醫(yī)學白血病患者血清VEGF和sfas水平及其監(jiān)測價值

1、醫(yī)學白血病患者血清VEGF和sfas水平及其監(jiān)測價值【摘要】目的觀察與分析白血病患者血清VEGF和sFas水平及其監(jiān)督價值。方法對72例白血病患者血清VEGF和sFas水平運用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）進行同步檢測，并對其水平變化的相關性進行比較。其中VEGF水平以VEGF/PLT的較正值表示。結(jié)果初發(fā)組和難治/復發(fā)組VEGF和sFas水平明顯高于正常對照組和緩解組(P0.01)，難治/復發(fā)組高于初發(fā)組(P0.05)。可見VEGF與sFas與乳酸脫氫酶（LDH）存在肯定相關性。結(jié)論對血清VEGF和sFas水平進行監(jiān)測有利于評價白血病的病理狀態(tài)及轉(zhuǎn)歸，具有肯定的臨床監(jiān)測價值。 【關鍵詞】白血

2、病血管內(nèi)皮細胞生長因子可溶性Fas 血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）通過旁分泌方式作用于血管內(nèi)皮細胞促使血管新生，并以自分泌方式作用于腫瘤細胞表面的VEGF受體，促使腫瘤細胞增殖，阻止其凋亡的同時也增強了對化療藥物的抵擋作用，可見VEGF與血液系統(tǒng)惡性腫瘤之間存在的肯定的關系。Fas/FasL是一對在腫瘤細胞凋亡中起著重要作用的膜蛋白分子，sFas是缺乏跨膜區(qū)的可溶性Fas分子，通過與膜Fas結(jié)合Fasl而阻斷由Fas介導的細胞凋亡。影響白血病化療失利的主要原因是白血病細胞多藥耐藥（MDR）。通過大量研究表明：白血病的發(fā)病與VEGF、sFas有著密切關系，由于當今醫(yī)學界對二者聯(lián)合研究較少，所以

3、研究VEGF、sFas兩者之間的相關性對進一步了解白血病發(fā)病機制和MDR機制有著很大幫助。本文通過對白血病患者血清VEGF和sFas水平采用ELISA法進行同步測定，并對兩者相關性進行分析。 一材料與方法 1觀察對象：72例白血病患者的血清標本均經(jīng)臨床表現(xiàn)、細胞形態(tài)學和細胞組化染色確診，并排除了其糖尿病、免疫系統(tǒng)疾病或其他惡性腫瘤性疾病的可能。其中男性38例，女性34例，年齡1680歲。初發(fā)26例，難治/復發(fā)18例，完全緩解/部分緩解28例。正常對照組中64例健康體檢合格，男性30例，女性34例，年齡2267歲。 2血清標本采集：患者均在清晨空腹情況下進行血清采集，5ml不抗凝靜脈血，以200

4、0轉(zhuǎn)/min運行2小時，20min后離心，將所得標本分開存放在-20溫度下，避免其反復融凍。 3血清VEGF、sFas水平測定：通過雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對血清VEGF及sFas水平進行檢測，并嚴格按照操作步驟進行。通過標化VEGF測定值（pg/ml）和血小板計數(shù)，并取標化值VEGF/PLT(pg/106)為最終指標來減小因血小板數(shù)差異造成的系統(tǒng)誤差。 4統(tǒng)計學方法：用SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)以S表示，采用F方差分析進行組間比較；采用相關系數(shù)的顯著性檢驗其變量間的關系。 二結(jié)果 1血清VEGF和sFas在白血病的表達(其中VEGF水平以VEGF/PLT標化值表示)，

5、詳見表1。 表1各組研究對象血清VEGF及sFas水平的測定注:與正常對照組比較,*P0.01;與初發(fā)組比較,P0.01。 1.1VEGF水平：初發(fā)組和難治/復發(fā)組明顯高于對照組，兩者差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01)；難治/復發(fā)組明顯高于初發(fā)組(P0.05)。 1.2sFas水平：初發(fā)搭配難治/復發(fā)組明顯高于對照組(P0.01)；難治/復發(fā)組明顯高于初發(fā)組(P0.05)。 2VEGF、sFas與LDH之間的關系 根據(jù)LDH中位置（188u/L）將白血病患者分為A、B兩組，并對其血清VEGF和sFas水平進行比較，A組(LDH188u/L)，B組(LDH188u/L)，得出結(jié)論：A組VEGF和s

6、Fas值均明顯低于B組，且兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P值均0.01)，詳見表2。 表2白血病A、B兩組血清VEGF和sFas之間的比較三討論 近年來，雖然不斷出現(xiàn)白血病的化療藥物，但其多藥耐藥性一直阻礙其正常治療，使很多患者因為細胞耐藥導致化療失利。究其原因還是因為白血病細胞抵擋化療藥物誘導的細胞凋亡而造成。 目前所知，最強的正性血管生成調(diào)節(jié)因子是血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF），由于其不僅影響著白血病的發(fā)生發(fā)展，還與腫瘤細胞耐藥有關，所以它與血液系統(tǒng)惡性腫瘤的關系已逐漸被人們所重視。在凝血過程中，由于血小板釋放的VEGF在肯定程度上對血小板造成影響，所以血小板數(shù)目會明顯影響血清VEGF的水平。

7、多數(shù)急性白血病患者外周血中血小板水平較低，所以應考慮因血小板數(shù)過低導致凝血過程中血小板釋放的VEGF減少對血清總VEGF水平造成的誤差。故本實驗將血清VEGF濃度和外周血小板計數(shù)的商值作為標化值來反應白血病患者血清VEGF的實際水平。另有報道稱：VEGF會對CP-16、阿霉素等藥物殺傷白細胞產(chǎn)生抵擋作用。這些研究分析都可以表明抑制VEGF對提高白血病細胞對化療藥物的敏感性有肯定的幫助，具有臨床意義。 Fas是一種屬于腫瘤壞死因子的跨膜糖蛋白。Caspase酶原會由于Fas與配體或抗Fas的結(jié)合導致其激活，使得敏感Fas陽性細胞凋亡。Fas在轉(zhuǎn)基因過程中產(chǎn)生的Fas蛋白從細胞膜中脫落形成sFas

8、，與Fas結(jié)合后生成FasL，從而抵擋Fas介入的細胞凋亡。實驗表明：難治/復發(fā)組的血清sFas水平明顯高于正常對照組，經(jīng)過化療后的緩解組患者血清sFas水平明顯得到改善，但與正常組比較無明顯差異?？梢?，作為凋亡抑制因子的sFas會影響到白血病細胞MDR，它的降低變化，會給細胞凋亡機制帶來影響，不利于化療，以至引起細胞耐藥。 研究發(fā)現(xiàn)：一些原癌基因的激活、抑癌基因的失活或某些細胞因子的改變是可能導致VEGF過高的原因。實驗表明VEGF可通過對抗凋亡基因MCL1的誘導而抑制caspase3酶的活性，從而抵擋化療藥物誘導細胞凋亡的作用，最終導致MDR的產(chǎn)生。所以，加強對VEGF促白血病細胞增殖及抗

9、凋亡的機制以及與其他抗凋亡因子之間關系的研究力度，會對研制新的白血病治療方案產(chǎn)生積極作用。 綜上所述，VEGF，sFas與白血病的MDR在不同程度上存在有相關性，但如今對兩者詳細聯(lián)系的研究開展并不多，通過本文研究可以發(fā)現(xiàn)，白血病患者VEGF和sFas在表達上存在明顯正相關性，可見兩者在抗凋亡方面或許存在一些關系，但畢竟是不是這樣，還要通過以后的研究分析才能明白。乳酸脫氫酶（LDH）作為反應腫瘤負荷的一個指標，其顯示降低，則說明白血病的預后不良。我們在上面的實驗中將白血病患者按照LDH的中位值分為兩組進行比較，發(fā)現(xiàn)LDH中位值以上組的患者sFas和VEGF水平明顯高于中位值以下組患者的水平，則可以說明sFas和VEGF與白血病腫瘤負荷之間可能存在肯定的關聯(lián)，若將其作為監(jiān)測病情、判斷預后情況的標準，對白血病的治療與診斷將產(chǎn)生積極意義。通過上述實驗，可以很好的對腫瘤細胞耐藥機制進行了解，并對利用誘導細胞凋亡來抵擋腫瘤細胞耐藥這一點上面提供肯定的臨床依據(jù)。但由于患者體內(nèi)環(huán)境復雜多變，加上條件器械有限等原因，對是否能通過在體內(nèi)誘導凋亡來逆轉(zhuǎn)腫瘤MDR進行治療，還需更多的工夫，更多的研究來證明。 參考文獻 1楊純正,王樹濱.腫瘤化療和細胞凋亡J.中華血液學雜