食品中苯甲酸的測定

1、食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定高效液相色譜法原理不同樣品經(jīng)提取后，將提取液過濾，經(jīng)反相高效液相色譜分離測定，根據(jù)保留時間定性，外標(biāo)峰面積定量。試劑和材料除另有說明外，所用試劑均為分析純，實驗用水符合GB/T6682要求。甲醇：色譜純。乙酸錢溶液：稱取乙酸錢，加水溶解并稀釋至1000mL經(jīng)微孔濾膜過濾。亞鐵氟化鉀溶液：稱取106g亞鐵氟化鉀K4Fe（CN）63H2O加水至1000mL乙酸鋅溶液：稱取220g乙酸鋅Zn（CH3COQ>2H2O溶于少量水中，加入30mL冰醋酸，加水稀釋至1000mL。氨水（1+1）：氨水與水等體積混合。正己烷。乙酸鹽緩沖溶液：a）乙酸鈉溶液：稱取乙酸鈉（C

2、HCOONa3H2O），用水溶解后定容至1000mLb）乙酸溶液：稱取冰乙酸，用水稀釋至1000mL將上述兩種溶液按體積比37:63混合，即得乙酸鹽緩沖溶液。磷酸鹽緩沖溶液：a）稱取磷酸氫二鈉（NaHPO12HO）,用水溶解后定容至1000mLb）稱取磷酸二氫鉀（KH2PO4），用水溶解后定容至1000mL。將上述兩種磷酸鹽溶液按體積比7:3混合，即得磷酸鹽緩沖液。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：a）苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取苯甲酸鈉，加水溶解并定容至200mL此溶液每毫升相當(dāng)于含苯甲酸。b）山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取山梨酸鉀，加水溶解并定容至200mL此溶液每毫升相當(dāng)于含山梨酸。c）糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱

3、取糖精鈉（C6H4CONNaS2）O（120烘干4h），加水溶解并定容至200mL此溶液中糖精鈉的含量為mLd）混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：分別準(zhǔn)確吸取不同體積苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，將其稀釋成苯甲酸、山梨酸和糖精鈉含量分別為mL、mL、mL、mL、mLmL的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。微孔濾膜：仙m水相。儀器與設(shè)備高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min超聲波水浴振蕩器。食品粉碎機(jī)。旋渦混合器。pH計。天平：分度值為和。分析步驟樣品處理液體樣品碳酸飲料、果酒、葡萄酒等液體樣品：稱取10g樣品（精確至）（如含有乙醇需水浴加熱除去乙醇后再用水定容至原體積）于25mL容量瓶中，用氨

4、水（1+1）調(diào)節(jié)pH至近中性，用水定容至刻度，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。乳飲料、植物蛋白飲料等含蛋白質(zhì)較多的樣品：稱取10g樣品（精確至）于25mL容量瓶中，加入2mL鐵氟化鉀溶液，搖勻，再加入2mL乙酸鋅溶液搖勻，以沉淀蛋白質(zhì)，加水定容至刻度，4000r/min離心10min,取上清液，經(jīng)微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。半固體樣品含有膠基的果凍樣品：稱取1g樣品（精確至），加水適量，轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，再加水至約20mL置60c70c水浴中加熱片刻，加塞，劇烈振搖使其分散均勻后，加氨水（1+1）調(diào)節(jié)pH至近中性，加塞，劇烈振搖，使樣品在水中分散均勻，置60c70c水浴鍋中加熱3

5、0min,取出后趁熱超聲5min,冷卻后用水定容至刻度，用微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。油脂、奶油類樣品：稱取2g3g樣品（精確至）于50mL具塞離心管中，加入10mL正己烷，用旋渦混合器使其充分溶解，4000r/min離心3min,吸出正己烷提取液轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，再向50mL具塞離心管中加入10mL正己烷重復(fù)上述步驟，合并正己烷提取液于250mL分液漏斗中。于分液漏斗中加入乙酸鹽緩沖溶液加塞后劇烈振搖分液漏斗約30s,靜置分層后，將水層轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，再加入乙酸鹽緩沖溶液，重復(fù)上述步驟，合并水層并用乙酸鹽緩沖溶液定容至刻度，經(jīng)微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。固體樣品肉制品、

6、餅干、糕點：稱取粉碎均勻樣品2g3g（精確至）于小燒杯中，用20mLK分?jǐn)?shù)次清洗小燒杯將樣品移入25mL容量瓶中，超聲振蕩提取5min,取出后加2mL亞鐵氟化鉀溶液，搖勻，再加入2mL乙酸鋅溶液，搖勻，用水定容至刻度，移入離心管中，4000r/min離心5min,吸出上清液，用微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。油脂含量高的火鍋底料、調(diào)料等樣品：稱取樣品2g3g（精確至）于50mL具塞離心管中，加入10mL磷酸鹽緩沖液，用旋渦混合器充分混合，然后于4000r/min離心5min,小心吸出水層轉(zhuǎn)移至ij25mL容量瓶中，再加入10mL磷酸鹽緩沖液于具塞離心管中，重復(fù)上述步驟，合并兩次水層液，用磷酸鹽緩

7、沖液定容至刻度，混勻，用微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。凝膠糖果、膠基糖果：按半固體樣品含有膠基的果凍樣品處理。色譜條件a）色譜柱：C18柱，250mme,5m,或性能相當(dāng)者；b）流動相：甲醇（）+乙酸錢溶液（）（5+95）;c）流速：1mL/min；d）檢測波長：230nme）進(jìn)樣量：10仙L。測定取處理液和混合標(biāo)準(zhǔn)使用液各10仙L注入高興液相色譜儀進(jìn)行分離，以其標(biāo)準(zhǔn)溶液峰的保留時間為依據(jù)定性，以其峰面積求出樣液中被測物質(zhì)含量，供計算。結(jié)果計算標(biāo)準(zhǔn)品四條校正曲線安賽章預(yù)期保留時間：二入,波nm,TT相關(guān)性：u.73栽用標(biāo)準(zhǔn)誤姜:7,S3137公式：yiiDt+bm:53.0&485b:3.1243K：含量:q/kgjy：面根米甲酸預(yù)期保留時間；8.721VWD1A,波長=二14nra,TT相關(guān)性：0.5937笠留標(biāo)準(zhǔn)誤差；20.25C£2公式：y=rax+bm:92,7735b114.42800k：,含呈；g/1kgl|y;面積精精鈉 預(yù)期 保留時間：13.054VWD1A,波長=之工4相關(guān)性；殘留標(biāo)準(zhǔn)誤差;公式£Y=ITLK+b62.94009TUlljr TT4.19194含量g，hg面枳