免疫測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用

1、免疫測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用免疫測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用張 瑞衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心免疫測(cè)定用室內(nèi)質(zhì)控血清的調(diào)整免疫測(cè)定用室內(nèi)質(zhì)控血清的調(diào)整 隨著臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)水平的不斷提高和檢測(cè)試劑質(zhì)量的不斷改進(jìn)，原有的室內(nèi)質(zhì)控物已經(jīng)不能滿(mǎn)足室內(nèi)質(zhì)控工作的需要，因此部中心對(duì)免疫測(cè)定用室內(nèi)質(zhì)控血清的含量進(jìn)行了調(diào)整，同時(shí)改進(jìn)了包裝。針對(duì)的檢測(cè)項(xiàng)目針對(duì)的檢測(cè)項(xiàng)目 HBsAg 抗HCV 抗HIV 梅毒螺旋體抗體提供不同含量的質(zhì)控物是為了實(shí)驗(yàn)室根據(jù)不同試劑的檢測(cè)值選擇合適的質(zhì)控物，使質(zhì)控物的檢測(cè)值（S/CO值）在1.54之間。HBsAg質(zhì)控血清定值的調(diào)整質(zhì)控血清定值的調(diào)整HBsAg定值單位改變：2004年，WHO研制了第二代

2、HBsAg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并將定值單位從ng/ml改為IU/ml?，F(xiàn)1IU/ml0.5ng/ml定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）調(diào)整原因0.2IU/ml用于一些靈敏度較高的試劑0.5IU/ml0.5ng/ml1IU/ml 1ng/ml 2IU/ml 2ng/ml 4IU/ml5ng/ml 濃度較高1萬(wàn)ng/ml “鉤狀效應(yīng)”HBsAg室內(nèi)質(zhì)控品的選用室內(nèi)質(zhì)控品的選用定值適用試劑0.2IU/mlMurex，生物梅里埃試劑0.5IU/mlOrtho，Bio-Rad試劑，雅培i2000和Axsym檢測(cè)系統(tǒng)和配套試劑1IU/ml國(guó)產(chǎn)試劑盒（萬(wàn)泰、新創(chuàng)、科華），血站和醫(yī)院用2IU/ml國(guó)產(chǎn)試劑盒（萬(wàn)泰、新創(chuàng)、科華

3、），醫(yī)院用4IU/ml國(guó)產(chǎn)試劑盒（萬(wàn)泰、新創(chuàng)、科華），醫(yī)院用抗抗HCV質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml國(guó)產(chǎn)試劑盒（萬(wàn)泰、新創(chuàng)、科華、麗珠）和DiaSorin的試劑1NCU/ml2NCU/mlMurex、Ortho等試劑2NCU/ml 4NCU/ml雅培i2000和Axsym檢測(cè)系統(tǒng)和配套試劑現(xiàn)現(xiàn)1NCU/ml0.5NCU/ml抗抗HIV質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用質(zhì)控血清定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml國(guó)產(chǎn)試劑盒（萬(wàn)泰、新創(chuàng)、科華、麗珠）1NCU/ml2NCU/mlBio-Rad等試劑2NCU/ml

4、 4NCU/ml進(jìn)口試劑及配套儀器4NCU/ml8NCU/ml進(jìn)口試劑及配套儀器現(xiàn)現(xiàn)1NCU/ml0.5NCU/ml1NCU/ml的確定：參考國(guó)際單位定值方法，采用的確定：參考國(guó)際單位定值方法，采用5種或以上試劑盒，結(jié)果種或以上試劑盒，結(jié)果63的試劑盒（按泊松分布計(jì)算）檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的值為的試劑盒（按泊松分布計(jì)算）檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的值為1NCU/ml。梅毒螺旋體抗體定值的調(diào)整及選用梅毒螺旋體抗體定值的調(diào)整及選用定值（調(diào)整前）定值（調(diào)整后）適用試劑1NCU/ml（特異）國(guó)產(chǎn)試劑盒2NCU/ml（特異）國(guó)產(chǎn)試劑盒2NCU/ml（特異） 4NCU/ml（特異）進(jìn)口試劑及/或配套儀器2NCU/ml（非特

5、異）2NCU/ml（非特異）RPR、TRUST現(xiàn)現(xiàn)1NCU/ml0.25NCU/ml注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 室內(nèi)質(zhì)控物僅用于相應(yīng)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)量控制，不能用于陰陽(yáng)性結(jié)果的判斷。 定值質(zhì)控物不適合評(píng)價(jià)試劑盒整體性能是否合格,但可用于試劑的批內(nèi)、批間變異和測(cè)定下限的評(píng)價(jià)質(zhì)檢。如果需要對(duì)試劑進(jìn)行比較評(píng)價(jià)和全面質(zhì)檢請(qǐng)選用相應(yīng)項(xiàng)目的臨床考核血清盤(pán)。臨床考核血清盤(pán)臨床考核血清盤(pán)項(xiàng)目項(xiàng)目規(guī)格規(guī)格支數(shù)/套HBsAg0.5ml/支40抗HCV0.25ml/支40梅毒螺旋體抗體 0.5ml/支40HBsAg血清盤(pán)血清盤(pán)l靈敏度l特異性lHBsAg變異的檢測(cè)能力：如G145R等lHook效應(yīng)導(dǎo)致的假陰性樣本樣本編號(hào)編號(hào)含量

6、含量(IU/ml)A（S/CO)B（S/CO)C（S/CO)D （S/CO)E（S/CO)1680.20.40.49.57.328101.00.70.49.814.910200000040.837.636.227.124.116約約160000040.043.941.047.135.08陰性陰性20.91.50.40.70.719陰性陰性9.47.719.20.40.427陰性陰性16.60.30.80.50.6360.5-1.01.61.62.97.38.5370.5-1.01.11.33.03.86.838約約0.20.60.81.82.43.9390.2-0.50.20.60.91.13

7、.0HBsAg血清盤(pán)血清盤(pán)抗抗HCV血清盤(pán)血清盤(pán)l不同試劑廠家的不同試劑廠家的ELISAELISA試劑盒所用包被抗原的差異：試劑盒所用包被抗原的差異：目前抗目前抗HCVHCV檢測(cè)檢測(cè)ELISAELISA試劑盒均采用試劑盒均采用HCVHCV的基因工程或合成多肽的基因工程或合成多肽抗原（核心區(qū)、抗原（核心區(qū)、NS3NS3、NS4NS4和和NS5NS5等）包被固相，以間接法進(jìn)行等）包被固相，以間接法進(jìn)行測(cè)定，上述測(cè)定，上述HCVHCV抗原的組合、來(lái)源及用量等方面的差異而造成抗原的組合、來(lái)源及用量等方面的差異而造成檢測(cè)結(jié)果不一致。檢測(cè)結(jié)果不一致。 l抗抗HCV ELISAHCV ELISA出現(xiàn)假陽(yáng)性的

8、主要原因有：出現(xiàn)假陽(yáng)性的主要原因有： 1.1.類(lèi)風(fēng)濕因子（類(lèi)風(fēng)濕因子（RFRF）的干擾）的干擾 2. 2.高免疫球蛋白血癥高免疫球蛋白血癥 3. 3.標(biāo)本中超氧化物歧化酶（標(biāo)本中超氧化物歧化酶（SODSOD）的干擾）的干擾 4. 4.用于固相包被的用于固相包被的HCVHCV基因工程抗原不純基因工程抗原不純抗抗HCV血清盤(pán)血清盤(pán)樣本樣本編號(hào)編號(hào)ABCDEFGRIBANS4NS3CNS5281.221.870.650.780.770.670.3+337.8311.96.324.286.24.760.62+340.920.680.610.841.140.650.3+356.414.111.862.9

9、92.812.040.34+381.62.061.860.681.682.051.38+152.42 0.820.550.65 0.5 0.5 0.5檢測(cè)方法1.檢測(cè)非特異性抗體-使用類(lèi)脂質(zhì)抗原的血清學(xué)試驗(yàn) ：RPR、TRUST2.檢測(cè)特異性抗體-使用密螺旋體抗原的血清學(xué)試驗(yàn)：FTA-ABS、TPHA、TPPA 、ELISA 、WB梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值值)BC(OD值值)D(OD值值)RPR膠體金膠體金1+0.090.7363.19927.353.7763.604+4+ +

10、0.3350.964.04127.612.1692.006+7+ +0.2561.120.65431.241.2150.978+23+/-+/-+0.2251.133.94830.241.8971.367+33+0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +Hook效應(yīng) 原倍原倍1：101：201：401：801：16013.3572.9462.0991.4280.9360.49042.2772.2561.9701.6151.0600.60371.7033.0662.9383.0233.1252.289232.3603.0892.8842.9752.2581.481梅毒

11、螺旋體抗體血清盤(pán)梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)1、4、7、23號(hào)血清稀釋結(jié)果顯示存在hook效應(yīng)。IgM抗體漏檢梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)梅毒螺旋體抗體血清盤(pán)TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值值)BC(OD值值)D(OD值值)RPR膠體金膠體金1+0.090.7363.19927.353.7763.604+4+ +0.3350.964.04127.612.1692.006+7+ +0.2561.120.65431.241.2150.978+23+/-+/-+0.2251.133.94830.241.8971.367+33+0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +使用方法使用方法 質(zhì)控血清都經(jīng)過(guò)滅活處理，但仍應(yīng)按照有潛在生物傳質(zhì)控血清都經(jīng)過(guò)滅活處理，但仍應(yīng)按照有潛在生物傳染性樣本對(duì)待。染性樣本對(duì)待。 HBsAgHBsAg，抗，抗HCVHCV，抗，抗HIVHIV，梅毒螺旋體抗體的質(zhì)控血清加，梅毒螺旋體抗體的質(zhì)控血清加樣時(shí)按待測(cè)病人原始樣本對(duì)待，依照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)樣時(shí)按待測(cè)病人原始樣本對(duì)待，依照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。行操作。 實(shí)驗(yàn)室收到血清后應(yīng)將血清保存在實(shí)驗(yàn)室收到血清后應(yīng)將血清保存在1818以下，保質(zhì)以下，保質(zhì)期為期