離體小腸平滑肌的生理特性及藥物作用的觀察

1、實(shí)驗(yàn)五 離體小腸平滑肌的生理特性及藥物作用的觀察【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?學(xué)習(xí)一種離體組織器官試驗(yàn)方法；觀察離子成分、酸堿度、溫度、乙酰膽堿、 腎上腺素等藥物對(duì)離體家兔小腸平滑肌的作用； 分析平滑肌活動(dòng)的某些生理特性及理化環(huán)境改變對(duì)它 的影響?！緦?shí)驗(yàn)原理】 消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性、較大的伸展性，對(duì)化學(xué)物質(zhì)、溫度及牽張刺激 較為敏感等生理特性。將離體的組織、器官至于模擬的內(nèi)環(huán)境中，可在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能，從而 為我們檢測(cè)它們的生理學(xué)和藥理學(xué)特性提供了便利的條件。 功能和維持的時(shí)間長(zhǎng)短與模擬內(nèi)環(huán)境的精 確性和穩(wěn)定性有關(guān)?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1. 恒溫浴槽的準(zhǔn)備工作2. 標(biāo)本制備3. 儀器連接與設(shè)置4. 啟動(dòng)計(jì)算

2、機(jī)開(kāi)始記錄【觀察項(xiàng)目】1. 自動(dòng)節(jié)律收縮2. 觀察膽堿能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用(1) 乙酰膽堿的作用(2) 阿托品的作用3. 觀察腎上腺素能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用(1) 腎上腺素的作用(2) 去甲腎上腺素的作用4. 觀察鈣離子對(duì)腸斷收縮的影響5. 觀察溫度對(duì)腸斷收縮的影響6. 觀察酸堿度對(duì)腸斷收縮的影響結(jié)果分析】1. 觀察膽堿能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用(1)乙酰膽堿的作用在浴槽中加入乙酰膽堿后，可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)增強(qiáng)，幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理，目前認(rèn)為乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結(jié)合，使得兩類(lèi)通道開(kāi)放：一類(lèi)為電位敏感性Ca2+專(zhuān)用通道，另一類(lèi)

3、為特異性受體活化Ca2+專(zhuān)用通道。前一類(lèi)通道對(duì) Ach敏感，小劑量 Ach即引起開(kāi)放；后一類(lèi)通道對(duì) Ach相對(duì)不敏感，只有大劑量 Ach才會(huì)引起 開(kāi)放。這兩類(lèi)通道開(kāi)放都使得肌漿中Ca2+增高，進(jìn)而激活肌纖蛋白 一肌凝蛋白一ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。阿托品的作用diI-> b- iikIiI|pii|p|Pi|VIp笳度阿托品乙配膽礙36S督上腺素羽度4piIIp在浴槽標(biāo)本管中加入阿品托溶液，2分鐘后再加入乙酰膽堿(Ach)，發(fā)現(xiàn)小腸管張力和收縮力沒(méi)有明顯的變化，原因是阿托品是乙酰膽堿阻斷劑，使乙酰膽堿的作用消失。故加入乙酰膽堿后沒(méi)有作用。所以?xún)烧叨技尤胗^察到曲 線(xiàn)無(wú)明顯變化。

4、2. 觀察腎上腺素能受體激動(dòng)劑對(duì)腸斷收縮的影響及阻斷劑的作用(1) 腎上腺素的作用在浴槽中加入腎上腺素后，可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)減弱，描記曲線(xiàn)出現(xiàn)收縮頻率變慢，幅度減小以及基線(xiàn)下移。出現(xiàn)上 述現(xiàn)象的機(jī)理，目前認(rèn)為與腸肌細(xì)胞膜上存在a和B兩中受體，a受體又分為a抑制型受體和 a興奮型受體有關(guān)。腎上腺素作用于 a抑制型受體，引起腸肌膜上一種特異性受體活化，使K+外流增多，細(xì)胞膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性降低，肌張力下降。同時(shí)，腎上腺素還作用于 B受體，它的激活引起腸肌細(xì)胞膜中的CAMP合成增多，CAMP激活腸肌膜及肌漿網(wǎng)上 Ca2+泵活動(dòng)，使肌漿中Ca2+濃度降低，亦使肌張力降低；B受體激活后還促使 K+及

5、Ca2+ 外流增加，加速膜的超極化，促進(jìn)了腸肌肌張力的減低。(2) 去甲腎上腺素的作用去甲腎上腺素與 包受體結(jié)合，造成肌漿中 Ca2+濃度降低，亦使肌張力降低；B受體激活后還促使 K+及Ca2+外流增加，加速膜的超極化，促進(jìn)了腸肌肌張力的減低。最終造成肌肉收縮能力減弱。3. 觀察鈣離子對(duì)腸斷收縮的影響38 度CaC12細(xì)胞外Ca2+濃度升高，Ca2+內(nèi)流增多，肌肉收縮能力增強(qiáng)。4. 觀察溫度對(duì)腸斷收縮的影響我們可以看到小腸從 38C轉(zhuǎn)移到17C （室溫）的臺(tái)氏液中，小腸平滑肌的收縮幅度、基線(xiàn)上移和頻率增加，產(chǎn)生上述的主要原因是：小腸腸管的臺(tái)氏液溫度以38 C40C為宜，低于或高于這個(gè)溫度，都會(huì)

6、影響結(jié)果。由于小腸管平滑肌對(duì)溫度改變極為敏感，當(dāng)溫度降到30C以下時(shí)，故代謝水平的降低，興奮性減弱，可出現(xiàn)收縮曲線(xiàn)基線(xiàn)下移，頻率變慢，收縮幅度變小。5. 觀察酸堿度對(duì)腸斷收縮的影響在浴槽中加入鹽酸溶液后，離體腸管活動(dòng)減弱，描記曲線(xiàn)出現(xiàn)收縮幅度降低，頻率變慢。出現(xiàn)這一現(xiàn)象，目前認(rèn)為 其原因在于：細(xì)胞外 H+升高時(shí)，Ca2+通道的活性受到抑制，使得 Ca2+內(nèi)流減少。 H+升高能干擾肌肉的代謝 和肌絲滑行的生化過(guò)程：H+能與Ca2+競(jìng)爭(zhēng)鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)而使肌球蛋白ATP酶活性降低（近期有理論認(rèn)為是直接抑制作用而非競(jìng)爭(zhēng)作用）；使肌原纖維對(duì) Ca2+的敏感性和 Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。在加鹽酸使平滑肌 收縮減弱的基礎(chǔ)上，再加 NaOH于浴槽中，則腸管活動(dòng)出現(xiàn)相反的情況，即腸管活動(dòng)增強(qiáng)。原因在于NaOH可以中和H+，改變了細(xì)胞外液的 PH值，PH過(guò)高、過(guò)低，收縮幅度及張力都會(huì)降低，故小腸