/3(0.186+0.294+0.318)=0.2
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