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文檔簡介

1、核酸的化學(xué)一、是非題1嘌呤堿分子中含有嘧啶堿結(jié)構(gòu)。2.核昔由堿基和核糖以(3型的CN糖昔鍵相連。3核苷酸是由核苷與磷酸脫水縮合而成,所以說核苷酸是核苷的磷酸酯。4核苷酸的堿基和糖相連的糖苷鍵是CO型。5核糖與脫氧核糖的差別是糖環(huán)的2位有無羥基。6核苷酸的等電點(diǎn)的大小取決于核糖上的羥基與磷酸基的解離。7在DNA雙鏈之間,堿基配對(duì)A-T形成兩對(duì)氫鍵,C-G形成三對(duì)氫鍵,若胸腺嘧啶C2位的羰基上的氧原于質(zhì)子化形成OH,AT之間也可形成三對(duì)氫鍵。8任何一條DNA片段中,堿基的含量都是A=T,C=G。9 DNA堿基摩爾比規(guī)律僅適令于雙鏈而不適合于單鏈。10 用二苯胺法測定DNA含量必須用同源的DNA作標(biāo)

2、準(zhǔn)樣品。11 DNA變性后就由雙螺旋結(jié)構(gòu)變成線團(tuán)結(jié)構(gòu)。12 .Tm值低的DNA分子中(AT)%高。13 .Tin值高的DNA分子中(C-G)%高。14 由于RNA不是雙鏈,因此所有的RNA分子中都沒有雙螺旋結(jié)構(gòu)。15 起始濃度高、含重復(fù)序列多的DNA片段復(fù)性速度快。16 DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄部必須根據(jù)堿基配對(duì)的原則。17 某氨基酸t(yī)RNA反密碼子為GUC,在mRNA上相對(duì)應(yīng)的密碼子應(yīng)該是CAG。18 細(xì)胞內(nèi)DNA的核苷酸順序都不是隨機(jī)的而是由遺傳性決定的。19 .RNA鏈的5'核甘酸的3'羥基與相鄰核昔酸的5'羥基以磷酸二酯鍵相連。20 .假如某DNA樣品當(dāng)溫度升高到一定

3、程度時(shí),OD260提高30%,說明它是一條雙鏈DNA。21 核酸外切酶能夠降解所有的病毒DNA。二、填空題1. 核甘酸是由、和磷酸基連接而成。2. 在各種RNA中含稀有堿基最多。3. Tm值高的DNA分子中核核核的含量高。Tm值低的DNA分子中核核核含量高。1 真核生物的DNA存在于核核核核,其生物學(xué)作用是核核核5 細(xì)胞內(nèi)所有的RNA的核苷酸順序都是由它們的核核核核核核決定的。6 .將雙鏈DNA放置在pH2以下或pH12以上,其OD260在同樣條件下單鏈DNA的OD260°7 .B型結(jié)構(gòu)的DNA雙螺旋,兩條鏈?zhǔn)瞧叫?,其螺距為每個(gè)螺旋的堿基數(shù)為。8 DNA抗堿的原因是兩兩兩兩兩兩兩兩兩

4、兩兩。9 .將A、U、C和G四種核甘酸溶解在pH3.5的緩沖液中,從負(fù)極向正極進(jìn)行電泳,兩兩跑得最快,兩兩跑得最慢。10 從Ecoli中分離的DNA樣品內(nèi)含有20的腺嘌呤(A),那么T=%,G+C=%。11 某DNA片段的堿基順序?yàn)镚CTACTAAGC,它的互補(bǔ)鏈順序應(yīng)為兩兩兩兩兩兩兩。12 具有高度重復(fù)序列的DNA片段,如兩兩兩兩兩,具有中度重復(fù)序列的DNA片段,如兩兩兩兩兩和兩兩兩兩的基因,真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基因是序列兩兩兩兩兩兩兩兩。13 當(dāng)溫度逐漸升到一定高度時(shí),DNA雙鏈兩兩兩兩兩兩兩稱為變性。當(dāng)溫度逐漸降低時(shí),DNA的兩條鏈兩兩兩兩兩兩兩兩,稱為兩兩兩兩兩兩。11 DNA的復(fù)性速度與兩

5、兩兩兩兩兩兩、兩兩兩兩兩兩以及DNA片段的大小有關(guān)。15 天然DNA的負(fù)超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈兩兩兩兩引起的,為兩兩手超螺旋。正超螺旋是由于DNA雙螺旋中兩條鏈兩兩兩兩引起的,為兩兩兩手超螺旋。16 tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)呈兩兩兩兩形,三級(jí)結(jié)構(gòu)的形狀像兩兩兩三、選擇題1.DNA的Tm與介質(zhì)的離子強(qiáng)度有關(guān),所以DNA制品應(yīng)保存在:A、高濃度的緩沖液中B、低濃度的緩沖液中C、純水中D、有機(jī)試劑中2在以下的修飾堿基中哪種在氫鍵的形成方面不同于和它相關(guān)的堿基:A、2-甲基腺嘌呤B、5-甲基胞嘧啶C、5-羥甲基胞噙陵D、1-甲基鳥瞟吟3 熱變性后的DNA:A、紫外吸收增加B、磷酸二酯鍵斷裂C、形成

6、三股螺旋D、(G-C)%含量增加4 DNA分子中的共價(jià)鍵有:A、堿基與脫氧核糖1位碳(C-1')之間的糖昔鍵。B、磷酸與脫氧核糖2位碳上的羥基(2'-OH)之間的酯鍵。C、堿基與脫氧核糖2位碳(C-2')之間的糖音鍵。D、磷酸與脫氧核糖1位碳上的羥基(2'-OH)之間的酯鍵。5 發(fā)生熱變性后的DNA復(fù)性速度與:A、DNA的原始濃度有關(guān)。B、催化復(fù)性的酶活性有關(guān)。C、與DNA的長短無關(guān)。D、與DNA分子中的重復(fù)序列無關(guān)。6下面關(guān)于核酸的敘述除哪個(gè)外都是正確的:A、在喋吟和喀咤堿之間存在著堿基配對(duì)。B、當(dāng)胸腺喀咤與腺喋吟配對(duì)時(shí),甲基不影響氫鍵形成。C、堿溶液只能水解

7、RNA,不能水解DNA。D、在DNA分子中由氫鍵連接的堿基平面與螺旋軸平行。7下列過程與DNA的人工克隆無關(guān)的是:A、用專一性的限制性內(nèi)切酶在特定的互補(bǔ)位點(diǎn)切割質(zhì)粒DNA和供體B、通過連接酶催化質(zhì)粒DNA與供體DNA接合。C、將重組后的DNA通過結(jié)合反應(yīng)引入寄主細(xì)胞。D、常常根據(jù)載體所具有的抗藥性來篩選含有重組DNA的細(xì)菌。8核酸分子中的共價(jià)鍵包括:A、喋吟堿基第9位N與核糖第1位C之間連接的(3-糖昔鍵B、磷酸與磷酸之間的磷酸酯鍵C、磷酸與核糖第1位C之間連接的磷酸酯鍵D、核糖與核糖之間連接的糖昔鍵9下列哪種物質(zhì)不是由核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合而成的復(fù)合物:A、病毒B、核糖體C、E.coli的蛋白質(zhì)生

8、物合成70S起始物D、線粒體內(nèi)膜10下列關(guān)于核糖體的敘述正確的是:A、大小亞基緊密結(jié)合任何時(shí)候都不分開。B、細(xì)胞內(nèi)有游離的也有與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體。C、核糖體是一個(gè)完整的轉(zhuǎn)錄單位。D、核糖體由兩個(gè)相同的亞基組成。11 .Crick的擺動(dòng)假說較好的描述了:A、密碼子的第二位變動(dòng)不影響與反密碼子的正確配對(duì)。B、新生肽鏈在核糖體上的延長機(jī)理:C由鏈霉素引起的翻譯錯(cuò)誤uB、溶原性噬菌體經(jīng)過誘導(dǎo)可變成烈性噬菌體。12 .分離出某種病毒核酸的堿基組成為:A=27%,G=30%,C=22%,T=21%,該病毒應(yīng)該為:A、單鏈DNAB、雙鏈DNAC、單鏈RNAD、雙鏈RNA四、問答與計(jì)算:1 .用RNaseF

9、限制降解tRNA得到一個(gè)長度為13個(gè)核甘酸的片段,再用RNaseE完仝降解得到下列產(chǎn)物:(a)ApCpApGp;(b)pGp;(c)ApCpU;(d)ApApUpApGpU用RNasecI完仝降解得至U下歹U產(chǎn)物:(a)ApGpApApUp;(b)pGpApCp;(c)Ur(dApGpApCp,請(qǐng)寫出該片段的順序。2 .某一寡聚十六核甘酸,用RNaseT1降解得到:(a)ApUpUpCpCpGp;(b)ApCpUpCpGp;(c)pUpCpCpA;(d)Gp名分了。用RNaseA降解得到:(a)1ApUp;(b)IGpGpApCp;(c)GpUp;(d)5Cp;(e)2Up;(f)1A請(qǐng)寫出該

10、片段的順序。3=根據(jù)下列性質(zhì)判斷某一均勺的DNA樣品應(yīng)可與甲酹進(jìn)行反應(yīng),并且能作為DNA聚合酶的模板.熱變性0260.增加;(b)可與硝化纖維膜結(jié)合;(c)在高離子強(qiáng)度介質(zhì)中的沉降系數(shù)比在低離于強(qiáng)度介質(zhì)中稍高;(d)變性時(shí)在CsCI中的浮力密度增加約0.011g/cm3;(e)變性后經(jīng)區(qū)帶離心得到A=B=兩個(gè)片段。A被切開一個(gè)缺口產(chǎn)生C,在高離子強(qiáng)度介質(zhì)中,C8A的沉降系數(shù)相等,在低離子強(qiáng)度的介質(zhì)中比A低,無論在哪種情況下,C均比B高。4 .DNA樣品在水浴中加熱到一定溫度,然后冷至室溫測其OD260,請(qǐng)問在下列情況下加熱與退火前后OD260的變化如何?(a)加熱的溫度接近該DNA的Tm值;(

11、b)加熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過該DNA的Tm值。5 .有一核酸溶液通過實(shí)驗(yàn)得到下列結(jié)果:(a)加熱使溫度升高.該溶液的紫外吸收增加。迅速冷卻紫外吸收沒有明顯的下降;(b)經(jīng)CsCI梯度離心后,核酸位于1.77g/ml溶液層。核酸經(jīng)熱變性后迅速冷卻再離心,原來的浮力密度=1.77g/ml的區(qū)帶消失,新帶在p=1.72g/ml出現(xiàn)。此帶的紫外吸收只有原來的一半。將離心管里的組分重新混合,通過適當(dāng)溫度處理進(jìn)行退火,再離心后新帶消失,p=1.77g/ml的原帶又重新出現(xiàn)了。具紫外吸收與變性前相同。(d)用提高pH12然后中和到7的方法代替熱變性重復(fù)(c)步驟,得到與(c)步驟的第一次離心后相同的結(jié)果,但經(jīng)退火

12、處理后p=1.72g/ml的區(qū)帶不消失。根據(jù)以上現(xiàn)象推斷該核酸樣品的結(jié)構(gòu)。6 .如果E.coli染色體DNA的75%用來編碼蛋白質(zhì).假定蛋白質(zhì)的平均分子量為60X1030請(qǐng)問:若E.coli染色體大約能編碼2000種蛋白質(zhì)。求該染色體DNA的長度是多???該染色體DNA的分子量大約是多少?(以三個(gè)堿基編碼一個(gè)氨基酸,氨基酸平均分子量為120u,核甘酸平均均分子量為640計(jì)算。)7 .假定每個(gè)基因有900對(duì)核甘酸,并且有三分之一的DNA不編碼蛋白質(zhì),人的一個(gè)體細(xì)胞(DNA量為6.4X109對(duì)核昔酸),有多少個(gè)基因?如果人體有1013個(gè)細(xì)胞.那么人體DNA的總長度是多少千米?等于地球與太陽之間距離(

13、2.2X109千米)的多少倍?8 .根據(jù)同源蛋白質(zhì)的知識(shí),說明為什么編碼同源蛋白質(zhì)的基因(DNA片段)可以雜交?9 .有一噬菌體的突變株其DNA長度為15pm,而野生型的DNA長度為17pm,問該突變株的DNA中有多少個(gè)堿基缺失?10 .用RNaseTI降解純tRNA樣品獲得一條其核甘酸片段,用蛇毒磷酸二酯酶完仝水解??僧a(chǎn)生pA,pC,pU和U,其比例是1:2:1:1,根據(jù)這一信息和tRNA3'端的恃點(diǎn)能否推斷tRNA3'端的核百酸順序。11 解釋下列名詞:(1)稀有堿基;(2)DNA超螺旋;u)DNA的增色和減色效應(yīng);(4)mRNA的帽子結(jié)構(gòu);(5)反密碼子。答案一、是非題1

14、對(duì)。2對(duì)。3對(duì)。4錯(cuò)。S對(duì)。6錯(cuò)。7錯(cuò).8錯(cuò)。9對(duì)。10錯(cuò)。11對(duì)。12對(duì)。13對(duì)。14錯(cuò)。15對(duì)。16對(duì)。17錯(cuò)。18對(duì)。19對(duì)。20對(duì)。21錯(cuò)。二、填空題1 堿基核糖2 tRNA3 (GC)(AT)4核內(nèi)攜帶遺傳信息5基因6高不變7反向平行54urn108脫氧核糖的第2位碳原子上沒有羥基,不利于堿(-OH)作用使磷酸二酯鍵斷裂。9 UA10 206011 GCTTAGTAGC12 衛(wèi)星DNAtRNArRNA單拷貝(不重復(fù))13 解開重新結(jié)合復(fù)性14 起始濃度重復(fù)序列多少15 松弛(少繞)右扭緊(多繞)左16 三葉草倒L形三、選擇題1 A2D3A4A5A6D7B8A9D10D11A12 A四

15、、問答與計(jì)算1 .根據(jù)RNaseTi降解RNA生成Gp或以Gp為3'-末端寡核甘酸片段的特性,pGp為該片段的5'-末端,ApCpU為3'-末端。根據(jù)RNaseI降解RNA生成Cp,Up或以Cp,Up為3'-末端寡核甘酸片段的特性,GpApCp為5'-末端,U為3'-末端。將兩種酶降解的片段疊加,可得該片段的全部順序?yàn)椋簆GpApCpApGpApApUpApGpApCpU2 根據(jù)RNaseT1特異性地降解G與相鄰核苷酸之間的磷酸二酯鍵生成Gp或以Gp為3'-末端寡核甘酸片段的特性,以及根據(jù)RNaseA特異性地降解C和U與相鄰核甘酸之間的磷

16、酸二酯鍵生成Cp、Up,或以Cp、Up為3'-末端寡核苷酸片段的特性,將兩種酶降解的片段疊加,可得該片段的全部順序?yàn)椋篈pUpUpCpCpGpGpApCpUpCpGpUpCpCpA3根據(jù)DNA結(jié)構(gòu)鑒定的一般標(biāo)準(zhǔn),可判斷DNA樣品是一個(gè)由一條環(huán)狀單鏈A和一條線狀單鏈B組成的環(huán)狀DNA分子,B鏈的長度短于A,所以該環(huán)狀DNA分子具有部分單鏈。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也表明該DNA分子具有單鏈性質(zhì)(a,b,d,e,f)。由e可知A為環(huán)狀單鏈,只有這樣,在被切開一個(gè)切口時(shí),才能產(chǎn)生與其沉降系數(shù)接近的線狀單鏈Co由于C的沉降系數(shù)B,A的長度B,所以A與B形成環(huán)狀分子,除A與B互補(bǔ)雙鏈外,還有A剩余部分的單鏈。4

17、 .(a)加熱的溫度接近該DNA的Tm值,開始退火復(fù)性后的A260與變性前應(yīng)完全相同,因?yàn)樵诮咏黅m值的溫度時(shí),DNA的兩條鏈并未完全分開,所以復(fù)性可以達(dá)到與變性前相同的程度。(b)加熱的溫度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過該DNA的Tm值,退火復(fù)性后的A260比變性前高,因?yàn)樵谶h(yuǎn)遠(yuǎn)超過Tm值的溫度時(shí),DNA的兩條鏈完全分開復(fù)性不容易達(dá)到與變性前相同的程度。5 .(a)紫外吸收隨溫度升高而增大,迅速冷卻后,紫外吸收并不降低說明此樣品分子為含氫鍵豐富的雙鍵結(jié)構(gòu)。(b)經(jīng)CsCL密度梯度離心后,p值較高,表明此樣品中除DNA片段外,還有RNA片段。(c)熱變性后迅速離心,重新離心出現(xiàn)新帶,這說明兩條鏈-1.720是DNA

18、的特征帶,另一條值1.80,由于密度太大,離心時(shí)不能形成區(qū)帶,但此鏈仍然完整存在,退火后重新出現(xiàn)就是證據(jù)。(d)雙鏈中p值大的一條鏈被堿降解說明此鏈?zhǔn)荝NA。綜上所述,此核酸樣品是由一條DNA片段和一條RNA片段形成的雜交分子。6設(shè)Ecoli染色體應(yīng)有的堿基為x,編碼蛋白質(zhì)的基因片段中應(yīng)有的堿基對(duì)數(shù)為:3X2000X60000/120=3x106=0.75xx=3X106/0.75=4X106(堿基對(duì))染色體的長度=0.34nmx4X106=1.36xi06nm。染色體DNA的分子量=640X4X106=2.56X109u7每個(gè)體細(xì)胞中有:(6.4X109-6.4X109X1/3)/900=4

19、.72X106(個(gè)基因)每個(gè)體細(xì)胞中DNA的長度:6.4X109X0.34nm=2.2X109nm=2.2km人體內(nèi)DNA的總長度:2.2X1013千米等于地球與太陽之間距離的:(2.2X1013)/(2.2X109)=104倍8同源蛋白質(zhì)是指來源不同的同一種蛋白質(zhì),它們具有基本相同的氨基酸序列,所以它們的基因具有相同的核著酸序列。當(dāng)將帶有同源蛋白質(zhì)基因的N八片段,進(jìn)行雜交時(shí)形成雜交分子的機(jī)會(huì)就比較多。9 .顯然,突變株的DNA比正常株的DNA短2m2wm=2Xl04?,2X104/3.4=5.88X103所以大約有5.88X103個(gè)堿基對(duì)缺失。10 tRNA的功能是在蛋白質(zhì)生物合成的過程中,轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸到核糖體參與肽鏈的形成。其3'-端有一共同的序列是CCA,根據(jù)蛇毒磷酸二酯酶的水解產(chǎn)物可以推斷該tRNA經(jīng)RNaseT1降解的寡核苷酸片段順序?yàn)閁pUpCpCpA16解釋名詞:(l)稀有堿基又稱修飾堿基,這些堿基在核酸分子中含量比較少,但它們是天然存在不是人工合成的

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