糖尿病腎病患者血清CC趨化因子升高并與AGE.肽相關(guān)

1、糖尿病腎病患者血清CC趨化因子升高并與AGE.肽相關(guān)                                        作者：孫子林，金暉，李世云，弓玉祥，李麗，張林，劉必成，劉乃豐，戴德哉【關(guān)鍵詞

2、】  糖尿病腎病     Abstract:Objective To investigate the expression of angiotensin（Ang）type1（AT1）receptors in the kidney of diabetic rats and its effects of blocking renin-angiotensin system（RAS）.Methods Diabetic rats were given angiotensinreceptor blocker，irbesartan（40mgkg-1 ），an

3、giotensin-converting enzyme inhibitor，fosinopril（40mgkg-1 ），and irbesartan plus fosinopril（20mg1 對(duì)象和方法     1.1 研究對(duì)象     正常健康對(duì)照（NC）組46例，來自東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院健康查體中心。DM病人176例，為2000年6月至2004年12月在東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的病人，排除伴有急慢性感染性疾病、嚴(yán)重心腦血管病變、腎功能不全、其他系統(tǒng)性疾病以及有嚴(yán)重DM急性代謝并發(fā)癥者，根據(jù)尿白蛋白水平

4、分為3組:正常蛋白尿（DM N）組，尿微量白蛋白（UMA）<30mg（24h）-1 ;微白蛋白尿（DM Mi）組，UMA30300mg（24h）-1 ;顯性蛋白尿（DMMa）組，UMA>300mg（在預(yù)先用抗人MCP.1抗體包被的酶標(biāo)孔里加入50l孔-1 的生物素標(biāo)記二抗。然后50l孔-1 加入稀釋的MCP.1標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品，室溫下孵育2h。洗板后加入100l孔-1 鏈白親和素標(biāo)記的髓過氧化物酶，孵育30min。洗板后100l孔-1 加入預(yù)混好的TMB顯色液，孵育30min后加入反應(yīng)終止液，酶標(biāo)儀測(cè)450nm吸光度并作標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出所測(cè)樣品的MCP.1濃度（pg按試劑盒說明書操作

5、。用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑B將標(biāo)準(zhǔn)品和血清樣本稀釋后加入酶標(biāo)孔（100l），繼之加入稀釋劑A100l和辣根過氧化物標(biāo)記的RANTES共軛劑50l，室溫孵育2h。洗板后加入顯色反應(yīng)底物液200l，避光孵育30min。終止反應(yīng)后酶標(biāo)儀測(cè)450nm吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)求出樣品RANTES濃度（ngml-1 ）。      1.4 數(shù)據(jù)分析和處理     所有樣品均重復(fù)3次檢測(cè)，數(shù)據(jù)以x±s表示，用統(tǒng)計(jì)軟件Prism3.0分別行方差分析和Newman-Keuls檢驗(yàn)分析。   &#

6、160;                         2 結(jié)  果     與NC組比較，DM患者血清MCP.1（634.15±248.24）pgml-1 vs（359.36±134.30）pgml-1 ，P<0.01（圖1）、RANTES（56.91±15.78）ng

7、ml-1 vs（12.34±2.28）ngml-1 ，P<0.001（圖2）和AGE.P水平（2.86±0.71）Uml-1 vs（1.38±0.31）Uml-1 ，P<0.001（圖3）均明顯增高。 3 討  論     越來越多的研究證實(shí)趨化因子特別是CC趨化因子（包括MCP.1和RANTES）通過募集單核巨噬細(xì)胞在腎小球或間質(zhì)浸潤(rùn)參與DN發(fā)生的早期事件。國內(nèi)外文獻(xiàn)710 一致報(bào)道DN患者尿MCP.1和RANTES增高，但關(guān)于DM和DN患者血清MCP.1和RANTES水平的意義尚存在爭(zhēng)議。Banba

8、等7 和Wada等8 幾乎同時(shí)報(bào)道各自的小樣本觀察結(jié)果，顯示DM不同水平蛋白尿各組之間以及和正常對(duì)照之間血清MCP.1無差異。新近Petrkova等11 觀察到DM合并周圍血管病變者血清MCP.1增加。而Nomura的多次結(jié)果顯示DM12 以及合并高血壓13 者血清MCP.1和RANTES水平顯著高于無DM者。國內(nèi)黃文輝等10 比較每組15例不同蛋白尿水平的DM患者與正常人血清MCP.1、RANTES水平，結(jié)果顯示各組均值基本一樣。而包艷等9 檢測(cè)總共31例DM患者和10例健康人血清MCP.1，從無白蛋白尿到顯性蛋白尿各組有逐步增加趨勢(shì)，正常對(duì)照最低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。  &

9、#160; 作者先前的初步觀察14 發(fā)現(xiàn)32例糖尿病患者血清MCP.1水平明顯高于23例正常對(duì)照組。本研究擴(kuò)大樣本后觀察結(jié)果與以前一致，而且觀察到血清MCP.1水平隨DN加重逐步增高（盡管DM Ma組與DM Mi組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異），提示血清MCP.1有助于判斷DN的程度，尤其是預(yù)測(cè)早期DN的發(fā)生。由于高糖、糖基化蛋白7 等許多因子可刺激細(xì)胞合成MCP.1，DM N組MCP.1增高可能與高血糖及其相關(guān)的代謝產(chǎn)物作用有關(guān)。此外，DM患者血清RANTES水平高于正常對(duì)照，與Nomura等的結(jié)果12，13 一致。但DM各亞組間RAN-TES水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示血清RANTES水平對(duì)判斷DN病變程度幫助

10、不大。參考文獻(xiàn)          1WOLF G.New insights into the pathophysiology of diabetic ne-phropathy:from haemodynamics to molecular pathologyJ.Eur J Clin Invest，2004，34（12）:785.796.    2YAMAGISHI S，INAGAKI Y，OKAMOTOT，et al.Advanced gly-cosylation end produc

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