高二生物選修3課件222動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體備課講稿

1、高二生物選修3課件222動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體一、動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）2、概念：、概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。的過(guò)程。3、結(jié)果：、結(jié)果：形成單核的雜交細(xì)胞形成單核的雜交細(xì)胞4、原理：、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性5、誘導(dǎo)方式、誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒生物法：滅活的病毒動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程：過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞A A動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞B B誘導(dǎo)，融合誘導(dǎo)，融合篩選篩選雜交細(xì)雜交細(xì)胞胞ABAB有絲分裂有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合、（

2、膜融合、質(zhì)融合、核融合核融合）注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞讓它們隨機(jī)融合后，再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞7、意義：、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交 （種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。8 8、應(yīng)用：、應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段新品種培育等的重要手段 特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技

3、術(shù)，為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。1 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？2、抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？、抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞每個(gè)每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體細(xì)胞只分泌一種特異性抗體要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群設(shè)計(jì)方案：設(shè)計(jì)方案：一種一種B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能在體外大量增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能在體外大量增殖雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞二二. .單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備1

4、1、注射抗原的目的是什么、注射抗原的目的是什么2 2、誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？、誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？3 3、融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞、融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞4 4、第一次篩選的方法和目的、第一次篩選的方法和目的5 5、第二次篩選的方法和目的、第二次篩選的方法和目的6 6、雜交瘤細(xì)胞獲得單一抗的方法、雜交瘤細(xì)胞獲得單一抗的方法1、原理：、原理：雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本的特性，即能雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本的特性，即能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。2、過(guò)程B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)誘導(dǎo)融合融合B-B細(xì)胞細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞瘤瘤-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞選擇

5、培養(yǎng)選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞（ B-瘤細(xì)胞）瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)專一抗體檢測(cè)專一抗體檢測(cè)能產(chǎn)生特異能產(chǎn)生特異性抗體的雜性抗體的雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體單克隆抗體3.單克隆抗體的應(yīng)用：?jiǎn)慰寺】贵w的優(yōu)點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大 作為診斷試劑作為診斷試劑：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合 優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速用于用于運(yùn)載藥物：制成運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療治療疾病：主要用于癌癥治療既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。 除通過(guò)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體

6、外，除通過(guò)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體外，還有什么方法？還有什么方法？1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的淋巴細(xì)胞A3.3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.B.所用的技術(shù)手段基本相所用的技術(shù)手段基本相同同 C. C. 所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D. D. 都能形成雜種細(xì)都能形成雜種細(xì)胞胞 D4. 單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是-A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 C.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D.由小鼠一個(gè)由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 D(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞的差別：無(wú)細(xì)胞壁全能性受限制，不能發(fā)育成雜種動(dòng)