實(shí)驗(yàn)十一、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活動(dòng)的觀察目的要求1

1、實(shí)驗(yàn)十一、實(shí)驗(yàn)十一、 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活動(dòng)的觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活動(dòng)的觀察目的要求目的要求1 1、熟悉并理解細(xì)胞吞噬活動(dòng)的生理過程、熟悉并理解細(xì)胞吞噬活動(dòng)的生理過程2 2、掌握誘導(dǎo)產(chǎn)生小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的方法、掌握誘導(dǎo)產(chǎn)生小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的方法實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)用品 光學(xué)顯微鏡、光學(xué)顯微鏡、2ml2ml注射器、載玻片、蓋玻片、解剖器械、注射器、載玻片、蓋玻片、解剖器械、1 1雞紅細(xì)胞液、小白鼠、雞紅細(xì)胞液、小白鼠、6 6淀粉肉湯淀粉肉湯( (含臺盼藍(lán)含臺盼藍(lán)) )、生理鹽水、生理鹽水試劑的配制：試劑的配制： 6 6淀粉肉湯：稱取牛肉膏淀粉肉湯：稱取牛肉膏0.3g0.3g、蛋白胨、蛋白胨1.0g

2、1.0g、氯化鈉、氯化鈉O.5gO.5g和和臺盼藍(lán)臺盼藍(lán)(trypan(trypan blue)0.3g blue)0.3g分別加入到分別加入到100ml100ml蒸餾水中溶解，蒸餾水中溶解，再加入可溶性淀粉再加入可溶性淀粉6g6g，混勻后煮沸滅菌，置，混勻后煮沸滅菌，置44保存，使用時(shí)保存，使用時(shí)溫浴溶解。溫浴溶解。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 高等動(dòng)物體內(nèi)存在著具有防疫功能的吞噬細(xì)胞高等動(dòng)物體內(nèi)存在著具有防疫功能的吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，它由粒細(xì)胞和單核細(xì)胞等白細(xì)胞構(gòu)成，是系統(tǒng)，它由粒細(xì)胞和單核細(xì)胞等白細(xì)胞構(gòu)成，是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分。巨噬細(xì)胞是體內(nèi)機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分。巨噬細(xì)胞是體內(nèi)的一種重要的免

3、疫細(xì)胞，具有非特異性吞噬功能，的一種重要的免疫細(xì)胞，具有非特異性吞噬功能，當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌等病原體及其它異物侵入時(shí)，巨當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌等病原體及其它異物侵入時(shí)，巨噬細(xì)胞將向病原體或異物游走，當(dāng)接觸異物時(shí)，噬細(xì)胞將向病原體或異物游走，當(dāng)接觸異物時(shí)，伸出偽足將其包圍并進(jìn)行內(nèi)吞作用，將病原體或伸出偽足將其包圍并進(jìn)行內(nèi)吞作用，將病原體或異物吞入細(xì)胞，形成吞噬泡，進(jìn)而初級溶酶體與異物吞入細(xì)胞，形成吞噬泡，進(jìn)而初級溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合，將異物消化分解掉。本實(shí)驗(yàn)將吞噬泡發(fā)生融合，將異物消化分解掉。本實(shí)驗(yàn)將觀察到小鼠巨噬細(xì)胞對進(jìn)入其體內(nèi)的雞血紅細(xì)胞觀察到小鼠巨噬細(xì)胞對進(jìn)入其體內(nèi)的雞血紅細(xì)胞進(jìn)行吞噬的情況。進(jìn)行吞

4、噬的情況。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法( (一一) )標(biāo)本制備標(biāo)本制備1 1、在實(shí)驗(yàn)前一天，每只小鼠腹腔注射、在實(shí)驗(yàn)前一天，每只小鼠腹腔注射6 6淀粉肉湯淀粉肉湯( (含含4 4的臺盼藍(lán)的臺盼藍(lán))lml)lml。2 2、實(shí)驗(yàn)時(shí)、實(shí)驗(yàn)時(shí)每組取一只每組取一只經(jīng)上述處理的小鼠，腹腔注射經(jīng)上述處理的小鼠，腹腔注射1 1的的雞紅細(xì)胞懸液雞紅細(xì)胞懸液lmllml。然后輕揉小鼠腹部，使雞紅細(xì)胞分。然后輕揉小鼠腹部，使雞紅細(xì)胞分散。散。( (腹腔注射時(shí)不要刺傷內(nèi)臟腹腔注射時(shí)不要刺傷內(nèi)臟) )3 3、2020分鐘后向腹腔注射分鐘后向腹腔注射0.5 ml0.5 ml生理鹽水，輕揉小鼠腹部，生理鹽水，輕揉小鼠腹部，

5、使其腹腔液稀釋。使其腹腔液稀釋。3 3分鐘后用用頸椎脫臼法處死小鼠。分鐘后用用頸椎脫臼法處死小鼠。4 4、將小鼠置于解剖盤中或衛(wèi)生紙上，剪開腹腔，把內(nèi)臟、將小鼠置于解剖盤中或衛(wèi)生紙上，剪開腹腔，把內(nèi)臟推向一側(cè)，用吸管或不裝針頭的注射器吸取腹腔液。推向一側(cè)，用吸管或不裝針頭的注射器吸取腹腔液。5 5、每人取一干凈載玻片，滴一滴腹腔液，蓋上蓋玻片，、每人取一干凈載玻片，滴一滴腹腔液，蓋上蓋玻片，標(biāo)本便制備好了。標(biāo)本便制備好了。6 6、實(shí)驗(yàn)繪圖。、實(shí)驗(yàn)繪圖。( (二二) )觀察觀察 巨噬細(xì)胞體積較大，呈巨噬細(xì)胞體積較大，呈圓形或不規(guī)則形，表面圓形或不規(guī)則形，表面具有多個(gè)突起具有多個(gè)突起( (偽足偽足

6、) )，胞質(zhì)中含有數(shù)量不等、大，胞質(zhì)中含有數(shù)量不等、大小不一的藍(lán)色顆粒，它們是細(xì)胞吞噬含臺盼藍(lán)的小不一的藍(lán)色顆粒，它們是細(xì)胞吞噬含臺盼藍(lán)的淀粉肉湯后形成的吞噬體；淀粉肉湯后形成的吞噬體；雞紅細(xì)胞呈雞紅細(xì)胞呈橢圓形，淡黃色，橢圓形，淡黃色，具橢圓形的細(xì)胞具橢圓形的細(xì)胞核。核。在視野中仔細(xì)尋找巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的不在視野中仔細(xì)尋找巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的不同階段。有的雞紅細(xì)胞緊貼在巨噬細(xì)胞表面；有同階段。有的雞紅細(xì)胞緊貼在巨噬細(xì)胞表面；有的紅細(xì)胞已部分被吞入；有的巨噬細(xì)胞已吞入的紅細(xì)胞已部分被吞入；有的巨噬細(xì)胞已吞入1 1個(gè)個(gè)或多個(gè)紅細(xì)胞，形成了吞噬泡。還可見有的吞噬或多個(gè)紅細(xì)胞，形成了吞噬泡。還