生化實(shí)驗(yàn)基本操作要求-文檔資料

1、1生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作2一一. 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作玻璃儀器的洗滌玻璃儀器的洗滌洗滌干凈的標(biāo)準(zhǔn)：在生化實(shí)驗(yàn)中，玻璃儀器潔凈與洗滌干凈的標(biāo)準(zhǔn)：在生化實(shí)驗(yàn)中，玻璃儀器潔凈與否，是獲得準(zhǔn)確結(jié)果的重要環(huán)節(jié)。潔凈的玻璃儀器否，是獲得準(zhǔn)確結(jié)果的重要環(huán)節(jié)。潔凈的玻璃儀器內(nèi)壁應(yīng)十分明亮光潔，無水珠附著在玻壁上。內(nèi)壁應(yīng)十分明亮光潔，無水珠附著在玻壁上。3 常用的洗滌方法：常用的洗滌方法：1.一般儀器（如燒杯、試管等）：一般儀器（如燒杯、試管等）： 可用毛刷蘸肥皂液、合成洗滌劑仔細(xì)刷洗。然后用自來水反復(fù)可用毛刷蘸肥皂液、合成洗滌劑仔細(xì)刷洗。然后用自來水反復(fù)沖洗，最后用少量蒸

2、餾水沖洗沖洗，最后用少量蒸餾水沖洗2323次，倒置在器皿架上晾干或置次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干備用。于烘箱烤干備用。 2.容量分析儀器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）容量分析儀器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）：不能用毛刷刷洗。用后應(yīng)及時(shí)用自來水多次沖洗，細(xì)心檢查潔不能用毛刷刷洗。用后應(yīng)及時(shí)用自來水多次沖洗，細(xì)心檢查潔凈程度，根據(jù)掛不掛水珠采取不同處理方法。凈程度，根據(jù)掛不掛水珠采取不同處理方法。 （1 1）如不掛水珠，用蒸餾水沖洗、干燥，方法同上；）如不掛水珠，用蒸餾水沖洗、干燥，方法同上； （2 2）如掛水珠，則應(yīng)瀝干后用重鉻酸鉀洗液浸泡）如掛水珠，則應(yīng)瀝干后用重鉻酸鉀洗液浸泡464

3、6小時(shí)，小時(shí)，然后按上法順序操作，即先用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，然后按上法順序操作，即先用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗，最后干燥。最后干燥。4 3.粘附有血漿的刻度吸量管等，有三種洗滌方法：粘附有血漿的刻度吸量管等，有三種洗滌方法：（1 1）先用）先用45%45%尿素溶液浸泡，使血漿蛋白溶解，然后用自來水尿素溶液浸泡，使血漿蛋白溶解，然后用自來水沖洗；沖洗；（2 2）也可用）也可用1%1%氨水浸泡，使血漿溶解，然后再依次用氨水浸泡，使血漿溶解，然后再依次用1%1%稀鹽稀鹽酸溶液、自來水沖洗；酸溶液、自來水沖洗；（3 3）以上二法如達(dá)不到清潔要求，可浸泡于重鉻酸鉀洗液）以上二法如達(dá)不到清潔要求

4、，可浸泡于重鉻酸鉀洗液4646小時(shí)，再用大量自來水沖洗，最后用蒸餾水沖洗小時(shí)，再用大量自來水沖洗，最后用蒸餾水沖洗2323次。次。 4.新購置的玻璃儀器新購置的玻璃儀器: 應(yīng)先置于應(yīng)先置于12%12%稀鹽酸溶液中浸泡稀鹽酸溶液中浸泡2626小時(shí)，除去附著的游離小時(shí)，除去附著的游離堿，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗堿，再用自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗2323次。次。5 凡用過的玻璃儀器，均應(yīng)立即洗滌，久置凡用過的玻璃儀器，均應(yīng)立即洗滌，久置 干涸后洗滌十分困難。如不能及時(shí)洗滌，先干涸后洗滌十分困難。如不能及時(shí)洗滌，先用流水初步?jīng)_洗后浸泡在清水中，待后按常用流水初步?jīng)_洗后浸泡在清水中，待

5、后按常規(guī)處理。規(guī)處理。 6 二二. 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作吸量管的使用吸量管的使用 吸量管和定量吸吸量管和定量吸(移移)液器液器(微量加樣器微量加樣器)均為用來轉(zhuǎn)移均為用來轉(zhuǎn)移一定體積溶液的量器。一定體積溶液的量器。 吸量管：吸量管：生化實(shí)驗(yàn)中常用的有三種，最常用生化實(shí)驗(yàn)中常用的有三種，最常用的是刻度吸量管。的是刻度吸量管。7 1.刻度吸量管：刻度吸量管：刻度吸量管的種類：刻度吸量管的種類： 按容量規(guī)格來分按容量規(guī)格來分，有，有0.10.1、0.20.2、0.250.25、0.50.5、1 1、2 2、5 5、10ml10ml等數(shù)種。其精等數(shù)種。其精密度按不同的容積可達(dá)移取量

6、的密度按不同的容積可達(dá)移取量的0.11%0.11%。通常將管身標(biāo)明的總?cè)萘糠挚虨?。通常將管身?biāo)明的總?cè)萘糠挚虨?00100等分。因此，等分。因此，10ml10ml的吸量管一格代表的吸量管一格代表0.1ml0.1ml；1ml1ml的吸量管一格代表的吸量管一格代表0.01ml,0.01ml,其余類推。其余類推。按按“零零”點(diǎn)位置來分點(diǎn)位置來分，有，有“0 0”點(diǎn)在吸量管上端的（即讀數(shù)從上而下逐點(diǎn)在吸量管上端的（即讀數(shù)從上而下逐漸增大），也有漸增大），也有“0 0”點(diǎn)在吸量管下端的（讀數(shù)從下而上逐漸增大點(diǎn)在吸量管下端的（讀數(shù)從下而上逐漸增大) )。兩種。兩種標(biāo)示方法，在使用時(shí)各有方便之處。標(biāo)示方法，

7、在使用時(shí)各有方便之處。按刻度方法來分按刻度方法來分，刻度吸量管也有兩種，一種是刻度刻到尖端的，將液，刻度吸量管也有兩種，一種是刻度刻到尖端的，將液體放出時(shí)，應(yīng)吹出殘留在吸量管尖端的少量液體，另一種是刻度不刻到尖體放出時(shí)，應(yīng)吹出殘留在吸量管尖端的少量液體，另一種是刻度不刻到尖端的。端的。 8 刻度吸量管的正確使用方法：刻度吸量管的正確使用方法： 用右手拇指和中指夾住管身，將吸量管的尖端伸入試液深處，用右手拇指和中指夾住管身，將吸量管的尖端伸入試液深處，左手持洗耳球把試液吸入管內(nèi)至高過刻度以上時(shí)，迅速用右左手持洗耳球把試液吸入管內(nèi)至高過刻度以上時(shí)，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制試液的泄放。

8、吸液后應(yīng)盡手食指按住吸量管的上口，以控制試液的泄放。吸液后應(yīng)盡量使吸量管保持垂直，使右眼與刻度等高，稍微輕抬食指或量使吸量管保持垂直，使右眼與刻度等高，稍微輕抬食指或輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)吸量管，使試液面緩慢降落，至管內(nèi)試液彎月面的輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)吸量管，使試液面緩慢降落，至管內(nèi)試液彎月面的最低點(diǎn)與吸量管的刻度線相齊為止。最低點(diǎn)與吸量管的刻度線相齊為止。9 然后將吸量管插到需加試劑的容器中，讓尖端與容器內(nèi)壁然后將吸量管插到需加試劑的容器中，讓尖端與容器內(nèi)壁靠緊，松開食指讓液體流出。液體流完后再等靠緊，松開食指讓液體流出。液體流完后再等1515秒鐘，捻秒鐘，捻動(dòng)一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，則吹出尖端的液動(dòng)一下吸

9、量管后移去（如需吹的吸量管，則吹出尖端的液體后再捻轉(zhuǎn)一下吸量管移去）。體后再捻轉(zhuǎn)一下吸量管移去）。10 使用刻度吸量管的注意事項(xiàng)：使用刻度吸量管的注意事項(xiàng)： 選擇適當(dāng)規(guī)格的吸量管：吸量管的最大容積應(yīng)等于或略大選擇適當(dāng)規(guī)格的吸量管：吸量管的最大容積應(yīng)等于或略大于所需容積（于所需容積（mlml數(shù)）。數(shù)）。 仔細(xì)看清吸量管的刻度情況：刻度是否包括吸量管尖端的仔細(xì)看清吸量管的刻度情況：刻度是否包括吸量管尖端的液體？讀數(shù)方向是從上而下，還是從下而上？液體？讀數(shù)方向是從上而下，還是從下而上？ 拿吸量管時(shí)，刻度一定要面向自己，以便讀數(shù)。拿吸量管時(shí)，刻度一定要面向自己，以便讀數(shù)。 吸取試劑時(shí)應(yīng)注意三點(diǎn)：一是先

10、吹去吸量管內(nèi)可能存在的吸取試劑時(shí)應(yīng)注意三點(diǎn)：一是先吹去吸量管內(nèi)可能存在的殘留液體，二是將吸量管插入試劑液面深部殘留液體，二是將吸量管插入試劑液面深部( (以免吸液過程中以免吸液過程中因液面降低而吸入空氣產(chǎn)生氣泡或管內(nèi)試劑進(jìn)入洗耳球因液面降低而吸入空氣產(chǎn)生氣泡或管內(nèi)試劑進(jìn)入洗耳球) )，三，三是使用洗耳球是使用洗耳球( (不可直接用口吸不可直接用口吸) )。11 按吸量管上口時(shí)應(yīng)該用食指，不能用拇指。按吸量管上口時(shí)應(yīng)該用食指，不能用拇指。 吸取粘滯性大的液體吸取粘滯性大的液體( (如血液、血漿、血清等如血液、血漿、血清等) )時(shí)，除選用合時(shí)，除選用合適的吸管適的吸管( (奧氏管奧氏管) )外，應(yīng)

11、注意拭凈管尖附著的液體，盡量減慢外，應(yīng)注意拭凈管尖附著的液體，盡量減慢放液速度放液速度( (用食指壓力控制用食指壓力控制) )，待液體流盡后吹出管尖殘留的最，待液體流盡后吹出管尖殘留的最后一滴液體。后一滴液體。 使用的吸量管應(yīng)干凈、干燥無水。如急用而又有水時(shí)，可使用的吸量管應(yīng)干凈、干燥無水。如急用而又有水時(shí)，可用少量欲取試劑沖洗用少量欲取試劑沖洗3 3次，以免試劑被稀釋。次，以免試劑被稀釋。 12 定量吸定量吸(移移)液器液器(微量加樣器微量加樣器)： 定量吸液器是吸量管的革新產(chǎn)品。由塑料制成。目定量吸液器是吸量管的革新產(chǎn)品。由塑料制成。目前，因產(chǎn)地廠家不同其質(zhì)量、價(jià)格差異十分懸殊。前，因產(chǎn)地

12、廠家不同其質(zhì)量、價(jià)格差異十分懸殊。 1.定量吸液器的優(yōu)點(diǎn)：定量吸液器的優(yōu)點(diǎn)：使用方便，取、加樣迅速，計(jì)使用方便，取、加樣迅速，計(jì)量準(zhǔn)確，不易破損，能吸取多種樣品（只換吸嘴即量準(zhǔn)確，不易破損，能吸取多種樣品（只換吸嘴即可）。可）。 13 2.定量吸液器的類型：定量吸液器的類型：有兩種類型。有兩種類型。 固定式：固定式：只能取加一定容量的試劑，不能隨意調(diào)只能取加一定容量的試劑，不能隨意調(diào)節(jié)取加樣量。其規(guī)格有節(jié)取加樣量。其規(guī)格有10l10l、20l20l、25l25l、30l30l、50l50l、100l100l、200l200l、250l250l、300l300l、400l400l、500l500

13、l、1000l1000l等。等。14 可調(diào)式：可調(diào)式：在一定容量范圍內(nèi)可根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)節(jié)取加樣量。在一定容量范圍內(nèi)可根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)節(jié)取加樣量。例如規(guī)格為例如規(guī)格為5050200l200l的可調(diào)式定量吸液器，可以在的可調(diào)式定量吸液器，可以在5050到到200l200l的范圍內(nèi)根據(jù)需要調(diào)節(jié)成設(shè)計(jì)容許的各種取加樣容量（的范圍內(nèi)根據(jù)需要調(diào)節(jié)成設(shè)計(jì)容許的各種取加樣容量（60l60l、85l85l、110l110l、170l170l、200l200l等）。等）。一般來講，固定式吸液器比較準(zhǔn)確，可調(diào)式吸液器一般來講，固定式吸液器比較準(zhǔn)確，可調(diào)式吸液器使用較為方便。使用較為方便。15 3.定量吸液器的使用方法

14、：定量吸液器的使用方法： 選擇適當(dāng)?shù)奈浩?。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上選擇適當(dāng)?shù)奈浩鳌Ｎ呵跋劝盐焯自谖苌?，套上后要輕輕旋緊一下，以保證結(jié)合嚴(yán)密。后要輕輕旋緊一下，以保證結(jié)合嚴(yán)密。 持法：右手四指（除大拇指外）并攏握住吸液器外殼（使持法：右手四指（除大拇指外）并攏握住吸液器外殼（使外殼突起部分搭在食指近端），大拇指輕輕放在吸液器的按外殼突起部分搭在食指近端），大拇指輕輕放在吸液器的按鈕上。鈕上。 取樣取樣( (吸液吸液) )：用大拇指按下按鈕到第一停止點(diǎn)，以排出一定：用大拇指按下按鈕到第一停止點(diǎn)，以排出一定容量的空氣，隨后把吸嘴尖浸入取樣液內(nèi)，徐徐松開大拇指，容量的空氣，隨后把吸

15、嘴尖浸入取樣液內(nèi)，徐徐松開大拇指，讓按鈕慢慢自行復(fù)原，取樣即告完成。讓按鈕慢慢自行復(fù)原，取樣即告完成。 16 排液：將吸液器的吸嘴尖置于加樣容器壁上，用大拇指慢排液：將吸液器的吸嘴尖置于加樣容器壁上，用大拇指慢慢地將按鈕按下到第一停止點(diǎn)，停留慢地將按鈕按下到第一停止點(diǎn)，停留1 1秒鐘（粘性較高的溶液秒鐘（粘性較高的溶液停留時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長）。然后再把按鈕按到第二停止點(diǎn)上，停留時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長）。然后再把按鈕按到第二停止點(diǎn)上，讓吸嘴沿管壁向上滑動(dòng)。當(dāng)吸嘴尖與容器壁或溶液離開時(shí)，讓吸嘴沿管壁向上滑動(dòng)。當(dāng)吸嘴尖與容器壁或溶液離開時(shí)，方可釋放按鈕，使其恢復(fù)到初始位置。方可釋放按鈕，使其恢復(fù)到初始位置。 吸

16、液器用后應(yīng)及時(shí)取下吸嘴。將吸嘴用自來水沖洗后浸入吸液器用后應(yīng)及時(shí)取下吸嘴。將吸嘴用自來水沖洗后浸入盛水的容器內(nèi)（以防干涸），待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后集中仔細(xì)清洗。盛水的容器內(nèi)（以防干涸），待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后集中仔細(xì)清洗。 17 三三. 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作溶液的混勻溶液的混勻 混勻的目的：混勻的目的： 使反應(yīng)體系內(nèi)的各種物質(zhì)分子很好地互相接觸，使反應(yīng)體系內(nèi)的各種物質(zhì)分子很好地互相接觸，充分進(jìn)行反應(yīng)；充分進(jìn)行反應(yīng)； 使欲稀釋的溶液成為濃度均一的溶液。使欲稀釋的溶液成為濃度均一的溶液。 18 混勻的方法通常有以下幾種：混勻的方法通常有以下幾種： 使盛器作離心運(yùn)動(dòng)。使盛器作離心運(yùn)動(dòng)。 左手持試管上

17、端，用右手指輕擊試管下半部，使管內(nèi)溶液左手持試管上端，用右手指輕擊試管下半部，使管內(nèi)溶液作旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。作旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。 利用旋渦混合（振蕩）器混勻。利用旋渦混合（振蕩）器混勻。 不得已時(shí)可用干燥清潔的玻璃棒攪勻。不得已時(shí)可用干燥清潔的玻璃棒攪勻。 19 混勻的注意事項(xiàng)：混勻的注意事項(xiàng)： 防止盛器內(nèi)的液體濺出或被污染。防止盛器內(nèi)的液體濺出或被污染。 嚴(yán)禁用手指堵塞管口或瓶口震蕩混勻。嚴(yán)禁用手指堵塞管口或瓶口震蕩混勻。20 四四. 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作離心機(jī)的使用離心機(jī)的使用 離心法是分離沉淀的一種方法。它是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)離心法是分離沉淀的一種方法。它是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)產(chǎn)生的離心力，使比

18、重較大的物質(zhì)沉積在管底，動(dòng)產(chǎn)生的離心力，使比重較大的物質(zhì)沉積在管底，以達(dá)到與液體分離的目的。因液體在沉淀的上部，以達(dá)到與液體分離的目的。因液體在沉淀的上部，故稱清亮的液體部分為故稱清亮的液體部分為上清液上清液。 21 電動(dòng)離心機(jī)的使用方法：電動(dòng)離心機(jī)的使用方法： 1. 1.將欲離心的液體，置于離心管或小試管內(nèi)。并檢查離心管或?qū)⒂x心的液體，置于離心管或小試管內(nèi)。并檢查離心管或小試管的大小是否與離心機(jī)的套管相匹配。小試管的大小是否與離心機(jī)的套管相匹配。 2. 2.取出離心機(jī)的全部套管，并檢查套管底部是否鋪有軟墊，有取出離心機(jī)的全部套管，并檢查套管底部是否鋪有軟墊，有無玻璃碎片或漏孔（有玻璃碎片必須取出，漏孔應(yīng)該用蠟封無玻璃碎片或漏孔（有玻璃碎片必須取出，漏孔應(yīng)該用蠟封?。?。檢查合格后，將盛有離心液的兩個(gè)試管分別放入套管?。?。檢查合格后，將盛有離心液的兩個(gè)試管分別放入套管中，然后連套管一起分置于粗天平的兩側(cè)，通過往離心管與中，然后連套管一起分置于粗天平的兩側(cè)，通過往離心管與套管之間滴加水來調(diào)節(jié)兩邊的重量使之達(dá)到平衡。套管之間滴加水來調(diào)節(jié)兩