流動注射化學(xué)發(fā)光法及光度法用于巴戟天提取液抗氧化活性的研究_

1、第卷，第期光譜學(xué)與光譜分析，年月，流動注射化學(xué)發(fā)光法及光度法用于巴戟天提取液抗氧化活性的研究吳擁軍，石杰，屈凌波，李斐菲，李曉靜，吳逸明¨鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，河南鄭州鄭州大學(xué)化學(xué)系，河南鄭州摘要將中藥巴戟天提取液加人魯米諾一一化學(xué)發(fā)光體系，測量其發(fā)光強(qiáng)度，根據(jù)系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光被抑制的程度可以評價巴戟天的抗氧化活性，并將巴戟天與抗壞血酸的抗自由基活性進(jìn)行了對比實驗，實驗證明巴戟天提取液具有明顯的抗自由基活性；采用分光光度法測定體系吸光度的變化來研究巴戟天對及自由基的清除作用，以抗壞血酸作陽性對照，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：巴戟天對。及自由基均有良好的清除作用，結(jié)果較為滿意。提示中藥巴戟天可作為潛在的具有

2、抗氧化活性的天然藥物。主題詞流動注射化學(xué)發(fā)光法；光度法；巴戟天提取液；抗氧化活性中圖分類號：；文獻(xiàn)標(biāo)識碼：文章編號：（）一孓型多功能化學(xué)發(fā)光檢測儀（西安瑞邁電子科技有引言限公司）；型流動注射化學(xué)發(fā)光光譜光度分析儀（西安瑞邁電子科技有限公司）；型分光光度計（上海第三自由基又叫游離基，活性氧自由基是一些處于激發(fā)態(tài)的分析儀器廠）；紫外分光光度計（日本島津公司）；含氧基團(tuán)，如超氧陰離子自由基、羥基自由基、烷氧基自由一型數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州國華電器公司）；所用試劑均基等。在正常情況下，體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除是平衡的，為分析純，配制用水為三蒸水。一旦自由基產(chǎn)生過多或抗氧化體系出現(xiàn)故障，體內(nèi)自由基代試劑謝就

3、會出現(xiàn)失衡，從而導(dǎo)致細(xì)胞損傷，引起心臟病、癌癥和魯米諾（哪）溶液：由叫和衰老等嚴(yán)重疾病。自由基和抗氧化荊的研究是近年來醫(yī)學(xué)卜溶液按體積比為：配制成溶液備用，生物中的熱門領(lǐng)域。目前，常用的抗自由基活性檢測方法主稱取，用此緩沖液配成×要有：電子自旋共振法、熒光光譜法等，這些方法存在操作的儲備液，實驗時稀釋為×。溶復(fù)雜、儀器昂貴、檢測方法缺乏專一性或靈敏度低等缺點。液：稱?。ū本┗S），配成而化學(xué)發(fā)光法具有靈敏、快速、操作簡單、重現(xiàn)性好等優(yōu)點。儲備液，實驗時稀釋為×。溶因而，被用于抗自由基活性藥物的研究和篩選。目前尚未見液：由（）稀釋成備用。維生素：稱適量維到有關(guān)中藥

4、巴戟天抗自由基活性的研究的報道，本文采用魯生索粉（分析純，天津市四通化工廠）配成米諾一一化學(xué)發(fā)光體系，對巴戟天提取液與維生素備液，實驗時稀至×。溶液對比研究其抗自由基活性，同時采用分光光度法測定流動注射化學(xué)發(fā)光法待測樣品溶液的制備體系吸光度的變化來研究巴戟天對及自由基的樣品溶液的制備按文獻(xiàn)方法進(jìn)行。精稱樣品，抑制率，以期對其抗氧化活性進(jìn)行研究，為合理開發(fā)該藥提于圓底燒瓶中，加入“。的乙醇水浴回流；供參考。過濾，濾渣加濾紙加蒸餾水，水?。贿^濾，殘渣用熱水洗次，每次，合并濾液，稀釋至，材料與方法故巴戟天樣品含量為。分光光度法待測溶液的制備儀器待測溶液按文獻(xiàn)方法制備。取生藥加入相當(dāng)于收稿日

5、期：一，修訂日期：一基金項目：“工程”重點學(xué)科研究項目、河南省科技攻關(guān)項目（）和河南省教育廳自然科學(xué)研究項目（）資助作者簡介：吳擁軍，年生，鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院副教授通訊聯(lián)系人第期光譜學(xué)與光譜分析倍的去離子水浸泡，煮沸，過濾，藥渣加入在時，可清除，從而阻止中間產(chǎn)物的積累，溶液在倍量水繼續(xù)煮沸過濾，合并兩次濾液濃縮定容于啪出現(xiàn)吸收減弱，故可以通過測定。值在加入清除劑前容量瓶，用時稀釋不同的倍數(shù)。后的變化來判定清除效果。清除率的計算式為：清除率流動注射化學(xué)發(fā)光法儀器條件空一（樣一底）空×。儀器與發(fā)光系統(tǒng)條件的選擇，本研究已另文發(fā)表，故羥基自由基（）清除率的測定本實驗中的儀器條件為：延遲時

6、間，測量時間，負(fù)反應(yīng)產(chǎn)生的羥自由基與甲基紫作用后使其吸光高壓，增益，濾波器截止頻率，采樣速度次度降低，加入清除劑后，消除，吸光度升高，利用反應(yīng)，自動詞零（），主泵速度。，副泵速度前后吸光度值的變化來測定清除率。清除率按下式進(jìn)行一（：）。計算：清除率（）（）×。方法流動注射化學(xué)發(fā)光法按圖設(shè)計的流動注射化學(xué)發(fā)光分析流路，過氧化氫和待測液由主蠕泵泵入管路，魯米諾溶液和硫酸銅溶液則由副蠕泵泵人管路，分別在混合器中混合并發(fā)生反應(yīng)，記錄發(fā)光囂囫信號。當(dāng)主蠕泵中進(jìn)的是過氧化氫和空白溶液時，發(fā)光信號昏腎哪佻蛐印：咖為空白值。，當(dāng)進(jìn)的是過氧化氫和原液或維生素溶液時，：腫；：曉；：；：發(fā)光信號記為，根據(jù)

7、發(fā)光信號的降低值（），可以定量分析巴戟天提取液與維生索清除自由基的能力。自由結(jié)果基抑制率為（）如×流動注射化學(xué)發(fā)光法測定超氧陰離子（）清除率的洲定根據(jù)上述條件，分別對其空白溶液、巴戟天提取液及維鄰苯三酚（）在堿性條件下自氧化、釋放出，生生素溶液進(jìn)行化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度測定，并考察了它們的穩(wěn)定成有色的中間產(chǎn)物在有強(qiáng)烈光吸收，當(dāng)有清除劑存性，其結(jié)果如下（見表表）。曲唧明軸蚰由表，表和表可知，空白溶液、巴戟天提取液及維的吸收。測定結(jié)果見圖和圖。生素溶液化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度基本穩(wěn)定，其中空白溶液平均發(fā)光強(qiáng)度為，巴戟天提取液和維生索溶液自由基平均抑嫡制率分別為和。很顯然，巴戟天提取液和維生素溶液的自由基抑制率

8、結(jié)果大體相當(dāng)。分光光度法測定超氧陰離子（）清除率的測定恒溫水浴，按下表（見表）加樣?；靹蚝螅帽壬?，以三蒸水作對照，在處，依照文獻(xiàn)的方法在在實驗范圍內(nèi)抗壞血酸及巴戟天提取液對超氧陰離子時測珈。在做樣品的測定時，需測本底。本底的設(shè)置使用三蒸水代替鄰苯三酚，目的是消除試樣自身在（）的清除率隨濃度增大而增大。光譜學(xué)與光譜分析第卷。薹舳匹喜詩旦者（×）昏姐馴驢刪柚蚰昏咖（×一）珂喜：毒。訂兒】昏秈艘輒昨嗽幣，（）昏血。蜀丘，魄帥髓劉【科酏岫衄對羥基自由基（。）的清除率分別配制下列溶液（）甲基紫溶液（×光強(qiáng)度越大，由于選用流動注射法，積累效應(yīng)較為嚴(yán)重，當(dāng)濃度過大時，峰的拖

9、尾現(xiàn)象嚴(yán)重，重現(xiàn)性較差，因此，實驗選擇合適的濃度，使光強(qiáng)度較大且重現(xiàn)性好。（）流動注射化學(xué)發(fā)光法測得了巴戟天提取液抗自由基活性，且巴戟天提取液和維生素溶液的自由基抑制率結(jié)果大體相當(dāng)。而分光光度法則分別測出超氧陰離子（）和羥基自由基（）的清除率，在實驗范圍內(nèi)抗壞血酸及巴戟天提取液對羥基自由基（）的清除率隨濃度增大而增大。（）本研究采用流動注射化學(xué)發(fā)光法利用巴戟天提取液）；測其吸光度為；（）甲基紫溶液（×一）；溶液（×一一）；溶液（）；測其吸光度為；（）甲基紫溶液（×）；溶液（×卜）；溶液（）；巴戟天（，）；測其吸光度為鬼；測定結(jié)果見圖和圖。在實驗范圍內(nèi)抗壞

10、血酸及巴戟天歪取液對羥基自由基（）的清除率隨濃度增大而增大。對眥一體系的抑制作用來測定其抗自由基活性，同時采用分光光度法分別測定了其對超氧陰離子自由基和羥基自由基的抑制率，取得了滿意的結(jié)果。這些方法靈敏度高、快速測定、操作簡單和重現(xiàn)性好，因此利用這些方法可以評價物質(zhì)的抗氧化活性，同時還可以用于抗自由基活性藥物的研究和篩選。（）超氧陰離子自由基、羥基自由基均屬于活性氧自由基，是些處于激發(fā)態(tài)的含氧基團(tuán)，它們都具有高度的反應(yīng)活性，產(chǎn)生某些毒效應(yīng)。因而維持體內(nèi)一定濃度水平的抗氧化劑，可以延長壽命和推遲衰老。外加一些抗氧化劑協(xié)助體內(nèi)維持氧代謝的平衡，對于防止疾病的發(fā)生和保持機(jī)體的健康是十分有益的。本實驗

11、結(jié)果可知中藥巴戟天可作為潛在的具有抗自由基活性的藥物或保健品。因此本研究為中藥巴戟天的開發(fā)和應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。討論（）主副泵的泵速大小及泵速比對發(fā)光強(qiáng)度有很大影響，實驗中選擇主副泵的泵速分別為和，此時具有較高的發(fā)光強(qiáng)度和穩(wěn)定性。（）負(fù)高壓的大小將直接影響化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的大小和靈敏度，在其他條件不變的情況下，負(fù)高壓增大，發(fā)光強(qiáng)度增大，同時靈敏度也隨之增大，使得發(fā)光不穩(wěn)定，因此，應(yīng)當(dāng)根據(jù)溶液的配制情況來選擇合適的負(fù)高壓，使得發(fā)光強(qiáng)度較大而且穩(wěn)定。（）硫酸銅溶液濃度對測定結(jié)果有影響，濃度越大，發(fā)第期光譜學(xué)與光譜分析參考文獻(xiàn)（趙保路）“】【（氧自由基和天然抗氧化劑）：（北京：科學(xué)出版社），（）：，（吳

12、擁軍，劉潔，吳予明，等）（光譜學(xué)與光譜分析），丹）（廣州醫(yī)藥），（）：，（馮昭明，肖柳英，張，鰣嘰，（石報自然科學(xué)版），（）：杰，吳擁軍，屈凌波）（）（鄭州大學(xué)學(xué)哪，州，口誠刪）【一，、）【）【妃】【；“；（，；，） 流動注射化學(xué)發(fā)光法及光度法用于巴戟天提取液抗氧化活性的研究作者：作者單位：吳擁軍， 石杰， 屈凌波， 李斐菲， 李曉靜， 吳逸明， WU Yong-jun， SHI Jie， QU Ling-bo ， LI Fei-fei， LI Xiao-jing， WU Yi-ming吳擁軍,吳逸明,WU Yong-jun,WU Yi-ming(鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,河南,鄭州,450052

13、， 石杰,屈凌波,李斐菲,李曉靜,SHI Jie,QU Ling-bo,LI Fei-fei,LI Xiao-jing(鄭州大學(xué)化學(xué)系,河南,鄭州,450052光譜學(xué)與光譜分析SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS2006,26(912次刊名：英文刊名：年，卷(期：被引用次數(shù)：參考文獻(xiàn)(4條1. 趙保路 氧自由基和天然抗氧化劑 19992. 吳擁軍. 劉潔. 吳予明 查看詳情期刊論文-光譜學(xué)與光譜分析 2005(123. 馮昭明. 肖柳英. 張丹 查看詳情 1999(054. 石杰. 吳擁軍. 屈凌波 查看詳情期刊論文-鄭州大學(xué)學(xué)報（理學(xué)版） 2003(03引證文

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