參黃頸康片鎮(zhèn)痛抗炎作用及對(duì)炎癥因子影響研究

1、參黃頸康片鎮(zhèn)痛抗炎作用及對(duì)炎癥因子影響研究劉新宇 1, 劉春娜 2*, 張曉妍 1, 楊 菁 2(1遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 , 遼寧 錦州 121001; 2遼寧醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室 , 遼寧 錦州 121001收稿日期 :2010-10-16基金項(xiàng)目 :遼寧省教育廳創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目 (LT2010065 ; 遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目 (20102139作者簡(jiǎn)介 :劉新宇 (1976 , 男 , 主治醫(yī)師 , 碩士學(xué)位 , 研究方向 :藥理學(xué)及新藥開發(fā) 。 Tel :(0416 4197208*通信作者 :劉春娜 (1977 , 女 , 副教授 , 博士學(xué)位 , 主要從事中藥藥理工作 。 E-mail

2、 :springnanatomcom 摘要 :目的 該實(shí)驗(yàn)通過觀察受試抗頸椎病藥物 (參黃頸康片 對(duì)抗炎 、 消腫 、 鎮(zhèn)痛的藥效學(xué)作用 , 探討參黃頸康片的藥理作用及相關(guān)機(jī)制 。 方法該實(shí)驗(yàn)采用小鼠耳廓腫脹模型 、 大鼠肉芽腫模型 、 大鼠足跖腫脹動(dòng)物模型 , 觀察給予不同劑量參黃頸康片 (小鼠為 600、 1200、 2400mg /kg; 大鼠為 500、 1000、 2000mg /kg 的抗炎 、 消腫的藥理作用 , 另外選擇物理 及化學(xué)法 , 進(jìn)一步研究參黃頸康片的鎮(zhèn)痛作用 , 同時(shí)應(yīng)用大鼠肉芽腫模型 , 測(cè)定血清中白介素 -6(IL-1 及腫瘤壞死因子 -(TNF- 的水平 。

3、結(jié)果參黃頸康片能明顯降低小鼠耳廓腫脹的腫脹率 、 大鼠肉芽腫的質(zhì)量 、 足跖腫脹程度 , 能提高小鼠痛閾值及降低其扭體反射 , 并能降低大鼠肉芽腫模型中炎癥介質(zhì)的表達(dá) 。 結(jié)論 參黃頸康片通過抑制炎癥介質(zhì)表達(dá)有較好的抗炎 、鎮(zhèn)痛作用 。 關(guān)鍵詞 :腫瘤壞死因子 -; 白介素 -1; 足跖腫脹 ; 肉芽腫 中圖分類號(hào) :R2855文獻(xiàn)標(biāo)志碼 :B文章編號(hào) :1001-1528(2011 07-1223-03頸椎病是中老年常見的多發(fā)病 , 該病有著椎間盤變性 、 髓核突出病變的個(gè)體 , 特別是髓核對(duì)機(jī)體組織的致炎反應(yīng)現(xiàn) 象 。 椎間盤周圍組織水腫 , 纖維蛋白沉積 , 大量的炎性細(xì)胞 浸潤(rùn) ,單核

4、細(xì)胞趨化蛋白 、 巨噬細(xì)胞炎性蛋白等化學(xué)激動(dòng)因 子存在過度表達(dá)現(xiàn)象 , 導(dǎo)致了在椎間盤局部形成了炎癥 、 增 生及腫脹1-3。 而頸椎病的治療目前沒有較好療效的藥物 。參黃頸康片是由丹參 、 黃芪 、 白術(shù) 、 姜黃 、 當(dāng)歸 、 煅牡蠣等中藥 組成的復(fù)方制劑 , 擬用于治療頸椎病 。 為進(jìn)一步闡明其療 效 , 本實(shí)驗(yàn)主要觀察給予不同劑量參黃頸康片對(duì)小鼠耳廓腫 脹模型 、 大鼠肉芽腫模型 、 大鼠足跖腫脹動(dòng)物模型的影響 , 觀 察其抗炎 、鎮(zhèn)痛的藥理作用 , 并對(duì)其機(jī)制進(jìn)一步研究 , 為臨床 治療頸椎病提供可靠的理論依據(jù) 4-5。1材料 11動(dòng)物取昆 明 種 小 白 鼠 160只 , 體 質(zhì)

5、量 18 22g 。Sprague-Dawley 大鼠 120只 , 體質(zhì)量 180 220g 。 動(dòng)物合格 證號(hào) :SCXK (遼 2003-0007。 12試驗(yàn)藥品參黃頸康片 (遼寧醫(yī)學(xué)院新藥研究所自制 ,為棕黃色粉末 ,035g /片 , 1g 相當(dāng)于應(yīng)用生藥 1429g ; 陽(yáng) 性對(duì)照藥品 :阿司匹林 (湖南新匯制藥有限公司提供 。 2方法21實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為 6組 , 組為空白對(duì)照組 ; 組為模型組 ; 組至 組分別為低 、 中 、 高劑量參黃頸 康片組 (小鼠為 600、1200、 2400mg /kg; 大鼠為 500、 1000、 2000mg /kg ; 組為陽(yáng)性藥物

6、對(duì)照組 , 灌胃給予阿司匹林 (100mg /kg 。 22測(cè)定項(xiàng)目221參黃頸康片對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響取健康小鼠 60只 , 每日灌胃給藥 1次 , 灌胃體積為 01mL /10g , 連續(xù)給藥 3d , 空白對(duì)照組灌胃等體積的生理鹽水 。 末次 給藥后 15h 將 30L 二甲苯涂于小鼠右耳廓前后兩面致 炎 (除空白對(duì)照組 ,左耳廓作為自身對(duì)照 。 致炎后 30min 將各組試驗(yàn)小鼠處死 , 用直徑 9mm 打孔器在相同的部位取 下左 、 右耳片 , 稱定質(zhì)量 , 計(jì)算左 、 右耳片質(zhì)量差為腫脹度或 抑制率 (% 。 222參黃頸康片對(duì)大鼠足跖腫脹的影響取健康雄性大鼠 60只 ,

7、 按 21項(xiàng)進(jìn)行分組 。 每日灌胃給藥 1次 , 體積 05mL , 連續(xù)給藥 3d , 空白對(duì)照組灌胃等體積的生理鹽水 。 末 次給藥 1h 后 ,各組試驗(yàn)動(dòng)物 (除空白對(duì)照組 右踝關(guān)節(jié)皮下 注射 10%雞蛋清 01mL , 致炎 , 分別用軟皮尺測(cè)量踝關(guān)節(jié)周 長(zhǎng) , 以給藥前 、 致炎后 1h 、2h 、 3h 踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)差值作為腫脹 度 。 223參黃頸康片對(duì)大鼠棉球肉芽腫及炎癥介質(zhì)的影響取雄性大鼠 60只 , 除空白對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外 , 其余 50只大 鼠用乙醚淺麻醉 , 無(wú)菌條件下 , 下腹正中切口 , 各鼠右側(cè)腹股 溝皮下各置入一無(wú)菌棉球 (30mg 。 術(shù)后隨機(jī)按 21項(xiàng)進(jìn)行 分

8、組 。 于手術(shù)當(dāng)天開始灌胃 ,連續(xù) 7d , 灌胃體積 05mL , 肉 芽腫模型組給等體積生理鹽水 , 第 8天處死動(dòng)物 , 解剖并剝離棉球 , 60 烘烤 12h 稱定質(zhì)量 , 計(jì)算肉芽質(zhì)量 (肉芽質(zhì)量 =帶肉芽組織的棉球質(zhì)量 棉球原始質(zhì)量 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 , 上述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 , 頸動(dòng)脈取血 2mL , 3000r /min, 離心 5min , 取 上清 , 用 ELISA 法測(cè)定血清白介素 -1(IL-1 及腫瘤壞死因 子 -(TNF- 。 224用熱板法觀察參黃頸康片的鎮(zhèn)痛作用采用 Woolf氏熱板法 。 于電熱恒溫水浴箱溫度保持在 (55 05 的3221范圍 。 將篩選后的小白鼠

9、50只稱定質(zhì)量 , 按 21項(xiàng)分組 , 測(cè) 每只小鼠的痛閾值一次 , 作為該鼠給藥前的痛閾值 。 各組試 驗(yàn)小鼠給藥前及給藥后 30min 各測(cè)定小白鼠痛閾值一次 。 痛閾提高百分率 =(用藥后痛閾值 用藥前痛閾值 /用藥 前痛閾值 %225用扭體法觀察抗頸椎病藥物參黃頸康片的鎮(zhèn)痛作用 取 50只小鼠稱定質(zhì)量后 , 按上述分組情況 , 灌胃給予不同 受試藥物 30min 后 , 腹腔注射 06%的醋酸 02mL /只 , 記錄 15min 內(nèi)各組 “ 扭體 ” 反應(yīng)陽(yáng)性的動(dòng)物數(shù) , 及 15min 內(nèi)出現(xiàn) “ 扭體反應(yīng) ” 的次數(shù) 。23數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 所有數(shù)據(jù)均以均數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)差 ( s 表示 。 兩

10、組平均值比較用非配對(duì) t 檢驗(yàn) 。 率的比較用四格表概率 法 。 P 005為有顯著性差異 , P 001為差異極顯著 。 3結(jié)果31參黃頸康片抗炎 、 消腫作用結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表 1, 2。 表明應(yīng)用不同劑量參黃頸康片 , 能明顯降低小耳廓腫脹度 、 減輕大鼠足跖腫脹 , 降低大鼠棉球肉芽腫質(zhì)量 , 與模型組相 比具有顯著性差異 (P 005 , 提示參黃頸康片有一定抗 炎 、 消腫作用 。不同劑量參黃頸康片受試藥物組與空白對(duì)照組相比 , 試 驗(yàn)動(dòng)物 15min 內(nèi)出現(xiàn)扭體反射的次數(shù)明顯減小 , 具有顯著 性差異 (P 005 。 另外 , 參黃頸康片能明顯提高小鼠痛閾 值 , 結(jié)果表明 ,

11、 參黃頸康片對(duì)化學(xué)法及物理法所致的疼痛有 較明顯的鎮(zhèn)痛作用 (見表 1 。表 1小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ( s , n =10組別 耳廓腫脹率/%肉芽腫質(zhì)量/mg痛閾提高百分率/%扭體反射 /(次 /15min 空白對(duì)照組 387 254*00040模型組 11491 19384643 6291291 4633960 603低劑量組 8967 2154*3514 567*1728 557*2190 591*中劑量組 5563 1379*2628 769*2856 402*1850 493*高劑量組 5315 1050*2853 884*3760 481*1631 576*陽(yáng)性對(duì)照組 5741 9

12、27*3068 611*2601 525*2082 485*注 :與模型組比較 , *P 005, *P 001。表 2大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ( s , n =10組別 0h /cm1h /cm2h /cm3h /cm空白對(duì)照組 213 021210 017*215 022*209 024*足跖腫脹模型組 216 017593 072504 081440 115低劑量組 211 023486 096*415 108*335 021*中劑量組 210 019441 069*361 053*317 044*高劑量組 211 018444 055*353 061*297 075*陽(yáng)性對(duì)照組 209

13、021421 032*386 057*308 041*注 :與足跖腫脹模型組比較 , *P 005, *P 001。32參黃頸康片對(duì)炎癥介質(zhì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表 3。 大鼠 肉芽腫模型組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中 IL-1及 TNF-明顯升高 , 而 應(yīng)用不同劑量參黃頸康片 , 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著下降 , 與模型 組相比 , 具有顯著性差異 (P 005 。 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示 , 參 黃頸康片能明顯降低血清中炎癥介質(zhì) IL-1及 TNF-的水 平 。表 3參黃頸康片對(duì)炎癥介質(zhì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ( s , n =10組別 IL-1/(ng /mL TNF-/(ng /mL 空白對(duì)照組 3174 0474*2179

14、0643*模型組 4607 06683973 0739低劑量組 3932 0623*2978 0696*中劑量組 3435 0608*2602 0515*高劑量組 3331 0512*2572 0463*陽(yáng)性對(duì)照組 4042 0489*3133 0691*與足跖腫脹模型組比較 , *P 005, *P 001。4討論頸椎病時(shí) , 大量促進(jìn)炎癥介質(zhì)釋放的細(xì)胞因子表達(dá)升 高 , 保護(hù)性細(xì)胞因子表達(dá)降低 , 炎癥介質(zhì)大量釋放 , 凋亡相關(guān) 蛋白表達(dá)異常 , 導(dǎo)致椎間盤不斷退變 , 進(jìn)而導(dǎo)致頸椎病的病 程發(fā)展 6。 本實(shí)驗(yàn)受試藥品 參黃頸康片是中藥復(fù)方制 劑 , 臨床擬用于治療頸椎病 。 其中 , 丹

15、參 、 黃芪能有效地改善 微循環(huán) , 糾正椎基底動(dòng)脈供血不足 , 抗脂質(zhì)氧化等作用 ; 白 術(shù) 、 姜黃具有抑菌 、 抗炎 、 鎮(zhèn)痛 、 抑制血小板聚集及血栓形成 、 改善血液流變學(xué) 、 增加腦血流量作用 ; 牡蠣有增強(qiáng)免疫力等 多種 功 效 。 這 些 藥 物 對(duì) 于 頸 椎 病 的 治 療 均 有 較 好 的 療 效 7-9。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 , 參黃頸康片對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫 脹 、 大鼠足腫脹及大鼠棉球肉芽腫 3種急 、 慢性試驗(yàn)性炎癥 均有非常顯著的抑制作用 。 另外 , 實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明 , 參黃頸 康片可顯著減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù) 、 增高痛閾值 , 有非 常顯著的抗炎 、 消腫

16、 、 鎮(zhèn)痛作用 。 可使頸椎病人的疼痛癥狀 緩解 , 從而使緊張或痙攣的肌肉松弛 , 以減輕肌肉對(duì)局部病 灶處的牽拉 , 有利于局部損傷病灶的修復(fù) 10-12。另外 , 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn) , 應(yīng)用不同劑量參黃頸康片能明顯降 低炎癥介質(zhì) IL-1及 TNF-。 提示參黃頸康片可能通過減少 炎癥介質(zhì)等產(chǎn)生 , 在頸椎病中發(fā)揮治療及保護(hù)作用 。綜上所述 , 參黃頸康片主要通過其抗炎 、 鎮(zhèn)痛 、 活血化瘀4221作用 , 來改善頸椎病人的多種癥狀 , 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與該藥消腫止 痛 、 活血通絡(luò)的功能亦相吻合 , 為該藥在臨床上治療頸椎病 癥提供了一定的理論依據(jù) 。 參考文獻(xiàn) :1丁文清 , 江怡珊 , 喬薇

17、頸痛靈膠囊對(duì)化學(xué) 、 物理方法致痛小鼠的鎮(zhèn) 痛 作 用 實(shí) 驗(yàn) 觀 察 J 上 海 中 醫(yī) 藥 雜 志 , 2003, 37(12 :37-382解硯英 , 牟艷玲 , 朱燕 , 等 頸舒膠囊抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究 J 中國(guó)新藥雜志 ,2005, 14(10 :1169-11723曾萬(wàn)玲 , 隋艷華 , 董學(xué)新 , 等 頸椎溫通膠囊對(duì)頸神經(jīng)根炎大鼠體感誘發(fā)電位 、 行為學(xué)及病理學(xué)影響的研究 J 中成藥 , 2009, 31(12 :1820-18214趙傳喜 , 吳淮 , 劉欣 , 等 丹參川芎嗪注射液治療椎動(dòng)脈型頸椎病的臨床研究 J 河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) , 2009, 24(7 :48-495

18、張愛平 , 許書亮 , 陳弘修 , 等 頸痛寧主要藥效學(xué)試驗(yàn)研究J 福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) , 2001, 11(3 :21-226劉新宇 , 劉春娜 , 武紅梅 , 等 參黃頸康片對(duì)頸椎病的防治作用及機(jī)制研究 J 中成藥 , 2010, 32(4 :554-5577周紅海 , 韋堅(jiān) , 陳耀宇 益氣化瘀補(bǔ)腎法對(duì)頸椎病模型動(dòng)物椎間盤炎癥介質(zhì)的影響 J 廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) , 2003, 6(1 :6-88吳茂文 中藥治療頸椎病的臨床概況 J 天津藥學(xué) , 2002, 14(6 :22-239邵文全 加味瓜蔞桂枝湯治療頸椎病實(shí)驗(yàn)觀察 J 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥 ,2007, 18(6 :1347-134810陳宏

19、賢 , 趙新梅 李俊岐 燈盞細(xì)辛注射液治療椎動(dòng)脈型頸椎病 29例 J 廣東醫(yī)學(xué) , 2008, 29(2 :325-32611鄒燕燕 頸痛湯合 -七葉皂甙鈉治療神經(jīng)根型頸椎病 40例療效觀察 J 河北中醫(yī) , 2009, 31(8 :1181-118212李寧 , 謝興文 脊髓型頸椎病動(dòng)物模型及其功能測(cè)定研究 進(jìn)展 J 中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志 , 2007, 15(2 :71-72紫檀芪對(duì)腦缺血 /再灌注損傷大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響胡向陽(yáng) 1, 舒曉春 1*, 馬 義 2(1中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院 , 廣東 珠海 519000; 2暨南大學(xué)生命科學(xué)院 , 廣東 廣州 510632收稿日期 :2010

20、-12-13基金項(xiàng)目 :廣東省中醫(yī)藥管理局科研基金 (A2010104作者簡(jiǎn)介 :胡向陽(yáng) (1975 , 男 , 博士 , 主治醫(yī)師 , 從事腦血管及神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究 。 Tel :(0756 2528851, E-mail :aikongzhi163com *通信作者 :舒曉春 (1965 , 男 , 副教授 , 從事中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌及代謝疾病的研究 。 Tel :(0756 2528622,E-mail :zhshuxc163com 摘要 :目的 觀察紫檀芪對(duì)腦缺血 /再灌注損傷大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響 。 方法 采用大鼠大腦中動(dòng)脈線栓法制備腦缺血 /再灌注模型 , 將 36只 SD 雄性

21、大鼠隨機(jī)分為 4組 :假手術(shù)組 、 缺血 /再灌注組 、 紫檀芪低劑量組 、 紫檀芪高劑量 。 檢 測(cè)各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的變化 。 結(jié)果 紫檀芪能降低腦缺血 /再灌注損傷大鼠全血黏度 、 血漿黏度 、 紅細(xì)胞壓積 , 提高紅細(xì)胞的應(yīng)激能力 。 結(jié)論 紫檀芪對(duì)腦缺血 /再灌注血液流變學(xué)變化具有改善作用 。 關(guān)鍵詞 :紫檀芪 ; 腦缺血 /再灌注損傷 ; 血液流變學(xué)中圖分類號(hào) :R2855文獻(xiàn)標(biāo)志碼 :B文章編號(hào) :1001-1528(2011 07-1225-03腦缺血 /再灌注損傷 (ischemia reperfusion injury , IRI 的 發(fā)生依賴于血管病變 、 血液成分和血液流變?nèi)齻€(gè)因素 , 是一 個(gè)系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng) ,包括能量障礙 、 炎性