實(shí)驗(yàn)三、口服撲熱息痛生物利用度和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)三 口服撲熱息痛生物利用度 和藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握口服給藥后測(cè)定制劑生物利用度的原理和計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的方法；2.熟悉撲熱息痛血液樣品的處理和檢測(cè)；3.熟悉家兔口服給藥。生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件二、基本原理1.血管外給藥藥物動(dòng)力學(xué)血管外給藥藥物動(dòng)力學(xué)血管外給藥途徑包括血管外給藥途徑包括口服口服、肌肉注射、皮下注射、透皮給藥、粘膜給、肌肉注射、皮下注射、透皮給藥、粘膜給藥等，相比于血管內(nèi)給藥，血管外給藥后，藥物有一個(gè)吸收過程。因藥等，相比于血管內(nèi)給藥，血管外給藥后，藥物有一個(gè)吸收過程。因此血管外給藥后，藥物的吸收和消除常用一級(jí)過程描

2、述，即藥物以一此血管外給藥后，藥物的吸收和消除常用一級(jí)過程描述，即藥物以一級(jí)速度過程吸收進(jìn)入體內(nèi)，然后以一級(jí)速度過程從體內(nèi)消除，級(jí)速度過程吸收進(jìn)入體內(nèi)，然后以一級(jí)速度過程從體內(nèi)消除，為一級(jí)為一級(jí)藥物動(dòng)力學(xué)吸收模型。藥物動(dòng)力學(xué)吸收模型。 2.撲熱息痛撲熱息痛 為乙酰苯胺類解熱鎮(zhèn)痛藥。通過抑制環(huán)氧化酶，選擇性抑制下丘腦體為乙酰苯胺類解熱鎮(zhèn)痛藥。通過抑制環(huán)氧化酶，選擇性抑制下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞前列腺素的合成，導(dǎo)致外周血管擴(kuò)張、出汗而達(dá)到解熱的溫調(diào)節(jié)中樞前列腺素的合成，導(dǎo)致外周血管擴(kuò)張、出汗而達(dá)到解熱的作用，其解熱作用強(qiáng)度與阿司匹林相似作用，其解熱作用強(qiáng)度與阿司匹林相似；通過抑制前列腺素等的合成通過抑制

3、前列腺素等的合成和釋放，提高痛閾而起到鎮(zhèn)痛作用，屬于和釋放，提高痛閾而起到鎮(zhèn)痛作用，屬于外周性鎮(zhèn)痛藥外周性鎮(zhèn)痛藥，作用較阿司，作用較阿司匹林弱匹林弱，一般一般口服給藥口服給藥有效。有效。撲熱息痛口服易吸收，血藥濃度撲熱息痛口服易吸收，血藥濃度0.5-1.0 h達(dá)峰值，吸收后在體內(nèi)分布達(dá)峰值，吸收后在體內(nèi)分布均勻，約有均勻，約有25%與血漿蛋白結(jié)合與血漿蛋白結(jié)合，大劑量時(shí)與血漿蛋白結(jié)合可達(dá)，大劑量時(shí)與血漿蛋白結(jié)合可達(dá)43%；因此本實(shí)驗(yàn)采用因此本實(shí)驗(yàn)采用血漿血漿作為測(cè)定樣品（加肝素鈉抗凝）。作為測(cè)定樣品（加肝素鈉抗凝）。生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件血管外給藥后藥物的吸收以及消除過程：X0X0為給

4、藥劑量；F為吸收率；Xa為吸收部位藥量；Ka為一級(jí)吸收速率常數(shù)；X為體內(nèi)藥量；K為一級(jí)消除速率常數(shù)。藥學(xué)代謝動(dòng)力學(xué)公式：tmax=2.303/(Ka-K)lg(Ka/K) Cmax=FX0/V*e-ktmax應(yīng)用拋物線法擬合計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（應(yīng)用拋物線法擬合計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（tmax、Cmax、K、Ka等），殘數(shù)法計(jì)算等），殘數(shù)法計(jì)算ka、ka、V、t1/2、AUC。取近峰值三個(gè)血藥濃度時(shí)間點(diǎn)，代入拋物線方程：取近峰值三個(gè)血藥濃度時(shí)間點(diǎn)，代入拋物線方程：Y=aX生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件FXaKaXK拋物線拋物線擬合擬合tmax代入方程求代入方程求Cmax生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件

5、家兔口服給藥操作示意圖開口器生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件所用材料所用材料日本大耳白或新西蘭兔日本大耳白或新西蘭兔兔子固定器兔子固定器灌胃器具灌胃器具1.5 ml EP管管其它其它:肝素鈉，漩渦振蕩肝素鈉，漩渦振蕩器，離心機(jī)，紫外檢測(cè)器，離心機(jī)，紫外檢測(cè)儀，儀，10 ml離心管離心管,三氯三氯醋酸等醋酸等.撲熱息痛片劑撲熱息痛片劑生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件三、實(shí)驗(yàn)操作1.撲熱息痛血藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：撲熱息痛血藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：精密吸取400ug/ml的濃儲(chǔ)備液1.25, 2.5,3.75,5.0,6.25 ml于100 ml容量瓶中，用蒸餾水定容得50,100,150,20

6、0,250 ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。空白血漿制備：將家兔耳緣靜脈處拔毛，將耳緣靜脈橫向切開，采血9ml，裝入1%肝素潤(rùn)洗過離心管，離心（2500r/min，15min）得上清空白血漿。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：取1.5 ml EP管，分別加入上述配制標(biāo)準(zhǔn)液0.5ml，加入空白血漿0.5ml，再加入0.5ml三氯醋酸，靜止5 min，10000 rpm離心5 min，取上清液0.5 ml，加入3.5ml蒸餾水，渦旋1min，離心（4000rpm,10min)，取上清液在245 nm處測(cè)吸光度A（ 以空白血漿相同處理結(jié)果為對(duì)照），繪制濃度c-吸光度A標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.口服給藥途徑血藥濃度的測(cè)定口服給藥途徑血藥濃度的

7、測(cè)定取體重2.53.0kg健康雄性家兔1只，禁食12 h，口服灌胃給藥0.5g（1片）。分別在給藥前（0 時(shí)間）和給藥后20、40、60、90、120、150、180 min用銳利刀片切割耳緣靜脈，用肝素鈉潤(rùn)洗好的EP管取血約1.5ml。分離血漿：分離血漿：將取血后的EP管馬上離心(10000r/min，15 s)，取上清液血漿約0.5ml至一新的1.5 ml EP管中。沉淀蛋白沉淀蛋白：往血漿中加入0.5 ml三氯醋酸，蝸旋震蕩后靜止5 min， 10000 rpm離心5 min，取上清液0.5 ml，加入3.5 ml蒸餾水，渦旋1min，離心（4000r/min,10min)；取上清液在2

8、45 nm處測(cè)吸光度A（ 以空白血漿相同方法處理為對(duì)照），代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度c。3. 假設(shè)假設(shè)F=0.9，撲熱息痛藥物含量：，撲熱息痛藥物含量：90%，單室模型給藥，求計(jì)算藥動(dòng)學(xué)，單室模型給藥，求計(jì)算藥動(dòng)學(xué)相關(guān)參數(shù)：相關(guān)參數(shù)：tmax、Cmax、K、 Ka、t1/2、V、AUC。4. 本實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)3人一組：人一組：每組進(jìn)行家兔口服給藥及血藥濃度藥物動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)的計(jì)算。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件T(min)20406090120150180AC(g/ml)二、撲熱息痛血藥濃度二、撲熱息痛血藥濃度-時(shí)間表時(shí)間表一、撲熱息痛血藥濃度與一、撲熱息痛血藥濃度與A的標(biāo)準(zhǔn)曲線

9、的標(biāo)準(zhǔn)曲線C = 28.228*A- 6.6085C單位：ug/ml, r = 0.99882三、藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算結(jié)果三、藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算結(jié)果生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件作時(shí)間t-濃度C-lgC表，畫lgC t圖，求算tmax、Cmax、K、Ka、t1/2、V、AUC 。五、討論與思考1. 做好本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是什么？操作中注意哪些 生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件T(min)20406090120150180A0.02640.03230.04590.07840.07270.04740.0396C(g/ml)二、撲熱息痛血藥濃度二、撲熱息痛血藥濃

10、度-時(shí)間表時(shí)間表一、撲熱息痛血藥濃度與一、撲熱息痛血藥濃度與A的標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)曲線C = 28.228*A- 6.6085C單位：ug/ml, r = 0.99882生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件六、參考結(jié)果：序號(hào)序號(hào)時(shí)間（時(shí)間（min）不同波長(zhǎng)下吸光度不同波長(zhǎng)下吸光度A濃度濃度（mg/ml）245 nm1200.2740.10.18412400.1680.070.12893600.1390.0640.11784900.1550.0620.114151200.2630.0560.103161500.1480.0560.103171800.2740.10.1841C = 28.228*A- 6.

11、6085C單位：ug/ml, r = 0.9988二、撲熱息痛血藥濃度二、撲熱息痛血藥濃度-時(shí)間表時(shí)間表一、撲熱息痛血藥濃度與一、撲熱息痛血藥濃度與A的標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)曲線生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件T(min)20406090120150180C(mg/ml)1.841.291.1781.1411.0311.0311.841lgC0.2650.1100.0710.0570.01330.0130.265二、撲熱息痛口服灌胃后時(shí)間二、撲熱息痛口服灌胃后時(shí)間 t C - lgC表表生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)課件七、注意事項(xiàng)：（1）為得到血漿，需將盛放血液的）為得到血漿，需將盛放血液的EP管加低濃度

12、肝素鈉（肝素管加低濃度肝素鈉（肝素鈉：蒸餾水鈉：蒸餾水=1：9）1滴潤(rùn)洗，防止血液凝固；滴潤(rùn)洗，防止血液凝固；（2）本實(shí)驗(yàn)家兔給藥前要先取空白血漿，血樣處理方法與含藥）本實(shí)驗(yàn)家兔給藥前要先取空白血漿，血樣處理方法與含藥血漿相同；血漿相同；（3）撲熱息痛藥物用灌胃前用）撲熱息痛藥物用灌胃前用5ml蒸餾水配成混懸液，灌胃后再蒸餾水配成混懸液，灌胃后再用用5ml蒸餾水沖洗燒杯和管路；蒸餾水沖洗燒杯和管路；（4）灌胃操作小心，防止家兔將灌胃管咬斷；灌胃前先通水試）灌胃操作小心，防止家兔將灌胃管咬斷；灌胃前先通水試一下灌胃管是否通暢；給藥時(shí)要確定導(dǎo)管進(jìn)入兔子食道，可將導(dǎo)一下灌胃管是否通暢；給藥時(shí)要確定導(dǎo)管進(jìn)入兔子食道，可將導(dǎo)管插入口腔管插入口腔2/3后用吹氣實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，看水杯中是否有氣泡冒后用吹氣實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，看水杯中是否有氣泡冒出，防止給藥入氣管從而導(dǎo)致動(dòng)物死亡；出，防止給藥入氣管從而導(dǎo)致動(dòng)物死亡；（5）所得濃度數(shù)據(jù)需）所得濃度數(shù)據(jù)需*16，