2-VITEK2CompactOperationSOP(程序性文件)

1、Version 3.01VITEK 2 COMPACT儀器SOP文件BIOMERIEUX目錄系統(tǒng)正常工作條件.3開機(jī)關(guān)機(jī)程序.4操作流程.6結(jié)果處理 .9質(zhì)控程序 .11儀器維護(hù)保養(yǎng)程序 .14鑒定卡試驗組成.附錄1鑒定卡細(xì)菌目錄.附錄2藥敏卡抗生素組成附錄3可以完成藥敏的細(xì)菌種類 附錄4VITEK2質(zhì)量控制方案附錄5系統(tǒng)正常工作條件安裝環(huán)境室內(nèi)使用避免日光直射。傾斜不超過3度。儀器背部可以靠墻，確保儀器風(fēng)扇的氣流不會被阻擋。左右邊距最少11cm。上邊距最少21cm。最低安裝海拔：100mt平面。最高安裝海拔：2000m$平面。室溫：15 °C- 30 ° C運(yùn)輸和貯藏溫度

2、：-20 ° C 55 ° C相對濕度：203 80%6凝集根據(jù)IEC664污染等級II。根據(jù)IEC664過電壓類別II。電器性能電器性能VITEK 2 Compact輸入電壓100/120/220/240 VAC50/60 Hz最大輸入電流5 A 120 VAC 或2.5 A 240 VAC正常輸入電流2.5A 120 VAC or 1.25A 240 VAC功率正常300W ,最大600W熱值1025 BTU/HR (正常)電源線按IEC320可撥3線接地可更換的熔斷器5.0A(100V/120V)4.0A (220V/240V )開機(jī)關(guān)機(jī)程序開機(jī)啟動VITEK 2 C

3、OMPACT（全自動微生物分析系統(tǒng)）儀1 .確認(rèn)VITEK 2 COMPACT 儀器所接電源符合要求。2 .打開交流電源（AC）開關(guān)在ON的位置。儀器按程序進(jìn)行初始化（包括儀器自檢）。儀器孵育轉(zhuǎn)盤溫度上升（約需要5-15分鐘），以達(dá)到測試卡培養(yǎng)所需要的溫度。卜面圖示為初始化（Initializing ）屏幕。InttruMenis 1<Qpyri0ht 2662-2331CB Version 網(wǎng)Fillrr ： Id*Fi】|Loadtr ：IriJCruh»ftt 1U ooooOklft3i|啟動完成后，屏幕下方的狀態(tài)區(qū)顯示OK。當(dāng)狀態(tài)顯示 OK,代表VITEK 2 COM

4、PACT 可以開始處理測試卡了。關(guān)機(jī)1、先關(guān)閉 VITEK 2 Compact 儀器；在VITEK 2 Compact儀器用戶界面上，按回車鍵，屏幕出現(xiàn)主菜單（1）進(jìn)入關(guān)機(jī)功能的指令：Main Menu > Maintenance > Shutdown > Yes0 0 0 0 0Note：如果孵育器內(nèi)留有測試卡，儀器顯示警告字樣："Warning : Cassette processing and/or cards in incubator（試卡運(yùn)行/試卡在孵箱中，關(guān)機(jī)嗎？）shutdown in progresso選才i No,退出關(guān)機(jī)程序。選擇YES ,關(guān)機(jī)。

5、儀器顯示下列信息并進(jìn)入關(guān)機(jī)過程關(guān)機(jī)程序完成后，儀器顯示"Ready for Shutdown"。 關(guān)交流電源開關(guān)。(4)拔掉電源插座，以免發(fā)生危險。2、關(guān)閉英文工作電腦(同普通電腦關(guān)機(jī))3、依次關(guān)掉其他附屬設(shè)備。簡易操作規(guī)程一、卡片選擇1鑒定卡：GN革蘭陰性桿菌鑒定卡GP革蘭陽性菌鑒定卡NH苛養(yǎng)菌鑒定卡YST酵母菌鑒定卡ANC厭氧菌鑒定卡2藥敏卡：AST-GN革蘭陰性桿菌藥敏卡AST-GP革蘭陽性球菌藥敏卡AST-YST 真菌藥敏卡、菌懸液配制及稀釋1 懸浮液：0.45% NaCL 液，PH 4.5-7.22.菌懸液濃度：鑒定卡 GN 0.5 - 0.63 麥?zhǔn)蠁挝籊P0.

6、5 - 0.63麥?zhǔn)蠁挝籒H2.7 - 3.3麥?zhǔn)蠁挝籄NC 2.7-3.3藥敏卡 AST-GN 3.0mlAST-GP 3.0mlAST-YST 3.0ml3.藥敏卡稀釋方法YST 1.8 - 2.2麥?zhǔn)蠁挝畸}水+ 鹽水+ 鹽水+麥?zhǔn)蠁挝?45 d l 0.5-0.63麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙?80科l 0.5-0.63麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙?80 d l 1.8 - 2.2麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙? 按上述濃度手工進(jìn)行稀釋VITEK 2 COMPACT機(jī)前的細(xì)菌培養(yǎng)要求（表一）菌 種接種物的濁度卡片培養(yǎng)要求革蘭陰性桿菌0.5-0.63 McFGNAST-GN培養(yǎng)基 TSAB/CBA/MAC , 35-37 °

7、; C, 需氧，無 CO2 ,培養(yǎng)18-24小時革蘭陽性菌0.5-0.63 McFGPAST-GP使用TSAB/CBA上的菌落。35-37 ° C需氧培養(yǎng)18-24小時，鏈球菌：5-10%二氧化碳葡萄千菌：無二氧化碳酵母菌1.8-2.2 McFYST AST-YST使用 SDA/TSAB/CHBA/CBA/TSA/CPSID3 , 35-37 ° C需氧培養(yǎng)18-72 小時，無二氧化碳余瑟南 嗜血菌 彎曲菌 其他苛養(yǎng)菌2.7-3.3 McFNH: TSAB,35-37° 微需氧甲 18-24 小時其他苛養(yǎng)菌：CHOC,CHOC PVX5-10% CO 2, 35-

8、37 ° C 需氧打 18-24 小 時厭氧菌 棒狀桿菌2.7-3.3 McFANC棒狀桿菌：使用 CBA/CAN/TSAB/TSAHB的菌落，35-37 ° C CO,或非CQ,培養(yǎng)18-24小時厭氧菌：使用CBA/CDC/BRU/CHBA/TSAB/TSAHBW 菌 落，35-37 ° C厭氧培養(yǎng)18-72小時TSA 胰酶大豆瓊脂TSAB胰酶大豆瓊脂+5血CBA: 哥倫比亞羊血瓊脂CHBA哥倫比亞馬血瓊脂MAC:麥康凱瓊脂CPS ID 3 :尿標(biāo)本產(chǎn)色鑒定平板SDA 沙保弱葡萄糖瓊脂CAN:哥倫比亞CANC脂+5矯血CDC: CDC厭氧瓊月旨+5矯血BRU:

9、Brucella 布氏瓊脂+5凝血，血紅素，維生素 K四、操作流程1 .18-24小時分純細(xì)菌（新鮮菌）。2 .根據(jù)細(xì)菌選卡片（參照表一）。3 .使用前將卡片和鹽水瓶從冰箱取出，放室溫 15-20分鐘，充分復(fù)溫。4 .在載卡架上放一次性塑料試管（注意：必須使用廠家配套提供的塑料管），每管中加入 3ml 0.45% NaCl溶液。5 .用比濁儀校正管（Ref 93059 ）校正比濁儀，測定的數(shù)值應(yīng)在規(guī)定范圍內(nèi)。6 .按表一建議配制菌懸液，并用比濁儀測定菌液濃度；如同時做藥敏試驗時，應(yīng)按 二（2）建議進(jìn)行稀釋并 混勻。喜，.XvfT*JTb2compact試卡與藥敏試卡鏈接，并輸入標(biāo)本信息。如圖所

10、示：1）進(jìn)入主菜單，如左圖：7.將卡片按順序放在載卡架上，輸樣管插入到菌液管中。藥敏卡應(yīng)放在配對鑒定卡的后面。8.進(jìn)入VITEK 2 COMPACTS用軟件主界面。掃描載卡架條碼（或直接選取卡架號）。掃描試卡條碼，將鑒定載卡架信息：可以用條碼掃描器輸入也可自下拉菜單選擇4）掃描試卡rw| Qaph2）點擊 ,進(jìn)入試卡編輯菜單，出現(xiàn)下圖窗口3）點擊,出現(xiàn)以下窗口5）選中屬于同一菌株的所有實驗卡，點擊按鈕，出現(xiàn)如下窗口輸入實驗號和菌株編號點擊保存。9.將載卡架放入儀器的填充倉，按充入”，70秒左右填充完畢。填充完畢后，儀器的藍(lán)色指示燈閃亮。將載卡架取出并放入裝載倉。儀器自動掃描條碼，審核所有輸入

11、的卡片信息是否正確，確認(rèn)無誤后自動進(jìn)行封口和上卡。操作完成后，儀器口的藍(lán)色箭頭閃亮提示。如圖：1)3),出現(xiàn)以下窗口:10.在儀器運(yùn)行過程中，可以進(jìn)行病人信息的輸入，點擊,編輯好病人信息并保存。11、儀器每隔15分鐘自動閱讀孵育倉內(nèi)所有卡片，并將數(shù)據(jù)傳入英文工作電腦，電腦分析所有數(shù)據(jù)并給予結(jié) 果，確認(rèn)無誤結(jié)果可傳至中文電腦，由操作者認(rèn)可并發(fā)放臨床報告。12、已完成的卡片由儀器自動卸載入廢卡箱。VITEK 2 Compact 結(jié)果處理測試卡片按正常程序放入 VITEK 2 Compact孵育轉(zhuǎn)盤后，儀器經(jīng)過一定時間的孵育和判讀，由工作電腦給出相應(yīng)實驗室結(jié)果，按下述方法進(jìn)一步處理、瀏覽結(jié)果圖標(biāo)，出

12、現(xiàn)以下窗口，點擊屏幕左列的相應(yīng)編號，可見:從主菜單敲擊ID結(jié)果卜圖為“結(jié)果處理流程圖”AST結(jié)果原始結(jié)果須補(bǔ)充休息的須回顧的須進(jìn)一步確認(rèn)的完成需要分離株信息實驗室操作者確認(rèn)分離株信息上級操作者確認(rèn)分離株信息并點擊 “review”并點擊 "approve”AES提示信息；在藥敏結(jié)果右上方顯示，見右圖標(biāo)示點擊專家系統(tǒng)按鈕,可見如下圖，可利用下拉箭頭瀏覽不同族抗生素的推薦耐藥機(jī)制:鑒定結(jié)果VITEK 2 COMPACT 程序瀏覽結(jié)果1 .鑒定卡的結(jié)果：一般僅給出單一結(jié)果，無需進(jìn)行補(bǔ)充試驗，電腦主機(jī)時，可給出結(jié)果的可信度評估。 單一良好結(jié)果可直接傳輸?shù)綌?shù)據(jù)庫 （LSN）和中文軟件中（在打開

13、“demoless” 模式設(shè)置并保證中文軟件通訊端口打開情況下），并長期儲存。2 .如果給出兩個及兩個以上結(jié)果，儀器會做出提示或要求進(jìn)行補(bǔ)充試驗，請按注釋進(jìn)行補(bǔ)充試驗，選擇正 確的鑒定結(jié)果，并將結(jié)果傳輸。3 .不能鑒定或無法確定的結(jié)果，請查找原始分離平板，確認(rèn)所分離細(xì)菌是否為純培養(yǎng)，必要時重新分離并 重新進(jìn)行鑒定試驗。三、藥敏結(jié)果1 .如果同時進(jìn)行鑒定和藥敏試驗，細(xì)菌鑒定結(jié)果會自動加到藥敏卡上；否則需手工添加細(xì)菌名稱到藥敏卡 信息中。2 .如果有專家系統(tǒng)評語出現(xiàn)，則應(yīng)按操作規(guī)程對藥敏結(jié)果作適當(dāng)?shù)男薷牟⒋_認(rèn)最終結(jié)果。3 .如果有瀏覽信息出現(xiàn)，應(yīng)按程序處理瀏覽信息并確認(rèn)最終結(jié)果。4 .上述步驟處理

14、完畢，結(jié)果會自動傳輸?shù)絃SN數(shù)據(jù)庫中。VITEK 2 COMPACT 建議質(zhì)控方法目的：1.監(jiān)測鑒定及藥敏試驗步驟的精密度和準(zhǔn)確度。2 .監(jiān)測試驗所用試劑和儀器的質(zhì)量。3 .監(jiān)測進(jìn)行試驗的工作人員是否規(guī)范操作。VITEK 2 COMPACT 反應(yīng)卡品種： 鑒定卡藥敏卡GNAST-GNGPAST-GPYSTAST-YSTNHANC質(zhì)量控制操作規(guī)范反應(yīng)卡質(zhì)捽1. 質(zhì)控的參考菌株，請參閱表11.1 質(zhì)控菌株的貯存1.11 將菌株置于含1015%甘油的胰酶消化大豆肉湯，脫纖維羊血，或脫脂乳中，放-20 C低溫冰箱保存。1.12 日常所用的質(zhì)控培養(yǎng)物每月都要用冷凍保存的培養(yǎng)物來更新。1.13 在測試前應(yīng)

15、將菌株在瓊脂板上傳1-2代后接種到相應(yīng)培養(yǎng)基上以獲得單個菌落。1.14 按VITEK 2 COMPACT推薦的菌懸液制備方法，將菌株進(jìn)行培養(yǎng)或制成懸液以進(jìn)行試驗。1.15 只要MIC值沒有發(fā)生由于方法錯誤造成的有意義的改變，質(zhì)控培養(yǎng)物就可以一直用于監(jiān)測試驗的精密度和準(zhǔn)確度。如果某意外結(jié)果提示該菌株的內(nèi)在敏感性發(fā)生改變就應(yīng)換用此質(zhì)控的新培養(yǎng)物。2. 新生產(chǎn)編號反應(yīng)卡的質(zhì)控操作2.1 對於每一批新生產(chǎn)批號反應(yīng)卡都需應(yīng)用相應(yīng)質(zhì)控菌株檢測生化反應(yīng)和MIC結(jié)果。2.2 每一新生產(chǎn)批號至少取一張卡片進(jìn)行質(zhì)控以保證卡片的可靠性。2.3 試驗所用的所有材料和試劑批號必須記錄并保存。3. 質(zhì)控頻率質(zhì)控頻率可分為

16、每日質(zhì)控和每星期質(zhì)控，新VITEK 2 COMPACT/ VITEK 2用戶建議先進(jìn)行每日質(zhì)控直至結(jié)果滿意后轉(zhuǎn)為每星期質(zhì)控。3.1 每天質(zhì)控每天應(yīng)用相應(yīng)質(zhì)控菌株進(jìn)行質(zhì)控以監(jiān)控試驗系統(tǒng)的整體質(zhì)量，直至符合以下要求，則可考慮應(yīng)用每周質(zhì) 控。連續(xù)檢測相應(yīng)質(zhì)控菌株 30天并記錄結(jié)果。針對每一個生化反應(yīng)/細(xì)菌和抗生素/細(xì)菌組合，每30個結(jié)果中，超出準(zhǔn)確范圍不超過3個，則可考慮應(yīng)用每周質(zhì)控。建議VITEK 2 COMPACT用戶在熟悉操作時，應(yīng)用每天質(zhì)控模式。3.2 每周質(zhì)控每周應(yīng)用相應(yīng)質(zhì)控菌株進(jìn)行質(zhì)控監(jiān)控試驗系統(tǒng)的整體質(zhì)量，并記錄質(zhì)控結(jié)果。如所測試抗生素種類改變，必須重新應(yīng)用每天質(zhì)控模式直至結(jié)果滿意后再

17、轉(zhuǎn)用每周質(zhì)控。4. 如果質(zhì)控檢測結(jié)果和目標(biāo)反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)誤差，必須立即進(jìn)行查誤步驟。5. 如誤差無法解決，請聯(lián)系生物梅里埃/委托代理的技術(shù)代表。比濁儀質(zhì)控在自動化儀器操作中，比濁儀質(zhì)控是質(zhì)控操作步驟的重要一環(huán)。1 .) VITEK 2 COMPACT Densichek 質(zhì)控步驟使用 “ DENSICHEK Calibration Standard” Ref: 93059,檢測 Densichek 比濁儀能否準(zhǔn)確判讀目標(biāo) McF單位，判讀值必須在目標(biāo)McF值+0.15 McF范圍內(nèi)。目標(biāo) McF單位值標(biāo)記在“ DENSICHEKCalibration Standard"標(biāo)準(zhǔn)管上。確認(rèn)質(zhì)

18、控誤差原因如質(zhì)控結(jié)果和目標(biāo)反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)誤差，必須遵循以下步驟查誤并矯正。1 .)明顯錯誤：錯誤使用質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株菌株/鹽水(0.45%鹽水)污染鹽水的pH及濃度未在要求的范圍。建議采用梅里埃提供的鹽水。沒有按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作。2 .)如無明顯錯誤，開始以下查誤步驟重覆實驗以認(rèn)證誤差結(jié)果。重新采用“每日質(zhì)控”程序。確認(rèn)比濁儀功能正常，比濁儀較正標(biāo)準(zhǔn)未過有效期。所有試劑未過有效期，并妥尚保存。注意：所有懸浮液開封后有效期為一個月，為避免污染，鹽水分裝器夜間必須置於冰箱(2 - 8 C)并每月高溫高壓消毒一次。孵育/判讀箱溫度正常標(biāo)準(zhǔn)菌株未受污染，生物特性及沒有改變。菌懸液濃度符合實驗要求。妥善接種

19、，傳代標(biāo)準(zhǔn)菌株於建議的平板上。 接種標(biāo)準(zhǔn)菌株孵育時間符合建議時間。表1 :質(zhì)控參考菌株檢測卡的種類推薦的質(zhì)控參考菌株GNATCC 700324產(chǎn)酸克雷伯菌GPATCC 29213金黃色葡萄球菌，43079馬鏈球菌獸瘟亞種YSTATCC 34449假絲酵母，ATCC 204094粘狀毛抱子菌NHATCC 9007流感嗜血桿菌ANCATCC 8482普通擬桿菌，ATCC 13124產(chǎn)氣莢膜梭菌AST-GNATCC 25922大腸埃希菌，27853綠膿假單胞AST-GPATCC 29212糞腸球菌，29213金黃色葡萄球菌AST-P533ATCC 49619肺炎鏈球菌VITEK 2 Compact質(zhì)控操作流程圖示如下:1 .在“ Manage QC results 菜單，點擊圖標(biāo)2 .輸入或掃描卡片批號3 .進(jìn)行批號維護(hù)：輸入接收的數(shù)量及日期等4.5.按照一般上卡程序上卡，掃描試卡后，在對試卡進(jìn)行維護(hù)時，選擇為質(zhì)控卡。試驗結(jié)束后點擊圖標(biāo)看質(zhì)控結(jié)果。VITEK 2 COMPAC