中國藥典-201四部通則-9205藥品潔凈試驗(yàn)室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則

1、92059205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則是用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)用的潔凈室等受控環(huán)境微生物污染情況的監(jiān)測和控制。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室是指用于藥品無菌或微生物檢驗(yàn)用的潔凈實(shí)驗(yàn)室、隔離系統(tǒng)及其他受控環(huán)境。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室的潔凈級(jí)別按空氣懸浮粒子大小和數(shù)量的不同參考現(xiàn)行“藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范”分為 ABAB、C C、D D4 4 個(gè)級(jí)別。為維持藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的穩(wěn)定性、確保藥品質(zhì)量安全及檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物監(jiān)測和控制，使受控環(huán)境維持可接受的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)水平。本指導(dǎo)原則包括人員要求、初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室參數(shù)確認(rèn)、微生物監(jiān)測方法、監(jiān)測頻次及監(jiān)測項(xiàng)目、監(jiān)

2、測標(biāo)準(zhǔn)、警戒限和糾偏限、數(shù)據(jù)分析及偏差處理、微生物鑒定和微生物控制。人員從事藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測和控制的人員應(yīng)符合現(xiàn)行中國藥典通則中“藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則（通則 92039203）”的相關(guān)要求。確認(rèn)初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行參數(shù)確認(rèn)，確認(rèn)參數(shù)包括物理參數(shù)、空氣懸浮粒子和微生物。潔凈實(shí)驗(yàn)室若有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大變化時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行參數(shù)測試。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室物理參數(shù)的測試應(yīng)當(dāng)在微生物監(jiān)測方案實(shí)施之前進(jìn)行，確保操作順暢，保證設(shè)備系統(tǒng)的運(yùn)行能力和可靠性。主要的物理參數(shù)包括高效空氣過濾器完整性，氣流組織、空氣流速（平均風(fēng)速），換氣次數(shù)、壓差、溫度和相對(duì)濕度等，測試應(yīng)在模

3、擬正常檢測條件下進(jìn)行。各級(jí)別潔凈環(huán)境物理參數(shù)建議標(biāo)準(zhǔn)及最長監(jiān)測周期見表 1,1,必要時(shí)，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)潔凈實(shí)驗(yàn)室使用用途、檢測藥品的特性等制定適宜的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。物理參數(shù)測試方法參照潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)中附錄 D3D3 高效空氣過濾器現(xiàn)場掃描檢漏方法、附錄 E12E12氣流的檢測、附錄 E1E1 風(fēng)量和風(fēng)速的檢測、附錄 E2E2 靜壓差的檢測、附錄 E5E5 溫濕度的檢測進(jìn)行。初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室其空氣懸浮粒子和微生物的確認(rèn)及監(jiān)測照以下“監(jiān)測”進(jìn)行。監(jiān)測藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期進(jìn)行微生物監(jiān)測，內(nèi)容包括非生物活性的空氣懸浮粒子數(shù)和有生物活性的微生物監(jiān)測，其中微生物監(jiān)測包括環(huán)境浮游菌和沉降菌

4、監(jiān)測，及關(guān)鍵的檢測臺(tái)面、人員操作服表面及 5 5 指手套等的微生物監(jiān)測。當(dāng)潔凈區(qū)有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大改變時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行監(jiān)測；當(dāng)微生物監(jiān)測結(jié)果或樣品測定結(jié)果產(chǎn)生偏離，經(jīng)評(píng)估潔凈區(qū)可能存在被污染的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，應(yīng)對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行清潔消毒后重新進(jìn)行監(jiān)測。*韁n陛卻/黃怔4法*matmat犢理事歌，K K帆至鼻（平均同建1 1檢次賽相電置金AH肉流噴施周*綱去河年KmKmeM.-4.eM.-4.修例胃咽月的鼠驗(yàn)制個(gè)月由於用累工塞曲荀也卬成向汰,標(biāo)鼻i ia-2a-2 r r俎5050小、 匕科用不C Cl l修司立3 單向看廿尚茂4 4HhHh1 1修中月市中區(qū)之*浮H H而小干小閡福情事

5、國之*的,餐不小于LOFiLOFiIfi-HCIfi-HCCHIMWCA季單向費(fèi)a個(gè)少計(jì)一次口好曲利ittjrittjr1.1.監(jiān)測方法藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；沉降菌的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；浮游菌的監(jiān)測照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)表面微生物測定是對(duì)環(huán)境、設(shè)備和人員的表面微生物進(jìn)行監(jiān)測，方法包括接觸碟法和擦拭法。接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對(duì)規(guī)則表面或平面進(jìn)行取樣，然后置合適的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間并計(jì)數(shù)，每碟取樣面積約為 25cm25cm2 2, ,微生物計(jì)

6、數(shù)結(jié)果以 cfu/cfu/碟報(bào)告；擦拭法是接觸碟法的補(bǔ)充，用于不規(guī)則表面的微生物監(jiān)測，特別是設(shè)備的不規(guī)則表面。擦拭法的擦拭面積應(yīng)采用合適尺寸的無菌模板或標(biāo)尺確定，取樣后，將拭子置合適的緩沖液或培養(yǎng)基中，充分振蕩，然后采用適宜的方法計(jì)數(shù)，每個(gè)拭子取樣面積為約 25cm2,25cm2,微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以 cfu/cfu/拭子報(bào)告。接觸碟法和擦拭法采用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和時(shí)間同浮游菌或沉降菌監(jiān)測。表面菌測定應(yīng)在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行。環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆月東瓊脂培養(yǎng)基（TSATSA）, ,必要時(shí)可加入適宜的中和劑，當(dāng)監(jiān)測結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí)，可增加沙氏葡萄糖

7、瓊脂培養(yǎng)基（SDASDA。在藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控中，監(jiān)測頻次及監(jiān)測項(xiàng)目建議按表 2 2 進(jìn)行。表工推薦的藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)副頻次及監(jiān)測項(xiàng)目受控區(qū)域果樣次曲洲項(xiàng)目無第隔寓系統(tǒng)銀灰實(shí)驗(yàn)空氣懸浮位子，浮潞曹 Q.沉降南.表面徽生物（看手套微生物惜凈實(shí)醯拿A A級(jí)每次實(shí)驗(yàn)空氣懸浮粒子叫浮海茵爾.沉降菌由， 表面微生物（含手套及幄作展每周一次空氣懸浮位于 J 浮博BP.BP.沉降感.表面微生物（含手套及提作股）cotcot每季度一次空氣懸浮粒子浮濟(jì)菌、沉降畫.表面生物D D級(jí)每半年一次空氣懸浮銀子.浮源恿、沉降、表而微生物注：每月一次。工作臺(tái)面沉降菌的日常監(jiān)測采樣點(diǎn)數(shù)不少于 3 3 個(gè)，且每個(gè)采樣點(diǎn)的平皿

8、數(shù)應(yīng)不少于 1 1 個(gè)。每季度一次每半年一次。如果出現(xiàn)連續(xù)超過糾偏限和警戒限、關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有污染微生物存在、空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修、消毒規(guī)程改變、設(shè)備有重大維修或增加、潔凈室（區(qū)）結(jié)構(gòu)或區(qū)域分布有重大變動(dòng)、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)考慮修改監(jiān)測頻次。2.2.監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)見表 3 3、微生物監(jiān)測的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)見表 4 4。表 3 3 各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米潔凈度級(jí)別靜態(tài)動(dòng)態(tài)0.5m0.5m5.0m0m0.5mm m5.0mm mA A 級(jí) 352020352020352020352020B B 級(jí) 352

9、02935200029003520293520002900C C 級(jí) 35200029003520000290003520002900352000029000D D 級(jí) 352000029000352000029000 不作規(guī)定不作規(guī)定表4各潔凈級(jí)別環(huán)境微生物監(jiān)測的動(dòng)杰標(biāo)漉6表面微生物浮游的直降菌690mm)潔凈度級(jí)別,，口一接觸。55mnO5指手套cfu/m$cfu/4小時(shí)力cfu/碑chi/手套A級(jí)1111B鍛10555C級(jí)1005025D級(jí)20010050注：表中各數(shù)值均為平均值；單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于 4 4 小時(shí)，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測并累積計(jì)數(shù)。3.3.警戒限和

10、糾偏限藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結(jié)合不同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)，采用適宜的方法，制定適當(dāng)?shù)奈⑸锉O(jiān)測警戒限和糾偏限。限度確定后，應(yīng)定期回顧評(píng)價(jià)，如歷史數(shù)據(jù)表明環(huán)境有所改善，限度應(yīng)作出相應(yīng)調(diào)整以反映環(huán)境實(shí)際質(zhì)量狀況。表 5 5 列出了各級(jí)別潔凈環(huán)境微生物糾偏限參考值。注：數(shù)據(jù)表示建議的環(huán)境質(zhì)量水平，也可根據(jù)檢測或分析方法的類型確定微生物糾偏限度標(biāo)準(zhǔn)；可根據(jù)潔凈區(qū)域用途、檢測藥品的特性等需要增加沉降碟數(shù)；A A 級(jí)環(huán)境的樣本，正常情況下應(yīng)無微生物污染。4.4.數(shù)據(jù)分析及偏差處理數(shù)據(jù)分析應(yīng)當(dāng)對(duì)日常環(huán)境監(jiān)測的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和回顧，通過收集的數(shù)據(jù)和趨勢分析，總結(jié)和評(píng)估潔凈實(shí)驗(yàn)室是否受控，評(píng)估警戒限和糾偏限是否

11、適合，評(píng)估所采取的糾偏措施是否合適。應(yīng)當(dāng)正確評(píng)估微生物污染，不僅僅關(guān)注微生物數(shù)量，更應(yīng)關(guān)注微生物污染檢出的頻率，往往在一個(gè)采樣周期內(nèi)同一環(huán)境中多點(diǎn)發(fā)現(xiàn)微生物污染，可能預(yù)示著風(fēng)險(xiǎn)增加，應(yīng)仔細(xì)評(píng)估。幾個(gè)位點(diǎn)同時(shí)有污染的現(xiàn)象也可能由不規(guī)范的采樣操作引起，所以在得出環(huán)境可能失控的結(jié)論之前，應(yīng)仔細(xì)回顧采樣操作過程。在污染后的幾天對(duì)環(huán)境進(jìn)行重新采樣是沒有意義的，因?yàn)椴蓸舆^程不具有可重復(fù)性。偏差處理當(dāng)微生物監(jiān)測結(jié)果超出糾偏限度時(shí)，應(yīng)當(dāng)按照偏差處理規(guī)程進(jìn)行報(bào)告、記錄、調(diào)查、處理以及采取糾正措施，并對(duì)糾正措施的有效性進(jìn)行評(píng)估。5.5.微生物鑒定建議對(duì)受控環(huán)境收集到的微生物進(jìn)行適當(dāng)水平的鑒定，微生物菌群信息有助于

12、預(yù)期常見菌群，并有助于評(píng)估清潔或消毒規(guī)程、方法、清潔劑或消毒劑及微生物監(jiān)測方法的有效性，尤其當(dāng)超過監(jiān)測限度時(shí)，微生物鑒定信息有助于污染源的調(diào)查。關(guān)鍵區(qū)域分離到的菌落應(yīng)先于非關(guān)鍵區(qū)域進(jìn)行鑒定。微生物鑒定參照微生物鑒定指導(dǎo)原則（通則 92049204）進(jìn)行。微生物控制為了保證藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維持適當(dāng)?shù)乃剑⑻幱谑芸貭顟B(tài)，除保持空調(diào)系統(tǒng)的良好運(yùn)行狀態(tài)，對(duì)設(shè)施進(jìn)行良好維護(hù)外，潔凈室內(nèi)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守良好的行為規(guī)范，并定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控，減少人員干預(yù)比監(jiān)測更有效。其次是通過有效控制人員和物品的移動(dòng)，適當(dāng)?shù)目刂茰囟群蜐穸取Ｎ⑸锟刂拼胧┻€包括良好的清潔和衛(wèi)生處理，應(yīng)定期對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔和消毒，應(yīng)當(dāng)監(jiān)測消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，并在規(guī)定的有效期內(nèi)使用，A/BA/B 級(jí)潔凈區(qū)應(yīng)當(dāng)使用無菌的或經(jīng)無菌處理的