《微生物培訓(xùn)》PPT課件

1、微生物基礎(chǔ)知識(shí)的培訓(xùn) 引言藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范附錄中明確規(guī)定：潔凈區(qū)內(nèi)的人數(shù)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)加控制，凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括維修工、輔助人員）應(yīng)當(dāng)定期進(jìn)行衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識(shí)、潔凈作業(yè)等方面的培訓(xùn)及考核，對(duì)進(jìn)入潔凈區(qū)臨時(shí)的外部人員應(yīng)進(jìn)行指導(dǎo)和監(jiān)督。主要內(nèi)容 一 微生物基礎(chǔ)知識(shí) 二 微生物的分布 三 微生物的控制 什么是微生物？定義：微生物是一切肉眼看不見或看定義：微生物是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。不清楚的微小生物的總稱。微生物的發(fā)現(xiàn) 1676年，荷蘭人列文虎克，用自己磨制的能放大200-300倍的顯微鏡觀察了污水、牙垢、腐敗的有機(jī)物等，發(fā)現(xiàn)了許許多多肉眼看不見的微小生物，為微生物

2、的存在提供了有力的證據(jù)。微生物的分類（1）原核細(xì)胞型：細(xì)胞核分化程度低，僅有原始核質(zhì)，沒有核膜與核仁；細(xì)胞器不很完善。包括：細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、 支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體等。（2）真核細(xì)胞型：細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體；胞質(zhì)內(nèi)有完整的細(xì)胞器。包括：真菌（酵母菌和霉菌）、原生動(dòng)物和顯微藻類。（3）非細(xì)胞型：沒有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，亦無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。包括病毒、類病毒和朊病毒等。藥品微生物檢驗(yàn)主要相關(guān)微生物： 細(xì)菌、霉菌、酵母菌、例如：飲用水：細(xì)菌總數(shù)每1ml不得過100cfu純化水：細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得 過100cfu注射用水：細(xì)菌

3、、霉菌和酵母菌總數(shù)每100ml不得過10個(gè)cfu原核細(xì)胞型-細(xì)菌細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短，細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，即一個(gè)細(xì)胞就是一個(gè)個(gè)體。細(xì)菌的基本形態(tài)有三種：球狀、桿狀和螺旋狀，分別被稱為球菌、桿菌和螺旋菌?；窘Y(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、芽孢等 絕大多數(shù)在3237最適宜生長(zhǎng)，最適宜pH6.57.2 (藥典規(guī)定細(xì)菌培養(yǎng)溫度為3035)細(xì)菌的形態(tài)：原核細(xì)胞型-細(xì)菌單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)，叫菌落。細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤(rùn)、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位顏

4、色一致等。細(xì)菌的菌落特征因種類而異。 依據(jù)各種細(xì)菌在一定條件下形成的菌落特征具有一定的穩(wěn)定性和專一性，這是衡量菌種純度，辨認(rèn)和鑒定菌種的重要。真核細(xì)胞型-真菌（霉菌及酵母菌）真菌是一類有細(xì)胞壁，以寄生或腐生方式生存，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。包括：?jiǎn)渭?xì)胞和多細(xì)胞兩種。霉菌：是絲狀真菌的俗稱，意為“發(fā)霉的真菌”，形成分枝繁茂的菌絲體，依靠產(chǎn)生形形色色的孢子進(jìn)行繁殖。菌落形態(tài)一般比較疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀，不易挑取，正反面的顏色和邊緣與中心顏色常不一致。最適宜生長(zhǎng)溫度:2228，最適宜pH5.56.0，霉菌生長(zhǎng)需要溫暖潮濕的環(huán)境(藥典規(guī)定細(xì)菌

5、培養(yǎng)溫度為2328 )霉菌真菌孢子能夠在不利其生長(zhǎng)的條件下干燥、熱、紫外線和消毒劑）存活很長(zhǎng)時(shí)間。 黑曲霉 酵母菌是單細(xì)胞真核微生物，喜歡在偏酸性且含糖較多的環(huán)境中生長(zhǎng)；通常形態(tài)有球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀和香腸狀等；酵母菌有多種繁殖方式：包括有性繁殖和無性繁殖；菌落表面光滑、濕潤(rùn)、粘稠，容易挑起、質(zhì)地均勻，顏色均一，菌落多為乳白色，少數(shù)為紅色，個(gè)別為黑色。真菌通常要比細(xì)菌大10倍。微生物五大共性 體積小面積大：個(gè)體極其微小，必須借助顯微體積小面積大：個(gè)體極其微小，必須借助顯微鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數(shù)萬倍才鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數(shù)萬倍才能看清能看清 吸收多轉(zhuǎn)化快：食譜廣泛，

6、凡是動(dòng)植物能利用吸收多轉(zhuǎn)化快：食譜廣泛，凡是動(dòng)植物能利用的營(yíng)養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動(dòng)植物不能的營(yíng)養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動(dòng)植物不能利用的物質(zhì)，甚至劇毒的物質(zhì)，微生物照樣可利用的物質(zhì)，甚至劇毒的物質(zhì)，微生物照樣可以視為美味佳肴。以視為美味佳肴。 生長(zhǎng)旺繁殖快：二分分裂是細(xì)菌最普遍、最主生長(zhǎng)旺繁殖快：二分分裂是細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式要的繁殖方式 適應(yīng)強(qiáng)變異頻：能耐適應(yīng)強(qiáng)變異頻：能耐0 0196196的低溫，可在的低溫，可在250250300300的高溫條件下正常生長(zhǎng)；的高溫條件下正常生長(zhǎng)； 分布廣種類多：微生物幾乎無處不有，無孔不分布廣種類多：微生物幾乎無處不有，無孔不入，地球上有入，

7、地球上有200200萬生物，其中微生物有萬生物，其中微生物有2020萬萬種之多。種之多。微生物的生長(zhǎng)規(guī)律微生物整個(gè)生長(zhǎng)過程可以分為4個(gè)階段 延滯期 ； 對(duì)數(shù)期 ； 穩(wěn)定期 ； 衰亡期 。微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)要求：微生物生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等；微生物的營(yíng)養(yǎng)類型：根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不同，可將其分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩大營(yíng)養(yǎng)類型；根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同，可分為光能營(yíng)養(yǎng)菌和化能營(yíng)養(yǎng)菌。微生物對(duì)藥品的影響正面影響正面影響 利用微生物及其代謝產(chǎn)物制成藥物。利用微生物及其代謝產(chǎn)物制成藥物。（疫苗、免疫制劑等）（疫苗、免疫制劑等） 微生物為藥品的生產(chǎn)工藝提

8、供了不可缺微生物為藥品的生產(chǎn)工藝提供了不可缺少的手段。（如發(fā)酵工藝）少的手段。（如發(fā)酵工藝） 微生物學(xué)方法成為檢測(cè)藥物質(zhì)量的重要微生物學(xué)方法成為檢測(cè)藥物質(zhì)量的重要手段（如抗生素效價(jià)測(cè)定、動(dòng)物試驗(yàn)等）手段（如抗生素效價(jià)測(cè)定、動(dòng)物試驗(yàn)等） 。負(fù)面影響負(fù)面影響 被微生物污染的藥品會(huì)使其失去有效被微生物污染的藥品會(huì)使其失去有效性。性。 微生物污染藥品可使其產(chǎn)生毒性。微生物污染藥品可使其產(chǎn)生毒性。藥品染菌的危害與控制藥品染菌的危害藥品染菌的危害 危及患者健康與生命安全危及患者健康與生命安全 導(dǎo)致藥品質(zhì)量問題導(dǎo)致藥品質(zhì)量問題藥品的微生物污染源藥品的微生物污染源 空氣、原輔料、水、包裝材料、廠房與設(shè)備、空氣

9、、原輔料、水、包裝材料、廠房與設(shè)備、 人員人員染菌對(duì)藥品質(zhì)量的影響染菌對(duì)藥品質(zhì)量的影響 藥物的物理性狀改變、藥物的化學(xué)成份變藥物的物理性狀改變、藥物的化學(xué)成份變化、藥物的療效變化、引起熱原化、藥物的療效變化、引起熱原防止藥品染菌的措施防止藥品染菌的措施 廠房環(huán)境控制、設(shè)備條件、空氣凈化、原廠房環(huán)境控制、設(shè)備條件、空氣凈化、原輔料的控制、衛(wèi)生管理措施、生產(chǎn)工藝衛(wèi)生輔料的控制、衛(wèi)生管理措施、生產(chǎn)工藝衛(wèi)生防止微生物污染的原則1.1.了解污染源了解污染源 對(duì)藥品生產(chǎn)全過程可能造成污染的來源，進(jìn)行深對(duì)藥品生產(chǎn)全過程可能造成污染的來源，進(jìn)行深入的了解研究，從而設(shè)計(jì)一個(gè)完好的生產(chǎn)工藝，制入的了解研究，從而設(shè)

10、計(jì)一個(gè)完好的生產(chǎn)工藝，制定規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，從各個(gè)環(huán)節(jié)采取消毒定規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，從各個(gè)環(huán)節(jié)采取消毒和衛(wèi)生措施來防止微生物污染，使產(chǎn)品達(dá)到所要求和衛(wèi)生措施來防止微生物污染，使產(chǎn)品達(dá)到所要求的衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量，包括穩(wěn)定性及各種微生物參數(shù)。的衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量，包括穩(wěn)定性及各種微生物參數(shù)。2.2.進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè) 在藥品生產(chǎn)過程中，應(yīng)按在藥品生產(chǎn)過程中，應(yīng)按GMPGMP要求不斷進(jìn)行各項(xiàng)要求不斷進(jìn)行各項(xiàng)微生物衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)。例如：對(duì)潔凈室空氣中的浮游微生物衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)。例如：對(duì)潔凈室空氣中的浮游菌、沉降菌的監(jiān)測(cè)；對(duì)無菌設(shè)備清潔滅菌的驗(yàn)證；菌、沉降菌的監(jiān)測(cè)；對(duì)無菌設(shè)備清潔滅菌的驗(yàn)證；對(duì)非無菌藥品進(jìn)

11、行細(xì)菌和活菌數(shù)測(cè)定和病原菌的限對(duì)非無菌藥品進(jìn)行細(xì)菌和活菌數(shù)測(cè)定和病原菌的限制性檢查等。制性檢查等。二、微生物的分布1、人體內(nèi)外微生物2、水中的微生物3、空氣中的微生物4、物料的微生物微生物的分布人是潔凈區(qū)中最大的污染源！!1、人在代謝過程中會(huì)釋放和分泌污染物。2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。3、人在潔凈室內(nèi)的各種動(dòng)作也會(huì)產(chǎn)生微粒和微生物。人體內(nèi)外微生物的分布微生物的分布 法規(guī)要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中第四節(jié)中明確規(guī)定：1、應(yīng)當(dāng)對(duì)人員健康進(jìn)行管理，并建立健康檔案。直接接觸藥品的生產(chǎn)人員上崗前應(yīng)當(dāng)接受健康檢查，每年至少進(jìn)行一次健康檢查。2、避免體表有傷口、患有傳染病或其他可能污染藥品疾病的人

12、員從事直接接觸藥品生產(chǎn)。3、工作服的選材、式樣及穿戴方式應(yīng)當(dāng)與所從事的工作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)。4、進(jìn)入潔凈生產(chǎn)區(qū)的人員不得化妝和佩帶飾物。5、操作人員應(yīng)當(dāng)避免裸手直接接觸藥品、與藥品直接接觸的包裝材料和設(shè)備表面水中的微生物水體是微生物廣泛分布的第二個(gè)天然環(huán)境。水中的細(xì)菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范第九十八條明確規(guī)定：純化水、注射用水儲(chǔ)罐和輸送管道所用材料應(yīng)當(dāng)無毒、耐腐蝕；儲(chǔ)罐的通氣口應(yīng)當(dāng)安裝不脫落纖維的疏水性除菌過濾器；管道設(shè)計(jì)和安裝應(yīng)當(dāng)避免死角、盲管。純化水、注射用水的制備、貯存和分配應(yīng)當(dāng)能夠防止微生物的滋生。空氣中的微生物空氣不是微生物生長(zhǎng)的良好場(chǎng)

13、所，因?yàn)榭諝獠缓匾乃趾蜖I(yíng)養(yǎng)?？諝庵械奈⑸飦碜曰覊m微粒，來自人的皮膚和衣服，以及談話、咳嗽、打噴嚏等造成的飛沫?？諝庵形⑸锏臄?shù)量取決于灰塵和活動(dòng)狀況?；覊m-“微生物的飛行器”因此空氣侵襲我們產(chǎn)品的污染物的主要媒介。進(jìn)入潔凈區(qū)的空氣要經(jīng)過空氣凈化系統(tǒng)的處理。潔凈區(qū)要定期消毒，使用的消毒劑不得對(duì)設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。工作時(shí)，不要快速走動(dòng)，操作的動(dòng)作要輕、幅度要小，避免不必要的走動(dòng)和動(dòng)作，不要頻繁進(jìn)出潔凈室。物料的微生物1、藥品生產(chǎn)所用的原輔料、與藥品直接接觸的包裝材料應(yīng)當(dāng)符合相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；2、對(duì)重復(fù)使用的盛裝容器，應(yīng)按SOP要求清洗干凈；3、直

14、接與藥品（中間產(chǎn)品）接觸的設(shè)備、工具、容器、內(nèi)包裝容器最后一次沖洗用水應(yīng)與生產(chǎn)用水一致；4、物料凈化包括物料清潔室、氣閘或傳遞窗、備料室、廢棄物料的出口專用傳遞設(shè)施等；5、物料應(yīng)經(jīng)凈化或消毒滅菌后通過物料通道進(jìn)入；6、生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢棄物出口不能與物料進(jìn)口合用一氣閘或傳遞窗，宜單獨(dú)設(shè)置專用傳遞設(shè)施。微生物的控制1、五個(gè)基本概念2、常用的消毒劑3、滅菌的方法微生物的控制五個(gè)基本概念：抑菌：抑制體內(nèi)或體外的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。防腐：防止或抑制體外細(xì)菌繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡，使用同一化學(xué)藥品在低濃度時(shí)為防腐劑，高濃度時(shí)為消毒劑無菌：不存在活菌消毒：殺滅物體上病原微生物的方法。并不消毒：殺滅物體上病原

15、微生物的方法。并不一定殺死含芽孢的細(xì)菌或非病原微生物。用一定殺死含芽孢的細(xì)菌或非病原微生物。用來消毒的藥品叫消毒劑，一般消毒劑在常用來消毒的藥品叫消毒劑，一般消毒劑在常用濃度下只對(duì)細(xì)菌的繁殖體有效，對(duì)其芽孢則濃度下只對(duì)細(xì)菌的繁殖體有效，對(duì)其芽孢則需提高消毒劑的濃度和延長(zhǎng)作用時(shí)間。需提高消毒劑的濃度和延長(zhǎng)作用時(shí)間。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。比消滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。比消毒要求高，它殺滅了包括細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全毒要求高，它殺滅了包括細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。部病原微生物和非病原微生物。滅菌和消毒的比較共性：殺死微生物以控制其污染和防止污染區(qū)別：1、殺滅微生物完全

16、性的差異。滅菌要求完全殺滅微生物，滅菌后的藥品不應(yīng)含有活的微生物。而消毒不完全殺滅微生物，只能殺滅一部分微生物即病原微生物。這是相對(duì)的。因?yàn)閺?qiáng)效消毒劑在適宜條件下可能達(dá)到滅菌效果；不適宜條件下滅菌，有不完全殺滅微生物的可能。2、方法上的差異：滅菌方法具有多樣性，消毒常借化學(xué)物質(zhì)。3、效果檢查的差異：滅菌效果用無菌檢查法檢測(cè)，而消毒效果以消毒劑的小家評(píng)定。常用消毒劑滅菌方法：1、熱力滅菌2、氣體滅菌3、輻射滅菌4、過濾滅菌滅菌方法1、熱力滅菌：主要利用高溫的致死作用，使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物高分子發(fā)生變性、破壞，而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。 分為：干熱滅菌和濕熱滅菌兩種滅菌方法(1)干熱滅菌：灼燒與

17、火焰滅菌 、干烤滅菌 灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪等在火焰上燒灼即可達(dá)到徹底滅菌。 火焰滅菌是在無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復(fù)通過火焰數(shù)次，利用火焰對(duì)管口等進(jìn)行滅菌，防止管口污染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。 干烤滅菌是利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。滅菌方法(2)濕熱滅菌法：通過熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。滅菌效率比干熱滅菌法高。包括：煮沸滅菌、流通蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細(xì)菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時(shí)間達(dá)到滅菌目的。流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100滅菌。僅可

18、殺死細(xì)菌繁殖體，不能完全殺滅芽孢。滅菌方法高壓蒸汽滅菌：通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，穿透力強(qiáng)、溫度高、滅菌效果最好。 是最可靠最適用最廣泛的滅菌方法，凡耐高溫和潮濕的物品可應(yīng)用本法滅菌。注意事項(xiàng)：完全排出高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。（冷空氣存在時(shí)，同一表壓下所達(dá)到的溫度值偏低，不符合規(guī)定的要求，滅菌就不徹底。滅菌方法2、氣體滅菌：利用化學(xué)消毒劑形成的氣體來殺滅微生物。臭氧殺菌消毒廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種清新的感覺，是因?yàn)榭罩蟹烹姰a(chǎn)生臭氧，消滅了空氣中的微生物，凈化了空氣。臭氧具有強(qiáng)烈的殺菌消毒作用。其殺菌消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧和單個(gè)氧分子，后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌具有很強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化滅菌方法 分解了細(xì)菌內(nèi)氧化葡萄糖所必需的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普通氧分子，不存在任何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。不但對(duì)各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸