AM-03-ZL-03(V1.0)工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)程

1、深圳上泰生物工程有限公司工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)范AM-03-ZL-03（V1.0）修改頁版本修訂文號修改內(nèi)容概述修訂人生效日期V1.0新增1目的32適用范圍33 術(shù)語34 參考法規(guī)、標準 35職責36內(nèi)容37相關(guān)文件和記錄 5創(chuàng)新生物科技改善人類健康第#頁，共5頁深圳上泰生物工程有限公司工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)范AM-03-ZL-03（V1.0）工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)程1目的1.1規(guī)范體外診斷試劑用純化水微生物限度檢查的操作。2適用范圍2.1適用于本公司體外診斷試劑用純化水的微生物限度檢查。3術(shù)語3.1無4參考法規(guī)、標準4.1中華人民共和國藥典（2010版二部）附錄

2、XJ微生物限度檢查法。5職責5.1質(zhì)量部QC負責本規(guī)程的實施。6內(nèi)容6.1微生物限度檢查環(huán)境要求6.1.1微生物限度檢查的的操作應(yīng)在潔凈度為10000級局部100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行，檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。6.1.2微生物限度檢查室應(yīng)保持潔凈，單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期監(jiān)測潔凈度 并應(yīng)符合規(guī)定要求。6.2微生物限度檢查用培養(yǎng)基及配制6.2.1細菌檢查培養(yǎng)用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，霉菌和酵母菌檢查培養(yǎng)用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。6.2.2按配方采購各組份自行配制培養(yǎng)基應(yīng)進行培養(yǎng)基靈敏性試驗，采購市售已配制好的培養(yǎng)基粉，可向生產(chǎn)廠商索取包含有培養(yǎng)基靈敏性試驗的檢測合格報告。6

3、.2.3微生物限度檢查用培養(yǎng)基配制執(zhí)行培養(yǎng)基配制標準操作規(guī)程。6.3檢查方法：采用薄膜過濾法，過濾用濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45u m直徑應(yīng)為50mm材質(zhì)為混合膜。6.4微生物限度檢查前的準備6.4.1每次操作前，操作人員應(yīng)用消毒液擦拭操作臺、設(shè)備、儀器及其它與無菌操作有關(guān)的 設(shè)備、器具，開啟紫外燈或潔凈工作臺層流罩30分鐘后，關(guān)閉紫外燈。6.4.2微生物限度檢查所用取樣瓶、薄膜過濾器及其濾膜、培養(yǎng)瓶、移液管等用具均應(yīng)用牛 皮紙或紗布包裹好，經(jīng)121C高壓滅菌20min（濕熱蒸汽滅菌）。配制培養(yǎng)基的滅菌，按市售培養(yǎng) 基粉規(guī)定的滅菌參數(shù)執(zhí)行。創(chuàng)新生物科技改善人類健康第3頁，共5頁深圳上泰生物工程有限

4、公司工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)范AM-03-ZL-03（V1.0）643取樣：取樣點位置按生產(chǎn)工藝用水管理制度執(zhí)行，每一監(jiān)測點取樣量為150mlX2瓶。644通過傳遞窗將待檢樣品、微生物限度檢查用培養(yǎng)基、已滅菌薄膜過濾器、濾膜以及其 它工具傳入微生物限度檢查操作室。6.5微生物限度檢查操作6.5.1核對檢品及取樣點名稱、批號、封口情況、液體外觀等無異常。6.5.2將濾膜裝入薄膜過濾器內(nèi)，薄膜過濾器與真空泵連接好，檢查裝置完好無松動。6.5.3如需過濾前應(yīng)用少量 0.9%氯化鈉沖洗液過濾以潤濕濾膜，使用時應(yīng)保證濾膜在過濾 前后的完整性，為發(fā)揮濾膜的最大過渡效率，應(yīng)注意保持待檢樣品溶液及沖洗

5、液覆蓋整個濾膜 表面。6.5.4取5ml待檢樣品直接過濾，過濾后如需沖洗可用PH7.0無菌氯化鈉一蛋白胨溶液或其 它適宜沖洗液如0.9%無菌生理鹽水適量沖洗濾膜，每張濾膜每次沖冼量一般為100m 1沖冼次數(shù)不少于3次，且總沖洗量不得超過1000m1以避免濾膜上的微生物受到損傷。6.5.5過濾完畢，取出濾膜，濾面朝上貼于培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，每種培養(yǎng)基至少制備一張濾 膜。6.5.6如待檢樣品每1m1含菌量較多時，可取待檢樣品1ml加PH7.0無菌氯化鈉蛋白胨溶液 或其它適宜沖洗液如0.9%無菌生理鹽水稀釋至適宜稀釋級混勻，然后取相當于每張濾膜含Iml待檢樣品的稀釋級供試液進行試驗。6.5.7陰性對照

6、試驗：取試驗用的沖洗液 5m1,照待檢樣品試驗的同樣方法濾膜過濾操作， 作為陰性對照，陰性對照不得有菌生長。6.6如若未使用沖洗液，直接取空白濾膜貼于培養(yǎng)基平板上，作為陰性對照，陰性對照不得 有菌生長。6.6.1試驗完畢，關(guān)閉層流罩或超凈工作臺，清潔臺面及操作室環(huán)境。6.7培養(yǎng)和計數(shù)6.8營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在35C 2C培養(yǎng)3天，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)在 25C 2C培養(yǎng)5天。逐 日觀察菌落生長情況；點計菌落數(shù)。6.9均數(shù)報告規(guī)則6.10以相當于1ml待檢樣品的菌落數(shù)報告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以1報告菌數(shù)(每張濾膜過濾1ml待檢樣品)，或1乘以最低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。6.11結(jié)果判定6.12依據(jù)工藝用水質(zhì)量標準和檢驗規(guī)程中標準判定。創(chuàng)新生物科技改善人類健康第5頁，共5頁深圳上泰生物工程有限公司工藝用水微生物限度檢查標準操作規(guī)范AM-03-ZL-03(V1.0)7相關(guān)文件和記錄7.1相關(guān)文件AM-03-ZL-12培養(yǎng)基配制標