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1、名詞解釋:1蛋白質(zhì)的一級(jí)、二級(jí)結(jié)構(gòu)P87、89蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序,也稱化學(xué)結(jié) 構(gòu);蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)是指多肽主鏈骨架有規(guī)則的盤曲折疊形成的構(gòu)象,不涉及 側(cè)鏈基團(tuán)的空間排布。2蛋白質(zhì)的變(別)構(gòu)效應(yīng)別構(gòu)效應(yīng)又稱為變構(gòu)效應(yīng),是寡聚蛋白與 配基結(jié)合改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象,導(dǎo)I 致蛋白質(zhì)生物活性改變的現(xiàn)象。 別構(gòu)效應(yīng)(allosteric effect )某種不直接涉及 蛋白質(zhì)活性的物質(zhì),結(jié)合于蛋白質(zhì) 活性部位以外的其他部位(別構(gòu)部位),引起 蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象變化,而導(dǎo)致蛋白質(zhì)活性改變的現(xiàn)象。(底物或效應(yīng)物和酶分子上的相應(yīng)部位結(jié)合后,會(huì)引起酶分子構(gòu)象改變從而影響酶的催化活性的效
2、應(yīng)。)3等電點(diǎn) P102對(duì)某一蛋白質(zhì)來說,在某一 PH溶液中,它所帶的正電荷與負(fù)電荷數(shù)恰好相 等,即凈電荷為0時(shí),在電場中它既不向陽極也不向陰極移動(dòng),這時(shí)溶液的PH就稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(pl)4酶的活性中心 P153通過肽鏈的折疊、螺旋或纏繞形成了多種活性空間一一酶的活性部位(或 稱活性中心5. 酶的比活力P163比活力是指每毫克酶蛋白所含的酶活力單位數(shù),即比活力=活力單位數(shù)/每毫克酶蛋白6. 核酸的增色效應(yīng)核酸的光吸收值比各核苷酸光吸收值的和少30-40%,當(dāng)核酸變性或降解時(shí)光吸收值顯著增加。(將DNA的稀鹽溶液加熱到80100C時(shí),雙螺旋結(jié)構(gòu)解體, 兩條鏈分開形成單鏈,由于雙螺旋分子內(nèi)部的
3、堿基暴露,260nm紫外吸收值升咼的現(xiàn)象。)7. 核酸的變復(fù)性 P133-134核酸的變性指DNA分子中的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈為無規(guī)則線性結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象。 變性DNA在適當(dāng)條件下,又可使兩條彼此分開的鏈重新締合稱為雙螺旋結(jié) 構(gòu),此過程稱復(fù)性。8. 生物氧化P175有機(jī)物質(zhì)在生物體內(nèi)的氧化作用(伴隨著還原作用)統(tǒng)稱為生物氧化。9. 呼吸鏈P177一系列具有氧化還原特性的酶與輔酶作為氫和電子的傳遞體。遞氫體和遞電子體按一定順序排列在線粒體內(nèi)膜上所形成的連鎖氧化還原體系稱為電子傳 遞鏈。由于其與細(xì)胞攝取氧的呼吸過程有關(guān),通常又稱為呼吸鏈。10. 氧化磷酸化 P182氧化磷酸化是指伴隨著代謝物的脫氫以及氫和電子
4、在呼吸鏈上傳遞最后交 給氧生成水的氧化途徑,所釋放的能量使 ADP磷酸化形成ATP的過程。11. 底物水平磷酸化 P182底物由于脫氫、脫水等作用,使分子重排,分子內(nèi)部能量重新分布而形成 的高能磷酸鍵(或高能硫酯鍵)直接將能量轉(zhuǎn)移給 ADP(或GDP形成ATP(或 GTF)的過程。12. 脂肪酸的3氧化P221-223B氧化過程:(1)脫氫反應(yīng)(2)水化反應(yīng)(3)再脫氫反應(yīng)(4)硫解反應(yīng) 糖酵解途徑P200糖酵解是一切有機(jī)體中普遍存在的葡萄糖降解途徑,也是葡萄糖分解代謝 的共同途徑,也稱EMP途徑。糖酵解是在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行的,不論有無氧氣均可 發(fā)生。13. 三羧酸循環(huán)P202三羧酸循環(huán)可分為3個(gè)
5、階段:第一階段為乙酰CoA和草酰乙酸生成六碳三 羧酸階段;第二階段為連續(xù)兩步氧化、脫羧生成四碳二羧酸階段;第三階段為 草酰乙酸的再生階段。14. 糖異生 P207,208由非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化成糖(由丙酮酸轉(zhuǎn)化為葡萄糖)15. 半保留復(fù)制P270由1條母代DNA鏈和1條子代DNA鏈配對(duì)產(chǎn)生子代雙螺旋 DNA。16. 岡崎片段P274在E.coli DNA復(fù)制中,前導(dǎo)鏈的連續(xù)合成比較簡單,而滯后鏈的不連續(xù)合成 較復(fù)雜。滯后鏈合成分段進(jìn)行,需要合成若干 RNA引物,DNA聚合酶川可以 在引物的3'端開始合成DNA,這樣產(chǎn)生的片段含有RNA約15個(gè)核苷酸)和DNA, 被稱為岡崎片段。(由DNA聚合酶
6、I切除小片段上的 RNA引物,填補(bǔ)片段之間的空缺,最后由連接酶把它們連接成一條完整的子代鏈,由子代鏈合成的 這些較小的DNA片段。)17. 中心法則是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再從RNA傳遞給蛋白質(zhì),即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。也可以從DNA傳遞給DNA,即完成DNA的復(fù)制過程。這是所有有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物所遵循的法則。在某些病毒中的RNA自我復(fù)制(如煙草花葉病毒等)和在某些病毒中能以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄成DNA的過程(某些致癌病毒)是對(duì)中心法則的補(bǔ)充簡答題:1. 生物化學(xué)的發(fā)展分哪三個(gè)階段?簡述每個(gè)階段的主要內(nèi)容。靜態(tài)生物化學(xué)時(shí)期(1920年以前)研究內(nèi)容以分析生物體內(nèi)物質(zhì)的化學(xué) 組成
7、、性質(zhì)和含量為主;動(dòng)態(tài)生物化學(xué)時(shí)期(1950年以前)這是一個(gè)飛速發(fā) 展的輝煌時(shí)期;機(jī)能生物化學(xué)時(shí)期(1950年以后)真正意義上的現(xiàn)代的生命 化學(xué),蛋白質(zhì)化學(xué)和和核酸化學(xué)成為研究重點(diǎn)。2. 簡述米氏常數(shù)(Km)的意義Km等于酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度,即當(dāng)V=Vm/2時(shí),S=Km單位為mol/L。Km值是酶的特征常數(shù),它只與酶的性質(zhì)有關(guān),而與酶 的濃度無關(guān)。Km值反映酶與底物親和力的大小。Km指小,表明酶與底物的親 和力大,酶促反應(yīng)易于進(jìn)行。 Km指作為常數(shù)只是對(duì)固定的底物、一定的 pH 指、一定的溫度條件而言的。3. 什么是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)?蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與其生物功能有何關(guān)系
8、?蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)具體包括:一級(jí)結(jié)構(gòu):組成蛋白質(zhì)多肽鏈的線性氨基酸序列。二級(jí)結(jié)構(gòu):依靠不同氨基酸之間的C=O和N-H基團(tuán)間的氫鍵形成的穩(wěn)定 結(jié)構(gòu),主要為a螺旋和B折疊。三級(jí)結(jié)構(gòu):通過多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)元素在三維空間的排列所形成的一個(gè)蛋白 質(zhì)分子的三維結(jié)構(gòu)。四級(jí)結(jié)構(gòu):用于描述由不同多肽鏈(亞基)間相互作用形成具有功能的 蛋白質(zhì)復(fù)合物分子。蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定高級(jí)結(jié)構(gòu),高級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)功能。(例:RNASE是一種水解RNA的酶,由124個(gè)氨基酸殘基組成的單肽鏈蛋白質(zhì),其中含有4個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵。整個(gè)分子折疊成球形的天然構(gòu)象。高濃度脲會(huì)破壞肽鏈中的次級(jí)鍵。巰基乙醇可還原二硫鍵。因此用脲和巰基乙醇處理RNa
9、Se;蛋白質(zhì)三維構(gòu)象破壞,肽鏈去折疊成松散肽鏈,活性喪失。淡一級(jí)結(jié)構(gòu)并未變化。除去脲和巰基乙醇,并經(jīng)氧化形成二硫鍵。 RNaSe重新折疊,活性逐漸恢復(fù)。由此看來,在一級(jí)結(jié)構(gòu)未改變的狀況下,其生物功能仍舊 發(fā)生變化,說明是蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)的功能。(1)一級(jí)結(jié)構(gòu)的變異與分子病蛋白質(zhì)中的氨基酸序列與生物功能密切相關(guān),一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化往往導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物 功能的變化。如鐮刀型細(xì)胞貧血癥, 其病因是血紅蛋白基因中的一個(gè)核苷酸的突變導(dǎo)致該蛋 白分子中3 -鏈第6位谷氨酸被纈氨酸取代。這個(gè)一級(jí)結(jié)構(gòu)上的細(xì)微差別使患者的血紅蛋白 分子容易發(fā)生凝聚, 導(dǎo)致紅細(xì)胞變成鐮刀狀, 容易破裂引起貧血, 即血紅蛋白
10、的功能發(fā)生了 變化。(2 )一級(jí)結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化同源蛋白質(zhì)中有許多位置的氨基酸是相同的,而其它氨基酸差異較大。如比較不同生物的細(xì)胞色素C的一級(jí)結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)與人類親緣關(guān)系接近,其氨基酸組成的差異越小,親緣關(guān)系越遠(yuǎn)差異越大)4. 蛋白質(zhì)的a螺旋結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?(1) 多肽鏈主鏈繞中心軸旋轉(zhuǎn),形成棒狀螺旋結(jié)構(gòu),每個(gè)螺旋含有3.6個(gè)氨基 酸殘基,螺距為0.54nm,氨基酸之間的軸心距為0.15nm。(2) 每一個(gè)書角等于-57°,每一個(gè)W角等于-47°NH與前面第4個(gè)(3) a -螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主要靠鏈內(nèi)氫鍵,每個(gè)氨基酸的 氨基酸的C=O形成氫鍵。a-碳原子相連的R基團(tuán)側(cè)鏈位于a -螺旋
11、的外側(cè)。天然蛋白質(zhì)的a -螺旋結(jié)構(gòu)大都為右手螺旋。5. 什么是蛋白質(zhì)的變性作用和復(fù)性作用?蛋白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變?某些物理或化學(xué)因素的作用可以破壞蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵,從而破壞蛋 白質(zhì)的螺旋或折疊狀態(tài),使其構(gòu)象發(fā)生變化,引起蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)改變和生物 功能喪失,這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)變性。變性的蛋白質(zhì)分子恢復(fù)其天然形式的現(xiàn)象稱之為復(fù)性。蛋白質(zhì)變性后,二級(jí)、三級(jí)以上的高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或破壞,但共價(jià)鍵不 變,一級(jí)結(jié)構(gòu)沒有破壞。變性蛋白質(zhì)與天然蛋白質(zhì)最明顯的區(qū)別是生物活性喪失, 如酶失去催化能力、血紅蛋白失去運(yùn)輸氧的功能、 抗體蛋白失去免疫作用等。此 外還表現(xiàn)出各種理化性質(zhì)的改變,如結(jié)晶能力喪失
12、、溶解度降低、分子不對(duì)稱性 及黏度增加、容易被蛋白水解酶水解等。6. 什么是必需氨基酸和非必需氨基酸?根據(jù)生物體的需要可將氨基酸分為必需氨基酸、半必需氨基酸和非必需氨 基酸三類。必需氨基酸:指人體內(nèi)不能合成,或合成速度不能滿足機(jī)體需要,必須從膳食中攝入的氨基酸,有8種,分別是Thr、Vak Leu、lie、Lys Trp、Phe Met。非必需氨基酸:人體能夠自身合成或由其他氨基酸轉(zhuǎn)化而來的氨基酸。7寫出三種常見的分離純化蛋白質(zhì)的方法及其原理?常見的分離提純蛋白質(zhì)的方法有: 1鹽析與有機(jī)溶劑沉淀:在蛋白質(zhì)溶液 中加入大量中性鹽,以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì),使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出,稱為 鹽析.常用
13、的中性鹽有:硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等鹽析時(shí),溶液的pH在蛋白質(zhì) 的等電點(diǎn)處效果最好凡能與水以任意比例混合的有機(jī)溶劑,如乙醇、甲醇、丙酮 等,均可引起蛋白質(zhì)沉淀.2、電泳法:蛋白質(zhì)分子在高于或低于其 pI的溶液中帶 凈的負(fù)或正電荷,因此在電場中可以移動(dòng)電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質(zhì)分 子所帶電荷量以及分子大小.3、透析法:利用透析袋膜的超濾性質(zhì),可將大分子物 質(zhì)與小分子物質(zhì)分離開.4、層析法:利用混合物中各組分理化性質(zhì)的差異,在相互 接觸的兩相(固定相與流動(dòng)相)之間的分布不同而進(jìn)行分離主要有離子交換層析,凝膠層析,吸附層析及親和層析等,其中凝膠層析可用于測定蛋白質(zhì)的分子量.5、 分子篩:又稱凝
14、膠過濾法,蛋白質(zhì)溶液加于柱之頂部,任其往下滲漏,小分子蛋白質(zhì) 進(jìn)入孔內(nèi),因而在柱中滯留時(shí)間較長,大分子蛋白質(zhì)不能進(jìn)入孔內(nèi)而徑直流出,因 此不同大小的蛋白質(zhì)得以分離.6、超速離心:利用物質(zhì)密度的不同,經(jīng)超速離心后, 分布于不同的液層而分離超速離心也可用來測定蛋白質(zhì)的分子量,蛋白質(zhì)的分子 量與其沉降系數(shù)S成正比.8. 什么是尿素循環(huán),有何生物學(xué)意義?尿素循環(huán):又稱為鳥氨酸循環(huán),肝臟中2分子氨(1分子氨是游離的,1分子 氨來自天冬氨酸)和1分子C02生成1分子尿素的環(huán)式代謝途徑.尿素循環(huán)是第 一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的環(huán)式代謝途徑生物學(xué)意義:(1) 尿素循環(huán)不僅將氨和C02合成為尿素,而且生成一分子延胡索酸,使尿
15、素循 環(huán)與檸檬酸循環(huán)聯(lián)系起來(2)肝臟中尿素的合成是除去氨毒害作用的主要途徑,尿素循環(huán)的任何一個(gè)步驟出問題都有可能產(chǎn)生疾病 如果完全缺乏尿素循環(huán) 中的某一個(gè)酶,嬰兒在出生不久就昏迷或死亡;如果是部分缺乏,引起智力發(fā)育遲滯、嗜睡和經(jīng)常嘔吐.在臨床實(shí)踐中,常通過減少蛋白質(zhì)攝入量使輕微的高氨血遺 傳性疾病患者癥狀緩解,原因就是減少了游離氨的來源( 3)植物體內(nèi)也存在尿素循環(huán),但轉(zhuǎn)運(yùn)活性低,其意義在于合成精氨酸.個(gè)別植物也可產(chǎn)生尿素,在脲酶 作用下分解產(chǎn)生氨,用以合成其他含氮化合物,包括核酸、激素、葉綠體、血紅素、 胺、生物堿等.9. 簡述糖的酵解途徑和糖異生途徑的不同點(diǎn)。糖酵解(1)葡萄糖(Gluc
16、ose)磷酸化形成6磷酸葡萄糖-G6P(2) 6磷酸果糖磷酸化形成1,6 磷酸果糖-FBP(3) 磷酸烯醇式丙酮酸將磷?;D(zhuǎn)移給 ADP形成ATP和丙酮酸糖異生(1)丙酮酸草酰乙酸磷酸烯醇式丙酮酸,丙酮酸羧化酶和磷酸烯 醇式丙酮酸羧激酶催化(2) 1,6-二磷酸果糖6-磷酸果糖,果糖二磷酸酶催化(3) 6-磷酸葡萄糖葡萄糖,葡萄糖6磷酸酶催化10. 為什么說轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)在氨基酸合成和降解過程中都起重要作用(1) 在氨基酸合成過程中,轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)是非必需氨基酸合成的主要方式,許 多氨基酸的合成可以通過轉(zhuǎn)氨酶的催化作用,接受來自谷氨酸的氨基而形成。(2) 在氨基酸的分解過程中,氨基酸也可以先經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作
17、用把氨基酸上的氨 基轉(zhuǎn)移到a -酮戊二酸上形成谷氨酸,谷氨酸在谷氨酸脫羥酶的作用上脫去氨基。11. 比較脂肪酸氧化和合成的差異氧化在線粒體,合成在胞液;氧化的?;d體是輔酶A,合成的?;d體是?;d體蛋白;氧化是FAD和NAD+,合成是NADPH氧化是L型,合成是D 型。氧化不需要CO2合成需要C02;氧化為高ADP水平,合成為高ATP水平。 氧化是羧基端向甲基端,合成是甲基端向羧基端;脂肪酸合成酶系為多酶復(fù)合體, 而不是氧化酶。12. 簡述分子雜交的原理與應(yīng)用。原理:應(yīng)用:酵母雙雜交技術(shù)13. DNA熱變性有何特點(diǎn)? Tm值表示什么?將DNA的稀鹽溶液加熱到70100C幾分鐘后,雙螺旋結(jié)構(gòu)即
18、發(fā)生破壞, 氫鍵斷裂,兩條鏈彼此分開,形成無規(guī)則線團(tuán)狀,此過程為DNA的熱變性,有以下特點(diǎn):變性溫度范圍很窄,260nm處的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性 喪失;比旋度下降;酸堿滴定曲線改變。Tm值代表核酸的變性溫度(熔解溫度、 熔點(diǎn))。在數(shù)值上等于DNA變性時(shí)摩爾磷消光值(紫外吸收)達(dá)到最大變化值半 數(shù)時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度。計(jì)算 Tm (G +C % = (Tm- 69.3)X 2.44 %14. 為什么說TCA循環(huán)是聯(lián)系糖代謝、脂代謝和氨基酸代謝的樞紐?在人體內(nèi)糖的主要形式是葡萄糖及糖原。葡萄糖是糖在血液中的運(yùn)輸形式, 在機(jī)體糖代謝中占據(jù)主要地位;而糖原是葡萄糖的多聚體,包括肝糖原、肌糖原 和腎糖原等,是糖在體內(nèi)的儲(chǔ)存形式。葡萄糖與糖原都能在體內(nèi)氧化提供能量。 機(jī)體內(nèi)糖的代謝途徑主要有葡萄糖的無氧酵解、有氧氧化、磷酸戊糖途徑、糖原合成與糖原分解、糖異生以及其他己糖代謝等。糖代謝之所以說是其他代謝的樞紐,原因是丙酮酸和葡糖糖-6-磷酸(后面簡稱PA和G-6-P)這個(gè)關(guān)鍵分支點(diǎn):(1) G-6-P可轉(zhuǎn)化為葡萄糖(雙向)或參與磷酸戊糖途徑
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