畢業(yè)論文茯磚茶中菠甾醇的分離與鑒定

1、茯磚茶中菠甾醇的分離與鑒定作者：張XX 指導(dǎo)教師：凌XX（安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院，合肥，230036）摘要：茯磚茶為黑茶的一種，主要產(chǎn)于湖南，該茶在長期的應(yīng)用實(shí)踐中被證明具有降血脂等保健作用。目前茯磚茶成分的研究尚不透徹，為了闡明其保健功能的化學(xué)基礎(chǔ)，我們首先利用有機(jī)溶劑提取，依據(jù)相似相溶的原理，利用各種溶劑的極性的差別，依次萃取，使得原提取物中的不同的極性部分，分配到相應(yīng)的溶劑中，再用吸附層析法對這些部分進(jìn)行分離處理，通過硅膠柱層析、凝膠柱層析、反相柱分離等方法，使待分離的化合物在此操作方法下的各個餾分盡可能的純凈，利用現(xiàn)代天然產(chǎn)物的鑒定方法，確定所分離出的物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，最后得到一種白色

2、針狀結(jié)晶物質(zhì)。通過核磁共振碳譜、氫譜分析，可確定化合物為菠甾醇，該成分曾在巖筋菜中發(fā)現(xiàn)1。關(guān)鍵詞：茯磚茶 柱層析 核磁共振 菠甾醇 保健功能1前言1.1黑茶1.1.1 黑茶的制作工藝與特點(diǎn)黑茶是我國六大茶類之一，主要包括普洱茶、茯磚茶、六堡茶。黑茶初加工包括殺青、揉捻、渥堆、干燥四道工序，相對于綠茶來說渥堆是黑茶初制獨(dú)有的工序，也是黑毛茶色、香、味品質(zhì)形成的關(guān)鍵工序，而高溫汽蒸和壓造成型是黑茶加工的共同特點(diǎn)2。由于特殊的加工工藝，使黑茶香味醇和不澀，湯色橙黃不綠，葉底黃褐不青，其品質(zhì)風(fēng)味既不同于綠茶，亦有別于黃茶，形成獨(dú)具一格的品質(zhì)特征；綠茶的制作工藝一般為：鮮葉、殺青、初揉、初炒、復(fù)炒、提毫

3、、烘干，綠茶要求鮮葉為一芽二三葉或嫩芽而黑茶用的鮮葉原料較為粗老，多為立夏前后采摘的1芽4、5葉新梢3。1.1.2 茯磚茶和普洱茶的制作工藝及其特點(diǎn)茯磚茶和普洱茶都屬于緊壓黑茶，茯磚茶多以黑毛茶或粗老綠茶為原料經(jīng)汽蒸、漚堆、壓制、發(fā)花、干燥等工序加工而成，其中發(fā)花是茯磚茶制造的獨(dú)特工序，其目的是通過控制一定的溫、濕度條件，促使微生物優(yōu)勢菌的生長進(jìn)而產(chǎn)生黃色閉囊殼（俗稱“金花”），“金花”是茯磚茶的主要品質(zhì)特征4。普洱茶是以曬青綠毛茶為原料，經(jīng)發(fā)水、渥堆和陳化及干燥工序加工而成，其中渥堆工藝對普洱茶品質(zhì)的形成至關(guān)重要。1.1.3 普洱茶和茯磚茶中的主要化學(xué)成分及其功能研究進(jìn)展到目前為止，國內(nèi)外對

4、普洱茶中成分的研究很少，周志宏、林智等從不同產(chǎn)地的普洱茶中分離鑒定出的化合物共有22種，其中只有四種相同，即：簡單兒茶素（表兒茶素、兒茶素、沒食子兒茶素）、簡單酚性化合物（山奈酚、槲皮素）、黃酮類化合物（楊梅素）和黃酮類配糖體（山奈酚-3-O-D-葡萄糖甙）5 6 7。其中沒食子酸含量最高（9.01mg/g），沒食子酸，即3，4，5-三羥基苯甲酸，有顯著的抗氧化活性，并有抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗突變等生理活性，是普洱茶的一個最具生理活性的簡單酚類化合物8 9。另外，普洱茶還具有抗脂質(zhì)過氧化、預(yù)防高脂血癥、減少心腦血管疾病發(fā)生等作用，在健齒、消除口臭、抑菌、減肥方面也有保健功能。茯磚茶（產(chǎn)地湖南）

5、中主要含有兒茶素（表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯）、黃酮類糖苷（三羥黃酮醇-蕓香糖苷、櫟皮酮醇-己糖-鼠李糖-鼠李糖苷、楊梅酮醇-己糖-鼠李糖-鼠李糖苷、楊梅酮醇-己糖-己糖-鼠李糖苷）、茶多酚（兒茶素沒食子酸酯）、咖啡堿等次生代謝物質(zhì)，其中沒食子酸和表兒茶素沒食子酸酯有減肥降脂的功效，茯磚茶還具有助消化、減肥、利尿、增強(qiáng)毛細(xì)血管、養(yǎng)胃、健胃的作用10 11，其中咖啡堿的刺激作用可以提高胃液的分泌量，從而增進(jìn)食欲、幫助消化，也可以刺激膀胱協(xié)助利尿，利尿的同時還有助于醒酒，解除酒精毒害作用；茯磚茶中含有810%的茶多酚，長期飲用可增強(qiáng)毛細(xì)血管的韌性，防止微血管的破裂。普洱茶和茯磚茶

6、中的一些物質(zhì)結(jié)構(gòu)如下：沒食子酸 咖啡堿表兒茶素沒食子酸酯 楊梅素表兒茶素（EC） 山柰素槲皮素沒食子兒茶素 山奈酚-3-O-D-葡萄糖甙 表沒食子兒茶素沒食子酸酯本實(shí)驗(yàn)通過研究普洱茶和茯磚茶中的這些次生代謝物質(zhì)，闡明其治病及保健的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。1.1.3.1 生物堿結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其功效茶葉中的生物堿含量為3%-5%，主要有咖啡堿、可可堿和茶葉堿，他們均為黃嘌呤甲基的衍生物。含量較多的是咖啡堿，其合成的前體物質(zhì)是可可堿，咖啡堿易溶于水，在273nm處有最大吸收峰，也可以和大多數(shù)生物堿沉淀劑作用生成難容物?？Х葔A是一種常用藥物,它有興奮神經(jīng)和利尿作用,對血管有擴(kuò)張作用,對高血壓、低血壓病有益,對防治膽

7、固醇升高、動脈粥樣硬化、心肌梗塞也有一定效果12，結(jié)構(gòu)如下： 黃嘌呤茶葉堿 可可堿 （2,6-二氧嘌呤）（1,3-二甲基黃嘌呤）（3,7-二甲基黃嘌呤）1.1.3.2 茶多酚結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其功效茶多酚（18%-36%）是存在與茶葉中的多元酚的混合物，主要有兒茶素、黃酮類、花青素和酚酸，其中兒茶素在茶葉中的含量為12%-24%，它是2-苯基苯并吡喃的衍生物；黃酮類的基本結(jié)構(gòu)是2-苯基色原酮13。兒茶素等具有幫助消化、增加食欲、減少體內(nèi)脂肪積累、降低膽固醇的作用,并有抑制痢疾、傷寒、霍亂、金黃色葡萄球菌等有害菌的作用,多酚類抗氧化劑還具有較強(qiáng)抗放射、抗衰老、抗血小板凝聚、抗動脈粥樣硬化、降血壓、抑癌作

8、用14。結(jié)構(gòu)如下： 兒茶素花青素 2-苯基色原酮 1.1.3.3 糖苷結(jié)構(gòu)特點(diǎn)茶葉中的糖苷是通過糖的端基碳連接而成的化合物，有-苷和-苷兩種，其結(jié)構(gòu)如下：-甲基-D-葡萄糖苷-甲基-D-葡萄糖苷1.1.3.4皂甙的結(jié)構(gòu)及其功效皂甙，又名皂素、皂角甙或皂草甙，是一類結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的糖苷類化合物，由糖鏈與三萜類、甾體或甾體生物堿通過碳氧鍵相連而構(gòu)成，茶皂素是一類齊墩果烷型五環(huán)三萜類皂甙的混合物，基本結(jié)構(gòu)為皂甙元、糖體、有機(jī)酸三部分組成。茶皂甙有吸濕性,味苦而辛辣,對咽喉粘膜有刺激作用,具有很強(qiáng)的起泡力和一定的溶血作用,有多種生理活性,在藥理方面有祛痰、消炎、鎮(zhèn)痛止咳及抗菌等作用,對治療多種類型的水腫

9、有特效15 16。1.1.3.5 鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其功效鞣質(zhì)又稱鞣酸或單寧，是指存在植物界的一類結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的多元酚化合物。鞣質(zhì)具有多種生物活性：如收斂作用、抗菌抗病毒作用、解毒作用、降壓作用、驅(qū)蟲作用等17。1.2 內(nèi)含物提取、分離、鑒定的步驟與預(yù)實(shí)驗(yàn)原理欲研究茯磚茶中次生代謝物的治病保健作用，需對這些有效成分進(jìn)行提取、分離和結(jié)構(gòu)鑒定。主要步驟是預(yù)實(shí)驗(yàn)、系統(tǒng)分離、組分分離與精制、成分鑒定。預(yù)實(shí)驗(yàn)的原理是：根據(jù)各成分極性的不同，先系統(tǒng)的分成幾個不同的部分，然后利用顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)，或結(jié)合紙色譜、薄板色譜，定性判斷各部分中可能含有的化合物類型，再根據(jù)相似相溶的原理，極性大的成分在極性溶劑中溶解

10、度大，極性小的成分則易溶于非極性溶劑。1.2.1 提取內(nèi)含物的方法及原理溶劑法，根據(jù)相似相溶的原理提取內(nèi)含物的方法；水蒸汽蒸餾法，內(nèi)含物可以隨水蒸汽蒸餾而不溶于水或微溶于水的原理進(jìn)行分離；分餾法，利用沸點(diǎn)不同進(jìn)行分離的方法；沉淀法，利用某些植物成分與某些溶劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)而得到分離或除去雜質(zhì)的方法；鹽析法，是向提取液中加入易溶性無機(jī)鹽至一定濃度或飽和，使一些成分在水中的溶解度降低，沉淀析出的方法；透析法，是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過的性質(zhì)而進(jìn)行分離的方法。1.2.2 內(nèi)含物的分離純化，常用色譜法（層析法）色譜法是利用不同的物質(zhì)在固定相與流動相中不同的平衡分配系數(shù)來

11、進(jìn)行的分離的一種方法，在色譜分離中，試樣混合物在固定相和流動相之間連續(xù)不斷地進(jìn)行分配以達(dá)到平衡，不同的化合物由于它們之間的理化性質(zhì)的差異，在兩相中存在量也各不相同。常用方法如下： 吸附柱層析法，常用的吸附劑是硅膠和大孔吸附樹脂，硅膠可用于非極性化合物也可用極性化合物，如萜類、甾體、生物堿等，而大孔吸附樹脂多用于皂苷、生物堿、黃酮類化合物的分離18。凝膠過濾層析法，其原理是凝膠顆粒內(nèi)部具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，被分離的混合物流過層析柱時，比凝膠孔徑大的分子不能進(jìn)入凝膠孔內(nèi)，在凝膠顆粒之間的空隙向下移動，并最先被洗脫出來；比網(wǎng)孔小的分子能不同程度的自由出入凝膠孔內(nèi)外，在柱內(nèi)經(jīng)過的路程較長移動速度較慢，最后

12、被洗脫出來。常用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠（Sephadex)和瓊脂糖凝膠，葡聚糖凝膠是由天然高分子-葡聚糖與其他交聯(lián)劑交聯(lián)而成，常用的是sephadex系列，它是葡聚糖與3氯1,2環(huán)氧丙烷相互交聯(lián)而成，如sephadex LH20，是SephadexG25的羧丙基衍生物，溶于水和親脂性溶劑，用于分離不溶于水的物質(zhì)。 高效液相色譜法（HPLC），主要由進(jìn)樣器、分離柱、檢測器、記錄儀組成19。常用反相色譜法（RPC），一般用非極性固定相（如C18、C8），流動相為水或緩沖液。適用于分離非極性和極性較弱的化合物，如：茶多酚。 氣液色譜法，原理是各組分在固定液中溶解能力不同，溶解度大的較難揮發(fā)，停留在柱

13、中時間較長，前移較慢；溶解度小的前移較快。經(jīng)一段時間后，各組分彼此分離。另外除了以上介紹的方法外還有紙色譜法（pc）、薄層色譜法（tlc）、高速逆流色譜等方法。1.2.3 次生代謝物質(zhì)結(jié)構(gòu)的鑒定（光譜鑒定法），常用的四大譜是紫外光譜（UV）、紅外光譜（IR）、核磁共振譜（NMR）、質(zhì)譜（MS）。核磁共振譜，其原理是原子核在磁場中吸收一定頻率的無線電波而發(fā)生核自旋能級躍遷的現(xiàn)象。在照射頻率確定時，同種核因在分子中的化學(xué)環(huán)境不同而在不同共振磁場強(qiáng)度下顯示吸收峰的現(xiàn)象稱為化學(xué)位移，其表示方法以四甲基硅（TMS）為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，規(guī)定它的化學(xué)位移為零，然后根據(jù)其他吸收峰與零點(diǎn)的相對距離來確定他們的化學(xué)位移值

14、。核磁共振譜儀由永久磁鐵、射頻振蕩器、射頻信號接收器、樣品管組成。常用的是氫核磁共振譜和碳核磁共振譜。紫外光譜，記錄有機(jī)分子在吸收紫外光(200-400nm)后產(chǎn)生電子振動而形成的吸收光譜，常用于研究不飽和有機(jī)物,特別是具有共軛體系的有機(jī)化合物；紅外光譜，記錄有機(jī)分子吸收紅外光后產(chǎn)生化學(xué)鍵振動而形成的吸收光譜。質(zhì)譜，質(zhì)譜分析法是通過對被測樣品離子的質(zhì)荷比的測定來進(jìn)行分析的一種分析方法20。被分析的樣品首先要離子化，然后利用不同離子在電場或磁場的運(yùn)動行為的不同，把離子按質(zhì)荷比（m/z）分開而得到質(zhì)譜，通過樣品的質(zhì)譜和相關(guān)信息，可以得到樣品的定性定量結(jié)果。一般，MS測定采用電子轟擊法（electr

15、on impact ionization，簡稱EI），故稱EI-MS，測定EI-MS時，需要先將樣品加熱汽化，使之進(jìn)入離子化室，而后才能電離，因此容易發(fā)生分階段的化合物或難于汽化的化合物，如醇、糖苷等，往往測不到分子的離子峰；而一些大分子物質(zhì)，如糖的聚合物也難于汽化而無法測定；另外，ESI-MS也較為常用，是采用電噴霧，ESI為電離源。2實(shí)驗(yàn)部分2.1 材料與方法2.1.1主要儀器 數(shù)顯恒流泵，BT100B型，上海青浦滬西儀器廠產(chǎn)品；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，CCA1110型，日本生產(chǎn)；電熱板，DB2型，國華產(chǎn)品；核磁共振儀，av400型，bruker公司產(chǎn)品。2.1.2內(nèi)含物的分離純化 硅膠吸附色譜柱為實(shí)

16、驗(yàn)室自裝，玻璃柱（D6*100cm），填料選擇安徽良臣硅源材料有限公司生產(chǎn)的200300目柱層層析硅膠，采取濕法裝柱，洗脫液選擇（三氯甲烷）：（甲醇）=98：2洗脫，用500ml試劑瓶收集洗脫液，正相板檢測后，將目標(biāo)產(chǎn)物混合、濃縮即可；反相色譜柱選擇YMC公司生產(chǎn)的50um球形反相硅膠。2.2 實(shí)驗(yàn)步驟2.2.1樣品的粗提取2.2.1.1樣品提取物的制備取1.8kg的茯磚茶經(jīng)過粉碎后，置于玻璃制的提取罐中，以70%丙酮冷浸，經(jīng)過兩天的浸泡，將所得溶液合并放置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，加入適量水制成混懸液。2.2.1.2有機(jī)溶劑萃取 （1）石油醚萃取將混懸液放入分液漏斗中,用石油醚完成5次萃取，共得500

17、ml5后進(jìn)行濃縮。（2）氯仿萃取將石油醚萃取后剩余的混懸液，繼續(xù)用氯仿萃取4次，直到氯仿的顏色已經(jīng)很淡。（3）正丁醇萃取再將氯仿提取后的混懸液繼續(xù)用正丁醇萃取。2.2.2條件實(shí)驗(yàn)，用反相板反復(fù)展開樣品（石油醚萃取部分）10次，甲醇為展開液，觀察結(jié)果（圖1），并記錄（樣品為凝膠柱層析液）。圖1、石油醚萃取部分反相板展開結(jié)果向裝有樣品的三角瓶（石油醚萃取部分）中加入少許氯仿溶解樣品，用蒸餾過的甲醇沖洗反相柱（約200ml），清洗兩個三角瓶，試管若干，切好硅膠板若干，配好展開液（氯仿：甲醇=100：2）。2.2.4進(jìn)樣，柱子沖過之后，將樣品移入試管中，暫停恒流泵，迅速打開然后關(guān)閉泵一次，使吸液管前有

18、少許空氣，吸入樣品12ml，大約40min后接第一份樣，以后每7min接一次。2.2.5蒸餾，將接好的樣品轉(zhuǎn)入蒸餾瓶中，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將樣品中的洗脫液甲醇蒸干，甲醇回收；樣品蒸干后用少許氯仿溶解，放入試管中，注意如果蒸餾瓶中殘存的有水分，加入少許丙酮處理。2.2.6點(diǎn)樣，用氯仿將毛細(xì)管沖洗干凈，吸入少許樣品，輕輕的點(diǎn)在硅膠板上（兩次，注：第一次干后再點(diǎn)第二次），將點(diǎn)好的硅膠板吹干，放入展缸中展開，展開后再次吹干，向板上噴灑硫酸-乙醇混合液（注：此過程在通風(fēng)櫥中進(jìn)行），后把硅膠板放在100150C的電熱板上顯色。2.2.7觀察并記錄結(jié)果（圖2）。圖2、石油醚萃取部分反相柱分離結(jié)果結(jié)果：濃縮2、3

19、份樣，8、9份樣（csa11），10、11、12、13份樣（csa11+5），14、15、16份樣（csa13），其中csa11、csa5和csa13為目的樣。繼續(xù)分離csa11+5，過程同上，結(jié)果如下（圖3）：圖3、反相柱分離csa11+5的結(jié)果繼續(xù)分離csa11+5，過程同上，結(jié)果如下（圖4）：圖4、反相柱分離csa11+5的結(jié)果確保濃縮液中無其他物質(zhì)，用反相板展開10、11、13、15、17號樣，反復(fù)展開8次，甲醇為展開液，結(jié)果如下（圖5）：圖5、反相板展開反相柱分離csa11+5的結(jié)果的結(jié)果濃縮8、9份樣（csa11），1318份樣（csa5），11、12、19、20份樣放入余液中。2

20、.2.8打譜，將獲得的目的樣濃縮，烘干，稱重，經(jīng)核磁共振打出氫譜。譜圖為附件1、附件2。 2.2.9純度鑒定，通過對氫譜觀察，沒有干擾峰出現(xiàn)得出分離物沒有雜質(zhì)，純度好。2.2.10打碳譜，譜圖為附件3和附件4。3結(jié)果與分析3.1結(jié)果菠甾醇的13 C-NMR化學(xué)位移（100Mhz，ppm）位置化學(xué)位移位置化學(xué)位移137.2（CH2）1523.1(CH2)231.9（CH2）1628.5(CH2)371.1（CH）1756.0(CH)438.0（CH2）1812.1(CH3)540.3（CH）1913.1(CH3)629.7（CH2）2040.8(CH)7117.5（CH）2121.1(CH3)8

21、139.6（C）22138.2(CH)949.5（CH）23129.5(CH)1034.3（C）2451.3（CH）1121.4（CH2）2531.5（CH）1239.5（CH2）2619.0（CH3）1343.3（C）2721.6（CH3）1455.2（CH）2825.4（CH2）2912.3（CH3）3.2目標(biāo)分離物的表征分離目標(biāo)產(chǎn)物csa11為白色針狀結(jié)晶1，其分子結(jié)構(gòu)如圖6所示。圖6、菠甾醇的結(jié)構(gòu)式3.3討論本試驗(yàn)成功的在茯磚茶中分離出菠甾醇，但是后來沒有做此單體化合物的抑菌試驗(yàn)，有些遺憾。菠甾醇曾在瓜蔞皮和巖筋菜中發(fā)現(xiàn)21。由于我不懂解核磁共振氫譜和碳譜，最后的結(jié)構(gòu)是由凌老師幫忙解出

22、的，所以在這一方面還是有待提高和研究。4 致謝本論文在安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院凌XX老師的悉心指導(dǎo)下和實(shí)驗(yàn)室凌XX等學(xué)長的熱心幫助下完成。非常感謝凌老師在實(shí)驗(yàn)上的指點(diǎn)，學(xué)習(xí)上的幫助以及在論文完成過程中的精心修改。在此向凌老師表達(dá)我深深的敬意和由衷的感謝。畢業(yè)論文代表著大學(xué)的終結(jié)，完成它既有一種收獲感，又有一種失落感。作為一個本科生的畢業(yè)論文設(shè)計(jì)，由于經(jīng)驗(yàn)的匱乏，難免有許多考慮不周全的地方，如果沒有導(dǎo)師的督促指導(dǎo)，以及一起工作的同學(xué)們的支持，想要完成這個設(shè)計(jì)是難以想象的。在這里，再次感謝我論文的指導(dǎo)老師凌鐵軍老師，再次感謝實(shí)驗(yàn)室的學(xué)哥學(xué)姐們，以及共同合做實(shí)驗(yàn)的同學(xué)們，他們在本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中，給予

23、我許多指導(dǎo)和幫助，讓我在實(shí)驗(yàn)中少走了許多彎路，讓我的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的更加順利。在此本論文完成之際，感謝給予我指導(dǎo)和幫助的老師、師兄師姐及共同合作的同學(xué)們，祝你們工作順利，學(xué)業(yè)有成！主要參考文獻(xiàn)1 丁立生、陳耀祖、吳鳳鍔.巖筋菜的化學(xué)成分的研究，中國中藥雜志，1991年第18卷第5期2 付潤華、齊桂年. 黑茶渥堆作用的研究進(jìn)展與展望.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院，福建茶葉，2007年第四期.3 宋淑平.綠茶的制作工藝.中小企業(yè)科技，2006年5月.4 楊撫林、鄧放明、趙玲艷、夏巖石. 茯磚茶發(fā)花過程中優(yōu)勢菌的研究進(jìn)展.茶葉科學(xué)技術(shù)，湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，2005年第一期.5 林智、呂海鵬、崔文銳等.

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25、7（2）：104110.10 傅冬和、劉仲華、黃建安、陳惠衡.茯磚茶不同萃取物對消化酶活性的影響，茶葉科學(xué)，2008，28（1）：6266.11 傅冬和、劉仲華、黃建安、陳金華、陳惠衡.茯磚茶中幾種單體成分功效的高通量篩選研究，茶葉科學(xué)，2008，28（1）：3942.12 左東東、劉來田.茶葉保健功能與應(yīng)用，信息科技.13 王龍、孫建設(shè).黃酮類的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能，河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，園藝學(xué)院，河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2003年5月第26卷增刊.14 胡秀芳、楊賢強(qiáng)、陳留記.茶多酚對皮膚的保護(hù)與治療作用，浙江大學(xué)茶學(xué)系，福建茶葉，2000年第二期.15 侯如燕、宛曉春、文 漢.茶皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物

26、活性研究進(jìn)展，安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部茶葉生物化學(xué)與生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，合肥，安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2005年第3期.16 劉 紅、田 晶.茶皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性最新研究進(jìn)展，大連工業(yè)大學(xué)現(xiàn)代教育技術(shù)部，食品科技，2008年第5期.17 劉 湘、汪秋安主編，天然產(chǎn)物化學(xué).北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.218 周志、汪興平、莫開菊、張家年.茶葉咖啡堿分離提取新技術(shù)研究，湖北民族學(xué)院園藝系、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技系，食品科學(xué)，2002年第二期.19 戴軍、王洪新、陳尚衛(wèi)、湯堅(jiān).茶葉及茶多酚中兒茶素的高效液相色譜分析方法的研究，無錫輕工大學(xué)，色譜，2001年第五期.20 朱旗、毛清黎、鄧放明.LC-M

27、S分析普洱茶和茯磚茶與紅茶成分的比較研究，茶葉科學(xué)，2006，26（3）：191194.21吳玉蓉、翟成塵、莫尚武.四川瓜蔞具鈣拮抗左右化學(xué)成分的光譜研究，化學(xué)研究與應(yīng)用，第13卷第2期，2001年4月.The Spinasterol Isolation and IdentificationofFuzhuan Brick-TeaAuthor: Chunfeng Zhang Supervisor:Tiejun Ling( Anhui Agricultural University, school of tea&food science , food quality and safety ,Hef

28、ei 230036)Abstract:Fuzhuan brick-tea is one kind of dark tea in China，mainly produced in Hunan province.The application of tea has been proved to have hypolipidemic effects and other health carein the long-term practice. Fuzhuan brick-tea ingredients study was not thorough at present, to elucidate the fun