植物病害標(biāo)本采集制作和鑒定

1、實(shí)訓(xùn)十、植物病害標(biāo)本采集、制作和鑒定一、目的要求通過(guò)采集和制作標(biāo)本，了解植物病害標(biāo)本采集要求，學(xué)會(huì)標(biāo)本的采集與記錄，掌握植物 病害標(biāo)本的制作方法，進(jìn)一步鞏固病害知識(shí)，每人抽簽完成1份病害標(biāo)本。二、材料和用具 標(biāo)本夾、吸水紙、塑料袋、紙袋、標(biāo)簽、鉛筆、記號(hào)筆、小刀、枝剪、 手鋸、標(biāo)本缸、酵酸銅、硫酸銅、95%乙醇、甲醛溶液、亞硫酸、甘油、蒸餡水等。三、內(nèi)容與方法（-）病害標(biāo)本的采集1標(biāo)本采集基本要求采集完整的標(biāo)本，最好是先攝影然后再壓制或浸漬保存，拍照越淸晰越好，要求拍正常 植株和病害部位。每號(hào)標(biāo)本，樣本數(shù)量應(yīng)至少采集2-3份。2取樣部位（1）標(biāo)本上有子實(shí)體的應(yīng)盡量在老葉上采集因?yàn)樗容^成熟，許

2、多真菌有性階段的子實(shí)體都在枯死的枝葉上出現(xiàn)，而無(wú)性階段子實(shí) 體大多在活體上可以找到。（2）柔軟多汁的子實(shí)體或果實(shí)材料，則應(yīng)采集新發(fā)病的幼果。（3）病毒病應(yīng)盡量采集頂梢與新葉。（4）線蟲(chóng)病害標(biāo)本應(yīng)采病變組織，為害根部的線蟲(chóng)病害標(biāo)本除采集病根外還應(yīng)采集根用上（5）表現(xiàn)焉萎的植株要連根挖出，有時(shí)還要連同根際的上壤等一同采集。（6）對(duì)于粗大的樹(shù)枝和植株，則宜削取一片或割取一截。（7）如果病害在葉、果實(shí)和枝干上都有表現(xiàn)時(shí)，盡疑采集全而。（8）寄生類(lèi)應(yīng)和寄主一起采集。病害癥狀很特殊病害，要連同植株的枝葉或花一起采集， 以便鑒、定其寄主名稱。3標(biāo)本數(shù)據(jù)記錄和標(biāo)本編號(hào)要求記錄準(zhǔn)確、簡(jiǎn)要、完整。完整的記錄與標(biāo)簽

3、同樣十分重要，要有寄主冬稱、采集日期與地點(diǎn)、采集者姓名、生態(tài)條件和土壤條件等。4標(biāo)本采集方法（1）枝于類(lèi)、根部病害標(biāo)本的采集取苴得病部位，用鋸、枝剪或髙枝剪采取，切勿用手折斷，影響標(biāo)本的美觀，對(duì)纖維長(zhǎng)而強(qiáng)韌的枝干等，尤應(yīng)注意。（2）葉部病害標(biāo)本的采集大型葉植物，它們的葉子和花序均很大，采集標(biāo)本時(shí)可采一部分或分段采集，以同株上幼小葉加上花果組成一份標(biāo)本（同時(shí)標(biāo)明葉實(shí)際大?。换虬讶~、葉柄各自分段取其一部分:對(duì)于像菟絲子、列當(dāng)這樣的寄生植物應(yīng)連同寄主一起采集，并記錄寄主的冬稱。（3）肉質(zhì)或多汁植物（花、果實(shí)）病害標(biāo)本的采集應(yīng)將艮縱切或橫切，有時(shí)需將其內(nèi)部的組織挖岀，還要考慮是否將一半的材料浸泡在保

4、 存液中保存。在野外干燥時(shí)，要在切開(kāi)的莖表面灑大量食鹽，用鹽包裹的材料應(yīng)宜于夾有多 層報(bào)紙的標(biāo)本夾中，24小時(shí)后要把浸有鹽水的報(bào)紙移去，或者用開(kāi)水將材料燙死，然后放 置在薄紙板一鋁板的三明治層中烘干。（二）病害標(biāo)本的制作從田間采回的標(biāo)本，除一部分用作分離鑒泄外，對(duì)于典型的病害癥狀最好是先攝影然后 再壓制或浸漬保存。壓制或浸漬的標(biāo)本盡可能保持其原有性狀，微小的標(biāo)本可以制成玻片， 如雙層玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。（三）病害標(biāo)本的保存1干燥法 適用于一般含水較少的莖、葉等病害標(biāo)本的制作，最簡(jiǎn)單、最經(jīng)濟(jì)、應(yīng)用最廣。將采集的標(biāo)本夾在吸水紙中，同時(shí)放入寫(xiě)有采集地點(diǎn)、日期和寄主爼稱的標(biāo)簽，再用標(biāo)

5、 本夾壓緊后日曬或加溫烘烤，使其干燥，干燥愈快愈能保持原有的色澤，標(biāo)本質(zhì)量亦愈高。 夏季采的標(biāo)本在溫濕度髙的情況下，容易發(fā)靈變色，換紙宜勒，通常在壓制的最初三、四天 每天換紙1一2次（視標(biāo)本含水多少，及溫濕度情況而左），以后每二、三天換一次，至完全 干燥為I匕。在第一次換紙的同時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本加以整理，因經(jīng)初步干燥，標(biāo)本變軟易于鋪展。 煙草、蠶豆、梨、馬鈴薯的莖葉等很易發(fā)黑變色，都是很難保存顏色的標(biāo)本，在制作過(guò)程中 特別要注意快速干燥。需要保持綠色的干制標(biāo)本，可先將標(biāo)本在2-4%硫酸銅溶液中浸24 小時(shí)，或經(jīng)過(guò)醋酸銅溶液（配方及方法見(jiàn)浸漬法中醋酸銅的浸漬法）處理后再壓制。也可以 在葉而抹一層液體石

6、蠟后再壓，可以保持鮮綠色2-3天。2浸漬法適用于多汁的病害標(biāo)本，如果實(shí)、塊根或擔(dān)子菌的子實(shí)體等，必須用浸漬法保存。浸漬液體種類(lèi)很多，有純屬防腐性 的，亦兼有保持標(biāo)本原色的，現(xiàn)介紹數(shù)種常用及效果較好的方法。（1）防腐浸漬法：此類(lèi)浸漬法僅能防腐而沒(méi)有保色作用，如蘿卜、甘薯等，不要求保色的 標(biāo)本，洗凈后直接浸于以下溶液中。 5%福爾馬林浸漬液。 亞硫酸浸漬液：1000ml水中加5%-6%'IE硫酸15ml （般市售的亞硫酸含量為5 6% ）或用亞硫酸鈉10.5g,濃硫酸8ml,水500ml配成混合液。（2）保持綠色標(biāo)本的浸漬液及浸泡法： 醋酸銅保（綠）色浸漬法：往50%的醋酸中逐漸加入醋酸銅

7、結(jié)晶溶解至飽和作為母液（大約1000ml50%的醋酸中加入15g醋酸銅即可達(dá)飽和），使用時(shí)兌水稀釋1一4倍（稀 釋倍數(shù)視標(biāo)本顏色而異，色深者稀釋倍數(shù)可小些）。將此液加熱煮沸，投入標(biāo)本，開(kāi)始時(shí)標(biāo) 本的綠色被漂去，再經(jīng)數(shù)分鐘后標(biāo)本又恢復(fù)綠色，此時(shí)立即將標(biāo)本取出，用淸水洗凈，保存 于5%的福爾馬林溶液中，此法稱為熱處理。冷處理的辦法是將標(biāo)本置于上述稀釋液中浸3 小時(shí)后標(biāo)本退色，再經(jīng)72小時(shí)后標(biāo)本恢復(fù)綠色，此時(shí)將標(biāo)本取岀，取水沖凈，保存于5% 的福爾馬林溶液中。此法保持色澤時(shí)間較長(zhǎng)，苴保色原理大致是銅離子與葉綠素中的鎂離子 發(fā)生程換作用。所以，溶液經(jīng)多次處理標(biāo)本后，銅離子會(huì)逐漸減少。如要繼續(xù)使用，應(yīng)補(bǔ)

8、入 適量的醋酸銅。此法保存標(biāo)本往往略帶藍(lán)色，與植物標(biāo)本原色稍有出入。 硫酸銅保（綠）色浸漬法：用淸水沖洗標(biāo)本，直接浸泡在5%的硫酸銅溶液中17天， 待標(biāo)本略帶褐色時(shí)取出用淸水漂洗，去除標(biāo)本表而多余的硫酸銅溶液，然后保存在亞硫酸浸 漬液中。 保存黃色和桔紅色標(biāo)本的浸漬液：保存杏、梨、柿、紅辣椒等果實(shí)標(biāo)本用亞硫酸浸 漬液，亞硫酸浸漬液有漂白作用，因此使用時(shí)要注意濃度，一般用1 %即可（浸杏時(shí)濃度可 再稀些），因濃度太小，防腐力不夠，可加入適量酒精。為了防止果實(shí)崩裂，可加入少許甘 油。 保存紅色標(biāo)本的浸漬液：保存標(biāo)本紅色較難，因?yàn)榧t色是水溶性的花青素，很難保存。常 用Hesler浸漬液保存，成分是：

9、氯化鋅50g,福爾馬林25ml,甘油25ml,水1000ml。將氯化鋅溶于熱水中，加入福爾馬林，如有沉淀，用英澄清液。此溶液適用于由于花青素 而顯紅色的標(biāo)本，如蘋(píng)果、番茄等。（四）標(biāo)本的保存制成的標(biāo)本，經(jīng)過(guò)整理和登記，然后依一定的系統(tǒng)排列和保藏。菌類(lèi)標(biāo)本一般按分類(lèi)系統(tǒng)排列，要有兩套索引卡片，一套是寄主索引，一套是菌類(lèi)索引，以 便于尋拽和整理。標(biāo)本室（柜）要保持干燥、潸浩，并要定期施藥以防蟲(chóng)蛀與霊變。1標(biāo)本盒保藏教學(xué)和示范用的干制病害標(biāo)本，采用玻而紙盒保藏比較方便，玻而紙盒，的適 宜大小為20X28X2cnio紙盒中先鋪一層棉花，并在棉花中加少許樟腦粉以驅(qū)蟲(chóng)。最后在 棉花上放上標(biāo)本和標(biāo)簽。2標(biāo)本

10、瓶保藏浸漬的標(biāo)本放在標(biāo)本瓶?jī)?nèi)保藏，為了防止標(biāo)本下沉和上浮，可綁在玻璃條上然 后再放入標(biāo)本瓶。標(biāo)本瓶的口蓋好后滴加石蠟封口，然后貼上標(biāo)簽。3紙?zhí)變?nèi)保藏用牛皮紙疊成15X33cm的紙?zhí)?，大量保存的干制?biāo)本，大多采用紙?zhí)妆２兀?將標(biāo)本裝入紙?zhí)變?nèi)，并在紙?zhí)咨腺N好標(biāo)簽，放在標(biāo)本柜中即可。四、作業(yè)：制作標(biāo)本及詳細(xì)資料。植物病害標(biāo)本野外采集記錄卡片標(biāo)本號(hào)96 采集日期采集地點(diǎn)生態(tài)環(huán)境 陽(yáng)光充足，上壤深厚肥沃，光熱條件較好，地形為坡地，排水條件較好。寄主名稱（通用名及學(xué)名）芍藥病名或?qū)W名芍藥紅斑病發(fā)病部位吐21癥狀描述葉背岀現(xiàn)針尖大小的凹陷斑點(diǎn)，不規(guī)則形的病斑，直徑約5-24mm,葉邊緣的病斑多為半圓形。葉片

11、正面病斑上有淡褐色的輪紋，不太明顯。采集人奎值 鑒定人張紹兵芍藥紅斑病【分布與危害】又稱芍藥褐斑病，是芍藥最常見(jiàn)的病害。國(guó)內(nèi)芍藥栽植均有發(fā)生。紅斑病使芍藥葉片早枯， 連年發(fā)生則削弱植株的生長(zhǎng)勢(shì)，植株坯小，花少，乃至全株枯死，嚴(yán)重影響了切花產(chǎn)量和“白 芍”的產(chǎn)量。該病害還危害牡丹?！景Y狀識(shí)別】紅斑病主要危害葉片，也侵染枝條、花、果殼等。早春葉片展開(kāi)即可受到侵染，葉背出現(xiàn)針 尖大小的凹陷斑點(diǎn)，逐漸擴(kuò)大成近圓形或不規(guī)則形的病斑，直徑約5-24nun，葉邊緣的病斑 多為半圓形。葉片正而病斑上有淡褐色的輪紋，不太明顯。病斑相互連接成片，使整個(gè)葉片 皺縮、枯焦，葉片常破碎。幼莖及枝條上的病斑長(zhǎng)橢圓形,紅褐

12、色,病斑長(zhǎng)葉柄 基部或枝干分叉處發(fā)病呈黑褐色的潰瘍斑，病部容易折斷。葉柄上的病斑和莖上的相似；呼 片、花瓣上的病斑均為紫紅色小斑點(diǎn)?！静≡考t斑病的病原菌是牡丹枝泡霉，屬半知菌亞門(mén)，絲抱菌綱，叢梗泡目，枝泡菌屬。【發(fā)病規(guī)律】病原菌主要以菌絲體在病葉、病枝條、果殼等殘?bào)w上越冬；在南京地區(qū)，由于葉片的腐爛， 病原菌不能在葉片上越冬。病原菌自傷口侵入或直接侵入，但傷口侵入發(fā)病率更高。在自然 界，下雨時(shí)泥漿的反濺使莖基部產(chǎn)生微傷口，也有利于該病原菌的侵入，葉片等處茸毛的脫 落，也可以造成微傷口。潛ff期短，一般6天左右，但病斑上子實(shí)層的形成時(shí)間則很長(zhǎng)，大 約病斑岀現(xiàn)1.5-2個(gè)月左右才產(chǎn)生子實(shí)層，因此

13、再侵染次數(shù)極少。在生長(zhǎng)季節(jié)該病均可發(fā)生。 在南京地區(qū)，3月下旬開(kāi)始發(fā)病，6-7月份為發(fā)病盛期：北京地區(qū)則4月底至5月初才開(kāi)始 發(fā)病，7-8月份為發(fā)病盛期?！痉乐未胧?、減少侵染來(lái)源。秋季割除芍藥的地上部分，殘茬越短越好，并及時(shí)處理病殘?bào)w。休眠期 發(fā)病重的地塊噴灑波美3度的石硫合劑，或在早春展葉前噴灑50%多菌靈可濕性粉劑600 倍液。2、加強(qiáng)栽培管理，控制病害的發(fā)生。株叢過(guò)大要及時(shí)分株移栽，栽植密度不要過(guò)大，以利 通風(fēng)透光，降低田間小氣候的濕度：肥水管理要好：及時(shí)淸除田間雜草；種植圃早春覆蓋塑 料薄膜，對(duì)病殘?bào)w上越冬菌源的傳播起到隔離作用，能大幅度地降低發(fā)病率。3、化學(xué)防治。在芍藥展葉后、開(kāi)花前，噴灑50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液；落花后可 交替噴灑65%代森鋅可濕性粉劑500倍液和1%波爾多液與0多菌靈。7-10天噴