新藥開(kāi)發(fā)中藥物分析流程

1、新藥開(kāi)發(fā)中藥物分析一般程序1.原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的確定    原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確定一般程序，這里將它分為三大階段:合成工藝待確定期，合成工藝確定期，穩(wěn)定性試驗(yàn)考察期。  1.1 合成工藝待確定期     一個(gè)原料藥首先由藥物合成部進(jìn)行合成工藝的確定，在其進(jìn)行工藝確定期間，就已經(jīng)與藥分部門有了密切的聯(lián)系。     協(xié)助合成部門的工作：幫助確定反應(yīng)步驟的終點(diǎn)控制、反應(yīng)產(chǎn)物的純度監(jiān)控，所能提供的分析方法可能有薄層色譜、液相色譜或熔點(diǎn)等。    做好自己的準(zhǔn)備工作：通過(guò)各種途徑搜集查閱有關(guān)該藥品的各方面信息

2、，比如該藥的理化性質(zhì)（性狀、溶解度、熔點(diǎn)、旋光性質(zhì)、紫外光譜、鑒別方法等）、檢查項(xiàng)（一般雜質(zhì)檢查、有關(guān)物質(zhì)檢查）、含量測(cè)定方法和該藥物的穩(wěn)定性等等。  1.2 合成工藝確定期    合成工藝路線打通后，合成部門將會(huì)提供試制的三批樣品（已確定該藥物結(jié)構(gòu)）供分析部門質(zhì)量研究及穩(wěn)定性試驗(yàn)用，一般來(lái)說(shuō)，所提供三批樣品應(yīng)該是成熟的工藝條件，以一定規(guī)模制備得到樣品，此時(shí)我們的質(zhì)量研究工作正式開(kāi)始。     1.2.1 質(zhì)量研究工作    理化常數(shù)：性狀（外觀、臭、味）、溶解度、熔點(diǎn)、比旋度、紫外吸收系數(shù)   

3、0; 鑒別：化學(xué)法、色譜法、光譜法     檢查：酸堿度、溶液澄清度與顏色、干燥失重或水分、熾灼殘?jiān)?、重金屬、無(wú)機(jī)鹽、無(wú)菌、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素、有機(jī)溶劑殘留 、有關(guān)物質(zhì)     含量測(cè)定：容量法、光譜法、色譜法     1.2.2 質(zhì)量研究試驗(yàn)順序安排  1.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察期     按照中國(guó)藥典穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則規(guī)定，我們的穩(wěn)定性研究包括三大部分影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)。    考察項(xiàng)目：樣品性狀、有關(guān)物質(zhì)和含量這三項(xiàng)必須考察（對(duì)于某些特殊藥物可能無(wú)法考察有關(guān)

4、物質(zhì)），另外諸如：熔點(diǎn)（若質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了熔點(diǎn)檢查，或能測(cè)出準(zhǔn)確熔點(diǎn)且熔點(diǎn)低于250的樣品，穩(wěn)定性研究中必須對(duì)其檢查）、溶液顏色與澄清度（若為供注射用原料，穩(wěn)定性研究中必須對(duì)其檢查）、pH值（若為供注射用原料，穩(wěn)定性研究中必須對(duì)其檢查）等項(xiàng)目則根據(jù)各藥物的性質(zhì)而具體制定。    上面將原料藥分析工作分三大塊做了簡(jiǎn)單討論，文中所講的多是實(shí)際試驗(yàn)的簡(jiǎn)單思路和一些注意事項(xiàng)，但對(duì)于新藥研究這樣一個(gè)很嚴(yán)肅的工作有很多法定性的規(guī)定內(nèi)容在文中并未詳細(xì)說(shuō)明，在中國(guó)藥典2000年版二部和新藥質(zhì)量研究與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)原則中有詳細(xì)的說(shuō)明。 2.藥物溶解度試驗(yàn)    1.試驗(yàn)溶劑

5、的選擇可參考有關(guān)文獻(xiàn)制定，若無(wú)文獻(xiàn)一般選擇常用的水相溶劑（水、酸、堿溶液）和有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、乙腈、乙醚、丙酮、氯仿、冰醋酸、DMF、DMSO）。    2.若按照中國(guó)藥典要求的做法將用去大量的原料和溶劑一般我們都按倍數(shù)減量試驗(yàn)，但在做極易溶解或易溶時(shí)因溶劑量較小可適當(dāng)放大原料量試驗(yàn)。 3.藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)    藥物的有關(guān)物質(zhì)檢查:它是藥物質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，包括未反應(yīng)完全的化學(xué)原料、合成副產(chǎn)物和藥品貯存過(guò)程中產(chǎn)生的降解物兩部分，檢查方法首選HPLC檢查，該方法亦是現(xiàn)在最常用的的有關(guān)物質(zhì)檢查方法，若該藥物無(wú)紫外吸收則考慮用TLC檢查。 4.藥物的含量

6、測(cè)定    對(duì)于含量測(cè)定方法有容量法（非水滴定、酸堿滴定、絡(luò)合滴定、典量滴定等）、光譜法（UV）、色譜法（HPLC、GC）等。容量法為原料含測(cè)的首選，我們一般使用非水滴定法，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需對(duì)照品即可測(cè)得樣品含量；原料藥中使用光譜法的較少（但也有用紫外吸收系數(shù)法或外標(biāo)法測(cè)定原料含量）；色譜法中主要使用的是HPLC法，一般含量測(cè)定的色譜條件與有關(guān)物質(zhì)檢查的色譜條件是相同的，所以樣品的有關(guān)物質(zhì)檢查使用HPLC時(shí)，只需在該色譜條件下進(jìn)行含量方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)（專屬性、精密度、重現(xiàn)性、線性、回收率等），若符合規(guī)定則可以用于樣品的含量測(cè)定。     何為完善的HPLC有關(guān)

7、物質(zhì)檢查方法？分離好（與合成中間體分離、與降解雜質(zhì)分離）、峰型好（無(wú)拖尾或前沿）、柱效好（理論板數(shù)能達(dá)到2000以上）、時(shí)間好（主峰保留時(shí)間在5-10分鐘為宜）、線性好，有了以上“五好”的基礎(chǔ)就可以對(duì)所選的方法進(jìn)行詳細(xì)的方法學(xué)研究（專屬性、檢測(cè)限、定量限等）。條件確定后進(jìn)行方法學(xué)論證試驗(yàn)。    有關(guān)物質(zhì)檢查方法論證:包括：線性、加速破壞試驗(yàn)、最小檢測(cè)限、最小定量限    含量測(cè)定要點(diǎn):    成鹽（如鹽酸左氧氟沙星）、帶結(jié)晶水（如阿魏酸鈉）的原料，在對(duì)此類樣品測(cè)定含量時(shí)首先要搞清楚它的含量是以誰(shuí)來(lái)計(jì)算的，若需要用到對(duì)照品的，應(yīng)該清楚

8、對(duì)照品是否與待測(cè)物結(jié)構(gòu)一致，因?yàn)橛行┰鲜浅甥}后的，但所用的對(duì)照品是未成鹽的。    關(guān)于對(duì)照品：對(duì)照品非常重要，可分兩類，中國(guó)藥品生物制品檢定所標(biāo)定的對(duì)照品和自己精制的對(duì)照品。若該藥品已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)以其為基準(zhǔn)測(cè)定含量。對(duì)于自制的對(duì)照品，對(duì)其純度的要求比樣品較高，如樣品規(guī)定含量限度為99.0%，有關(guān)物質(zhì)限度為1%，則對(duì)照品含量一般規(guī)定為99.5%，有關(guān)物質(zhì)限度為0.5%。若以外標(biāo)法（或內(nèi)標(biāo)法）計(jì)算時(shí)不要忘記折算對(duì)照品的含量，有的要求扣除水分后計(jì)算的也不要忘記。             

9、;    5.理化常數(shù)    外觀（注意晶型）、熔點(diǎn)（不能簡(jiǎn)單記錄樣品的熔程，應(yīng)詳細(xì)記錄熔融時(shí)的現(xiàn)象，尤其是熔融同時(shí)分解的樣品，對(duì)于有文獻(xiàn)報(bào)道的熔點(diǎn)值，切勿因心理作用在測(cè)定時(shí)將數(shù)據(jù)往文獻(xiàn)值中靠）、比旋度、紫外吸收系數(shù)（用對(duì)照品或精制品配制高低兩個(gè)濃度的樣品溶液各兩份，分別在五臺(tái)校準(zhǔn)過(guò)的儀器上測(cè)定）。     一般檢查    酸堿度、溶液的澄清度與顏色（供注射用原料及抗生素類藥需考察此項(xiàng)目，一般無(wú)特殊顏色的樣品可不考察），干燥失重或水分、熾灼殘?jiān)⒅亟饘?、無(wú)機(jī)鹽（如砷鹽、氯化物檢查、硫酸鹽檢查、銨鹽檢查，該類檢查是合成工藝而定，如合成中使用了大量硫酸，則樣品應(yīng)該對(duì)硫酸鹽進(jìn)行檢查），無(wú)菌、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素（一般只針對(duì)于供注射用的原料），有機(jī)殘留溶劑（合成部門提供在藥物合成工藝中所用的溶劑種類，該實(shí)驗(yàn)由外單位協(xié)助完成。ICH將有機(jī)溶劑按照毒性的大小分為一、二、三類，指導(dǎo)原則中規(guī)定合成工藝中用到的一、二類溶劑及后三步反應(yīng)用到的三類溶劑均要考察）。 6.穩(wěn)定性試驗(yàn)考察期注意事項(xiàng)    對(duì)于那些穩(wěn)定性差的藥物在做影響因素試驗(yàn)和加速試驗(yàn)時(shí)可按規(guī)定降低試驗(yàn)強(qiáng)度進(jìn)行考察，此時(shí)我們一般的做法是在放樣影響因素高溫條件時(shí)同時(shí)對(duì)60和40進(jìn)行考察