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1、實驗二. 分離以尿素為氮源的微生物1(2009學年杭州二中高三年級第4次自選模塊練習)從自然菌樣中篩選較理想生產菌種的一般步驟是:采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應從 環(huán)境采集。(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件,使其在群落中的數量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇以 的培養(yǎng)基,并在 條件下培養(yǎng)。(3)下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,請分析接種的具體方法。獲得圖A效果
2、的接種方法是 ,獲得圖B效果的接種方法是 。(4)在對大腸桿菌進行數量測定的實驗中,在某一稀釋倍數下,得到以下幾種統(tǒng)計結果,與事實更加接近可信的是。A一個平板,統(tǒng)計的菌落數是23 B兩個平板,統(tǒng)計的菌落數是22和26,取平均值24C三個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是21、5和52,取平均值26D四個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是21、30、24和25,取平均值25用這種方法測定密度,實際活菌數量要比測得的數量 (多、少),因為_ _。(5)配制培養(yǎng)基時各種成分在熔化后分裝前必須進行 ,接種前要進行 。2 (2010全國高考,34)下列是與微生物培養(yǎng)有關的問題,請回答:(1)某細菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH
3、2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是_,碳源是_,氮源是_。已知只有能合成脲酶的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長,故該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。按照化學成分分類,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類型上看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于_。(2)將少量細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng),定時取樣測定菌體數目,以時間為橫坐標,以細菌數目的對數為縱坐標,可得到細菌的_曲線。該曲線中以菌體數目的對數作為縱坐標的原因是 _。實驗室中,為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體,一般應在_期取材;在生產中,常搜集培養(yǎng)至_期的細菌用于次級代謝產物的提取。3尿素是一種高濃度氮肥且長期
4、施用沒有不良影響,但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后,才能被植物吸收利用。分解尿素的細菌都能合成脲酶,脲酶能催化尿素水解。某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌,并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目,培養(yǎng)基配方如下:KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根據培養(yǎng)基的成分判斷,該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌?_(能/不能),原因是_。(2)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目,宜采用_法接種,根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積,統(tǒng)計平板上的_就能大約推測出樣品中活菌數。(3)初步分離脲酶通常用_
5、法,如下圖,試管中收集到的液體最先出現的是_。鑒定分離出的脲酶純化程度,一般采用_法。(4)該同學設想:由活性脲酶和尿素混合,制成“加酶尿素”,尿素肥效一定更高。為了提高“加酶尿素”中脲酶的利用率,應當采用 技術。4用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數,在對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中得到以下幾種統(tǒng)計結果,正確的是( ) A涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數是230 B涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數是215和260,取平均值238 C涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是21、212和2墨6,取平均值163 D涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數分別是2l0、240和250,取平均值2335若要分離土壤中的
6、尿素分解菌,對于采集和處理土壤樣品,下列表述不正確的是A最好選擇在肥沃濕潤、動物排泄物多的土壤中取樣B采集的土樣需經高溫滅菌后,才可以用于制取土壤稀釋液C制備土壤稀釋液時,要用無菌水D用于制備土壤稀釋液的各種器具要經過滅菌6下列表述正確的是A只有細菌可以分解尿素 B在尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基上,只有一種微生物可以生長C土壤中尿素分解菌的存在有利于植物的N素營養(yǎng)D若要分離出土壤中能獨力固氮的微生物,可用尿素培養(yǎng)基7工作人員為了解某種細菌的發(fā)酵進程,連續(xù)取樣檢測培養(yǎng)液中的細菌數目。已知開始時細菌的數量約為2104個mL。工作人員在培養(yǎng)的不同時間進行4次連續(xù)取樣,分別進行如下稀釋處理,再分別取第一次
7、取樣稀釋103倍、第二次取樣稀釋105倍、第三次取樣稀釋106倍、第四次取樣稀釋106倍的菌液1mL,接種于裝有已滅菌的培養(yǎng)基的、號培養(yǎng)皿中培養(yǎng)48小時,檢查其菌落數目。菌液9mL水9mL水9mL水9mL水9mL水9mL水圖1對不同時間取樣的菌液分別進行稀釋(數據表示稀釋倍數)圖2對不同時間取樣的稀釋菌液進行培養(yǎng)得到如下結果:、培養(yǎng)皿中的菌落數分別是19個、25個、46個、47個。請根據以上資料回答下列問題: 接種細菌培養(yǎng)液于平板上的方法為_。四次取樣測得的培養(yǎng)液中實際的菌體數分別是每毫升_、_、_、_個。 用該種方法測得的細菌數量是(活或死)菌的數目,原因是_。1、參考答案:(1)海灘等高鹽 (2)淀粉為唯一碳源、高溫 (3)稀釋涂布法、平板劃線法(4)D、多、當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落(5)pH調整、高壓蒸汽滅菌2(1)瓊脂葡萄糖尿素選擇合成異養(yǎng)型(2)群體生長培養(yǎng)的細菌以指數形式增殖,取對數便于反映細菌群體的生長規(guī)律 對數穩(wěn)定3(1)不能培養(yǎng)基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能選擇出只以尿素為氮
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